血型鉴定微柱凝胶法

血型鉴定微柱凝胶法

1.目的：

采用正反定型对受检者进行血型鉴定

2.职责：

严格按照血型鉴定试剂说明书操作

3.适用范围：

血库工作人员

4.原理：

凝胶作为微柱凝胶卡的填充物，将生物化学的凝胶分子筛过滤技术、离心技术和血型血清学的抗体特异性结合在一起，当抗原抗体反应时，凝集的红细胞在离心力的作用下不能通过凝胶而留在凝胶上层或游离在凝胶中，呈阳性反应；而抗原抗体没有反应时，未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶而沉积在微柱凝胶管的底部，呈现阴性反应。

5.试剂、仪器及所需材料

5.1 ℃保存，主要成分：IgM性质抗-A单克隆试剂：细胞株HA4、ADD、HA5、HA3，来源于河北医科大学生物医学工程中心；

IgM性质抗-B单克隆试剂：细胞株BAD、BDF、HB4，来源于河北医科大学生物医学工程中心；IgM性质抗-D单克隆试剂：细胞株RUM-1，来源于英国Millipore公司。

5.2 0.8%-1%的A型和B型红细胞

5.3 0.9%的生理盐水：安徽双鹤药业有限责任公司

5.4 LB-3000医用低速离心机一次性吸管一次性塑料试管

6.标准种类及收集要求

样本应符合《临床输血技术规范》要求，应无严重溶血、无脂血及无纤维蛋白存在，EDTA 抗凝的血液标本。

7.检测环境条件：

18-25℃，湿度30%-70%

8.操作程序

8.1 血型卡有六个凝集管。其中第一管为抗A凝胶，第二管为抗B凝胶，第三管为抗D凝胶，第四至六管为中性胶。

8.2 用生理盐水将待检者的压积红细胞配置成0.8%-1%浓度，分别加入第一至第三管和第六管微管中，每管50ul。

8.3 将A型、B型红细胞分别加入到第四和第五管中，每管50ul。

8.4将待检者血浆分别加入到第四至第六管中。每管25ul。

8.5 混匀后置专用离心机离心5分钟。

8.6 离心结束后，取出观察结果并记录。

9.结果判定

10.注意事项

10.1为了便于鉴别，抗A微管中内容物为蓝色，抗B微管中内容物为黄色，抗D微管中内容物为乳白色，其他三个中性胶中内容物为乳白色。

10.2 使用血型卡前重新离心后使用。

10.3 若凝胶卡封口开裂、孔中凝胶干涸或有气泡时，不可使用。

10.4 撕开凝胶卡的封口膜时，不可用力过猛，以免造成凝胶微孔间的交叉感染。

10.5 红细胞悬液的浓度为0.8%-1%，浓度过高或过低会影响检测结果。

10.6 血浆标本必须充分离心去除纤维蛋白，否则会在微柱凝胶中阻止红细胞沉淀，呈现假阳性反应。

10.7 如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，一定要认真分析并向上级主管技术人员报告并讨论。

10.8 某些药物、疾病可导致正定型结果弱阳性反应或正反定型不相符，应进一步检查以明确原因。

10.9 溶血性疾病、巨球蛋白血症、输注大分子血浆扩容剂如右旋糖酐等可能会影响实验结果。

10.10 人源血液样本存在潜在的传染性，凝胶卡使用后按医疗生物垃圾废弃物处理。

10.11 本产品进行临床验证时，使用上海血液生物医药有限责任公司生产的人ABO血型反定型用红细胞试剂盒，其他反定型用红细胞试剂未经临床验证，不推荐使用。

10.12 仅用于体外诊断。