病料的采集、保存与送检 PPT

甲状腺等）。 ➢液状病料、渗出液。 ➢柔软与变形的组织（肠系膜、神经干）。 ⑹ 防人为变化：取材刀具要快，动作要轻， 防挤压。
2. 病料的保存（固定）
⑴ 固定的作用：使细胞内的物质尽量接近生 活状态时的形态，结构和位置，并便于切片和 观察。
⑵ 固定液的选择：用于组织固定的固定液种 类繁多，根据切片观察的目的而定（形态结构、 组织内抗原、组织内脂肪、糖原）
二、实用举例
（一）用于病理组织学检查病料的采集、 保存与送检
（二）微生物学检查的材料的采集、保存 与送检
(三)用于毒物分析材料的收集保存与送检
（一）用于病理组织学检查病料的采 集、保存与送检 1. 病料的采集（取材） 2. 病料的保存（固定） 3. 病料的送检
1. 病料的采集（取材）
⑴ 取材应目的准确，有病变的组织必须取，有疑问 处重点取，变化不明现时全面取。
甲醛溶液
120ml
NaH2PO4·H2O Na2HPO4 蒸馏水
4g 13g 880ml
⑶ 4％多聚甲醛固定液（用于免疫组织化学）
多聚甲醛
4gLeabharlann 0.1mol/L PB （PH 7.4） 100ml
※多聚甲醛＋PB，于磁力搅拌器上，加热到60℃左 右 完 全 溶 解 ， 溶 液 变 清 （ 有 时 需 加 几 滴 1mol/L
⑵ 50％甘油缓冲盐水溶液：
氯化钠
2.5g
酸性磷酸钠 0.46g 溶于100ml中性蒸馏水内
⑵ 附送检说明：检查的目的与要求，基本情况介绍 （病史、发病、死亡及剖检、取材的组织种类、数量 等）
⑶ 专人送检：人畜共患的烈性传染病（炭疽），国家 规定的一类动物疫病（口蹄疫、高致病性禽流感、 牛海绵状脑病等）。
（二）微生物学检查的材料的采集保存与送检
要求在没有其它微生物污染情况下进行，因此 必须做到以下几点： ⑴ 所有取材的用具（刀、剪 、盛装容器等）事先要
严格消毒、灭菌，取材环境尽量做到无菌。 ⑵ 尸检时应首先采取用于微生物检查的病料。 ⑶取材时间尽量早，动物死后肠道内微生物大量繁
殖造成污染。 ⑷ 必要时将整个脏器、尸体送检。
1.病料的采集（取材）
⑴实质脏器的取材：先用烧热的刀片烧烙脏器表 面，再用消毒的刀、剪取深部组织，同时作触片。 ※最好一种组织用一套刀具
（二）正确采集、保存与送检病料的重要
性
1.关系到疾病诊断的准确性：病变材料反应了疾病 的本质变化。
2.关系到科研和实验结果正确与否： 科研试验：设计 实施 结果。 实施（实验） 的过程 获取数据 动物 形态变 化、机能（生理生化指标）。
（三）病料的采集、保存与送检三者之间的关系
1. 正确的采集病料是获得正确结果的关键。 2. 正确的保存病料是获得正确结果的保证。 3. 正确的送检病料是获得正确结果的必要条件。 ※ 三者均能影响结果！！！
⑵ 取材部位要准确，所取组织块应含有病变、正常 和两者相交过度结构;组织结构要完整,如肠（外 膜层、肌层、粘膜层）、肾（皮质、髓质）。
⑶ 取材时间尽量早。病死动物夏季不超过6h，冬季 不超过24h。（相对）
⑷ 取材大小及数量。一般1.5×2.0×0.3～0.5cm为 好，不同的变化均取。
⑸ 特殊组织取材 ➢ 壁薄的囊腔脏器（肠、胆囊）。 ➢ 体积微小的组织（小鼠的肾上腺、垂体、
⑵ 病毒学检查材料：
A 组织块：浸入50％甘油缓冲盐水或鸡蛋生 理盐水。
B 液体材料：灭菌试管严密封口低温保存。 在4℃时可保存数小时，若长期保存应在 -70℃条件下。
※ 保存液的配制
⑴ 30％甘油缓冲盐水：
纯甘油 氯化钠 碱性磷酸钠 0.02%酚红液 中性蒸馏水加至 混合后在15磅高压灭菌
30ml 0.5g 1g 1.5ml 100ml 30mins
⑶ 固定液的量：10倍于组织的体积。
⑷ 固定的时间：数小时～24小时，不同种 类不一样（固定液种类、组织大小……）
⑸ 固定温度：常温20～25℃，低温4℃时 间要延长。
⑹ 固定用容器：玻璃容器为好，禁用金属 容器，底部最好垫纱布或棉花，防组织贴 壁而固定不良。
※ 固定方法：
⑴浸泡法：要固定的组织浸入固定液中，是最常用的 方法。
病料的采集、保存与送检
一、概述
（一）病料的含义 （二）确采集、保存与送检病料的重要性 （三）病料的采集、保存与送检三者之间的关系
（一）病料的含义
狭义：用于疾病诊断的材料。
广义：用于动物科学研究、实验等各方面的 实验室检查材料。如：动物研究中的重要内 容——形态学和生理机能的变化。涉及到病 理学、组织胚胎、药物毒理、动物营养、动 物生化、生化等学科
⑵注射、灌流固定法：用于体积过大，固定液 又难 进入肉尸的组织或整个器官、动物体进行固定。 ※电镜取材 活体固定 ※眼球固定 ※动物整体浸渍标本制作
⑶蒸气固定法：固定组织中的可溶性物质，甲醛或锇 酸固定。
石蜡切片常用固定液
⑴ 10％福尔马林固定液
甲醛溶液 1份
自来水
9份
⑵ 10％中性福尔马林固定液（PH 7.0）
NaOH ） ， 最后PB补足至100ml。
⑷ Bouin氏固定液（用于组织学和免疫组织化学固定）
苦味酸饱和水溶液
75ml
甲醛
25ml
冰醋酸
5ml
⑸ Carnoy氏固定液（使用于染色体、DNA、RNA、糖
原的固定）
纯酒精
6份
冰醋酸
1份
三氯甲烷
3份
3. 病料的送检
⑴ 及时送检 新鲜病料：2h以内能送到的，气温高时要加冰冷藏。 已固定的病料：用塑料袋或瓶密封包装。
⑸ 皮肤及皮屑：刀刮至真皮层收集 皮屑，作真菌、疥癣检查。
⑹ 脑、脊髓：常作病毒检查。
2.病料的保存
⑴ 细菌学检查材料：
A .组织块：一般用灭菌的液体石蜡、30％甘油 缓冲盐水或饱和氯化钠溶液。
B .液体材料：保存于灭菌的密封性好的试管内， 可用石蜡或密封胶封口。
C .各种涂片、触片、抹片, 自然干燥后装盒冷 藏。
⑵液体病料（血液、胆汁、渗出物、脓汁等）表 面 烧烙后，用灭菌注射器吸取保存。 ⑶全血
抗凝剂
⑴ 4％枸橼酸钠 0.1ml，可抗凝血 1ml。 ⑵ 20％枸橼酸钠2～3滴可抗凝血 5ml。 ⑶10％乙二胺四醋酸钠2～3滴可抗凝血5ml。 ⑷肝素：1mg可抗凝1ml，多用于病毒学检
查的抗凝血。
⑷ 肠内容物：烧烙表面，吸取内容 物于灭菌容器内。