大豆磷脂中磷脂含量测定ppt
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表1 磷脂的线性方程、相关系数、线性范围及回收率
3.3 密度试验 用磷脂混合对照品溶液在同一块板上点样6次，每次点样量60ug，按2.3 方法展开、显色、测定，结果RSD分别为： LPC1.5%,SM1.8%,PC2.5%,PI2.3%,PS2.4%,PE2.8%,PA3.1% 3.4 稳定性测试 样品显色后，按2.3 方法测定3h，结果表明显色后3h稳定
小组成员：李璐 童鞋 倪培元 童鞋 谢静 童鞋 付歆瑜 童鞋 王惠 童鞋
邵月莹 童鞋
马粉霞 童鞋 周政妍 童鞋 李曼 童鞋 袁小飞 童鞋
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3 方法评价 3.1 标准曲线及线性范围 分别取磷脂混合对照品溶液6,10,16,20,30u1，点与同一块 板上，按 2.3 方法展开、显色、测定。以磷脂对照品峰面积与磷脂对照品点样量进 行回归分析，线性方程、相关系数及线性范围见表1 3.2 回收率实验 精密称取四川产卵磷脂70mg，置于50ml量瓶中，加入混合对照品各 约25ug，加二氯甲烷溶液并稀释至刻度。2.3 方法展开、显色、测定，以外表二点 法计算，测得回收率见表1
1仪器、试剂与样品 CS-930薄层扫描仪（岛津） 自制硅胶G板：硅胶G（青岛海洋化工厂） 适量，加入0.5%硫酸铵溶液（含0.3%羧甲 基纤维素钠），调匀后涂布于15cm*20cm玻 璃板上，使用前110。C活化2h。 磷脂对照品：P磷脂酰胆碱（PC），溶血磷 脂酰胆碱（LPC），磷脂酰乙醇胺（PE）， 磷脂酰肌醇（PI），神经鞘磷脂（SM）， 磷脂酸（PA）,磷脂酰丝氨酸（PS）均购于 Signa公司。 磷脂样品：卵磷脂（四川），卵磷脂（北 京），大豆磷脂胶囊（北京），卵磷脂胶 囊（美国），L ECITHIN胶囊（美国） 试剂均为分析纯，水为去离子水。
马辰 段宏瑾 （中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所 北京100050）
摘要目的：应用薄层色谱扫描法鉴定 样品中磷脂的含量，比较不同样品中磷脂 含量。方法：展开剂为氯仿-甲醇-冰醋酸 -丙酮-水（45:25:7:4:2）,磷显色剂显色。 结果：北京卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量大 于70%，四川卵磷脂中含有所测的7种成分， 大豆磷脂胶囊、美国卵磷脂胶囊和 LECITHIN胶囊为口服剂型，磷脂总含量较 低。结论：本法可作为磷脂质量控制的有 效方法。 关键词：磷脂 薄层色谱扫描法 含量 测定
5.4 应用本法测定了样品含量，北京产卵磷脂 中PC的含量在70%以上，其他磷脂含量较少，四 川卵磷脂含有所测定的7种成分，以PC的含量最 高，为25%，大豆磷脂胶囊、美国卵磷脂胶囊和L ECITHIN胶囊为口服剂型，磷脂的总含量较低， 本文为开发利用磷脂和评价磷脂的质量提供了可 靠的数据。
6 参考文献 （1）郭戎，周永治，许益民，等。百合磷脂组分的研究及品 种鉴定的数学判别。中药材，1991,14（9）：32 （2）WANG W Q,Gustafson A .One-Dimensional Thin-Layer Chromatographic Separation of Phospholipids and Lysopholipids from Tissue Lipid Extracts . J Chromatogr,1992,581(1):139 (3)Chapman G W .A Conversion Eactor to Determine Phospholipid Content in Soybean and Sunflo wer Crude Oils,JAOCS,1980,57(9):299 (4)Vaskovsky V E and Svetashev VI.Phospholipid Spray Reagents.J Chomatogr,1972,65(2):45
2试验方法 2.1 对照品溶液的配制 精密称取PC,LPC,PI,SM,PA,PS等对照品各约20mg， 置于50ml容量瓶中，加二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，备用 2.2 磷脂显色剂的配制 溶液A：称取3g钼酸钠，加入15ml盐酸。溶液B： 称取0.3g硫酸肼，加入25ml水，加热溶解。合并溶液A，B，置50。C水浴 中30min，冷却后加水至300ml，溶液呈棕红色，避光保存。 2.3 测定方法 精密吸取样品液及对照品溶液各20u1点于硅胶板上。已展开 剂氯仿-甲醇-冰醋酸-丙酮-水（45:25:7:4:2）饱和20min后，直立上行展 开15cm。取出薄层板，挥干溶剂。喷显色剂后，喷10%硫酸甲醇液，斑点 呈蓝色，薄层色谱图见图1
扫描测定 检测波长700nm; 狭缝6nm*0.4nm。采用反射 法线性扫描，测定灵敏度Baidu Nhomakorabea中。记录峰面积，用外标 二点法计算含量。
图 磷 脂 薄 层 色 谱 图
1.混合对照品 2.北京卵磷脂（1） 3.北京卵磷脂 （2） 4.四川卵磷脂 5.大豆磷脂胶囊 6.卵磷脂 胶囊 7.L ECITHIN胶囊
磷脂是动物与人体细胞膜重要组成部分，亦是生殖腺和精液的 主要成分。磷脂中的不饱和脂肪酸是体内多烯酸的重要来源， 尤其是机体正常需要而又不能合成的必需脂肪酸。今年来发现 多烯酸对大脑细胞，特别是脑神经传导和生长发育有重要作用。 本文探讨了7种磷脂的薄层分离、显色条件，对磷脂的开发利 用及质量控制与评价提供了有效手段。
4 样品测定 称取样品约70mg，置于10ml量瓶中，用二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇 匀，备用。分别系取适量，点于硅胶板上随行点磷脂对照品溶液，按2.3 方 法展开、显色、测定、计算。结果见表2
表2 样品中磷脂含量测定
注：n=4
5 讨论
5.1 文献[1]报道，用0.02mol/l碳酸钠溶液涂碱性版，试用后发现，其斑点（尤其是 PS与PI）拖尾严重，PS与PI不能分离。用0.5%硫酸铵溶液[2]铺板，可以较好的改善这 一情况，通过展开剂氯仿-甲醇-冰醋酸-丙酮-水（45:25:7:4:2）达到PS与PI的分离， 这一方法完成了7种磷脂的分离测定。 5.2 用选定的展开剂系统，改变硫酸铵的浓度，当硫酸铵浓度低时，磷脂中PS与PI的 分离不好，且拖尾，如果硫酸铵的浓度高，PS,PI的Rf值增加，分离情况改善，最后选 定的铵盐浓度是0.5% 5.3 磷脂在UV区只有末端吸收，故需经显色后，才能测定，曾采 用碘蒸气熏板[3]后，封板测定，亦可稳定3h，但碘显色法的影响 因素很多，用林显色剂喷版[4]，斑点呈蓝色，背景类白色，对比 明显，显色条件易于掌握。薄层板放干后，约2h后背景变蓝。如 在喷显色剂后，喷10%硫酸钾醇溶液，可以避免背景变蓝，提高薄 层板稳定性，有利于测定
3.3 密度试验 用磷脂混合对照品溶液在同一块板上点样6次，每次点样量60ug，按2.3 方法展开、显色、测定，结果RSD分别为： LPC1.5%,SM1.8%,PC2.5%,PI2.3%,PS2.4%,PE2.8%,PA3.1% 3.4 稳定性测试 样品显色后，按2.3 方法测定3h，结果表明显色后3h稳定
小组成员：李璐 童鞋 倪培元 童鞋 谢静 童鞋 付歆瑜 童鞋 王惠 童鞋
邵月莹 童鞋
马粉霞 童鞋 周政妍 童鞋 李曼 童鞋 袁小飞 童鞋
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3 方法评价 3.1 标准曲线及线性范围 分别取磷脂混合对照品溶液6,10,16,20,30u1，点与同一块 板上，按 2.3 方法展开、显色、测定。以磷脂对照品峰面积与磷脂对照品点样量进 行回归分析，线性方程、相关系数及线性范围见表1 3.2 回收率实验 精密称取四川产卵磷脂70mg，置于50ml量瓶中，加入混合对照品各 约25ug，加二氯甲烷溶液并稀释至刻度。2.3 方法展开、显色、测定，以外表二点 法计算，测得回收率见表1
1仪器、试剂与样品 CS-930薄层扫描仪（岛津） 自制硅胶G板：硅胶G（青岛海洋化工厂） 适量，加入0.5%硫酸铵溶液（含0.3%羧甲 基纤维素钠），调匀后涂布于15cm*20cm玻 璃板上，使用前110。C活化2h。 磷脂对照品：P磷脂酰胆碱（PC），溶血磷 脂酰胆碱（LPC），磷脂酰乙醇胺（PE）， 磷脂酰肌醇（PI），神经鞘磷脂（SM）， 磷脂酸（PA）,磷脂酰丝氨酸（PS）均购于 Signa公司。 磷脂样品：卵磷脂（四川），卵磷脂（北 京），大豆磷脂胶囊（北京），卵磷脂胶 囊（美国），L ECITHIN胶囊（美国） 试剂均为分析纯，水为去离子水。
马辰 段宏瑾 （中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所 北京100050）
摘要目的：应用薄层色谱扫描法鉴定 样品中磷脂的含量，比较不同样品中磷脂 含量。方法：展开剂为氯仿-甲醇-冰醋酸 -丙酮-水（45:25:7:4:2）,磷显色剂显色。 结果：北京卵磷脂中磷脂酰胆碱的含量大 于70%，四川卵磷脂中含有所测的7种成分， 大豆磷脂胶囊、美国卵磷脂胶囊和 LECITHIN胶囊为口服剂型，磷脂总含量较 低。结论：本法可作为磷脂质量控制的有 效方法。 关键词：磷脂 薄层色谱扫描法 含量 测定
5.4 应用本法测定了样品含量，北京产卵磷脂 中PC的含量在70%以上，其他磷脂含量较少，四 川卵磷脂含有所测定的7种成分，以PC的含量最 高，为25%，大豆磷脂胶囊、美国卵磷脂胶囊和L ECITHIN胶囊为口服剂型，磷脂的总含量较低， 本文为开发利用磷脂和评价磷脂的质量提供了可 靠的数据。
6 参考文献 （1）郭戎，周永治，许益民，等。百合磷脂组分的研究及品 种鉴定的数学判别。中药材，1991,14（9）：32 （2）WANG W Q,Gustafson A .One-Dimensional Thin-Layer Chromatographic Separation of Phospholipids and Lysopholipids from Tissue Lipid Extracts . J Chromatogr,1992,581(1):139 (3)Chapman G W .A Conversion Eactor to Determine Phospholipid Content in Soybean and Sunflo wer Crude Oils,JAOCS,1980,57(9):299 (4)Vaskovsky V E and Svetashev VI.Phospholipid Spray Reagents.J Chomatogr,1972,65(2):45
2试验方法 2.1 对照品溶液的配制 精密称取PC,LPC,PI,SM,PA,PS等对照品各约20mg， 置于50ml容量瓶中，加二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，备用 2.2 磷脂显色剂的配制 溶液A：称取3g钼酸钠，加入15ml盐酸。溶液B： 称取0.3g硫酸肼，加入25ml水，加热溶解。合并溶液A，B，置50。C水浴 中30min，冷却后加水至300ml，溶液呈棕红色，避光保存。 2.3 测定方法 精密吸取样品液及对照品溶液各20u1点于硅胶板上。已展开 剂氯仿-甲醇-冰醋酸-丙酮-水（45:25:7:4:2）饱和20min后，直立上行展 开15cm。取出薄层板，挥干溶剂。喷显色剂后，喷10%硫酸甲醇液，斑点 呈蓝色，薄层色谱图见图1
扫描测定 检测波长700nm; 狭缝6nm*0.4nm。采用反射 法线性扫描，测定灵敏度Baidu Nhomakorabea中。记录峰面积，用外标 二点法计算含量。
图 磷 脂 薄 层 色 谱 图
1.混合对照品 2.北京卵磷脂（1） 3.北京卵磷脂 （2） 4.四川卵磷脂 5.大豆磷脂胶囊 6.卵磷脂 胶囊 7.L ECITHIN胶囊
磷脂是动物与人体细胞膜重要组成部分，亦是生殖腺和精液的 主要成分。磷脂中的不饱和脂肪酸是体内多烯酸的重要来源， 尤其是机体正常需要而又不能合成的必需脂肪酸。今年来发现 多烯酸对大脑细胞，特别是脑神经传导和生长发育有重要作用。 本文探讨了7种磷脂的薄层分离、显色条件，对磷脂的开发利 用及质量控制与评价提供了有效手段。
4 样品测定 称取样品约70mg，置于10ml量瓶中，用二氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇 匀，备用。分别系取适量，点于硅胶板上随行点磷脂对照品溶液，按2.3 方 法展开、显色、测定、计算。结果见表2
表2 样品中磷脂含量测定
注：n=4
5 讨论
5.1 文献[1]报道，用0.02mol/l碳酸钠溶液涂碱性版，试用后发现，其斑点（尤其是 PS与PI）拖尾严重，PS与PI不能分离。用0.5%硫酸铵溶液[2]铺板，可以较好的改善这 一情况，通过展开剂氯仿-甲醇-冰醋酸-丙酮-水（45:25:7:4:2）达到PS与PI的分离， 这一方法完成了7种磷脂的分离测定。 5.2 用选定的展开剂系统，改变硫酸铵的浓度，当硫酸铵浓度低时，磷脂中PS与PI的 分离不好，且拖尾，如果硫酸铵的浓度高，PS,PI的Rf值增加，分离情况改善，最后选 定的铵盐浓度是0.5% 5.3 磷脂在UV区只有末端吸收，故需经显色后，才能测定，曾采 用碘蒸气熏板[3]后，封板测定，亦可稳定3h，但碘显色法的影响 因素很多，用林显色剂喷版[4]，斑点呈蓝色，背景类白色，对比 明显，显色条件易于掌握。薄层板放干后，约2h后背景变蓝。如 在喷显色剂后，喷10%硫酸钾醇溶液，可以避免背景变蓝，提高薄 层板稳定性，有利于测定