10鲁凤民-HCV核心抗原检测

Dai ZC, et al. The viral hepatitis of China: the epidemiological of serous, 1997.60-71.
7
Evolution of anti-HCV antibody assays
5’-UTRstructural non-structural 3’-UTR
Hemodialysis， 20 cases, Taiyuan
Hemodialysis，19 cases, Huoshan 9 cases, Shouxian 15 cases, Anqing 7 cases, Liuan
Sharing syringe prevalence, Jianping
Hemodialysis， 10 cases, Xuzhou
90 80
70 60 50 40
30
20 20 25 30 35 40 45 50 55 60
Age (years)
Foster et al. AASLD 2003; Zeuzem et al. Ann Int Med 2004;140:370.
20
加强HCV的筛查：抗-HCV检测
静脉吸毒人群 高流行区域人 群
10 6
GT3
10 4
r=0.73 (p<0.0001, n=23)
10 2
10 2
10 0 10 0
10 2
10 4
10 6
10 8
10 0 10 0
10 2
10 4
10 6
10 8
HCV-RNA (IU/ml)
HCV-RNA (IU/ml)
Mederacke et al, J Clin Virol 2009
28
Diagnosis of HCV infection

Serology

Anti-HCV

Screening tests Confirmatory tests

HCV Core antigen HCV RNA


NAT (nucleic acid test)

急/慢性HCV感 染患者
Qualification Quantification
肝炎类型 甲肝 乙肝 发病数 43841 1,179,607 发病率 /10万 3.30 88.82
丙肝
戊肝 未分型 合计
131849
20275 49448 1425020
9.93
1.53 3.72 107.30
资料来源：法定传染病报告系统
13
中国HCV感染的诊断和治疗现况
2010年CDC报告发病数: 158,758
仅占:1.6%~3.2%
估计HCV感染者: 500万~1000万
HCV治疗的进展
发现HCV 基因组 用 IFN alfa 治疗24 或者48周– 每周三次 – 结果欠佳
加用 RBV联合IFN alfa 改善疗效
Peg-IFN单药 – 每周一次 Peg-IFN alfa联合RBV 成为标准治疗 根据应答指导治疗（RGT）出现 新抗病毒药物的研发 第一个DAA药物上 市
31
32
33
HCV core antigen定量与罗氏
Amplicor HCV RNA的相关性
100000
Abbott ARCHITECT HCV Ag (f mol/L)
10000
y = 3.2804x 0.9637 r = 0.887 n = 735
1000
100
10
1 0.1 1 10 100 1000 10000 Roche Amplicor HCV Monitor (KIU/mL)
1989
2011
中国人对丙肝抗病毒治疗应答良好
Preliminary Results of China 11th 5-year Plan — high RVR and EVR predict achieving the expected SVR
48 weeks Peg-IFN -2a 180 µg/week plus ribavirin 800 mg/day (N=362)
35
The concentrations of serum HCV core antigen were highly correlated with HCV RNA level in HIV- CHC and HIV+ CHC individuals
急性感染痊愈 急性感染进展为慢性感染
抗-HCV 抗-HCV
症状 ±
症状±
HCV-RNA
HCV-RNA
滴度
滴度
HCV 核心抗原
HCV 核心抗原
ALT
ALT
正常
正常
0
1
2 月
3
4
5
6
1
2 3 年
4
0
1
2
3
4
5
6
1
月
2 3 年
4
暴露后时间
暴露后时间
抗-HCV抗体检测不能够鉴别既往感染 痊愈者和慢性感染者 早期感染
100
Patients (%)
80 60 40 20 0
75
35
33 17 8 Null response
17
RVR
cEVR
eRVR
pEVR
Chen X-Y, Wei L, et al. Data on file
HCV感染预后

75％~80％新感染HCV人群会发展成慢性肝炎， 据估计，经过10－20年的慢性病程后，20％的患 者发展为肝硬化，部分患者发展为肝癌1。
估计HCV感染者: 500万~1000万
Hemodialysis, 59 cases, Dali Contaminated Blood transfusion, 64 cases, Pingtang Unknown Cause High prevalence Putian
12
2009年病毒性肝炎发病情况


HCV genotype and sub-genotype HCV drug resistance
29
Hepatitis C Virus
Envelope Core Ag ssRNA Genome
Virus first identified in 1989, Flaviviridae family Small, lipid-enveloped virus (50nm) Single, positive-stranded RNA virus----naked HCV genome infectious
Reported Epidemic of Hepatitis C in China: 2000-2010
Hemodialysis, 10 cases, Wulate
Reuse of medical experiments， 56 cases, Hailin
Sharing syringe prevalence, Fuyu Hemodialysis， 14 cases, Baiyin
6个基因型
4
丙型肝炎流行病学 Worldwide Prevalence of HCV infection

全球性的健康问题(WHO)
感染人数达2.27亿 慢性感染者约1.7亿



每年的新感染者达3万
在北欧的发病率约为0.5%，

而在埃及则高达20%

估计仍有大量漏报病例（美
国的“隐形杀手”）

HCV的抗病毒治疗效果远远优于HBV，大部分 HCV患者通过抗病毒治疗可获得治愈，其持续病 毒学应答（SVR）率高2。

1.《丙型肝炎防治指南2010》 2.China Medical Tribune 2010 Mar 25,A15
18
晚诊断、晚治疗 = 低治愈率
Sustained virologic response (%)
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
Undiagnosed patients (%)
83%
75%
75%
40%
UK
Germany
New Zealand
US
/treatments-hepatitis-c.asp; Schlosser et al. EASL 2009; Vermehren et al. DGVS 2010; Gane. New Zealand Doctor. 2007; /hep-c-facts--stats.html.
Recent data: Anti-HCV in general population:
0.43%
我国HCV感染流行率 最新数据 0.43% ？感染者
Press Release, Ministry of Health, P.R. China. (2010).
10
HCV感染绝大部分并未被诊断出来
Detection of hepatitis C virus infection
核心抗原检测----丙肝诊断的下一步：
鲁凤民
北京大学感染病中心 北京大学医学部病原生物学系
1
3
Genomic RNA is infectious
HCV基因型及亚型
Quasispecies
HCV感染宿主后，经
一定时期，在感染者 体内形成以一个优势 株为主的相关突变株 病毒群，称为准种
HCV 核心抗原检测

上世纪90年代， HCV 核心抗原检测1,2

20世纪初: 首个 HCV coreAg assay (trak-C, Ortho) 有用的补充诊断工具，和HCV-RNA均有很好的相关性3 2009年： 全自动化学发光HCVcore Ag test(Abbott) 高灵敏度定量检测HCV 总核心抗原3,4
HCV感染者的性伴
HCV 筛查
1992年以前接受过输血 手术、器官移植
HCV暴露史
共用注射器、纹身、 纹眉、口腔治疗、侵 入性诊疗、1992年以 前单采浆
HCV感染者的家庭成 员
Ghany et al. Hepatology 2009;49:1335. EASL Clinical Practice Guidelines: Management of hepatitis C virus infection. J Hepatol, 2011,55:245.
1990*
1992* 1996*
NS5
8
检测ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ式的改进
夹心法 间接法 竞争法
灵敏度较低 灵敏度提高 重现性提高 灵敏度/特异性 更佳 特异性更高 适合定量
重现性不佳
不适合定量
可用于定量
雅培Axysm 罗氏Elecsys
雅培Architect
？
9
HCV Infection Prevalence in China
1Tanaka 2Aoyagi

T et al, J Hepatol 1995;23:742–5. K et al, J Clin Microbiol 1999;37:1802–8. 3Tillmann HL et al, Z Gastroenterol 2005;43:11–6. 4Park Y. et al. J Clin Microbiol 2010
C
E1
E2
p7
NS2
NS3
NS4A
NS4B
NS5A
NS5B
5-1-1
c100
c22
c33
1st generation EIA
2nd generation EIA 3rd generation EIA/CIA
* Years in which the assays were approved by FDA
血清标本(n=735): r=0.887
34
HCV 核心抗原和不同基因型HCV-RNA相关性良好
10 6
10 6
HCV core Ag (fmol/L)
HCV core Ag (fmol/L)
GT all
10 4
r=0.75 (p<0.001, n=118)
GT2
10 4
r=0.77 (p=0.0036, n=12)
HCV 感染的血清学
急性感染痊愈 急性感染进展为慢性感染
抗-HCV 抗-HCV
症状 ±
症状±
HCV-RNA
HCV-RNA
滴度
滴度
HCV 核心抗原
HCV 核心抗原
ALT
ALT
正常
正常
0
1
2 月
3
4
5
6
1
2 3 年
4
0
1
2
3
4
5
6
1
月
2 3 年
4
暴露后时间
暴露后时间
22
23
24
25
26
HCV 感染的血清学
10 2
10 2
10 0 10 0
10 2
10 4
10 6
10 8
10 0 10 0
10 2
10 4
10 6
10 8
HCV-RNA (IU/ml)
HCV-RNA (IU/ml)
10 6
HCV core Ag (fmol/L)
10 4
HCV core Ag (fmol/L)
GT1
r=0.72 (p<0.001, n=54)
中国丙肝流行率?
6
www.who.int
HCV Infection Prevalence in China
standardized rate: Year 1992-1995 3.2% 38.4 million patients in China at least
我国HCV感染流行率 3.2% 3千8百万感染者