毛霉的分纯

毛霉的分纯

一、实验原理：毛霉无匍匐枝及假根，营养菌丝能渗入琼脂培养基内

1.5-

2.0mm处。孢囊梗直接由气生菌丝胜出，单生，较少分枝，分枝常出现在近顶端处呈单轴式，各分枝顶端均生孢子囊。孢子囊呈球状，成熟后可见表面有刺状突起。囊轴近球形或卵形，未见明显囊领，无囊托。孢囊孢子呈短卵形或球形，表面光滑。

二、实验方法

（1）从长满菌丝的培养基上取一小块与5ml无菌水中，振摇，制成孢子悬液。

（2）用接种环取该孢子悬液在灭菌马铃薯葡萄糖培养基平板表面划线分离，20℃培养1-2d,以获取单菌落。

（3）根据形态鉴别毛霉。菌落呈白色棉絮状，菌丝发达。于载玻片上加一滴石炭酸乳酚油，用解剖针从菌落边缘挑取少量菌丝于载玻片上，轻轻将菌丝体分开，加盖玻片，于显微镜下观察孢子囊、梗的着生情况。若无假根和匍匐菌丝或菌丝不发达，孢子梗直接由菌丝长出，单生或分枝，则可初步确定为毛霉，必要时可进一步通过生理生化试验予以验证。

（3）性能测定毛霉菌用马铃薯葡萄糖培养基培养后测其蛋白酶活力，以定优劣。

根霉的分离

实验原理：根霉的特点是蔓延繁殖，没有一定的菌落形态，常易与其它霉菌混生。所以分离时可采取大稀释度、早移植、添加抑制剂等措施，可获得良好结果。分离培养后可依照形态特征进行鉴别。

实验方法：

（1）从长满菌丝的培养基上取一小块于10ml无菌水中，制成均匀的悬浮液。

（2）融化葡萄糖豆芽汁琼脂培养基制作平板。

（3）将上述悬液以10倍法108 ，取后三个稀释度的稀释液各0.2ml于无菌培养皿中（每一稀释度平行两个皿），用玻璃涂布器涂布均匀，置25℃培养18h。

（4）观察有无菌丝生长，由于此时菌丝细段短颜色与培养基相似，不易发现，故宜在光线处斜视。用接种钩挖菌丝一段，植于豆芽汁斜面培养基中25℃培养3d.

（5）鉴定根据形态鉴别根霉，必要时可进一步通过生理生化试验予以验证。

性能测定根霉菌用米粉或麸皮培养基培养后测其糖化酶活力，以定优劣。

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