前白蛋白(prealbumin,PA) 紫外终点法

目录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

血清中前白蛋白与其相应抗体在液相中相遇，立即形成抗原—抗体复合物，形成一定浊度。该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。可利用标准浓度的前白蛋白生成的浊度在340nm处吸光度，建立吸光度与浓度的标准曲线，从而计算出未知浓度的前白蛋白含量。

2．标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆使用肝素、EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司PA试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。R1为无色液体，R2为无色或淡黄色液体，当试剂变色，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

计算标准液的吸光度的差值（A2－A1），建立标准液吸光度－浓度工作曲线。

计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（mg/dL）。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量。

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV<4.8%，批间CV<9.8%。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

前白蛋白浓度为：1.0mmol/L时，吸光度为1.009～1.107。

7.4 可报告范围：

血清与试剂R1、R2用量之比为1:50:10时，测定上限为52 mg/dl。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。

8．参考值

10.0-40.0mg/dl

9．临床意义

前白蛋白测定试剂盒临床上用于测定人体血清中前白蛋白的含量。

血清前白蛋白(prealbumin,PA) 是肝脏细胞合成的一种血清蛋白质，其主要生理功能是运输甲状腺素和维生素A，并具有胸腺激素活性，可通过促进淋巴细胞的成熟来增加机体的免疫力。PA对临床肝实质性损害有重要诊断价值。肝癌，肝硬化，慢性活动性肝炎，阻塞性黄疸患者均显著降低，是早期肝功能损伤的指标。此外，营养不良和急性感染的病人PA也可降低。

附录A: 参数