r-聚谷氨酸
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γ-聚谷氨酸合成酶的 研究进展
• pgsB的表达蛋白(不含跨膜区)可与ATP结 合催化ATP水解,为γ-聚谷氨酸的合成提供 能量,pgsC蛋白(含4个跨膜区)高度保守, 为疏水性蛋白。PgsA蛋白在N端含一个跨膜 区,为亲水性稳定蛋白。
γ-聚谷氨酸检测技术
• 定性检测:实验采用的检测通常是用红外 光谱技术,与公司生产的γ-聚谷氨酸的标准 光谱图对照,以检测产物是否为γ-聚谷氨酸, 或是通过核磁共振来确定分子式。 • 定量检测:高效液相色谱法 27h 酶水解法 2-5h 黏度计法 快速 紫外分光光度法 快速
固体发酵:以黄豆 作为基本培养物, 所得γ-聚谷氨酸的 产量比液体发酵高, 只是固体发酵也存 在困境。
培养基的优化配置
液体发酵: 普遍 使用的碳源为葡 萄糖,氮源为酵 母粉、牛肉膏、 蛋白胨、豆粕等, 大多数的培养基 都含有谷氨酸钠。
固体发酵:以黄豆 作为基本培养基。 提议可用豆粕。
四株纳豆芽孢杆菌产γ-PGA 的平均产量
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)应用 研究进展
• 农业生产
农用的塑料制品 应用于干旱防治,沙漠、荒山等的绿化。 显著的增肥作用。
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)应用 研究进展
• 重金属污染治理
γ-聚谷氨酸对铬,镍等众多重金属都有 络合反应或吸附作用,尤其对铜离子吸附 作用很强,因此可用于污水处理。
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)应用 研究进展
• 食品加工 γ-聚谷氨酸可降解且安全无毒,对食品风 味无影响,可作为食品添加剂:含矿物质 的食品的除涩剂,冰淇林的稳定剂,果汁 类饮料的增稠剂。 蔬菜水果的防冻保鲜剂。 作为载体螯合钙做新型的钙制剂。 应用于人体重金属中毒。
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)应用 研究进展
• 其他应用 吸水纸,纸尿裤,卫生巾,餐巾纸,湿巾 纸,药棉,吸汗内衣,抹布的制造材料。 天然的美容面膜,保湿或滋润类化妆品的 有效成分。 护发素的有效成分,头发定型剂,表皮缓 释因子。 牙齿修复剂。
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)的 研究进展
γ-聚谷氨酸
目
1
录
背景 γ-聚谷氨酸发酵生产 γ-聚谷氨酸的合成酶 γ-聚谷氨酸的检测技术 γ-聚谷氨酸的应用
2
3
4
5
背景
• 1937 年Ivanovics 等首次于炭疽芽孢杆菌的夹膜
中发现γ-PGA, 1942 年Bovarnick 等人发现有些
芽孢杆菌属细菌能通过发酵培养积累γ-PGA。
γ-聚谷氨酸合成酶的 研究进展
• γ-聚谷氨酸的合成基因共有capA,capB,capC, capE和pgsA,pgsB,pgsC,pgsE,其中capB和 capC主要负责γ-聚谷氨酸的聚合,而capA和 capE主要负责γ-聚谷氨酸的转运。这些合成 基因的表达物组成复合酶系以谷氨酸为底 物催化γ-聚谷氨酸的合成。
• γ-聚谷氨酸(γ-Polyglutamic acid,γ-PGA)是一
种由D-或L-谷氨酸通过α-氨基和γ-羧基形成γ-酰
胺键结合而成的阴离子聚合物。
γ -PGA的结构式
背景
无毒性 可降解性
可食用性
γ-PGA
保湿性
成膜性
粘结性
γ-聚谷氨酸发酵生产 研究进展
菌种来源
发酵方法
γ-PGA的发酵生产
培养基的优化配置 分离纯化方法 现状与前景讨论
菌种来源
1
从豆制品或土壤 中或日本纳豆、 豆瓣酱、酱大蒜、 酱黄瓜等传统酱 类食品自行筛选。
2
由实验室保藏γ聚谷氨酸产生菌 为出发菌经诱变 筛选出高产菌种。
3ห้องสมุดไป่ตู้
运用基因工程将 产γ-聚谷氨酸的 基因连接到载体 导入大肠杆菌。
发酵方法
液体发酵:研究者 绝大多数止于摇瓶 培养,所用摇瓶的 体积大都250ml和 500ml,装液量为 10%-20%之间,发 酵时间为24-72h之 间。
背景
γ-PGA的应用研究进展
γ-PGA
四大方面
医药制造
农业生产
重金属污 染治理
食品加工
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)应用 研究进展
• 医药制造 作为载体:转运或联合转运或磁铁靶向转 运药物(疫苗,抗肿瘤药物,抗病毒药物, 激素类药物等)、基因。
γ-聚谷氨酸(γ-PGA)应用 研究进展
自身起作用: 恢复甚至重造肌肤的自我润湿系统。 对头发上的毛鳞片损伤有修复作用。 对眼角膜损伤具有一定的修复作用。 对脂质代谢有调控作用。 可减弱鼠科动物呼吸道哮喘的炎症。 新型安全无害的生物胶带。 交联后制成水凝胶。
分离纯化方法
液体发酵:有 机溶剂法、化 学沉淀法、膜 分离沉淀法。
固体发酵:对产 物的处理与液体 发酵用乙醇沉淀 的有机沉淀法基 本一致。
沉淀法
现状与前景的讨论
液体发酵:产 率较低,可运 用基因工程对 微生物进行定 向改造的技术, 尽快的可工业 化生产到高产 菌种。
固体发酵:产量 高,不易产物提 取,生产成本太 高。可在培养基 和分离纯化工艺 上优化。