【CN110157696B】αL阿拉伯呋喃糖苷酶及其编码基因和应用【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201910369472.7(22)申请日 2019.05.05

(65)同一申请的已公布的文献号

申请公布号 CN 110157696 A (43)申请公布日 2019.08.23

(73)专利权人 云南与诺生物工程有限责任公司

地址 650117 云南省昆明市经开区出口加

工区浦发路16号B2幢2楼(72)发明人 韩秀林　李铭刚　赵江源　蒋明星　

包崇卯　李芮　刘兴　艾黎　文孟良　(74)专利代理机构 北京润平知识产权代理有限

公司 11283

代理人 刘依云　乔雪微

(51)Int.Cl.

C12N 9/24(2006.01)C12N 15/56(2006.01)C12N 15/70(2006.01)C12N 1/21(2006.01)C12R 1/19(2006.01)

审查员 靳春鹏

(54)发明名称

α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶及其编码基因和应用

(57)摘要

本发明涉及基因工程技术及生物医药领域，公开了一种α-L -阿拉伯呋喃糖苷酶及其编码基因和应用。具体地，本发明提供了一种α-L -阿拉伯呋喃糖苷酶及其编码基因，含有该基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌，及其在制备人参皂苷Rd中的应用。本发明所述的α-L -阿拉伯呋喃糖苷酶能够较高效地催化人参皂苷Rc 反应制备人参皂苷Rd，酶活性较高；在较宽的pH 和温度范围内均能表现出较高的活性，稳定性强。而且本发明的α-L -阿拉伯呋喃糖苷酶对阿拉伯糖和葡萄糖具有较高的耐受性，有利于和其

他的人参皂苷水解酶进行协同作用。

权利要求书1页 说明书9页序列表4页 附图5页

CN 110157696 B 2020.01.17

C N 110157696

B

权　利　要　求　书1/1页CN 110157696 B

1.一种α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶，其特征在于，其为(a)、(b)或(c)：

(a)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列组成的酶；

(b)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基末端或羧基末端连接有标签的氨基酸序列组成的酶；

(c)由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的氨基末端和羧基末端连接有标签的氨基酸序列组成的酶。

2.编码权利要求1所述的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的基因。

3.根据权利要求2所述的基因，其中，所述基因的序列如SEQ ID NO：2所示。

4.一种制备权利要求1所述的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的方法，其特征在于，该方法包括：将编码所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的基因插入载体，用所得重组载体转化表达宿主，并诱导表达宿主表达所述基因。

5.包含权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

6.权利要求1所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、权利要求2或3所述的基因、以及权利要求5所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌中的任意一项在制备人参皂苷Rd中的应用。

7.一种制备人参皂苷Rd的方法，该方法包括：将含有人参皂苷Rc的原料与酶进行接触，其特征在于，所述酶含有权利要求1所述的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，相对于每毫克的人参皂苷Rc，所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的用量为2-10U。

9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述接触的条件包括：温度为25-55℃，pH值为4-9，时间为10-60min。

10.根据权利要求7-9中任意一项所述的方法，其中，所述酶还含有β-D-葡萄糖苷酶；所述原料还含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rb3中的至少一种。

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