高二生物微生物数量的测定PPT教学课件

响。
4．该方法统计的菌落数比活菌的实际数目低，这是因为当两 个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 。
学习探究区
第3课时
小贴士 显微镜直接计数法
(1)原理：此法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显
微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量，但不能区分细菌
的死活。计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积
解析 用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计，只
是一种估测，根据此方法的实验过程可知，在某一稀释度
下涂布的平板菌体数具有一定的偶然性，并不是绝对均匀，
所以取若干个平板菌落数量的平均值比较接近样品中菌体
数的真实值。
学习探究区
第3课时
2．下列不属于菌种记数方法的是
A．平板划线法
本
课
B．稀释涂布平板法
菌可以利用 氮气 ，培养基中可以不含有氮源。
开 关
2．选择培养基：根据微生物对 营养物质 、pH、氧气等要求
的不同，在培养基中加入某种化学物质，促进 需要的微生
物的生长，或者抑制 不需要的微生物的生长，从而 淘汰 不
需要的微生物，分离得到需要的微生物纯种的培养基。
知识储备区
第3课时
本 3．菌落是微生物的 单个 菌体或者孢子在 固体 培养基表面上
落是不是尿素分解菌。
学习探究区
第3课时
本 小贴士 鉴别培养基,是指在培养基中加入某种特殊的化学物
课 栏
质，某种微生物在培养基中生长后产生的某种代谢产物可以与
目 开
该特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变
关 化，从而鉴别该微生物。如大肠杆菌在含有伊红—美蓝的培养
基中，菌落会出现黑色。
学习探究区 2．结合下图分析实验过程和注意事项
涂布平板法同样计数。
学习探究区
第3课时
2．计算方法
从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法
是 (平均菌落数÷取样接种量)×稀释倍数 。
本 课
3．优缺点
栏 目
(1)优点：能测出样品的 活菌 数，可用于微生物的选种、
开 关
_育__种___、分离纯化等方面。
(2)缺点：操作烦琐、时间较长、测定值常受各种因素的影
课 栏
生长繁殖形成的肉眼可见的 细胞群体 ，通常作为鉴定菌
目 开
种的重要依据。
关 4．微生物分离与纯化的主要步骤是： 稀释 →分离→培养
→_接__斜__面__，其中分离的方法有 平板划线 分离法和涂_ 布_分
离法。
学习探究区
第3课时
本 探究点一 微生物数量测定的方法和原理
课 栏
微生物数量的测定也是重要的微生物技术之一，平板菌落计数
课 栏
能利用尿素。因此该培养基对微生物具有选择作用，其选择机
目 开
制是_只__有__能__够__分__泌__脲__酶__从__而___以__尿__素__作__为__氮__源__的__微__生__物__才__能___在_
关 _该__培__养__基__上__生__长___。
(3)细菌合成的脲酶分解尿素产生了氨，使培养基的碱性增强， pH 上升，使酚红变色，菌落周围变 红 。可用来鉴定选出的菌
目 开
法是一种应用广泛的微生物数量测定方法。
关 1．平板菌落计数法的原理
根据微生物在高度稀释的条件下，固体 培养基上所形成的
单个菌落，是由 一个单细胞 繁殖而成的，即一个菌落代
表 一个单细胞 。
学习探究区
第3课时
小贴士 平板菌落计数法根据操作步骤的不同可分为两种：
(1)涂布平板法：用灭过菌的涂布器将一定量(一般为 0.1 mL)
菌的平均数，再按公式求出每毫升样品中所含的细菌数。
(3)计数公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×
400×10 000×稀释倍数。
学习探究区
第3课时
归纳提炼
本 课
要使平板菌落计数法准确，需要掌握的关键步骤有：
栏 目
严格的无菌操作，否则容易被杂菌污染；稀释液要
开 关
充分混匀，吸量准百度文库，否则结果不准确；多做几个
的适当稀释过的菌液涂布在琼脂培养基的表面，然后保温培养
本
课 直到菌落的出现。记录菌落的数目并换算成每毫升样品中的活
栏 目
细胞的数量。
开 关
(2)倒平板法：将已知体积(0.1～1 mL)的适当稀释过的菌液加
到灭过菌的培养皿内，然后倒入溶化后冷却至 45 ℃的琼脂培
养基，水平晃动混匀，待凝固后保温培养到出现菌落，然后与
第3课时
微生物数量的测定
本
课 栏
[学习目标定位]
目 开
1.概述测定某种微生物数量的方法和步骤。
关 2.以尿素为唯一氮源的培养基从土壤中分离出尿素分解菌并测
定数量。
知识储备区
第3课时
1．微生物需要的营养物质主要有水、 无机盐 、 碳 源、氮
本 课
源、微量元素等，不同微生物需要的氮源可能不同，固氮
栏 目
成分
用量
栏
目
尿素
20 g
开 关
酵母粉
0.1 g
磷酸二氢钾
9.1 g
磷酸氢二钠
9.5 g
酚红
0.01 g
琼脂
20 g
加热溶解后，蒸馏水定容至1 000 mL
学习探究区
第3课时
(1)在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 酵母粉 ， 提供氮源的是 尿素 ，琼脂的作用是 凝固剂 。
本 (2)微生物要利用尿素需要分泌脲酶，不能分泌脲酶的微生物不
栏
目
C．显微镜检法
开
关
D．滤膜法
(A )
解析 平板划线法可以用于菌种的纯化和分离，不能用于 菌种记数。
学习探究区
第3课时
探究点二 土壤中尿素分解菌数量的测定
土壤中含有种类繁多的微生物，不同微生物的数量有差别，我
们通过实验来测定土壤中尿素分解菌的数量。
1．下面是本课题使用的培养基的配方，请分析：
本
课
重复实验，减少误差。
学习探究区 活学活用
第3课时
1．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓
度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最
接近样品中菌体数真实值的是
( D)
本 课
A．菌落数量最多的平板
栏 目
B．菌落数量最少的平板
开 关
C．菌落数量适中的平板
D．取若干个平板菌落数量的平均值
本 课 栏 目 开 关
第3课时
学习探究区
第3课时
步骤
实验操作
操作提示
本
牛肉膏蛋白胨培养
课 栏
制备 分别配制牛肉膏蛋白胨培 基可以作为 对照 ，
本
课 1 mm2 和高 0.1 mm 的计数室，在 1 mm2 的面积里又被划分成 25
栏
目 个(或 16 个)中格，每个中格进一步划分成 16 个(或 25 个)小
开 关
格，计数室由 400 个小格组成。
(2)操作：将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在
显微镜下计数 4～5 个中格中的细菌数，求出每个小格所含细