猪繁殖与呼吸综合征病毒-
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病毒分离鉴定是诊断PRRSV最确切的方法 1、病料 首选材料：肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清。 适宜的检验材料：死产和流产胎儿的脾肺血清和胸水。 检出率最高：弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪。
2、分离病毒的细胞
原代细胞：PAM。 传代细胞：CL2621、MAl04、 Marcl45等细胞系。 但就临诊分离率而言，PAM的敏感性要高于传代细胞。 注意： （1）一般来说日龄小的猪对病毒的敏感性更高些。 （2）首次传代有时可能无CPE，需盲传2～3代。
时我国的分离毒株也存在变异现象，现已发现有缺失变异毒 株的存在。
三、PRRSV的致病机理
病毒
巨噬细胞
免疫系统 严重损伤
心衰 肺衰
广泛性的血管炎 其他组织的破坏
免疫功能 脾广泛坏死
淋巴结的严重破坏 畜体
四、PRRSV的抵抗力
1、病毒的稳定性受pH和温度的影响比较大。
在pH﹤5或 pH﹥7的条件下，其感染力降低95%以
一、PRRSV的形态特征
1、套式病毒目 动脉炎病毒科 动脉炎病毒属
2、基本形态及核酸 病毒粒子呈卵圆形，直
径50～65nm。 核衣壳直径30～35nm，
呈二十面体对称。 有囊膜。 单分子线状单股正链RNA
病毒。
3、病毒蛋白有核衣壳蛋白（N， 分子质量120000u）和两种主要囊 膜蛋白（M和GP5）。
七、PRRSV的防治
(1)坚持自繁自养的原则，建立稳定的种猪群，不轻 易引种。
(2)规模化猪场应彻底实现全进全出，至少要做到产 房和保育两个阶段的全进全出。
(3)建立健全规模化猪场的生物安全体系，定期对猪 舍和环境进行消毒，保持猪舍、饲养管理用具及环 境的清洁卫生。
（3） 不同的毒株可能适应不同的细胞系。 有些毒株仅能在PAM或仅能在CL2621细胞中生长。 欧洲株在PAM上的复制速度更快、效率更高。 北美毒株在CL2621上更有利于分离。
3、病毒鉴定的技术 （1）单克隆抗体或多克隆抗体免疫荧光抗体技术 （2）单层过氧化物酶试验 （3）RT-PCR技术 （4）电镜技术 （二）血清学诊断
上。 病毒在-70℃可保存18个月，4℃保存1个月，
37℃ 48h，56℃ 45min完全失去感染力。 2、干燥可很快使病毒失活。 3、对有机溶剂十分敏感，经氯仿处理后，其感染性
可下降99.99％。 4、对常用的化学消毒剂的抵抗力不强。
五、PRRSV的流行病学
1、易感动物 PRRSV只感染猪。 各种品种、不同年龄和用途的猪均可感染，
或禽类红细胞。
二、PRRSV的增殖与变异 1、病毒的增殖
病毒增殖的细胞：
猪的单核细胞巨噬细胞系统内增殖
猪肺泡 巨噬细胞
外周 单核细胞
肺间质 巨噬细胞
在宿主细胞浆的空泡膜及 滑面内质网小池膜上“出 芽”，成熟的病毒粒子多 蓄积在空泡腔内。
最为敏感
病毒增殖数量与其适应宿主细胞程度有密切关系。
病毒增殖的过程：
鼻黏膜或 上呼吸道系统 (巨噬细胞)
初级复制部位
血液循环
其他器官 （单核巨噬细胞系统）
病毒增殖的特点：
增殖的特点
有严格的宿主专一性
对巨噬细胞有专嗜性。
抗体依赖性 增强作用
即在亚中和抗体 水平存在的情况 下，在细胞上的 复制能力反而得 到增强。
2、wenku.baidu.com毒的变异
PRRSV分为两个型： （1）以Lelystad virus(LV株)为代表的欧洲型（简称A亚群）。 （2）以ATCC VR-2332毒株为代表的美洲型（简称B亚群）。 两者在抗原上有显著差异， 只有很少的交叉反应。 A亚群：广泛的基因组变异。 B亚群：呈较为保守性。 不同毒株之间在毒力和致病力上有明显的差异。 我国的PRRSV均属美洲型，迄今还没有发现欧洲型株，同
抗原变异会影响结果
血清中和试验
（ SN ）
可检测期长
敏感性低 耗时 抗原变异会影响结果
酶联免疫吸附试 自动化操作 高品质 高背景
验 （ ELISA ）
控制
（三）分子生物学诊断技术 1、RT-PCR 2、巢式PCR 3、原位PCR 4、RT-PCR-RFLP 5、核酸探针技术 直接检测病料组织中的病毒。
感染猪的流动也是本病的重要传播方式。
4、流行病学特点 高度接触性传染病，呈地方流行性。
持续性感染是PRRSV流行病学的重要特征 。 ＊ PRRSV可在感染猪体内存在很长时间。 ＊猪感染病毒后2～14周均可通过接触将病毒
传播给其它易感猪。
六、PRRSV的实验室诊断
该病毒确切诊断需依赖实验室诊断技术，包括病毒 分离鉴定、血清学诊断和分子生物学诊断技术。 （一）病毒分离鉴定
M是非糖基化的嵌膜蛋白，分子质 量160000u 。
GP5为糖蛋白，分子质量约25 000u。
GP5与M通过二硫键形成二聚体， 对病毒的感染力及中和作用至关 重要。
此外，还有4种次要囊膜蛋白 （GP2、GP3、GP4及E）及两种 大分子非结构蛋白（NSP）。
4、基因组大小为13000～15000nt。 5′端帽，约75%为RNA聚合酶基团。 3′端聚A尾，有编码病毒结构蛋白的基因。 有感染性。 5、表面有约5nm大小的突起，无血凝活性，不凝集哺乳动物
猪繁殖与呼吸综合征病毒
（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能引起猪 的一种高度传染性疾病，又称“猪蓝耳病”。 症状:
妊娠母猪的繁殖障碍(流产、死胎、木乃伊胎)。 各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病 。
采用血清学抗体检测技术是应用最为广泛的实验室诊 断方法。
目前有4种不同的方法用于检测血清中的 PRRSV抗 体，包括：
方法
优点
缺点
间接免疫荧光抗 特异性高 早期诊断 抗原变异会影响结果
体试验 （IFA）
结果主观判定
免疫过氧化物酶 特异性高 敏感性高 结果主观判定
单层试验（IPMA） 早期诊断
高背景
但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感。
2、传染源 患病猪和带毒猪是本病的重要传染源。
4、传播途径 PRRSV主要传播途径是接触感染、空气传播，也可通过
胎盘垂直传播。
易感猪可经以下几种途径而感染病毒： 经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种。 与带毒猪直接接触。 与污染有PRRSV的运输工具、器械接触。
2、分离病毒的细胞
原代细胞：PAM。 传代细胞：CL2621、MAl04、 Marcl45等细胞系。 但就临诊分离率而言，PAM的敏感性要高于传代细胞。 注意： （1）一般来说日龄小的猪对病毒的敏感性更高些。 （2）首次传代有时可能无CPE，需盲传2～3代。
时我国的分离毒株也存在变异现象，现已发现有缺失变异毒 株的存在。
三、PRRSV的致病机理
病毒
巨噬细胞
免疫系统 严重损伤
心衰 肺衰
广泛性的血管炎 其他组织的破坏
免疫功能 脾广泛坏死
淋巴结的严重破坏 畜体
四、PRRSV的抵抗力
1、病毒的稳定性受pH和温度的影响比较大。
在pH﹤5或 pH﹥7的条件下，其感染力降低95%以
一、PRRSV的形态特征
1、套式病毒目 动脉炎病毒科 动脉炎病毒属
2、基本形态及核酸 病毒粒子呈卵圆形，直
径50～65nm。 核衣壳直径30～35nm，
呈二十面体对称。 有囊膜。 单分子线状单股正链RNA
病毒。
3、病毒蛋白有核衣壳蛋白（N， 分子质量120000u）和两种主要囊 膜蛋白（M和GP5）。
七、PRRSV的防治
(1)坚持自繁自养的原则，建立稳定的种猪群，不轻 易引种。
(2)规模化猪场应彻底实现全进全出，至少要做到产 房和保育两个阶段的全进全出。
(3)建立健全规模化猪场的生物安全体系，定期对猪 舍和环境进行消毒，保持猪舍、饲养管理用具及环 境的清洁卫生。
（3） 不同的毒株可能适应不同的细胞系。 有些毒株仅能在PAM或仅能在CL2621细胞中生长。 欧洲株在PAM上的复制速度更快、效率更高。 北美毒株在CL2621上更有利于分离。
3、病毒鉴定的技术 （1）单克隆抗体或多克隆抗体免疫荧光抗体技术 （2）单层过氧化物酶试验 （3）RT-PCR技术 （4）电镜技术 （二）血清学诊断
上。 病毒在-70℃可保存18个月，4℃保存1个月，
37℃ 48h，56℃ 45min完全失去感染力。 2、干燥可很快使病毒失活。 3、对有机溶剂十分敏感，经氯仿处理后，其感染性
可下降99.99％。 4、对常用的化学消毒剂的抵抗力不强。
五、PRRSV的流行病学
1、易感动物 PRRSV只感染猪。 各种品种、不同年龄和用途的猪均可感染，
或禽类红细胞。
二、PRRSV的增殖与变异 1、病毒的增殖
病毒增殖的细胞：
猪的单核细胞巨噬细胞系统内增殖
猪肺泡 巨噬细胞
外周 单核细胞
肺间质 巨噬细胞
在宿主细胞浆的空泡膜及 滑面内质网小池膜上“出 芽”，成熟的病毒粒子多 蓄积在空泡腔内。
最为敏感
病毒增殖数量与其适应宿主细胞程度有密切关系。
病毒增殖的过程：
鼻黏膜或 上呼吸道系统 (巨噬细胞)
初级复制部位
血液循环
其他器官 （单核巨噬细胞系统）
病毒增殖的特点：
增殖的特点
有严格的宿主专一性
对巨噬细胞有专嗜性。
抗体依赖性 增强作用
即在亚中和抗体 水平存在的情况 下，在细胞上的 复制能力反而得 到增强。
2、wenku.baidu.com毒的变异
PRRSV分为两个型： （1）以Lelystad virus(LV株)为代表的欧洲型（简称A亚群）。 （2）以ATCC VR-2332毒株为代表的美洲型（简称B亚群）。 两者在抗原上有显著差异， 只有很少的交叉反应。 A亚群：广泛的基因组变异。 B亚群：呈较为保守性。 不同毒株之间在毒力和致病力上有明显的差异。 我国的PRRSV均属美洲型，迄今还没有发现欧洲型株，同
抗原变异会影响结果
血清中和试验
（ SN ）
可检测期长
敏感性低 耗时 抗原变异会影响结果
酶联免疫吸附试 自动化操作 高品质 高背景
验 （ ELISA ）
控制
（三）分子生物学诊断技术 1、RT-PCR 2、巢式PCR 3、原位PCR 4、RT-PCR-RFLP 5、核酸探针技术 直接检测病料组织中的病毒。
感染猪的流动也是本病的重要传播方式。
4、流行病学特点 高度接触性传染病，呈地方流行性。
持续性感染是PRRSV流行病学的重要特征 。 ＊ PRRSV可在感染猪体内存在很长时间。 ＊猪感染病毒后2～14周均可通过接触将病毒
传播给其它易感猪。
六、PRRSV的实验室诊断
该病毒确切诊断需依赖实验室诊断技术，包括病毒 分离鉴定、血清学诊断和分子生物学诊断技术。 （一）病毒分离鉴定
M是非糖基化的嵌膜蛋白，分子质 量160000u 。
GP5为糖蛋白，分子质量约25 000u。
GP5与M通过二硫键形成二聚体， 对病毒的感染力及中和作用至关 重要。
此外，还有4种次要囊膜蛋白 （GP2、GP3、GP4及E）及两种 大分子非结构蛋白（NSP）。
4、基因组大小为13000～15000nt。 5′端帽，约75%为RNA聚合酶基团。 3′端聚A尾，有编码病毒结构蛋白的基因。 有感染性。 5、表面有约5nm大小的突起，无血凝活性，不凝集哺乳动物
猪繁殖与呼吸综合征病毒
（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能引起猪 的一种高度传染性疾病，又称“猪蓝耳病”。 症状:
妊娠母猪的繁殖障碍(流产、死胎、木乃伊胎)。 各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病 。
采用血清学抗体检测技术是应用最为广泛的实验室诊 断方法。
目前有4种不同的方法用于检测血清中的 PRRSV抗 体，包括：
方法
优点
缺点
间接免疫荧光抗 特异性高 早期诊断 抗原变异会影响结果
体试验 （IFA）
结果主观判定
免疫过氧化物酶 特异性高 敏感性高 结果主观判定
单层试验（IPMA） 早期诊断
高背景
但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感。
2、传染源 患病猪和带毒猪是本病的重要传染源。
4、传播途径 PRRSV主要传播途径是接触感染、空气传播，也可通过
胎盘垂直传播。
易感猪可经以下几种途径而感染病毒： 经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种。 与带毒猪直接接触。 与污染有PRRSV的运输工具、器械接触。