生物大分子物质的结构与功能

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第 1 页三.同工酶：

催化的化学反应相同，但酶蛋白本身的分子结构、组成有所不同的

一组酶，称为同工酶。

对于同工酶最早发现的是乳酸脱氢酶。乳酸脱氢酶有两种亚基组成的四聚体，这四个亚基可以相同也可以不同，这样可组成五种同工酶,分别为LH1、LH2、LH3、LH4、LH5.它们向正极的电泳速度依次减慢；在各组织中的分布和含量有很大差异，前两种在心肌细胞中的活性最高且第一种的活性比第二种的活性高；第三种在肺中的活性最高；而后两种是在骨骼肌和肝细胞中的活性最高。只有当这些组织细胞有炎症或坏死，细胞的通透性增强，才释放进入血液，使血清中的这种酶的活性升高，且同工酶谱分析相当可靠、灵敏可作为疾病诊断的辅助手段。

四.酶催化作用机制：

P

E

ES

S

E+

−→

←

−→

←

+其中E——酶；S——底物；ES——酶与底物的复合物；P——产物。

小结：酶的概念；酶催化作用的特点；结合酶；酶的活性中心；酶原与酶原激活及其意义；同工酶。

第四影响酶促反应速度的因素

一.底物浓度的影响：

1．当底物浓度很低时，反应速度

随底物浓度的增加而增加，

两者成正比关系。但进一步

增加底物浓度时，反应速度

的增加逐渐减慢，两者不成

正比。当反应速度增大到一定程度后，再增加底物浓度，反应速度将解释同工酶的概念

幻灯片：同工酶的概念、乳酸脱氢酶同工酶的组成

强调LH1在心肌活性最高；LH5在肝细胞中活性最高。

幻灯片：酶催化作用机制

幻灯片：酶与底物结合的诱导契合假说示意图

小结

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（一）碱基：

核苷酸中的碱基均为含氮杂环化合物，它们分别属于嘌呤衍生物和

嘧啶衍生物。核苷酸中的嘌呤碱(purine)主要是鸟嘌呤(guanine,G)和腺

嘌呤(adenine,A)，嘧啶碱(pyrimidine)主要是胞嘧啶(cytosine,C)、尿嘧

啶(uracil,U)和胸腺嘧啶(thymine,T)。

碱基的结构式如下图所示

嘌呤和嘧啶环中含有共轭双键，对260nm左右波长的紫外光有较

强的吸收。碱基的这一特性常被用来对碱基、核苷、核苷酸和核酸进行

定性和定量分析.

（二）戊糖

启发讲授

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核酸中的戊糖有核糖(ribose)和脱氧核糖(deoxyribose)两种，分别存在于核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸中。为了与碱基标号相区别，通常将戊糖的C 原子编号都加上“′”，如C 1′表示糖的第一位碳原子。核糖的结构如下：

OH

H

OH H OH

H

H O HOH 2C

1'

2'

3'

4'5'

D-2-脱氧核糖

H

H

OH H OH

H

H O HOH 2C

1'

2'

3'

4'

5'

D-核糖

（三）核苷

戊糖与嘧啶或嘌呤碱以糖苷键连接就称为核苷，通常是戊糖的C 1′与嘧啶碱的N 1或嘌呤碱的N 9相连接。 （四）核苷酸

核苷磷酸化的产物

（五）核酸分子中核苷酸的连接方式：3',5'—磷酸二酯键

前一个核苷酸的3＇羟基与后一个核苷酸的5＇磷酸基脱水形成的化学键。许多核苷酸借助3＇，5＇磷酸二酯键连接形成了没有分支的线性大分子的多核苷酸链。构成多核苷酸链主链的是戊糖和磷酸。

第二 ： 核酸的分子结构

一． DNA 的一级结构：

１、概念：脱氧多核苷酸链中脱氧核苷酸的排列顺序。 ２、连接键：3',5'-磷酸二酯键

二． DNA 的二级结构——DNA 的双螺旋结构： 它是DNA 二级结构的重要形式，其要点是：

1． DNA 分子是由两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴右螺旋；

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对双链DNA进行加热变性，当温度升高到一定高度时，DNA溶液在260nm处的吸光度突然明显上升至最高值，随后即使温度继续升高，吸光度也不再明显变化。若以温度对DNA溶液的紫外吸光率作图，得到的典型DNA变性曲线呈S型如上图所示。可见DNA变性是在一个很窄的温度范围内发生的。通常将核酸加热变性过程中，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为核酸的解链温度，由于这一现象和结晶的融解相类似，又称融解温度。在Tm时，核酸分子内50%的双螺旋结构被破坏。特定核酸分子的Tm值与其G＋C所占总碱基数的百分比成正相关。

一定条件下(相对较短的核酸分子)，Tm值大小还与核酸分子的长度有关，核酸分子越长，Tm值越大；另外，溶液的离子强度较低时，Tm 值较低，融点范围也较宽，反之亦然，因此DNA制剂不应保存在离子强度过低的溶液中。

(二)DNA的热变性与复性(renaturation)

指经加热变性的DNA在适当条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的一种逆转过程。热变性DNA一般经缓慢冷却后即可复性，此过程称之为退火(annealing)。这一术语也用以描述杂交核酸分子的形成(见后)。DNA的复性不仅受温度影响，还受DNA自身特性等其它因素的影响：幻灯片：DNA的解链温度