高速逆流色谱

其中固定相以一种相对均匀的方式分布在一根聚四氟乙烯
管绕成的螺旋管中
流动相以一定的速度通过固定相，并按照被分离物质分配
系数的不同依次洗脱而获得分离
固定相的保留 利用螺旋管的方向性和同步行星式运动产生的二 维离心力场形成的单向性流体动力学平衡 （HDES） 从而实现流动相高速移，留在柱子中固定相的多少是影响 样品分离效果的重要因素。一般来说，样品的分离 度随着固定相保留值的增加而提高。溶剂体系中各 物质的物理特性与固定相的保留值有密切关系。 其中粘度对固定相的保留值的影响较大，粘度低 的溶剂体系一般具有较高的固定相保留，而高粘度 的溶剂系统固定相保留值相对较低，表面张力、两 相之间的比重差等也可以影响样品中固定相的保留。
高速逆流色谱的工作流程
高速逆流色谱条件的选择
对用于HSCCC分离的溶剂体系应满足要求 (1) 溶剂体系不会造成样品的分解与变性； (2) 对样品有足够的溶解度； (3) 样品在溶剂体系中有合适的分配系数，一般认为 分配系数在0.2～2的范围内较为合适，针对不同的 仪器，在上机后根据不同的情况进行一步调试； (4) 固定相能够实现足够高的保留。
高速逆流色谱
汇报内容
一.高速逆流色谱的发展 二.高速逆流色谱的原理 三.高速逆流色谱的特点
一.高速逆流色谱发展
逆流色谱起源于20世纪50年代多极萃取技术
但是多级萃取设备庞大复杂，溶剂体系容易乳 化，溶剂耗量大，分离时间长。
液滴逆流色谱 DCCC（20世纪70年代）
缺点：流动相流速低,每小时只有十几毫升;分 离过程长,一般需要几十小时才能完成一次几个 组分的分离；连接处容易出现渗漏
三.高速逆流色谱特点
不存在样品的不可逆吸附，理论回收率100%
样品负载能力强，制备量大，重现性好
操作成本低，无制备柱消耗，后续投入较低 可采用广泛的溶剂体系和多样性的操作条件 操作简单，无需太多样品前处理
逆流色谱与传统色谱的比较
相对柱层析 1. 分离效率高，实验周 期短 2. 封闭性操作，无溶剂 挥发造成污染 3. 简化繁琐的实验步骤 4. 工艺重复性高 5. 无死吸附，回收率高 相对制备HPLC 1.一次进样，制备量大 2.工艺重复性高 3.前处理简单 4.无耗材消耗，实验成 本低 5.无死吸附，回收率高
螺旋管转速的选择
螺旋管的旋转速度对两相溶剂在流体动力学平衡 时的体积比影响很大，从而影响逆流色谱对目标化 学成分的分离效果，但并不是转速越高越好，通常 情况下，转速越高，溶剂系统在逆流色谱的螺旋管 柱中越容易产生乳化现象，非常不利于目标化学成 分的分离。所以要求针对不同的仪器、样品、溶剂 体系，选择适合的螺旋管的旋转速度。
混合区：在靠近离心轴 心大约有四分之一的区 域，两相的激烈混合 静置区：两相溶剂分成 两层，重相在外部，轻 相在内部
以1000转/分的速率进行旋 转，在二维力场的作用下分 离管柱内混合和传递的频率 可达到17次/S，从而实现高 效的分离
K ＝ Cs/Cm
Cs—组分分子在固定相中的溶解度 Cm—组分分子在流动相中的溶解度
离心分配色谱仪CPC （20世纪70年代）
缺点：连接处较多而且容易出现渗漏，清洗维护 复杂
20世纪80年代出现了高速逆流色谱仪 (HSCCC)，这是一种新型的、连续高效的 液-液分配色谱技术。
二.高速逆流色谱原理
液－液分配色谱
利用一种特殊的流体动力学现象使互不混溶的两相溶剂 (固定相和流动相)在螺旋管中高效地接触、混合、分配和 传递