引进的俄罗斯高效大豆根瘤菌培养基的选择与优化
大豆根瘤菌剂应用技术培训
大豆根瘤菌剂土壤喷雾接种装置
根瘤菌剂容器
喷雾装置
根瘤菌产品使用方法之三 —— 种子包衣
种子包衣是将根瘤菌菌剂和粘着剂拌合后包在种子外面，然 后外面再拌上种子包衣材料，制成包衣种子。
常用的粘着剂有10%糖溶液、阿拉伯胶或40%羧甲基纤维素 溶液等。
阿根廷生产大豆根瘤菌
试验采用小区试验，三次重复，随机排 列，共设九个处理，每处理4垄，垄距 0.65米，垄长10米，第小区面积26平方 米,试验地总面积702平方米。
表2 长势调查表
单位：个、 克
项目 处理
大豆始花期单 株根瘤数 （15 株平均） 主根 侧根
大豆鼓粒期单 株根瘤数 （15 株平均） 主根 侧根
谢谢
谢 谢！
理由是：大豆根瘤菌种类很多，不同的大豆根瘤菌在同一大 豆品种上结瘤的数量、根瘤的质量、固氮能力差异相当大， 参见下图。
根瘤菌菌株形成的大豆根瘤
无效瘤
高效瘤
在上、下（根瘤剖面图） 二组照片中，左边为不 匹配的根瘤菌形成的无 效瘤；右边则是与大豆 匹配的根瘤菌形成的高 效根瘤。
(二) 大豆根瘤菌剂的使用
8
5.1
20.2 18.1 50.3 0.47 0.73 2.44 3.02
9
5.4
22.5 20.6 52.8 0.51 0.91 3.40 3.56
接种根瘤菌对根系和土壤剖面的效果：增加根瘤 数量，促进作物根系生长，提高大豆产量。
对照(未接种)
接种根瘤菌
经过一年的试验看出，大豆应用根瘤 菌可以促进大豆生长发育、表现为根瘤 数量、重量增加，植株长势健壮，单株 粒数增多，具有提高大豆抗逆性及显著 的增产增收作用。尤其是今年，在7-8月 份持续高温多雨季节，施用氮肥多的处 理表现出徒长、结荚部位增高等现象， 且有一定程度的菌核病发生，而应用根 瘤菌拌种的处理，植株生长健壮，结荚 部位降低，菌核病发病率也明显降低。
大豆根瘤菌HH103菌株培养基的筛选与优化
大豆根瘤菌HH103菌株培养基的筛选与优化肖亦农;徐琼【摘要】Quick-growing soy bean rhizobium (Rhizobium fredii) HH103 was used as a tested strain, and adopted single factor nitrogen source utilization experiment and orthogonal design experiment to confirm the optimum medium and its formula. The results showed that the strain grew well on YMA, the optimum carbon source was sucrose, and the optimum nitrogen was yeast extract with the optimum medium formula as follows (in g/L) : sucrose 11, yeast extract 0.9, K2HPO40.5, MnSO4 0.005, CaCl2 0.1, KH2PO40.5, MgSO40.2, KNO30.77, (NH4)2HPO4 0. 33, FeCl3 0.005, andpH7.2.%以快生型大豆根瘤菌HH103菌株为供试菌株,采用单因素碳氮源利用试验和正交设计试验,确定最佳培养基及其配方.结果表明:该菌株在YMA中生长良好,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母膏,最佳培养基成分配方(g/L):蔗糖11,酵母膏0.9,K2HPO4 0.5,MnSO40.005,CaCl2 0.1,KH2PO4 0.5,MgSO40.2,KNO30.77,(NH4)2HPO4 0.33,FeCl3 0.005,pH 7.2.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2011(031)006【总页数】4页(P92-95)【关键词】大豆根瘤菌;培养基筛选;培养基优化;正交试验【作者】肖亦农;徐琼【作者单位】沈阳农业大学土地与环境学院,辽宁沈阳110866;沈阳农业大学土地与环境学院,辽宁沈阳110866【正文语种】中文【中图分类】S182空气中约78%的氮气不能被植物直接利用，只有固氮微生物具有将氮气转化成氨的能力，人们称为生物固氮。
俄罗斯高效大豆根瘤菌肥对大豆主要性状及产量的影响
俄罗斯高效大豆根瘤菌肥对大豆主要性状及产量的影响作者：赵念力谷维张俐俐夏善勇赵曦吴立成来源：《江苏农业科学》2014年第01期摘要：利用从俄罗斯引进的大豆高效根瘤菌配制的菌肥GF1、GF2进行田间试验，研究其在大豆上的增产效果。
结果表明，施用根瘤菌肥后，单株鲜重、根瘤数、株根瘤鲜重都有增加的趋势，在生育后期百粒重增加，增产幅度均达13%以上，其中以根瘤菌肥GF2处理应用效果最好。
关键词：大豆；根瘤菌肥；产量中图分类号： S565.101文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）01-0072-02收稿日期：2013-05-15基金项目：黑龙江省留学归国科学基金（编号：LC2009C06）。
作者简介：赵念力（1963—），男，黑龙江哈尔滨人，博士，研究员，主要研究方向为大豆栽培生理。
E-mail：zhaonl513@。
通信作者：谷维。
E-mail：guwei_link@。
大豆根瘤菌与大豆共生形成根瘤，能将空气中的氮固定转化成为大豆可直接吸收利用的铵。
大豆与根瘤菌的共生固氮作用，既能直接改善大豆的氮素营养状况，提高大豆的产量和品质（尤其明显提高蛋白含量），又能将更多的固定氮素释放到土壤中，从而起到培肥地力的作用。
据文献报道，根瘤菌与豆科植物的共生固氮作用，是目前研究证明的效率最高的一种生物固氮体系，可以固定空气中分子态氮形成氮肥45～75 kg/hm2，能使大豆增产15%左右[1-2]。
俄罗斯对根瘤菌的研究已有近百年的历史，具有理论基础并积累了丰富的实践经验[3-4]。
2009年黑龙江省农业科学院从全俄大豆科学研究所引进十几株高效大豆固氮根瘤菌，结合黑龙江省生态环境特点和大豆主栽品种进行综合研究、开发和应用，筛选出2株高效大豆根瘤菌，并研制出大豆高效根瘤菌肥GF1和GF2。
本研究就这2个大豆根瘤菌肥对黑农44大豆品种的增产作用进行分析。
1材料与方法1.1供试菌肥利用俄罗斯高效大豆根瘤菌研制的菌肥GF1与GF2，由黑龙江省农业科学院研制。
俄罗斯根瘤菌对大豆黑河17号的增产效果
俄罗斯根瘤菌对大豆黑河17号的增产效果张 雷(黑龙江省农科院黑河农科所 164300)摘 要 利用从俄罗斯引进根瘤菌2号及18号,进行了田间试验研究,研究其在大豆上的增产效果,结果表明,施用根瘤菌肥后,单株鲜重、根瘤数、根瘤鲜重及其干重都有增加的趋势;在生育后期使百粒重增加,增产幅度均达10%以上,以根瘤菌18号应用效果最好。
关键词 大豆 根瘤菌 产量俄罗斯全俄大豆研究所大豆根瘤菌研究室提供的根瘤菌在俄罗斯已广泛应用,用以提高大豆自身的固氮能力,减少化学氮肥的使用量,提高大豆产量,改善产品品质。
大豆是黑河地区主栽作物之一,而根瘤菌在生产上应用极少。
为此,于2001—20022号及18号,研究其在大豆上的增产效果,进行了田间试验研究。
1 材料与方法111 试验材料根瘤菌2号,根瘤菌18号(俄罗斯提供)。
试验用品种为黑河17号。
112 试验地点试验于2001—2002年在黑河农科所试验地进行。
供试土壤为粘质中层草甸暗棕壤,0～20cm土壤有机质含量3176%、全氮为01185%、全磷为01148%、水解氮为6418mg/kg、速效磷为2410mg/kg、速效钾为128mg/kg,肥力中等。
113 试验设计与方法试验处理:根瘤菌2号,根瘤菌18号,对照(不拌根瘤菌)。
根瘤菌肥的使用剂量为3g/m2(即公顷施菌肥30kg)。
采用小区试验,随机区组,3次重复,5m垅长,4行区, 6617cm垅距。
114 根瘤菌培养模式培养基:蔗糖10g,甘露醇2g,K3PO4011g,KH2PO40137 g,MgSO4・7H2O0118g,NaCl0106g,(NH4)2HPO4011g,Ca2 SO4・2H2O0104g,CaCO30125g,酵母1g,加入1000ml水,搅拌至完全溶解,分装入8个250ml三角瓶中,加棉塞。
把上述8瓶培养基在高温高压灭菌锅中灭菌后,取出,凉至常温后,在接菌室内接菌,写上标记,在28～30℃的培养箱内培养5d。
大豆根瘤菌示范推广项目实施方案
一、项目背景大豆根瘤菌是一种对大豆生长有益的微生物，能够与大豆根系共生，固氮、供应植物所需的氮源，提高大豆的产量和品质。
然而，由于大豆根瘤菌的种类繁多，且对环境条件要求较高，导致其在实际生产中应用较少。
为了推广大豆根瘤菌的应用，提高大豆产量和质量，制定了大豆根瘤菌示范推广项目实施方案。
二、项目目标1. 推广大豆根瘤菌的应用，提高大豆产量和质量。
2. 培育适应不同环境条件的大豆根瘤菌品种。
3. 建立大豆根瘤菌示范推广模式，为农民提供技术指导和支持。
三、项目内容1. 大豆根瘤菌品种筛选：根据不同地区的土壤条件和大豆品种特点，筛选适应性强、固氮效果好的大豆根瘤菌品种。
2. 大豆根瘤菌培养技术研究：研究大豆根瘤菌的培养方法和培养基配方，提高大豆根瘤菌的培养效率和质量。
3. 大豆根瘤菌示范推广：选择几个典型的大豆种植区域，开展大豆根瘤菌的示范推广工作，包括培训农民、提供种苗和技术指导等。
4. 大豆根瘤菌应用效果评估：对示范推广区域的大豆产量和品质进行评估，分析大豆根瘤菌的应用效果。
四、项目实施步骤1. 确定示范推广区域和参与农户：选择几个适宜种植大豆的地区作为示范推广区域，并与当地农民合作，确定参与项目的农户。
2. 大豆根瘤菌品种筛选：根据示范推广区域的土壤条件和大豆品种特点，筛选适应性强、固氮效果好的大豆根瘤菌品种。
3. 大豆根瘤菌培养技术研究：研究大豆根瘤菌的培养方法和培养基配方，提高大豆根瘤菌的培养效率和质量。
4. 大豆根瘤菌示范推广：在示范推广区域开展大豆根瘤菌的示范推广工作，包括培训农民、提供种苗和技术指导等。
5. 大豆根瘤菌应用效果评估：对示范推广区域的大豆产量和品质进行评估，分析大豆根瘤菌的应用效果。
6. 项目总结和推广经验总结：总结项目的实施情况和效果，提炼出推广经验，为今后的大豆根瘤菌推广工作提供参考。
五、项目预期成果1. 推广大豆根瘤菌的应用，提高大豆产量和质量。
2. 培育适应不同环境条件的大豆根瘤菌品种。
大豆根瘤菌应用技术
大豆根瘤菌应用技术
大豆生产中使用根瘤菌是一项成熟的、广泛使用的技术，能够大幅度地提高大豆生长期中的自身固氮能力，供给充足的氮素，供大豆生产所需。
大豆根瘤菌有液体、固体两种剂型。
固体型根瘤菌采用拌种或土施方式应用。
液体型根瘤菌采用浸种方式使用。
也可以在种子包衣时加入大豆根瘤菌剂，但是要注意包衣剂和根瘤菌剂之间应相互匹配，不能因种衣剂药效抑制根瘤菌的活性。
一、增产增效情况
根据大田示范结果，大豆应用根瘤菌，可以使大豆产量提高10%以上，同时大豆的蛋白质含量提高2%、粗脂肪含量提高1～2%，每亩净收入增加40～50元。
二、技术要点
1、选择合适的大豆根瘤菌品种采集大豆生产区的主要土壤类型，进行土壤、根瘤菌匹配试验，筛选活性强、效果好、适应当地土壤和气候的大豆根瘤菌品种。
2、采用适宜的施用方法根据大豆根瘤菌的剂型，固体菌剂采用拌种或造粒后随大豆种子、肥料穴施；液体菌剂采用
浸种方式使用。
也可以在种子包衣时加入大豆根瘤菌菌剂，但是要注意包衣剂和根瘤菌剂之间应相互匹配，不能因种衣剂药效抑制根瘤菌的活性。
3、合理用量菌剂拌种时每亩用量0.5千克，菌剂造粒
后随大豆种子、肥料穴施时每亩用量1～2千克；液体菌剂浸种时用量0.5千克；种子包衣时用量根据包衣剂要求的用量。
大豆根瘤菌是一种活的微生物制剂，在储藏、运输、使用过程中，要避免温度过高或者过低；同时不能与杀菌剂类农药混用。
三、适宜区域和范围
在我国的黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古以及黄淮海的大豆主产区，均可广泛使用大豆根瘤菌。
2002～2004年，在辽宁、吉林、黑龙江和内蒙古的大豆生产区示范推广800万亩，取得很好效果，应用前景广阔。
工艺方法——大豆根瘤菌接种及配套施肥技术
工艺方法——大豆根瘤菌接种及配套施肥技术工艺简介大豆根瘤菌是能与豆科植物共生形成根瘤，并进行生物固氮的一类革兰氏阴性杆菌。
通过接种大豆根瘤菌及科学合理施肥，能够增强根瘤菌共生固氮能力，提高产量、改善品质、培肥地力。
一、大豆根瘤菌剂要求选用取得农业农村部肥料登记的大豆根瘤菌剂产品，产品质量符合《农用微生物菌剂（GB20287-2006）》要求，已按《根瘤菌生产菌株质量评价技术规范（NY/T1735-2009）》完成质量评价，在保质期内、包装完好。
二、接种方式（一）拌种适用于现拌现用的小规模种植农户。
1、拌种剂量及时间根据播种量，按大豆根瘤菌剂产品说明书确定用量。
应在大豆播种前12小时内进行根瘤菌拌种作业。
2、拌种器械根据用种量和当地生产条件，使用干净的盆、桶、袋子等容器或拌种机械进行拌种。
拌种容器或机械进行过农药种衣剂作业的，应用水清洗3次以上。
3、拌种作业拌种地点应在阴凉处，避免阳光直射。
将适量根瘤菌剂与大豆种子混合，轻轻搅拌至所有种子表面都附着根瘤菌剂，种子阴干后播种。
拌种时应避免碰破种皮。
（二）喷施适用于使用带喷施设备播种机具的种植农户。
1、菌液配制根据喷施面积和大豆根瘤菌剂产品说明书确定根瘤菌剂和水的用量。
使用自来水配制菌液时，提前将自来水接入容器静置1-2天。
将根瘤菌剂加入水中，搅拌均匀后即可使用。
喷施菌液应现用现配。
2、喷施设备用喷施设备在大豆播种时将根瘤菌液喷洒在大豆种子表面及周围土壤。
使用过抑菌或灭活作用药剂的喷施设备，应用清水将容器、管路和喷头清洗3次以上。
3、喷施作业喷施作业前应检查喷施设备的压力部件、控制部件、喷头和接口，保证喷施设备正常运行。
喷施时，作业人员应注意观察喷头是否堵塞、各接口是否有滴漏现象，发现问题及时排除。
（三）种子包衣适用于种子企业对大豆种子包衣操作。
1、包衣剂要求包衣剂所用材料应对根瘤菌、大豆植株、人畜和环境无毒无害，并能保证包衣1个月后每粒大豆种子根瘤菌存活数量在1×104以上。
高效大豆根瘤菌的筛选
高效大豆根瘤菌的筛选作者：张欣，李玉文转贴自：本站原创(1．东北林业大学林学院；2．黑龙江省科学院生物肥料研究中心，黑龙江哈尔滨150086)摘要：将选取的10株大豆根瘤菌菌株(HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN10 05，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010)与在黑龙江省大面积栽培的5 个大豆品种（垦农18号，垦鉴豆25号，合丰25号，疆丰21-1381号，绥农4号）进行最佳共生匹配双瓶筛选试验，测定了大豆植株株高、叶片颜色、结瘤数、瘤干重和植株地上部分干重等生物学指标并进行统计分析，从中筛选出共生固氮结瘤能力强的优良菌株HLJN1001和HLJN 1003。
关键词：大豆根瘤菌；大豆品种；共生匹配；筛选中图分类号：S565.1 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2011)10—0125—03根瘤菌(Rhizobium)是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌，它可以侵染豆科植物根部，形成根瘤，固定空气中的分子态氮形成氨，为植物提供氮素营养。
但根瘤菌与豆科植物独立存在时，不能利用大气中的N2，而当根瘤菌侵入豆科植物的根细胞并在其中迅速增殖后，可产生类菌体，并在根瘤内出现豆血红蛋白，同时具备类菌体和豆血红蛋白的根瘤便具有固氮能力。
研究表明，不同的根瘤菌与大豆品种间的共生固氮能力存在着较大的差异［1,2］ 。
因此，筛选与豆科作物品种匹配、固氮能力好、竞争结瘤能力强的优良菌株，是提高根瘤菌应用效果的重要途径［3］。
现选取10株大豆根瘤菌菌株，与5个在黑龙江省大面积栽培的大豆品种进行共生匹配性研究，从中筛选出优良菌株，为大豆育种材料的选择和共生固氮作用的发挥提供依据。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN1005，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010，共10株，由黑龙江省科学院生物肥料研究中心提供。
大豆根瘤菌生产工艺流程
大豆根瘤菌生产工艺流程
大豆根瘤菌是一种对大豆植株有益的固氮菌，其生产工艺流程
通常包括以下几个主要步骤：
1. 菌种培养，首先需要选择高效的大豆根瘤菌菌种，然后在适
当的培养基上进行培养，以获得大量的活菌种。
2. 发酵生产，将培养好的菌种接种到发酵罐中，加入适量的培
养基和其他营养物质，控制好发酵温度、pH值和通气量等参数，进
行发酵培养，以获得高活性的大豆根瘤菌发酵液。
3. 分离提取，将发酵液进行分离提取，通常采用离心、过滤等
方法，获得纯净的大豆根瘤菌菌体或发酵液。
4. 菌剂制备，将提取得到的大豆根瘤菌菌体或发酵液进行浓缩、干燥等处理，制成大豆根瘤菌菌剂，以便于储存和运输。
5. 质量控制，在整个生产过程中，需要对菌种培养、发酵生产、分离提取和菌剂制备等环节进行严格的质量控制，确保产品的质量
稳定。
除了以上主要步骤外，大豆根瘤菌生产工艺流程还涉及原料准备、设备清洁消毒、生产环境控制等多个方面。
同时，针对不同菌株和不同产品形式（如固体菌剂、液体菌剂等），生产工艺流程也会有所差异。
总的来说，大豆根瘤菌生产工艺流程需要严格控制各个环节，确保产品质量，并且需要根据实际情况灵活调整，以达到高效、稳定、可控的生产目标。
高效大豆根瘤菌筛选的初步研究
高效大豆根瘤菌筛选的初步研究吴萍;何庆元;李正鹏;史钧;祝嫦巍【摘要】采用CR-YMA培养基对新鲜的大豆根瘤提取物进行根瘤菌的分离、纯化培养,获菌落为圆形乳白色,表面凸起,直径0.4 ～0.5cm,革兰反应阴性,显微观察显示为短杆状的根瘤菌26株,并对26个菌株进行蛭石盆栽试验,接种效果显示:接种根瘤菌的大豆植株都有结瘤；与对照相比在结瘤数、鲜瘤重、瘤干重及植株地上部分干重分别增加了14.6％～ 1330.4％,6.3％～461.9％,28.6％～492.9％,10.2％～86.3％,植株全氮量在9.188％和12.563％之间.初步筛选出与大豆品种“南农1138-2”最佳共生匹配的根瘤菌菌株分别是:AF1、AF9、AH10.【期刊名称】《安徽科技学院学报》【年(卷),期】2013(027)003【总页数】4页(P29-32)【关键词】根瘤菌;大豆;共生固氮;筛选【作者】吴萍;何庆元;李正鹏;史钧;祝嫦巍【作者单位】安徽科技学院应用微生物研究所,安徽凤阳 233100;安徽科技学院应用微生物研究所,安徽凤阳 233100;安徽科技学院应用微生物研究所,安徽凤阳233100;安徽科技学院应用微生物研究所,安徽凤阳 233100;安徽科技学院应用微生物研究所,安徽凤阳 233100【正文语种】中文【中图分类】S182根瘤菌(Rhizobium)是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌，它能侵染豆科植物根部后形成根瘤，固定空气中的分子态氮形成氨，为植物提供氮素营养。
因此，研究和利用根瘤菌与豆科植物的共生固氮体系，在减少化学氮肥施用、保护生态环境、促进农业可持续发展等方面均有重要意义［1－3］。
大豆与大豆根瘤菌的共生体系是其中的典型代表，我国又是大豆和大豆根瘤菌的起源地之一，对该共生体系开展根瘤菌与大豆品种的匹配性组合研究，具有重要的实践价值。
研究表明，不同的根瘤菌与大豆品种间的共生固氮能力存在着较大的差异［4－8］。
高效大豆根瘤菌的筛选
高效大豆根瘤菌的筛选作者：张欣，李玉文转贴自：本站原创(1．东北林业大学林学院；2．黑龙江省科学院生物肥料研究中心，黑龙江哈尔滨150086)摘要：将选取的10株大豆根瘤菌菌株(HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN10 05，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010)与在黑龙江省大面积栽培的5 个大豆品种（垦农18号，垦鉴豆25号，合丰25号，疆丰21-1381号，绥农4号）进行最佳共生匹配双瓶筛选试验，测定了大豆植株株高、叶片颜色、结瘤数、瘤干重和植株地上部分干重等生物学指标并进行统计分析，从中筛选出共生固氮结瘤能力强的优良菌株HLJN1001和HLJN 1003。
关键词：大豆根瘤菌；大豆品种；共生匹配；筛选中图分类号：S565.1 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2011)10—0125—03根瘤菌(Rhizobium)是一类广泛分布于土壤中的革兰氏阴性细菌，它可以侵染豆科植物根部，形成根瘤，固定空气中的分子态氮形成氨，为植物提供氮素营养。
但根瘤菌与豆科植物独立存在时，不能利用大气中的N2，而当根瘤菌侵入豆科植物的根细胞并在其中迅速增殖后，可产生类菌体，并在根瘤内出现豆血红蛋白，同时具备类菌体和豆血红蛋白的根瘤便具有固氮能力。
研究表明，不同的根瘤菌与大豆品种间的共生固氮能力存在着较大的差异［1,2］ 。
因此，筛选与豆科作物品种匹配、固氮能力好、竞争结瘤能力强的优良菌株，是提高根瘤菌应用效果的重要途径［3］。
现选取10株大豆根瘤菌菌株，与5个在黑龙江省大面积栽培的大豆品种进行共生匹配性研究，从中筛选出优良菌株，为大豆育种材料的选择和共生固氮作用的发挥提供依据。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌株HLJN1001，HLJN1002，HLJN1003，HLJN1004，HLJN1005，HLJN1006，HLJN1007，HLJN1008，HLJN1009，HLJN10010，共10株，由黑龙江省科学院生物肥料研究中心提供。
俄罗斯大豆根瘤菌与不同大豆品种的生态适应性
俄罗斯大豆根瘤菌与不同大豆品种的生态适应性张武(黑龙江省农业科学院黑河分院,164300,黑龙江黑河)摘 要 接种俄罗斯全俄大豆所提供的两株根瘤菌H和K,通过筛选表明,不同大豆品种对根瘤菌的适应性不同,其中黑河38号、黑河48号对两种根瘤菌的适应性较好,合丰42号对H菌的适应性优于K菌,蒙豆9号对K菌的适应性优于H菌。
关键词 根瘤菌;大豆;适应性植物在生长过程中,通过离子交换在土壤中取得营养元素,同时根的不同部位也向根际周围分泌无机离子及有机化合物。
这些物质在植物与植物、植物与微生物之间起到了 语言 作用,这些 语言 把植物与植物、植物与微生物有机的联系起来。
如豆科植物在缺氮条件下根系会分泌黄酮类和异黄酮类物质,启动根瘤菌结瘤基因的表达导致根瘤菌侵染根系并形成根瘤[1]。
此黄酮类物质就是豆科植物根系与微生物间对话的"语言"。
由于不同豆科植物分泌的黄酮类物质种类不同,使得不同种类的根瘤菌能够识别不同的寄主植物[2]。
决定豆科植物根瘤菌的竞争结瘤能力受到土壤环境,宿主植物和根瘤菌本身3方面因素影响。
江木兰等[3]研究表明,豆科植物与根瘤结瘤固氮的遗传性状受共生体双方控制,而且,生态条件、土壤类型及起源、豆科作物品种类型及种植历史都影响共生作用。
国内外研究还表明,虽然大豆栽培品种是优良的固氮者,但是不同的大豆类型、大豆品种间也存在着显著差异,这种根瘤菌对宿主的专一性不仅体现在种的水平上,并且与品种的差异有关。
因此,通过对宿主植物的基因型选育,希望通过有选择地提高固氮优良菌株与宿主实物之间的亲和力来提高根瘤菌的竞争力,并能抑制竞争能力相当强的土著根瘤菌[4]。
本试验的目的是结合黑龙江省黑河地区生态环境,筛选出适合该地区主栽大豆品种的根瘤菌 大豆共生组合,为引进根瘤菌剂的广泛使用提供依据。
1 材料与方法1 1 材料供试品种:黑河38号、黑河48号、合丰42号和作者简介:张武,研究实习员,研究方向为植物保护土壤修复基金项目:全国大豆体系黑河试验站项目资助收稿日期:2010-02-26;修回日期:2010-03-09蒙豆9号(黑龙江省农科院黑河分院大豆室提供)。
大豆根瘤菌的筛选及分离鉴定
大豆根瘤菌的筛选及分子鉴定韩孝强（天津农学院农学系）1 前言根瘤菌是可以与豆科植物共生形成根瘤，将空气中的氮还原成氨，提供植物营养并能促使植物异常增生的一类革兰氏阴性菌。
如根瘤菌属和慢性根瘤菌属都能从豆科植物根毛侵入根内形成根瘤，并在根瘤内成为分枝的多态细胞，称为类菌体[1]。
常制成细菌制剂即一种生物肥料在田间施用，作为作物或牧草增产的一种手段。
美国、澳大利亚、新西兰、日本、意大利、奥地利、加拿大、法国、荷兰、芬兰、泰国、韩国、印度及非洲的一些国家，至少有70多个国家研究、生产和应用豆科根瘤菌，不仅面积不断扩大，而且应用的豆科植物种类也日益繁多。
在美国、巴西等大豆种植的主要国家，根瘤菌接种率达到95%以上[2]。
世界各国一直在研究与豆科作物及其品种相匹配的优良根瘤菌生产用菌株，根瘤菌剂产品在稳步提高[3]。
我国微生物肥料的研究始于20世纪40年代，其研究与应用已有几十年的历史，在我国的农业生产中起了非常重要的作用。
最早研究应用的是根瘤菌制剂，代表和奠基人有张宪武先生、陈华癸院士和樊庆笙先生等[4]。
众所周知，大豆是富含蛋白质的一种作物，构成蛋白质的主要元素就是氮，而空气有80%都是由氮气组成的，根瘤菌正是利用了这种最廉价的原料来满足了大豆生长过程中氮元素的需要[5]。
而且根瘤菌产生的氨态氮没有环境污染，吸收率相当高，使用过程中没有氮流失，而人工施用化学氮肥流失率往往大于50%，且氮肥为产酸肥料，施用后会造成土壤酸化问题[6]。
因此使用了根瘤菌后可以不施或大量减少化学氮肥的用量，在显著提高亩产量的同时还能减少因使用化肥对土壤结构造成的破坏和对水源的污染，节省能源、改良土壤、实现可持续发展的目标[7]。
传统的微生物系统分类是根据菌落的形态特征和生理生化特性，对菌种进行纯培养分离，然后从形态学、生理生化反应特征以及免疫学特性加以鉴定[8]。
但近几十年来，随着分子遗传学和分子生物学技术的迅速发展，给传统微生物分类鉴定带来了巨大的革新，许多新技术和方法在微生物分类中己得到广泛应用，使微生物分类鉴定从一般表型特征的鉴定，深化到遗传特性的鉴定[9]。
俄罗斯根瘤菌对大豆黑河17号的增产效果
瘤 茵肥 后 ， 单株 鲜 重 、 瘤数 、 瘤 鲜 重 及 其 干 重 都 有 增 加 的 根 根
趋 势 ； 生 育后 期使 百 粒 重 增 加 ， 产 幅度 均 达 １ ％以 上 ， 在 增 ０ 以
根瘤 茵 １ ８号应 用效 果 最 好 。 关键 词 大 豆 根 瘤 茵 产 量
养 好 的 根 瘤 菌 ， 合 均 匀 后 ， 最 后 体 积 为 ３ ０ ｌｈ 混 至 ０ ｍ／ｍ 。 将 已 配 好 的 菌 液 洒 在 沸 石 上 ， 速 摇 动 ， 菌 液 均 匀 吸 迅 使 附 在 沸 石 中 ， 干后 待 用 。 阴
１ ６ 栽培 管 理 ． 秋 施底 肥 磷 酸 二 铵 ３ ０ ｇ ｈ 试 验 时 ， 工 开 沟 ， ０ ｋ／ ｍ 。 人 施
６ ． 垅 距 。 ６７ｍ ｃ
２ ２ 对 大 豆 单株 鲜 重 及根 瘤 的 影 响 ． 从 表 ２看 出 ， 河 １ 黑 ７号 施 用 根 瘤 菌 肥 后 ， 株 鲜 重 、 单 根
１ ４ 根 瘤 菌 培 养 模 式 ．
培 养 基 ： 糖 １ ｇ 甘 露 醇 ２ ， Ｐ ） ０ １ ， Ｈ２ （ ． ７ 蔗 ０ ， ｇ Ｋ３ （４ ． ｇ Ｋ Ｐ ） ０ ３ ４
１ ３ 试 验 设计 与 方 法 ．
致 ， 明根瘤菌对大豆熟期无影响 。 说
表 １ 物 候 期 调 查
试验 处 理 ： 瘤 菌 ２号 ， 瘤 菌 １ 根 根 ８号 ， 照 （ 拌 根 瘤 对 不 菌 ） 根瘤 菌 肥 的使 用 剂 量 为 ３ ／ （ 公 顷 施 菌 肥 ３ ｋ ） 。 ｇｍ 即 ０ｇ。 采 用 小 区 试 验 ， 机 区 组 ， 次 重 复 ， 垅 长 ， 行 区 ， 随 ３ ５ ｍ ４
取 沸 石 ２ ． ｋ ／ ｍ 腐 殖 酸 ９ ， ｋ ／ ｍ ， 酸 铵 ３ １ ／ ２ ５ ｇｈ ， ７５ ｇｈ 钼 ０ ｇ
俄罗斯大豆根瘤菌与不同大豆品种的生态适应性
盛 花 期测 定根 瘤 数量 及 风 干重 ， 熟 期进 行 产 成
量及产量构成 因子测定。产量构成 因子包括株高 、 单株荚数、 单株粒数 、 百粒重及单位面积产量。利用 电子天平 称重 。 采用 Ｄ Ｓ７０ Ｐ ．５版 、 ｘｅ 和相 关 的计 算 机其 他 Ｅｃｌ 软 件进行 数据分 析 。
明显 ， 均显著高于对照。合丰 ４ ２施用 Ｈ菌后根瘤 菌数量及风干重显著高于施用 Ｋ菌处 理 ， 极显著高 于对照 。蒙豆 ９号 施 用 Ｋ 菌处 理 的 根 瘤 数 量 及 风 干重显著高于 Ｈ菌处理 ， 极显著高于对照。 ２ ２ Ｈ、 ． Ｋ根瘤 菌对大 豆产 量及 其构成 因子的影 响 从表 ２可 以看 出 ， 株 高 方 面 ， 河 ３ 在 黑 ８号施 用 不 同根瘤 菌后 较对 照差异 不显 著 ； 黑河 ４ ８号施用 根 瘤菌 后 ， 对 照 差 异 显 著 ， 处 理 与 对 照 差 异 不 显 较 Ｋ 著， Ｈ处理与对照差异显著 ； 合丰 ４ ２号施用不 同根
同根瘤 菌 （ Ｋ） Ｈ、 的处 理 ， 根瘤 数 量 、 瘤 干 重 差 异 根
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
ห้องสมุดไป่ตู้
供 试 品种 ： 河３ 号 、 河 ４ 号 、 丰４ 号 和 黑 ８ 黑 ８ 合 ２
作 者 简介 ： 武 ， 究 实 习 员 ， 究方 向 为 植 物保 护 土 壤 修 复 张 研 研 基 金 项 目 ： 国大 豆体 系 黑 河试 验 站 项 目资 助 全 收 稿 日期 ：００— ２— ６ 修 回 日期 ：０ ０—０ ０ ２１ ０ ２ ； ２１ ３— ９ ５ ４
１３ 测 定项 目与方 法 ．
物根瘤 菌 的竞 争结 瘤 能 力受 到 土 壤 环境 ， 宿主 植 物 和根瘤 菌本身 ３方 面 因素影 响 。江木 兰等 研究 表 明， 豆科植 物 与根瘤 结 瘤 固氮 的遗 传 性状 受 共 生 体 双 方控制 ， 而且 ， 生态 条件 、 土壤类 型及起 源 、 豆科作 物品种类型及种植历史都影响共生作用 。国内外研 究 还表 明 ， 虽然 大豆栽 培 品种 是优 良的固氮者 ， 但是 不 同的大豆 类型 、 大豆 品种 间也存 在着显 著差 异 ， 这 种根瘤 菌对 宿主 的专 一 性 不 仅体 现 在 种 的水 平 上 ， 并且 与品种 的差 异 有 关 。因此 ， 通过 对 宿 主植 物 的 基 因型选 育 ， 希望通 过有 选 择地 提高 固氮优 良菌 株 与宿 主实物 之 间的亲 和 力 来 提高 根 瘤 菌 的竞 争 力 ， 并 能抑制 竞争 能力 相 当强 的土 著根瘤 菌 Ｊ 。
大豆根瘤菌实施方案
大豆根瘤菌实施方案大豆根瘤菌是一种对大豆生长有益的微生物，它能够与大豆根系共生，并固氮，为大豆提供养分。
因此，对大豆根瘤菌的实施方案具有重要意义。
本文将对大豆根瘤菌实施方案进行详细介绍，以便广大农户和农业专业人士能够更好地了解和应用这一方案。
首先，大豆根瘤菌的选择非常重要。
在选择大豆根瘤菌时，应优先选择对大豆生长有益的优质菌种，确保其对大豆的固氮效果良好。
同时，还应注意菌种的适应性和稳定性，以便在不同环境条件下都能够发挥作用。
此外，要注意避免使用过期或劣质的菌种，以免对大豆生长造成不良影响。
其次，大豆根瘤菌的施用方法也需要注意。
一般来说，大豆根瘤菌可以通过种子浸种、根部浇灌或土壤施用等方式进行施用。
在选择施用方法时，应根据具体情况进行综合考虑，确保菌种能够有效接触到大豆根系，并且能够在根系附近迅速生长和定殖。
此外，施用时需要注意适量适时，避免过量施用或施用时间不当导致浪费或影响效果。
另外，合理的管理措施也是大豆根瘤菌实施方案中不可忽视的一部分。
在大豆栽培过程中，应注意合理施肥、灌溉和病虫害防治等措施，以创造良好的生长环境，为大豆根瘤菌提供良好的生长条件。
此外，还应注意避免对大豆根瘤菌造成不利影响的农药使用，保证菌株能够正常生长和固氮。
最后，对大豆根瘤菌的效果进行监测和评估也是实施方案中的重要环节。
在大豆生长期间，应定期对大豆根系和根瘤进行观察和检测，了解大豆根瘤菌的定殖情况和固氮效果。
同时，也可以通过土壤和植株组织的化验分析等方法，对大豆根瘤菌的效果进行评估，及时调整和改进实施方案。
综上所述，大豆根瘤菌实施方案的成功与否，关键在于菌种的选择、施用方法、管理措施和效果监测等方面的合理安排和落实。
只有在这些方面都做到位，才能够确保大豆根瘤菌能够充分发挥作用，为大豆的生长和产量提供有力支持。
希望本文所述内容能够对大豆根瘤菌实施方案的制定和应用提供一定的参考和帮助。
高效大豆根瘤菌的筛选
此 方法 温室最 佳共 生 匹配试验 方案 。
１ ２ ３ １ 选 取 优 良 的 大 豆 种 子 ， 人 无 菌 培 养 皿 ． ．． 放 中 ， 入 ９ ％ 的 乙 醇 ， 枪 头 反 复 冲 洗 ， 使 种 子 表 加 ５ 用 以
２１ ０ １年 ５月
内 蒙 古 科 技 与 经 ห้องสมุดไป่ตู้
Ｉ ｅ ｏ ｇ ｌ ｃｅ ｃ ｃ ｎ ｌｇ ＆ Ｅｃ ｎ ｍｙ ｎｎ ｒＭ ｎ ｏ ｉ Ｓ ｉｎ ｅＴｅ ｈ ｏｏ ｙ ａ ｏｏ
Ｍａ ｙ ２０１ １
第１ ｏ期 总 第 ２ ６ ３ 期
Ｎｏ． ０ Ｔ ｏ ａ １ ｔ ｌＮｏ．２ ３６
筛 选 与 豆 科 作 物 品 种 匹 配 、 氮 能 力 好 、 争 结 瘤 能 固 竞
力 强 的 优 良菌 株 ， 提 高 根 瘤 菌 应 用 效 果 的 重 要 途 是
基 中 ， 摇 瓶 培 养 法 在 ３ 培 养 条 件 下 ２ ０ｐ 摇 床 用 ０Ｃ ０ ｒｍ
中培养 至 发酵液 菌 体密 度 ５ ０亿 个 ／ ｍ］以 上 后 ， 于 置 ４ 的冰箱 中低温保 存备 用 。 ℃
豆 血 红 蛋 白 ， 时 具 备 类 菌 体 和 豆 血 红 蛋 白 的 根 瘤 同
１ ２ １ 大 豆 根 瘤 菌 的 培 养 ．． 将 大 豆 根 瘤 菌 ＨＬＪ １ ０ ， ＨＬ Ｎ １ ０ ， Ｎ ０１ Ｊ ０ ２
Ｈ ＬＪ １ ０３， Ｈ ＬＪ １ ４， Ｈ ＬＪ １ ０ Ｎ ０ Ｎ ００ Ｎ ０ ５， Ｈ ＬＪ １ ６， Ｎ ００
固氮作用 的发挥 提供 依据 。 １ 材 料 与 方 法 １１ 试 验材料 ． １１１ ．． 供 试 菌 株
不同地区大豆根瘤菌培养条件的优化
对 pH 的适应能力表现出不同的趋势。海伦地区的 大豆根瘤菌对 pH 值的变化趋势不大；而绥棱地区 和呼兰地区的大豆根瘤菌对弱碱性的适应能力较 强；北安和绥化地区的大豆根瘤菌在 pH 6.0~7.5 的变化趋势大体一致，而在 pH 7.5~8.0 的变化趋势 却不同，北安地区的大豆根瘤菌 OD 值随着 pH 值的 增加而上升，而绥化地区的大豆根瘤菌 OD 值则随 着 pH 值的减少而下降。培养基的初始 pH 值是影响 微生物生长的主要因素，太高或太低均不利于菌体 生长。这是由于一方面不适合的 pH 值会引起微生 物表面电荷的改变，从而不利于细胞对营养物质的 吸收；另一方面 pH 的改变会让有机化合物离子化， 不利于有机化合物渗入细胞，继而影响微生物细胞 的运输机制，促进或妨碍一些营养物质的吸收。 2.3 转速对大豆根瘤菌生长的影响
160、180、180 r·min-1；培养温度均为 28 ℃。
关键词：大豆根瘤菌；培养时间；pH；转速；温度
中图分类号：S144.3
文献标识码：A
文章编号：1005-9369（2009）11－0011－03
Optimization on culture conditions of Rhizobia in different areas/LI Zheng-
斜面固体培养基：甘露醇 10.0 g，酵母膏 3.0 g， Na2SO4 0.2 g，K2HPO4 0.5 g，NaCl 0.1 g，CaCl·2 6H2O 0.1 g，1%干果红。种子液体、发酵液体培养基： 甘露醇 10.0 g，酵母膏 3.0 g，Na2SO4 0.2 g，K2HPO4 0.5 g，NaCl 0.1 g，CaCl2·6H2O 0.1 g。 1.3 方法 1.3.1 培养方法
“奥龙奇康”牌大豆根瘤菌剂
“奥龙奇康”牌大豆根瘤菌剂作者：钟春霞来源：《科技创新与品牌》2014年第09期发展绿色生态农业，重振大豆产业雄风，大力推广使用微生物菌肥—“奥龙奇康”牌大豆根瘤菌系列产品，是我国豆科作物减少氮肥用量、降低成本、改善土壤、减少污染、实现优质高效的有效途径。
大豆根瘤菌剂产品是保障食品安全、实现节能减排、利国利民的好产品。
在首届中俄博览会上，哈尔滨工业大学华龙科技发展有限公司研发生产的“奥龙奇康”牌大豆根瘤剂系列产品展台前吸引了与会的国内外客商纷纷驻足关注，了解、咨询、洽谈者络绎不绝。
这是一家什么“奥龙奇康”牌大豆根瘤菌剂—为非转基因大豆增产增收提供技术支撑公司？生产的产品什么特点？本刊记者采访了公司董事长逄镜萍女士。
逄总于2000年创办了哈尔滨工业大学华龙科技发展有限公司，14年来凭着她对事业的执着，对家乡的热爱，公司在她的率领下现已发展成为一家集科、工、贸为一体的现代化高科技企业。
公司先后研制完成了新型大豆、绿豆、花生、红豆，苜蓿草根瘤菌剂等多项新技术、新成果。
公司拥有国家专利三项；并获国家科技成果证书、农业部全国农业技术推广服务中心鉴定证书及黑龙江省农委颁发的科技项目鉴定证书；公司是黑龙江省2011年农民放心农资企业，已于2012年通过ISO9001：2008年质量管理体系认证。
大豆根瘤菌是世界公认的一项生物固氮技术，美国及西方发达国家使用它有近百年的历史。
它的主要作用有：改良土壤及增进土壤肥力；大豆根瘤菌能与豆科植物共生固氮；增强植物抗病能力，对植物起到促早熟、抗倒伏的作用；可提高大豆品质（增加大豆异黄酮含量30～150）及增产增收；节能降耗；经济环保，利用微生物代替化肥资源，可以有效改变土壤板结状况。
近年来我国对大豆的需求量迅猛增加，但由于种植大豆效益低，致使我国大豆种植面积在逐年减少，已从大豆出口国变为大豆进口国。
如何改变这一被动局面，扩大本土非转基因大豆的种植面积，提高本土非转基因大豆在国际市场上竞争力，在我国大豆产区大面积推广使用大豆根瘤菌剂新技术势在必行，并已形成共识。
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引进的俄罗斯高效大豆根瘤菌培养基的选择与优化
作者：赵念力等
来源：《江苏农业科学》2014年第03期
摘要：将引进的俄罗斯高效大豆根瘤菌GF菌株在YMA、TY、PA、BSE、SM 5种培养基中进行培养，相关生长情况的试验结果表明，该菌株在YMA培养基中生长较快。
在YMA 培养基中进行的碳源利用试验表明，在葡萄糖为碳源的培养基中根瘤菌生长得最好。
按L9（34）正交设计表对YMA培养基中的4个组分比例进行优化，对结果进行分析可得最优的培养基配方（1 L）为：10.0 g葡萄糖+0.8 g酵母粉+0.2 g MgSO4·7H2O+0.8 g K2HPO4+0.1 g NaCl+0.01 g CaCl2，去离子水补足至1 000 mL。
关键词：俄罗斯大豆根瘤菌；培养基；优化
中图分类号： Q93-335 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）03-0069-02
根瘤菌与豆科植物能形成共生的固氮体系，在自然界中，这个体系不但具有最高的固氮效率，而且具有最多的固氮量[1]。
大豆根瘤菌与大豆共生可以形成根瘤，能将空气中的氮固定转化成为大豆可以直接吸收利用的铵。
大豆与根瘤菌的共生固氮作用既能直接改善大豆的氮素营养状况、提高大豆的产量和品质，又能将更多的固定氮素释放到土壤中，从而起到培肥地力的作用[2]。
目前，接种根瘤菌剂已经成为世界各国豆科作物增产、减少化肥施用的一项技术措施，在许多国家都有大规模商品菌剂的生产和出售，应用面积也不断扩大。
随着无公害农业的发展，接种高效大豆根瘤菌将产生更显著的社会与环境效益[3]。
俄罗斯对根瘤菌的研究已有近百年的历史，具有了一定的理论基础并积累了丰富的实践经验[4-5]。
2009年黑龙江省农业科学院从全俄大豆科学研究所引进了十多个高效大豆固氮根瘤菌株，并结合黑龙江省的生态环境特点和大豆主栽品种进行综合研究、开发和应用。
大豆根瘤菌通常选用YMA培养基进行分离培养，但其生长较慢，不适合在生产上加以应用，因此有必要研究、改良培养基配方，选择最适合俄罗斯大豆根瘤菌生长的培养基配方，提高大豆根瘤菌的培养速度。
本研究主要通过优化俄罗斯高效大豆根瘤菌培养基，筛选出最适合根瘤菌生长的培养基配方，为实现高密度发酵培养提供基础和依据。
1 材料与方法
1.1 试验菌株
试验菌株为引进的俄罗斯大豆根瘤菌GF菌株，为大豆快生根瘤菌，由俄罗斯全俄大豆科学研究所提供。
1.2 培养基
试验用培养基有YMA、SM、TY、PA、BSE 5种，配方如下。
（1）YMA培养基（1 L）：10 g甘露醇/蔗糖，1 g酵母粉，0.2 g MgSO4 ·7H2O，0.5 g K2HPO4，0.1 g NaCl，0.05 g CaCl2 ·6H2O，4 mL Rh 微量元素液（将5 g H3BO3、5 g Na2MnO4溶解于1 000 mL去离子水中制成），加去离子水至1 000 mL，调节pH值6.8～7.0。
（2）SM培养基（1 L）：10 g甘露醇，0.5 g K2HPO4，0.2 g MgSO4 ·7H2O，0.1 g NaCl，0.5 g KNO3，0.1g CaCl2 ·6H2O，4 mL Rh微量元素液，1 mL混合维生素液（将10 mg硫胺、10 mg烟酰胺、10 mg泛酸钙、1 mg生物素溶解于100 mL去离子水中制成），加去离子水至1 000 mL，调节pH值6.8～7.0。
（3）TY培养基（1 L）：5 g胰蛋白胨，3 g酵母粉，1.3 g CaCl2 ·6H2O，加入去离子水至1 000 mL，调节pH值为7.0。
（4）PA培养基（1 L）：2 g蛋白胨，0.5 g MgSO4 ·7H2O，加入去离子水至1 000 mL，调节pH值 6.8～7.0。
（5）BSE培养基（1 L）：10 g甘露醇，0.2 g MgSO4 ·7H2O，0.5 g K2HPO4，0.1 g NaCl，0.1 g CaCl2 ·6H2O，4 mL Rh微量元素液，加入去离子水至1 000 mL。
1.3 试验方法
1.3.1 根瘤菌菌种的活化、传代、接种将根瘤菌在斜面培养基上28 ℃的条件下培养2 d后接种到YMA培养液中，再置于28 ℃、150 r/min的摇床中振荡培养4 d，制成接种液。
1.3.2 根瘤菌的培养将培养好的接种液按照体积比1%的接种量接入5种液体培养基中，250 mL三角瓶的装液量为100 mL，在28 ℃、150 r/min的摇床中培养。
1.3.3 培养基的比较在600 nm下测定不同培养时间的吸光度，绘制大豆根瘤菌在5种培养基中的生长曲线。
1.3.4 不同碳源的筛选试验在培养基选择试验的基础上，进一步在生长较好的培养基上进行碳源的筛选试验。
用等量的甘油、乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖替换YMA培养基中的甘露醇，同时保持其他成分不变。
接种根瘤菌于液体培养基上，接种量为1%，于28 ℃、150 r/min 的条件下振荡培养，分别在培养12、24、36、48h时测定D600 nm。
1.3.5 培养基的优化在常规培养基的基础上对大豆根瘤菌的培养基进行进一步优化。
进行碳源筛选之后，采用L9（34）正交设计方案对培养基的主要营养成分进行优化，正交设计见表1。
3 结论
通过对5种培养基的筛选表明，YMA培养基较适于俄罗斯大豆根瘤菌GF菌株的生长。
碳源利用试验表明，葡萄糖为最优碳源。
正交试验得到GF菌株的最优培养基配方为：10.0 g 葡萄糖+0.8 g酵母粉+0.2 g MgSO4 ·7H2O+0.8 g K2HPO4+0.1 g NaCl+0.05 g CaCl2+4 mL Rh微
量元素液，加水补至1 000 mL。
优化的根瘤菌YMA培养基在避免资源浪费和降低生产成本的前提下，实现了根瘤菌的大量、快速生长，为根瘤菌工业生产奠定了基础[6]。
参考文献：
[1]刘保平，周俊初. 根瘤菌菌剂研究[J]. 湖北农业科学，2006，45（1）：57-61.
[2]谭娟. 接种俄罗斯大豆根瘤菌对大豆生长和产量的影响[J]. 作物杂志，2007（4）：36-37.
[3]李阜棣，胡正嘉. 微生物肥料在持续发展农业中的应用[M]. 北京：中国科技出版社，1994.
[4]张武. 俄罗斯大豆根瘤菌与不同大豆品种的生态适应性[J]. 作物杂志，2010（3）：54-55.
[5]李艳杰. 接种大豆根瘤菌对大豆生长及产量的影响[J]. 黑龙江农业科学，2013（1）：50-53.
[6]吴红慧，周俊初. 根瘤菌培养基的优化和剂型的比较研究[J]. 微生物学通报，2004，31（2）：14-19.。