九州虫草中金属硫蛋白的诱导、提纯及性质研究

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W ANG We i , XI E Bo 。 U U Fa ng 。 e t a l

( 1 . G u a n g d o n g G a r d i o v a s c u l a r I n s t i t u t e , G u a n g z h o u 5 1 0 0 8 0 , C h i a; n 2 . G u i y a n g Me d i c a l U n i v e r s i t y , G u i y a n g 5 5 0 0 0 4, C h i a; n
a s a me a n s . a n d t o s e l e c t t h e o p t i ma l p r o d u c t i o n e x t r a c t i o n c o n d i t i o n s a s w e l l a s v e i r f y t h e e x t r a c t e d me t a l l o t h i o n e i n n a t u r e b y o r t h o g o n l a
t o i n d u c e he t s y n he t s i s o f me t ll a o t h i o n e i n . T h e me t ll a o t h i o n e i n w a s i s o l a t e d a f t e r c e l l d i s r u p t i o n, c r u d e e x t r a c t i o n a n d c h r o ma t o g r a p h y s t e p s . P r e l i mi n a r y s t u d y wa s ma d e o n t h e o p t i mu m c o n d i t i o n s f o r z i n c s u l f a t e i n d u c i n g c o r d y c e p s s e c r e t i n g me t a l l o t h i o n e i n, a n d d e t e m i r n a - t i o n w a s ma d e o f t h e r e l a t i v e mo l e c u l a r ma s s , s u l f h y d r y l c o n t e n t , a n d he t c o n t e n t o f z i n c me t a l o f t h e r e s u l t i n g me t ll a o hi t o n e i n ft a e r p u r i i f - c a t i o n . Re s u l t s Wi t h z i n c a t o m c o n c e n t r a t i o n o f 1 5 g・L~ me t a l l o t h i o n e i n a c h i e v e s ma x i mu m y i e l d i n t h e f e r me n t a t i o n p r o c e s s , u p t o
并用 Z n S O 刺激诱导其合 成金属硫蛋 白, 后 经细胞破碎 , 粗 提取和层析等步骤 , 得到锌金属硫蛋 白 , 同时初步研究硫酸锌诱 导虫 草金属硫 蛋 白的最佳条件 , 提纯后所得金属硫蛋 白的相对 分子质量 , 巯基 含量及金属锌 的含量 。结 果 较传 统动物肝脏提取方 法, 九州虫草菌株发酵法可快速 高效 的制得金属硫蛋 白 , 发酵过程 中培养基 中锌原 子浓度 达 1 5 g・ L 时金 属硫蛋 白达到最高
关键词 : 生物工程 ; 九州虫草 ; 金 属硫 蛋 白; 生产; 测定
I nd uc t i 0 n. p u r i ic f a t i o n a n d na t u r e o f me t a l l o t h i o ne i n i n Ky u s h u Co r d y c e p s
产率 , 可达 1 O . 8 6 mg・ g 菌丝体 ( 湿重 ) 。该种锌金属硫蛋 白分 子量约 为 7 k D, 每 分子金 属硫蛋 白含有 由 2 1 个 半胱 氨酸和 7 个锌原 子。结论 通过蛋 白柱层析 图谱 , 紫外光扫描 图谱分 析 , 证 明所提取 蛋 白符合金属硫蛋 白的相应特征 。
e x p e i r me n t a l m e ho t d . Me t h o d s S u b me r g e d f e r m e n t a t i o n K y u s h u a s g e n e t i c a l l y e n g i n e e r e d C o r d y c e p s f u n i, g Z n S O 4 s t i mu l a t i o n w a s u s e d
5 1 0 0 8 0 ; 2 . 贵阳 医学院 , 贵州 贵阳
以生 物发酵工程 为手段 , 探寻一种经济 , 高效 , 简 易的金属硫蛋 白生产工艺 , 并用正交试 验法优选 出最适 的生产提 以经过基因工程 改 良的九 州虫草真 菌为菌种 , 采 用液态深 层发酵增殖 菌丝体
取条件及验证 所提取的金属硫蛋 白性 质。方法
3 . T h e S e c o n d Mi l i t a r y Me d c i a l U n i v e r s i t y , S h a n g h a i 2 0 0 4 3 3 , C h i a) n Ab s t r a c t : Ob j e c t i v e T o e x p l o r e a n e c o n o mi c , e f f i c i e n t , e a s y m e t a l l o t h i o n e i n p r o d u c t i o n p r o c e s s , w i t h b i o l o g i c a l f e r m e n t a t i o n e n i g n e e i r n g
王 巍 , 谢 波 , 刘 芳 , 吴观 生 , 刘师 宏 , 庄 建 , 陈寄 梅 , 郭 惠 明 , 朱
2 0 0 4 3 3 )

5 5 0 0 0 4;
( 1 . 广 东省心血 管病研 究所 , 广 东省人 民 医院 , 广 东省 医学科 学院 , 广 东 广州 3 . 上 海第二 军 医大学免疫研 究所, 上海 摘要: 目的
安 徽 医 药
A n h u i Me d i c a l a n d P h a r m a c e u t i c a l J o u r n a l 2 0 1 3 Ma r ; 1 7 ( 3 )
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◇药 学研 究 ◇
九州虫草中金属 硫蛋 白的诱 导 、 提纯及性质研究
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