Hplc法测定盐酸纳美芬注射液中盐酸纳曲酮和双纳美芬的含量

Hplc法测定盐酸纳美芬注射液中盐酸纳曲酮和双纳美芬的含量

发表时间：2012-09-03T15:27:30.700Z 来源：《中外健康文摘》2012年第22期供稿作者：侯文启

[导读] 盐酸纳美是继纳洛酮和纳曲酮之后合成的又一种新的纯阿片受体拮抗剂。

侯文启 (河南省商丘市第一人民医院药剂科 476000）

【中图分类号】R971+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012）22-0128-02

【摘要】目的建立以HPLC法测定盐酸2纳美芬注射液中酸纳曲酮和双纳美芬含量的方法。方法采用钻石色谱柱:(250mmx4.6mm，,5μm)柱,以磷酸缓冲液(20:50)为流动相,检测波长:210nm流速1.0ml.mol-1.结果以上表达式说明酸纳曲酮在21一126μg范围内具有良好的线性关系。以上表达式说明酸纳曲酮在0.1—1.5μg范围内具有良好的线性关系。取供试品溶液,先后进行4次测定，期间分别为0小时，4小时，6小时，8小时，24小时.结果测得盐酸纳曲酮和双纳美芬峰面积的RSD =0.17%,结果表明供试品溶液在6h内稳定。结论 HPLC法测定盐酸那美分注射液中盐酸纳曲酮以及爽那美分的含量，具有操作简便,方法可靠,结果准确，灵敏度高,重复性好等优点。

【关键词】Hplc法盐酸纳美芬注射液盐酸纳曲酮双纳美芬

盐酸纳美是继纳洛酮和纳曲酮之后合成的又一种新的纯阿片受体拮抗剂。目前已应用于麻醉性镇痛剂呼吸抑制的拮抗、心力衰竭和休克的治疗、酒精中毒和成瘾的治疗以及减肥等[1]。1995年经美国FDA批准，1可用于手术后逆转阿片类药物引起的不良反应，如呼吸抑制、血压降低等。与吗啡相似，易被氧化，其中含有盐酸纳曲酮及双纳美芬的成分。目前该制剂质量标准中尚无含量测定项目[2]。本文采用了高效液相色谱法测定盐酸纳美芬注射液中酸纳曲酮和双纳美芬的含量，该法操作简便，结果准确。适合该药生产的质量控制。

1 资料与方法

1.1仪器与药品

美国Wtaers高效液相色谱仪，pHS-3C型精密pH计(上海冠特超声仪器有限公司)。盐酸纳美芬注射液对照品(中国药品生物制品检定所，规格2ml∶2mg，批号:20100205).,其他试剂均为分析纯。

1.2对照品溶液、供试品溶液的制备

对照品溶液：分别精密称取对照品适量，置100ml量瓶中，用水溶解并定容。再用水稀释制成约含盐酸均为 1μg/ml的对照品溶液。供试品溶液：精密量取本品适量，用水稀释制成含 1 为0.1μg/ml的溶液，作为供试品溶液。色谱条件：色谱柱 Diamonsil C18柱

(4.6mm×250mm，5μm)，以磷酸缓冲液(20:50)为流动相,检测波长:210nm流速1.0ml.mol-1，柱温 25 ℃，进样量 20 μl。分别取辅料溶液，对照品溶液进样测定。

1.3测定方法:

取含量测定项下的供试品溶液作为有关物质侧定的供试品溶液，另精密量取供试品溶液测量样品1mL，放置另一个精确度 100mL烧瓶，应用流动相予以稀释到标记处，震动，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，精密量取对照溶液20mL进样，调节检测灵敏度，使主成分的峰高约为记录仪满量程的20%;再精密量取供试品溶液、对照溶液和空白溶液各20mL，分别进样，记录供试品溶液的色谱图至主峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中如显杂质峰，量取各杂质的峰面积之和，应不得大于对照溶液的主峰面积的2倍(2.0%)。

重复性试验，取同一批供试样品，按供试品溶液制备方法操作并测定其含量的RSD值。取已知酸纳曲酮和双纳美芬含量的供试样品6份，精密称定，分为3组，每组分别加入酸纳曲酮和双纳美芬对照品一定量，按前述方法处理并测定计算加样回收率。稳定性试验，取同一供试品溶液，分别在不同时间测定。

2 结果

2.1线性关系:以盐酸纳曲酮和双纳美芬进样量(μg)为横坐标X，峰面积积分值为纵坐标Y，得回归方程：

双纳美芬：y=-91.2.3.4x

盐酸纳曲酮：y=3.287x104-128.64

注：以上表达式说明酸纳曲酮在21一126μg范围内具有良好的线性关系。

以上表达式说明酸纳曲酮在0.1—1.5μg范围内具有良好的线性关系。

2.2稳定性试验:供试品溶液在10小时内稳定。

取供试品溶液,先后进行4次测定，期间分别为0小时，4小时，6小时，8小时，24小时，结果测得盐酸纳曲酮和双纳美芬峰面积的RSD =0.17%,结果表明供试品溶液在6h内稳定。

2.3药品含量测定:取4批盐酸纳美芬注射液样品，按前述方法处理并测定，每批测定2次，结果见表2。

表2 药品含量测定情况

样品批号双纳美芬含量% 盐酸纳曲酮

原料药 20110205 99.57 0.41

20110206 99.61 0.38

20110207 99.54 0.39

对照样品 20110208 98.54 0.29

20110209 98.76 0.39

20110210 97.64 0.3

3 讨论

盐酸纳美芬的含量测定法应首选容量法，但是由于盐酸纳美芬结构为吗啡类结构，可能在光照等外界条件下生成盐酸纳美芬二聚合物，因此，在某些条件下容量法可能不能够完全准确测定新药的含量，影响测定结果的准确性。有专家[3]采用高效液相色谱法研究纳美芬注射液(Revex)溶液稳定性，液相条件进行纳美芬原料药和制剂注射液的含量测定和有关物质检查，实验结果表明此法中主成分峰与原料纳曲酮及降解产物峰分离良好，具有准确度高、专属性好等特点。

实验证明本条件高效液相色谱法的分离效能良好，检测灵敏度较高，干扰因素少，专属性强，能够准确的测定样品的含量和进行有关

物质的检查。

本品原料药酸性水溶液在210nm和283nm处均有最大吸收，其中在283nm处的吸收度很小，而在211nm处的吸收较强中指定的液相条件，选用峰形较为平缓的210nm为高效液相法的检测波长[4]。本品注射液中，只有注射用生理氛化钠溶液作为溶剂，加盐酸调节pH，不含其他辅料，对主药纳美芬无干扰[5]，因此同原料药一致选择210nm作为本色谱条件的检测波长。用二极管阵列检测器测定纳美芬主成分的纯度大于99.9%，表明主峰为单一纯峰，在190一400nm波长内扫描，未漏检杂质峰。本试验建立的HPLC方法灵敏、准确，测定专属性好、适用性强、精密度符合测定要求，检测所需样品量少。

综上所述，HPLC法测定盐酸那美分注射液中盐酸纳曲酮以及爽那美分的含量，具有操作简便,方法可靠,结果准确，灵敏度高,重复性好等优点。

参考文献

[1]钟武,郑志兵,肖军海,任珅,李松.HPLC法测定盐酸纳美芬的含量及其有关物质[J].中国新药杂志,2006,15(11),895-898.

[2]曹凤习,杜增辉,周建敏.RP-HPLC测定盐酸地芬尼多片的含量与有关物质[J].中国药学杂志,2009,(22),1748-1751.

[3]刘浩,仇士林.应用离子对HPLC-ELSD法测定磷霉素钠中磷霉素及有关物质的含量(英文)[J].中国抗生素杂志,2007, 32(6),345页.

[4]高素英,陈龙珠.高效液相色谱法测定甲磺酸沙喹那韦胶囊主药及有关物质含量[J].医药导报,2009,28(02)，233-234.

[5]胡婷婷,于波涛,姜云平,陆国庆,吴雪钗.HPLC法测定亮菌甲素注射液的含量及有关物质[J].西南国防医药,2005,15(5)，513-515.