淀粉提取步骤

实验原理

淀粉主要由直链淀粉(约占20％)和支链淀粉(约占80％)组成。直链淀粉能溶于热水，跟碘作用显现蓝色。支链淀粉不溶于水，但能在水中胀大而润湿、跟碘作用显现紫红色。酸性氯化钙溶液与磨细的含淀粉样品共煮，可使淀粉轻度水解。同时钙离子与淀粉分子上的羟基络合，这就使得淀粉分子充分地分散到溶液中，成为淀粉溶液。淀粉在稀酸作用下能发生水解，生成一系列产物，最后得到葡萄糖。

三、仪器和试剂

仪器

植物样品粉碎机、离心机、分析天平、粗天平、量筒、三角瓶；分样筛(100目)、布氏漏斗、抽滤瓶及真空泵、离心管、小电炉；烧杯、三脚架、石棉网、滴管。

试剂

1 .乙醚

2. 80%的乙醇

3. 含有氯化汞的乙醇溶液

4. 醋酸氯化钙溶液

5. 30％ZnSO4

6. 15％K4Fe(CN)

7. 95％乙醇

8. 淀粉

9. 碘溶液(碘酒或碘化钾的碘溶液)

10. 稀硫酸(1:5)

11. 碳酸钠

12. 红色石蕊试纸

13. 氢氧化钠溶液(5％)

14. 硫酸铜溶液(2％)

15. 斐林试剂

四、操作步骤

(一)淀粉的提取

1.样品准备

(1)称取样品：将样品风干、研磨、通过100目筛，精确称取约2.5g 样品细粉(要求含淀粉约2g，请参考附注估计)，置于离心管内。

(2)脱脂：加乙醚数mL 到离心管内，用细玻棒充分搅拌，然后离心。倾出上清液并收集以备回收乙醚。重复脱脂数次，以去除大部分油脂、色素等(因油脂的的存在会使以后淀粉溶液的过滤困难。大多数谷物样品含脂肪较少，可免去这个脱脂手续。

(3)抑制酶活性：加含有氯化高汞的乙醇溶液10mL 到离心管内，充分搅拌，然后离心，倾去上清液，得到残余物。

(4)脱糖：加80％乙醇10mL 到离心管中，充分搅拌以洗涤残余物(每次都用同一玻棒)，离心，倾去下清液。重复洗涤数次以去除可溶性糖分。

2.溶提淀粉

(1)加醋酸－氯化钙：先用醋酸氯化钙溶液约10mL 加到离心管中，搅拌后全部倾入250mL 三角瓶内，再用醋酸氯化钙溶液50mL 分数次洗涤离心管，洗涤液并入三角瓶内，搅拌玻棒也转移到三角瓶内。

(2)煮沸溶解：先用蜡笔标记液面高度，直接置于加有石棉网的小电炉上，在4min～5min 内迅速煮沸，保持沸腾15min～17min，立即将三角瓶取下，置流水中冷却。煮沸过程中要时

加搅拌，勿令烧焦；要调节温度，勿使泡沫涌出瓶外；常用玻璃将瓶侧的细粒擦下；并加水保持液面高度。

3.沉淀杂质和定容

(1)加沉淀剂：将三角瓶内的水解液转入100mL 容量瓶，用醋酸氯化钙溶液充分洗涤三角瓶瓶，并入容量内，加30％ZnSO41mL 混合后，再加15％K4Fe(CN)61mL，用水稀释至接近刻度时，加95％乙醇一滴以破坏泡沫，然后稀释到刻度，充分混合，静置，以使蛋白充分沉淀。

(2)滤清：用布氏漏斗(加一层滤纸)吸气过滤。先倾清溶液约10mL 于此滤纸上，使其完全湿润，

让溶液流干，弃去滤液，再倾清溶液进行过滤，用干燥的容器接受此滤液，收集约50mL，即可供测定之用。

(二)淀粉性质的测定

1.淀粉跟碘的反应：在一个试管里加入1mL 制备好的淀粉溶液，然后加如1滴碘液，淀粉溶液立即会显深蓝色。加热，颜色褪去，冷却，蓝色又出现。

2.淀粉的水解：加40mL 淀粉溶液于烧杯中，再加稀硫酸1mL，煮沸5分钟，取出1mL 热溶液放在试管里，使其迅速冷却，滴入1滴碘溶液，出现蓝紫色。以后每隔2min 取一次试样检验，共计五次，可以看到不同大小的糊精颗粒对碘溶液显现紫红色、橙红色、橙黄色及黄色。

3.把已经水解的淀粉溶液用碳酸钠中和硫酸，使溶液略显碱性。取出1mL，加入盛有斐林试剂的(甲和乙各3mL 的混和液)试管里，摇和均匀，加热煮沸，即有红色氧化亚铜沉淀生。