流动注射化学发光测定铬的含量..

Luminol（鲁米诺）为3－氨基苯二甲酸肼，又名发光氨，在碱 性溶液中，与H2O2作用，氧化过程中产生的化学能量被产物氨基邻 苯二甲酸根离子所吸收，使其处于激发状态。当其价电子从第一电 子激发态的最低振动能级跃回到基态中各个不同振动能级时，便产 生最大发射波长为425nm的光辐射。
NH2 O NH NH O NH2
0.1mol/L的NaOH溶液配成500mL ；
鲁米诺2.55x10-4mol/L :取储备液12.5mL，配成500mL。 3、H2O2标准溶液0.1mol/L：取1mL 30%的H2O2用二次蒸馏水配 成100 mL，用时现配。 4、配1g/L的Cr(NO3)3储备液：称取Cr(NO3)3.9H2O 7.6923g配成
由基态跃迁至激发态，然后再从激发态返回到基态，同时将能
量以光辐射的形式释放出来，产生化学发光，利用反应物的浓
度与化学发光强度成正比，对反应物进行定量分析。对某些极
弱的发光反应，当加入某些痕量金属离子后，往往对化学发光 反应产生催化作用，使反应速度加快，从而发出较强的光，且 发光强度的增加与所加入的痕量金属离子的浓度成正比，这就 拓宽了化学发光的应用范围。
Fe2+ 、Ag+ 、Au3+ 、Mn2+ 等金属离子。
本实验利用Cr3+催化鲁米诺与H2O2的反应，使反应速度加快， 发光增强，且发光强度的增加与所加入的Cr3+浓度成正比，因此在 保持H2O2浓度不变时，可以利用标准曲线法测定Cr3+含量。 鲁米诺主要用于现代刑侦的血液检测。在要调查的区域内喷洒
500mL。
实验步骤
1、在4只50ml容量瓶中，分别加入0.20、0.40、0.60、0.80 mL 铬标准溶液（1g/L），用水稀释到刻度，即0.004、0.008、 0.012、0.016 g/L。另取0.50 mL铬待测溶液，配成50mL。 2、开启仪器并预热（约30min），开电脑，运行流动注射化学发 光系统软件。 3、参数设定：点击界面最上端“样品测量”按钮，这时会弹出 两个选择栏：“建立新参数”和“打开参数文件”这一栏。 可进行新建或打开已有测定参数。 4、管线清洗：将三根进样管插入二次蒸馏水中，点击测量按钮， 让仪器进行自动清洗。清洗完毕后，把管道中残余的二次蒸 馏水放空。
把一定体积的液体试样注射到一个运动着的，无空气间隔的、
由适当液体组成的连续载流中，被注入的试样形成一个带，然
后被载流带到检测器中，连续地记录其光强，并以峰高来进行
定量分析。因此，流动注射分析是在物理和化学非平衡的动态 下进行测定的一种分析方法。
化学发光(简称CL) 的机理是反应体系中某种物质（反应物、 产物、中间体）的分子的外层电子吸收了反应所释放的能量而
流动注射化学发光测定Cr3+含量
实验目的
1、掌握化学发光流动注射测定Cr3+含量的基本原理。 2、了解流动注射化学发光仪的基本构造和原理，并 能简单的操作。
实验原理
流动注射分析（Flow Injection Analysis,FIA）是1974年由丹 麦科学家Ruzicka 和Hansen首次提出，并迅速发展起来的溶 液自动在线处理及测定的现代分析技术。流动注射分析是基于
6、将管线入口放入试剂，选谱测量类型。
7、点击测量按钮开始进行检测，检测与停止时间可根据实际 情况而决定。
8、谱图保存：样品测量完毕后，点击界面最下端处理谱图按 钮。此时出现的是处理谱图界面，然后点击此界面的最上 端保存谱图按钮，当前谱图进行保存。
实验步骤
9.、拟合曲线操作： ①首先点击界面下方曲线拟合按钮，进入曲线拟合界面。 ②进行参数设定。在此界面的最上端点击“样品测量”按钮。参数设定 同单组样品检测的操作一样。 ③点击被激活的“标准样品设定”按钮，弹出样品设定的对话框，然后 根据提示进行所测一系列样品的设定，完毕后确定。 ④设定谱图的横纵坐标和类型。 ⑤对一系列样品进行检测。全部检测完毕后，停止最后测量。 ⑥点击界面右上端的“曲线拟合”按钮，从而找出此样品组的线性关系。 ⑦一样品组的曲线拟合操作基本完成。保存操作同单组样品操作过程。 ⑧重复开始时的清洗操作，对仪器进行清洗，清洗完毕后放空管中残 留的蒸馏水。 ⑨关闭电源。
a、b经过蠕动泵流动注射进入混合器混合，一定量的样品c
经过蠕动泵流动注射与混合好的a、b在进样阀(换向阀)V内混
合，然后进入流通池C，在C里产生化学反应，放出特定波长的 光，样品a可参与化学发光反应，样品a的浓度和发光反应的强
度存在线形关系，测定光的强度，就可分析样品a的含量。
仪器与试剂
1、IFFM-E型流动注射化学发光仪（西安瑞迈电子设备有限 公司） 2、鲁米诺储备液0.005 mol/L ： 称取0.4447g Luminol，用
鲁米诺和激发剂溶液，血中的铁立即催化鲁米诺的发光反应，使
其产生蓝色光芒。该反应需用的催化剂量非常少，因此鲁米诺可 以检测痕量的血迹。发光大约持续30秒钟，可通过长曝光的照片
观察出。
流动注射化学发光法（FIA-CL）是流动注射进 样技术与化学发光定量分析相结合而建立起来的 一种有效痕量的分析技术，具有设备简单、高效 率、低消耗、灵敏度高、线性范围宽、快速、易 于自动化的特点，在痕量超痕量金属元素的分析 测定方面具有重要意义。
+
4OH
-
+ H2O2
COO+ N2 + 2H2O + hv COO
在一定的浓度范围内化学发光的强度与H2O2的浓度成正比，因 此可以利用标准曲线法测定H2O2含量。
鲁米诺与H2O2的反应，可以被一些痕量的过渡金属离子所催化， 使发出的光大大增强，据此可以测定Co2+、Cu2+、Cr3+ 、 Fe3+、
流动注射系统参数的选择
运行步参数
步 号
1 2
运行 时间
10 15
主泵 速度
40 50
副泵 速度
20 20
重复 次数
1 0
阀 位
R L
数据 读取
Y Y
主泵 方向
F F
副泵 方向
F F
跳 转
2 1
测量参数
延迟时间 测量时间
0秒 0秒
高压
600Vபைடு நூலகம்
增益
1
滤波器截止频率
50赫兹
采样速度
5次/秒
实验步骤
5、谱图横纵坐标的设定：在样品测量界面的最上端点击“测 量、暂停、停止”按钮之后的按钮对谱图的横纵坐标进行 设定。“X、Y”轴根据测量所需进行设定，也可设定为“自 动量程” 。设定完毕后，确定。