家蚕幼虫消化液蛋白质组学分析

收稿日期:2007-09-20

资助项目:国家重点基础研究发展计划“973”项目(编号2005CB1212

000)。

作者简介:崔颖俊(1981-),男,河南,硕士研究生。

E 2mail:cuiyingjun@yahoo

通讯作者:赵巧玲,研究员,硕士生导师。

E 2mail:qlzhao302@

家蚕幼虫消化液蛋白质组学分析

崔颖俊

1,2

　裘智勇2　赵巧玲2　沈兴家2　唐顺明2　郭锡杰

1,2

(1江苏科技大学生物与环境工程学院,江苏镇江　212018;

2

中国农业科学院蚕业研究所,农业部家蚕生物技术重点开放实验室,江苏镇江　212018)

摘　要　为了研究家蚕幼虫消化液的蛋白质组成情况,用双向电泳(22DE )技术对家蚕幼虫消化液中的蛋白质进行了分离,随后用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALD I 2T OF MS )对其中的个高丰度蛋白进行了鉴定,并用生物信息学方法进行了分析。结果显示:家蚕幼虫消化液中的蛋白质种类较少,分子量小,分布集中;在8个鉴定的蛋白点中,1个是30kP 蛋白酶A 原,5个是类胰蛋白酶,其它2个是碱性丝氨酸蛋白酶。关键词　家蚕;消化液;蛋白质组学;双向电泳;基质辅助激光解析电离飞行时间质谱

中图分类号　S88112;[Q816] 文献标识码　A 文章编号　0257-4799(2008)01-0050-04

Pr oteo mic Analysis of Digestive Juice Fr o m Silk wor m (B o m byx m ori )Larvae

CU I Ying 2J un

1,2

　Q IU Zh i 2Yong 2　ZHAO Q ia o 2L ing 23　SH EN Xing 2J ia 2

T AN G S hun 2M ing 2　GUO Xi 2J ie

1,2

(1S c hoo l of B io te c hno log y a nd Environm e n ta l Eng ine e ring,J i a ng s u U n ive rs ity of S c ie nc e a nd Te c hno log y,Zhe n jia ng J ia ng s u 212018,C h ina;

2

The S e ric u ltu ra l R e s e a rc h Ins titu te,C h ine s e A c a d em y of A g ric u ltu ra l S c i e nc e s,

The Ke y L a b o ra to ry of S ilkw o r m B io te c hno log y,M in is try of A g ric u ltu re,Zhe n jia ng J ia ng s u 212018,C h ina )A b s tra c t To inve s tig a te the c ons titu ti ons of p ro te ins of the d ig e s ti ve ju ic e from s ilkw o r m (B om b yx m o ri )la r 2va e,w e s ep a ra te d the p ro te ins b y t w o d i m e ns i ona l e le c trop ho re s is (22D E ),i d e n ti fie d 8m a i n p ro te ins b y m e a ns of m a trix a s s is te d la s e r d e s o rp tion ion i za ti on tiom e of flig h t m a s s sp e c trom e try (MALD I 2T O F M S ),a nd a na lyze d them th roug h b io info r m a ti c s m e thod s.The re s u lts s how e d tha t the re a re l e s s p ro te ins sp o ts in the d i 2g e s ti ve ju ic e,c ha ra c te rize d a s sm a llm o le c u la r w e ig h t a nd s i m ila r p I .Am ong the id e n tifie d 8p ro te i n sp o ts,1p ro te in sp o t is 30kP p ro te a s e A,5p ro te in sp o ts a re tryp s i n 2like p ro te a s e,the o the r 2p ro te in sp o ts a re a l ka li 2p h ili c s e ri ne p ro te a s e P 2II c.

Ke y w o rd s B om b yx m o ri ;D ig e s tive ju ic e;P ro te om ic s;22D E;MALD I 2T O F M S

昆虫是自然界中最大的生物类群,在其长期

的进化过程中逐渐形成了不同于高等生物的复杂而又非常有效的免疫防御机制。与高等动物相比,昆虫具有以吞噬为主的细胞免疫功能,但缺少

抗原2抗体这样的特异免疫反应体系,而是由抗菌

肽(anti m icrobial pep tides )、抗病毒因子(antiviral fact or )、凝集素(lectin )、酚氧化酶原(p r ophol oxi 2dase )、溶菌酶(lys ozy me )和蛋白酶抑制剂(p r otease inhibit or )等活性因子构成其完整的防御体系

[1-3]

。

对昆虫的免疫系统进行研究,不仅对于保护有益昆虫具有重要意义,同时可为防治有害昆虫提供启示。在家蚕(B o m byx m ori )的免疫系统中,除了其体壁和血淋巴在抵抗外界感染中起重要作用外,其消化液的强碱性以及所包含的红色荧光蛋