骨髓细胞学检测方法与要求诊断学第二章

血细胞的成熟规律
骨髓增生程度分级
骨髓增生程度：指有核细胞:成熟红细胞 1：1 增生极度活跃 1：10 增生明显活跃 1：20 增生活跃 1：50 增生低下 1：200 增生极度低下
骨
髓
增
生
程
度
极 度活跃
明显 活 跃
活跃
低下
极 度 低下
原始 红细胞
中幼 红细胞
早幼 红细胞
晚幼 红细胞
幼红细胞系统
骨髓细胞学检测方法和要求
主要内容
血细胞生成 细胞形态学 细胞化学染色 细胞免疫学 遗传学
造血干细胞——能够长期重建造血和免疫 功能的细胞。具有二大特点：自我更新；多向 分化。呈不对称分裂。
造血微环境——造血干细胞赖以生存的内
血
环境。包括：基质细胞和细胞外基质。
细
胞
起
源
胚 胎 期 造 血
出 生 后 造 血
常见的化学染色包括： 过氧化物酶（POX) 碱性磷酸酶(NAP) 酸性磷酸酶(ACP） 糖原(PAS） 铁染色
细胞发育过程中的过氧化酶
中性粒细胞硷性磷酸酶反应
酸性磷酸酶染色
糖原染色
骨髓含铁血黄素染色
急性白血病细胞化学染色特点
急淋
急粒
急单
过氧化物酶 （— ） （+）~（+++） （— ）或（+）
T:cCD3、TCR 、 CD2 、 CD5、CD7、CD4、 CD8、CD10 、 CD1a 、 TdT。
Stem Cell: CD34+、CD38- 、Lin -
遗传学
(Cytogenetics)
荧 光 原 位 杂 交
常见细胞遗传学异常
染色体改变
基因改变
t(8;21)(q22;q22) AML1-ETO
原始粒 细胞
早幼粒 细胞
中幼粒 细胞
粒细胞系统
晚幼粒 细胞
杆状粒 细胞
分叶粒 细胞
嗜酸粒细胞
嗜碱粒细胞
淋巴细胞
单核细胞
巨核细胞的形态特点
组织细胞、巨噬细胞、海蓝组织细胞、 内皮细胞、骨髓小粒
破骨、成骨、网状、脂肪细胞
各种组织细胞
各种浆细胞
骨髓细胞学检查的内容和方法
低倍镜： 选择镜检部位； 判定增生程度； 计数巨核细胞； 观察特殊细胞 。
骨髓采集
1、骨髓穿刺部位：髂后上棘、髂前上棘、胸骨、 棘突。
2、吸取骨髓液：一般0.2ml，过多易被血稀释。 3、骨髓穿刺成功的标志：抽吸骨髓液时患者感 觉锐痛；有黄色骨髓小粒；涂片中有骨髓细胞成分。 4、骨髓涂片和染色：制备厚薄、长短适宜的涂 片数张，同时作外周血涂片2-3张，瑞-姬染色后备 检。
恶性组织细胞增生症 霍奇金淋巴瘤
病 理 血 细 胞 形 态
毛细胞白血病 多发性骨髓瘤
病 理 血 细 胞 形 态
骨髓转移癌 骨髓坏死
病 理 血 细 胞 形 态
利什曼原虫
病 理 血 细 胞 形 态
血细胞化学染色
血细胞化学染色 是在保存细胞结构完整的情况下， 根据化学反应的原理进行染色，研究其中的化学成分的 分布与变化，了解各种细胞的化学组成及病理生理改变， 主要用作血细胞类型的鉴别。
骨髓穿刺术
正常骨髓象
贫血骨髓象
正 常 细 胞 形 态
观察内容：
1.大小、形态。
3.核：位置、大小、形态、染色质。
2.胞浆：量、着色、包含物。 4.核仁：大小、多少、清晰度。
正 常 细 胞 形 态
观察内容：
1.大小、形态。
3.核：位置、大小、形态、染色质。
2.胞浆：量、着色、包含物。 4.核仁：大小、多少、清晰度。
扫描电镜
透射电镜
急性粒细胞白血病
病 理 血 细 胞 形 态
急性早幼粒细胞白血病 单核细胞白血病
病 理 血 细 胞 形 态
巨核细胞白血病 红白血病
病 理 血 细 胞 形 态
急性淋巴细胞白血病(L1-L3)
嗜酸粒细胞白血病 嗜碱粒细胞白血病
病 理 血 细 胞 形 态
慢性粒细胞白血病
病 理 血 细 胞 形 态
油镜：计数500个有核细 胞，然后计算各系不 同阶段比例。
诊断: 结合临床资料， 提出诊断或提供参考
意见。
骨髓细胞学检查临床应用
血象有异常：RBC、WBC、PTS、异常细胞 肝脾淋巴结舯大：髓外造血、浸润、脂质
沉积病 查明发热原因：如黑热病等 消瘦、恶液质：有无骨髓转移
血 细 胞 超 微 结 构
t(15;17)(q22;q21) PML-RARα
t(11;17)(q23;q21) PLZF-RARα
inv(16)(p13;q22) CБайду номын сангаасFβ-MYH11
t(16;16)(p13;q22) CBFβ-MYH11
t(11q23)
MLL
t(8;14)(q24;q32)
MYC-IgH
t(9;22)(p34;q11)
MICROSCOPY (immunochemistry)
Cell
FLOW CYTOMETRY
免疫学表型
AML: cMPO 、 CD117 、 CD13 、 CD33、 CD65 、 CD14、CD15、CD64 、 HLA-DR、血型糖蛋白、CD41、CD61。
ALL:B:CD79a 、 cCD22、 cIgM 、 CD19、 CD20 、 CD10 、 CD24。
BCR-ABL
白血病类型
M2 M3 M4 M4Eo M4Eo M4/M5 L3 CML
例一: t(15;17) /PML-RAR
例二:t(8;21)(q22;q22); AML1/ETO
糖原
（ +） 成 块 或 颗粒状
（—）或弥 漫性红色
（ +） 弥 漫 淡 红 色或颗粒状
非特异性 酯酶
（—）
（—）
（+）能被 NaF
抑制
碱性磷酸酶
增加 减少或（—） 正常或增加
免疫学检查
cluster of differentiation system： 系列特异性和阶段特异性。
Antibodies