小肠耶尔森氏菌及其检测方法

小肠耶尔森氏菌及其检测方法
一、小肠耶尔森氏菌
小肠结肠炎耶尔森氏菌，简称小肠耶尔森氏菌，学名Yersinia enterocolitica，是革兰氏阴性杆菌或球杆菌，大小为1-3.5×0.5-1.3μm，多单个散在，有时排列成短链或成堆。

该菌是能在冷藏温度下生长的少数几种肠道致病菌之一，在4℃条件下能保存和繁殖。

小肠耶尔森氏菌在自然界分布很广：
（1）作为重要的食源性致病菌，该菌在生的蔬菜、乳和乳制品、肉类、豆制品、沙拉、牡蛎、蛤和虾等食物中也分布很广，很多国家都已将该菌列为进出口食品的常规检测项目。

（2）该菌也存在于环境中，如湖泊、河流、土壤和植被。

（3）该菌天然寄居在多种动物体内，如鼠、狗、猫、山羊、家畜等，在港湾周围，许多鸟类包括水禽和海鸥可能是带菌者。

小肠耶尔森氏菌通过污染食物（牛奶、猪肉等）和水，经粪—口途径感染或因接触染疫动物而感染，易染人群为婴幼儿。

典型症状常为发热、腹痛、腹泻和呕吐。

有的引起反应性关节炎，还有少数患者可表现为脑膜炎、肺炎、败血症即血液系统感染，尽管少见，但死亡率较高。

二、小肠耶尔森氏菌检测方法
1.细菌培养法
本菌生长温度为30-37℃，但在22-29℃才能使本菌的某些特性出现。

4℃时能保存和繁殖。

本菌世代时间长，最短亦需40分钟左右。

在SS或麦康凯琼脂上于25℃经24小时培养，菌落细小，至48小时直径才增大成0.5-3.0mm。

菌落圆整、光滑、湿润、扁平或稍隆起，透明或半透明；在麦康凯琼脂上菌落淡黄色，如若微带红色，则菌落中心的红色常稍深。

本菌在肉汤中生长呈均匀混浊，一般
不形成菌膜。

2.生化鉴定法
从营养琼脂平板上挑取单个菌落做生化实验，所有的反应皆在26℃±1℃培养。

主要生化特性如下：
①动力（26℃）阳性；
②素酶阳性；
③VP试验（26℃）阳性；
④鸟氨酸脱羧酶阳性；
⑤蔗糖有不同生化型；
⑥棉子糖阴性；
⑦山梨醇阳性；
⑧甘露醇阳性；
⑨鼠李糖阴性。

3.血清凝集法
小肠结肠炎耶尔森氏菌的抗原结构较为复杂，现已知有84个O抗原因子和19个Ｈ抗原因子，在同一血清型的菌株中，可含两种或更多的O抗原。

小肠耶尔森氏菌在我国分布很广，菌群复杂，目前主要占优势的血清型为O：3，O：5，O：8和O：9型。

某些O抗原同其他细菌有共同性，如O：9与布氏菌有交叉反应，O：12血清与沙门氏菌有交叉反应等，在流行病学调查中，血清学诊断起着较为重要的作用。

关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片公司生产的小肠耶尔森氏菌全套诊断血清产品，该菌最常见的O：3，O：5，O：8和O：9型的诊断血清被纳入这套产品.
4.分子生物学检测方法
常规PCR检测法
许文炯等利用小肠结肠炎耶尔森菌的ail基因以及毒力质粒上的virF基因应用PCR技术区分出致病菌与非致病菌。

马宏伟等根据小肠结肠炎耶尔森菌的ail 基因和伤寒沙门菌的Hl-d基因顺序设计2对引物，通过聚合酶链反应检测食品
中的小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门菌，扩增出170和458 bp条带，适用于食品中小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门菌的快速检验。

实时定量PCR检测法
郑浩轩等应用针对致病性小肠结肠炎耶尔森菌染色体上yst基因而设计的特异引物和探针进行实时定量PCR，检测致病性(7种血清型)和非致病性(5种)小肠结肠炎耶尔森菌、耶尔森菌属内的其他菌种(8种)及其他肠道细菌(8种)，特异性强，可应用于临床检测。

《小肠结肠炎耶尔森菌的致病及检测研究进展》环境与健康杂志2008年8月第25卷第8期。