氨基酸态氮的测定
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③同时取80mL水，先用0.05mol/L氢氧化钠溶液调节至pH为8.2，再加入 10.0mL甲醛溶液，用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至pH9.2，做试 剂空白试验。
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❖结果计算
M
c(V1 V2 ) 1000
5 V3 100
式中 ρ------氨基酸态氮质量浓Leabharlann Baidu，g/100mL;
❖ 操作方法
①吸取含氨基酸约20mg的样品溶液，置于100mL容量瓶中，加水至刻度 混匀后吸取20.0mL烧杯中，加60mL水，开动磁力搅拌器，用0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2（记下消耗0.05mol/L氢氧 化钠标准溶液的毫升数，可计算总酸含量）。
②加入0.1mL甲醛溶液，混匀。再用0.05mol/L氢氧化钠标准的溶液继续 滴定至pH9.2，记下消耗0.05mol/L氢氧化钠标准溶液的毫升数。
❖ 试剂：
①40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂， 用氢氧化钠将40%甲醛中和至淡蓝色。 ②0.1%百里酚酞乙醇溶液 ③0.1%中性红50%乙醇溶液 ④0.1%mol/L氢氧化钠标准溶液
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❖ 操作方法
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电位滴定法
❖ 原理 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性， 使羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时 插入被测液中构成电池，用氢氧化钠标准溶液滴定，依据 酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。
电位滴定法：原理、试剂、仪器、测 定方法、结果计算
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双指示剂甲醛滴定法
❖ 原理：
氨基酸具有酸性的羧基和碱性的氨基。它们相互租用而 使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，氨基与甲醛 结合从而使其碱性消失。这样就可以用强碱标准溶液来滴定 羧基并用间接的方法测定氨基酸的总量。
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c-------氢氧化钠浓度，mol/L；
V1-----加入甲醛后耗NaOH的量，ml； V2------空白试验加甲醛后耗NaOH量，ml； V3------测定用样品稀释液的量，ml； M氮----氮的摩尔质量，14.01g/mol； 5-------样品量，ml.
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❖ 仪器 酸度计（附磁力搅拦器）
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磁力搅拌器
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❖ 试剂
①酚酞乙醇指示液：1% ②硼砂（标准物质）缓冲液：PH9.22 称取3.8克Na2B4O7 溶解后，定容至1000mL ③甲醛：36%-----38% ④0.0500mol/l氢氧化钠标准溶液
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课程：食品分析与检测 主题：氨基酸态氮的测定
xx现代职业技术学院 xx（讲师）
随着食品科学的发展和营养知识的普及，食物蛋白质 中必需氨基酸含量的高低及氨基酸的构成，愈来愈得到人 们的重视。食品及其原料中氨基酸的分离、鉴定和定量也 就具有极其重要的意义。
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氨基酸态 氮的测定
双指示剂甲醛滴定法：原理、试剂、测 定方法、结果计算、说明
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❖结果计算
M
c(V1 V2 ) 1000
5 V3 100
式中 ρ------氨基酸态氮质量浓Leabharlann Baidu，g/100mL;
❖ 操作方法
①吸取含氨基酸约20mg的样品溶液，置于100mL容量瓶中，加水至刻度 混匀后吸取20.0mL烧杯中，加60mL水，开动磁力搅拌器，用0.05mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2（记下消耗0.05mol/L氢氧 化钠标准溶液的毫升数，可计算总酸含量）。
②加入0.1mL甲醛溶液，混匀。再用0.05mol/L氢氧化钠标准的溶液继续 滴定至pH9.2，记下消耗0.05mol/L氢氧化钠标准溶液的毫升数。
❖ 试剂：
①40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示剂， 用氢氧化钠将40%甲醛中和至淡蓝色。 ②0.1%百里酚酞乙醇溶液 ③0.1%中性红50%乙醇溶液 ④0.1%mol/L氢氧化钠标准溶液
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电位滴定法
❖ 原理 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性， 使羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时 插入被测液中构成电池，用氢氧化钠标准溶液滴定，依据 酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。
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双指示剂甲醛滴定法
❖ 原理：
氨基酸具有酸性的羧基和碱性的氨基。它们相互租用而 使氨基酸成为中性的内盐。当加入甲醛溶液时，氨基与甲醛 结合从而使其碱性消失。这样就可以用强碱标准溶液来滴定 羧基并用间接的方法测定氨基酸的总量。
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c-------氢氧化钠浓度，mol/L；
V1-----加入甲醛后耗NaOH的量，ml； V2------空白试验加甲醛后耗NaOH量，ml； V3------测定用样品稀释液的量，ml； M氮----氮的摩尔质量，14.01g/mol； 5-------样品量，ml.
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❖ 仪器 酸度计（附磁力搅拦器）
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磁力搅拌器
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❖ 试剂
①酚酞乙醇指示液：1% ②硼砂（标准物质）缓冲液：PH9.22 称取3.8克Na2B4O7 溶解后，定容至1000mL ③甲醛：36%-----38% ④0.0500mol/l氢氧化钠标准溶液
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课程：食品分析与检测 主题：氨基酸态氮的测定
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随着食品科学的发展和营养知识的普及，食物蛋白质 中必需氨基酸含量的高低及氨基酸的构成，愈来愈得到人 们的重视。食品及其原料中氨基酸的分离、鉴定和定量也 就具有极其重要的意义。
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双指示剂甲醛滴定法：原理、试剂、测 定方法、结果计算、说明