中国两性生殖卤虫种群MDH同工酶基因的表达 Expression of Malate Dehydrogenase Isozymic Genes o

摘
要
采用聚丙烯 酚胺凝胶垂直 板电泳法对 中国两性生殖卤虫 １ 个品系的苹果酸脱氢酶 （ ２ ＭＤＨ 同工 ）
酶基 因的表达进行 了研 究。实验结果表 明： １ 由于 一些 ＭＤＨ 同工酶基 因所编码产生 的亚基相互结合 （）
的频率较低， 故没有得到理论上应得到的基因型数； ２ （）存在品系内和品系间的多态现象； ３ Ａ ｓ ｉ （） ｉｃ ． ａ ｎ 与 Ａｐｒ ｅｏｅｅｃ 之间存在高度的遗传变异和分化， ． ｈｎｇｎｔａ ａｔ ｉ 另外， 二者间具有相同的基因型和较高的遗传相
①国家自 然科学基金资助的项目（ 批文号：９００５ ３２０ １） ０
２ ０
遗
传 Ｈ Ｒ ＤＩＡ （ｅｉ ） ８ Ｅ Ｅ Ｔ Ｓ ｉｎ １９ Ｂ ｊｇ ９
衰 １ 研究 的材料
２ ０卷
品
Ａ ｓｎｃ ． ｉ ｉ ａ
系
ＮＬ
采集地点
内萦 纳 林 淖
尾
数
采集时 间
１９ ．０ ９ １１
倍
性
２ ｎ
３ ０
ａｂ ａ ｂ ａ ａｂ ７
ａｂ
ａｂ ａ
ａｂ ａｂ ３
ｍ －Ｍ ＤＨ －３ ｍ －Ｍ ＤＨ －２ ｍ －Ｍ ＤＨ －１
ａ ｂ ６
ｓ Ｍ ＤＨ－ － ２
ｓ －Ｍ Ｄ Ｈ－１
荃因型编号
图 １ 两性生殖品系卤虫 ＭＤ 同工酶的表现型、基因型 Ｈ
表 ３ 各 两性 生殖卤虫品系 ＭＤ 同工酶等位 基因频率 Ｈ
等位墓 因
Ｓ Ｑ
ＹＣ Ｇ Ｎ ＣＤ ＳＹ Ａ Ｔ
内蒙水泉 子
山 西 运城 盐 湖 吉 林 工农 湖 青海大柴且湖 河北尚义 新扭阿尔泰
３ ０
３ ０ ３ ０ ３ ０ ３ ０ ３ ０
１９． ９ １ ０ １
１ ９１１ ９ ．０ １ ９１１ ９ ．０ １ ９１１ ９ ．０ １ ９１ ９ ９ ． １ ９１ ９ ９ ．
Ｈ Ｑ Ｊ
Ｓ Ｂ ＢＹ ＣＨ ＮＨ
内狡杭锦旗
内蒙 苏 贝 淖 内玻 白彦 淖 内滚 察汉 淖 内 蒙努 合 图
３ ０
３ ０ ３ ０ ３ ０ ３ ０
１９． ９ １ ９
１ ９１１ ９ ．０ １ ９ ．０ ９ １１ １ ９１１ ９ ．０ １ ９１１ ９ ．０
２ ｎ
２ ｎ ２ ｎ ２ ｎ ２ ｎ
裹 ２ 各两性 生殖 品系卤虫 ＭＤ 同工酶基 因型分布 Ｈ
品 系 １ ．
００ ７ ．６
２
０．０ ２ ０
３
００ ３ ．３
４
０８ ０ ．０
５
０ １ ３ ．３
６
０．３ ０ ４
７
０．３ １ ３
Ｎ Ｌ
Ｈ Ｑ Ｊ
Ｓ Ｂ ＢＹ ＣＨ ＮＨ
０７ ． ０ ０
０１０ ． ３
０．３ １ ３ ０ ０ ７ ．６ ０．７ ０ ０ ０．３ １ ３
／ａ／ ／ ／ ； ｂ／ ／ ／ ／ ； ａ／ ／ ／ ／ ， ｂ ａ ａ ｂ （） ａ ａ ａ ｂ （） ａ ｂ ａ ａ 分别属于７ ９ １， 条酶带．其中 ｂ ｂ ｂ ６ ｂ ａ ａ ｂ ｂ ７ ｂ ａ ｂ ａ ｂ ， ３ １ ， ５ ｓＭＤＨ １ ｓＭＤ ２ － － ， Ｈ－ 编码可溶性组份中的ＭＤＨ ｍ－ Ｈ－ ， ＭＤＨ ２ ｍ ＭＤＨ ３ － ， ＭＤ １ ｍ － － ， － － 、编码线粒体中的 ＭＤＨ 每个座位均有ａ ｂ ， ， 二个等位基因， Ｈ， 除Ｃ Ｎ Ｈ品系外均存在品系内和品系间的多态现象 （ ， １， 表２图 ）
遗传 Ｈ Ｒ ＤＩＡ （ｅｉ ） （） １－２ １９ Ｅ Ｅ Ｔ Ｓ ｉ ｇ ２ ３： －２ ８ Ｂｊ ｎ ０ ９ ９
中国两性生殖卤虫种群 ＭＤ Ｈ同工酶基因的表达①
侯 林Ｉ 邹向阳２ 蔡含药１
ｃ． 宁师范大学海洋资源研究所 大连 １６２） （ ． Ｉ辽 １０９ ２ 大连医科大学生物学教研室 大连 工６２） １０７
Ｈ Ｕ ＇ Ｕ ｎｙ ｇ Ｃ Ｉ ｊ Ｏ Ｌ Ｚ Ｘａ ａ ＇ Ｈ ｎ ｎ ｉ Ｏ ｉｇ ｎ ｎ Ａ ａｕ
（． ｔｕｅ Ｍａｉｅ ｓｕｃｓ Ｌａｎｎ Ｎ ｒ ａ Ｕ ｖｒ ｔ Ｄａａ １６２） １ Ｉｓｔｔｏ ｎｉ ｆ ｒ Ｒ ｏ ｒ ， ｏ ｉ ｏｍ ｌ ｅ ｉ ， ｌｎ ０９ ｎ ｅ ｅ ｉ ｇ ｉ ｎ ｓｙ ｉ １ （． ｐ ｒ ｎｏ Ｂｏ ｇ， ｌｎ ｄ ａＵｎ ｅｓｙ Ｄ ｌ ｎ ６２） ２ Ｄ ａｔ ｔ ｉｌ ｙ Ｄａａ Ｍｅ ｉ ｌ ｉ ｒｔ， ｉ １ ０７ ｅ ｍｅ ｆ ｏ ｉ ｃ ｖ ｉ ａａ １
Ｂｗｎ ７） ｂｅ－ ｏｏ 等〔６对欧洲产的孤雌生殖卤虫品系和世界５ ｏｅ 等‘８、Ａ ｒｕＧｒｂｉ ５， ， ｓ ． 大两性种的ＭＤ Ｈ同工酶进行了
报 道。本文报道了 中国两性生殖卤虫种群 的 ＭＤＨ 同工酶基 因的表达情况。
１材 料
１ ． １材料
和
方
法
本实验共研究 中国两性生殖 １ 个品系卤虫 ３０ ２ ６ 尾。各两性品系卤虫卵的采集情况见表 ｔ ｏ
卤虫 （ ｒｍａ）是一群在世界上分布甚广的小型甲壳动物， Ａｔ ｉ ｅ 为重要的饵料生物和实验动物。有关卤虫的苹
果 氢酶 （ Ｄ ）同工酶基因的 酸脱 Ｍ Ｈ 表达情况的 研究， 已见侯林等〔２对我国孤雌生殖卤虫的８ ’， 个品系（ 属欧亚
大陆— 旧大 陆孤雌生 殖种） 和 ２个两性生 殖 卤虫品系 （ 吉林 工农 湖卤虫 、山西运城 盐湖 卤虫）进行 了报 道。
似系数值也说 明二者 间存在一定的亲缘关系。
关键词 中国两性生殖卤虫品系， 苹果酸脱氢酶， 基因表达， 群体遗传
中图分类号 Ｑ５．３ ９９ ２ ２
Ｅ ｐｅｓ ｎ Ｍａ ｔＤ ｈｄｏｅａｅ ｚｍｃ ｎｓ ｘｒ ｉ ｏ ｓ ｏ ｆ ｌ ｅ ｙｒｇｎｓ Ｉ ｙ ｉＧｅｅ ａ ｅ ｓ ｏ
ｏ Ｂｉｅ ｕ ｌ ｔｍｉ Ｓｔａｎ ｆｏ Ｃｈ ｎ ｆ ｓ ｘ ａ Ａｒｅ ａ ｒ ｉ ｓ ｍ ｉ ａ ｒ
Ｓ －Ｍ ＤＨ－１ ０ Ｓ －Ｍ ＤＨ－２ ０
ＮＬ
ＨＪ Ｑ
Ｓ Ｂ
Ｂ Ｙ
ＣＨ
０
ＮＨ
０
Ｓ Ｑ
Ｙ Ｃ
ＧＮ
Ｃ Ｄ
Ｓ Ｙ
Ａ Ｔ
０ １０ ００ ３ ０ １ ０ ００ ７ ，０ ．３ ，０ ．６ Ｉ ．ｏ ０ ００ ７ ００ ７ １０ ０ ，６ ．６ ．０
３期
侯
林 等：中国两性生殖卤虫种群 ＭＤＨ 同工酶基因的表达
２１
ａ／ ／ ／ ／ 为 ｂａ ａ ａ ａ ｂ ｂ ｂ ｂ
１ ６ ａ／ ／ ／ ／ ． ％， ａ ａ ａ ｂ ３ ｂ ｂ ６ ｂ ｂ和
（ ２， 表 ）
ａ／ ／ ／ ／ ｂ ａ ｂ ａ ａ ａ ｂ ａ ｂ基 因 型 为
１１ ． ％，而 １
ｂｒ ｘｅｉｅｔｌ ｐ ｓｗ ｄｄ ｇｔ ｔｅｒｔａｎｍ ｅｏ ｇｎｔｐ ｔａｓｏｌａｐａｅ （） ｅｏ ｅｐｒ ｎａｓｍ ｌ， ｉｎｔ ｔ ｈｏｅｉ ｌ ｂｒ ｅｏｙｅ ｔ ｕ ｐｅｒ ２ ｆ ｍ ａ ｅ ｅ ｏ ｅ ｈ ｅ ｃ ｕ ｆ ｈ ｈ ｄ ；
Ａ ｓ ｉ ａ ｄ ． ｔｅｏｅｅ ｃ ｈｖ ｃａａｔ ｉｉ ＭＤＨ ｏｙ ｉ ｐｔ ｒｓ ｔｉ ｐｏｉ ｓ ｃ ｅ ． ｃ ｎ Ａ ｐ ｒ ｎｇｎｔ ａ ｅ ｒｃ ｒｔ ｉ ａ ｎ ａｈ ｉ ａ ｈ ｅｓｃ Ｉ ｚｍ ｃ ｔ ｎ， ｓ ｖ ｅ ｐｅｉ ｓ ａｅ ｈ ｒ ｄ ｒ ｓ
ｂ／ ／ ／ ／ 基因型 的出现率仅 为 ０ ８ ｂ ａ ａ ａ ｂ ａ ａ ｂ ｂ ． ２
２ ． ３各两性生殖品系卤虫 ＭＤ Ｈ同工酶等位基因频率 各两性生殖品系卤虫 ＭＤ Ｈ同工酶等位基因频率见表 ３ 。从表 ３ 可知 。ＭＤ －ｂ ｍ ＭＤ － Ｈ１ － Ｈ八 ， ｍＭＤ －” － Ｈ ３基因频 率均相当高， － Ｈ ２和。 ＭＤ －” 而ｍ ＭＤ －０ － Ｈ ２基因出现的 频率基本相同 。在ｓＭ Ｈ ２ － Ｄ － 座位 除ＨＱ Ｓ 品系ｓＭＤ －” 频率较高外， 它品系ｓＭ Ｈ ２比。 Ｈ ２基因 Ｊ， Ｂ － Ｈ ２基因 其 － Ｄ －“ ＭＤ －０ 频率高的 多。
ｂｏｈｍｃｌ ｘ ｄ ｔｇｉ ｉ ｄｆｅｔ ｅ ｉ ｓ ａ ｓ（） ｉ ｅ ｉ ｉ ｅ ｆｒ ｉ ｕ ｈ ｇ ｅ ｎ Ａｔ ａ ｉ ； ３ ＭＤＨ ｚｍ ｉ１ ｂｅｕｌ ｍａ ｃ ａ ｎ ｏ ｉ ｎ ｓｎ ｉ ｒ ｄ ｓ ｆ ｒｍ ｔ ｎ ｒ ｉ ｙ ｅ ２ ｘａＡｔ ｉ ｓ ｏ ｎ ｉ ｓ ｒ ｅ
２ ｎ
２ ｎ ２ ｎ ２ ｎ ２ ｎ ２ ｎ
Ａ ｐ ｒ ｅｏｅｅｉ ． ｔ ｎｇｎｔａ Ｙ ａｈ ｃ Ｋ
辽宁营 口盐场
参见文献 〔 ） ２
１ ． ２卤虫的培养 卤虫的 孵化、培养及倍性检查见本组以 往的方法〔２． １ ， ）
１３方法 ．
酶液的提取、电泳方法、酶的 染色按侯林〔２的 ， １ 方法进行 〕 。 等位 基因的 命名参考熊全沫〔 、侯林（２的 ４ ） （ 〕 方法进行．根据Ｎｉ 的 计算 ｉ ， ｅ（９ 方法 等位基因 ３〕 ， 频率。 ２结 果
ｍ－Ｍ Ｄ Ｈ－３
ｍ－Ｍ Ｄ Ｈ－２
ｍ －Ｍ ＤＨ－１
ｓ －Ｍ Ｈ－２ Ｄ
ｓ －Ｍ ＤＨ －１
ａｂ ａｂ ａｂ
ｂ
ｂ
ｂ ａｂ ａｂ ａｂ ｂ ａｂ ａｂ ｂ ｓ ４ Ｚ ａ ａｂ ａ ｂ ａｂ
ｂ ａｂ ａｂ ａｂ ａｂ ａｂ ３
ａｂ ａｂ ａｂ ｂ ａｂ ｌ Ｚ ａ ａｂ ｂ ａｂ
ｂ ａｂ ａｂ ｂ ａｂ ｌ
０１３ ． ０
０３ ． ０ ９
０８ ０ ．０ ０８ ７ ．６ １０ ．０ １０ ．０
Ｓ Ｑ
ＹＣ Ｇ Ｎ ＣＤ ＳＹ ＡＴ
０９７ ． ６
０．３ ８ ３ ０８ ７ ．６ ０９ ３ ．３ ０８ ０ ．０ ０８ ７ ．６
‘ 基因型编号见结果 ２ ． ． １
２ ． ２各两性生殖品系卤虫的ＭＤ Ｈ同工酶墓因型分布情况
中国各两性生殖品系卤虫的ＭＤＨ同工酶主要基因型分布情况为ｂ／ ／ ／ ／ 占全部基因型出现率 ｂａ ｂ ａ ｂ ａ ｂ ６ ｂ 的 ８． ８ ％．其它几种基因型的出现率为 ａ／ ／ ／ ／ ９ ｂ ａ ｂ ａ ｂ ａ ｂ ｂ ｂ为 ６０％， ｂ／ ／ ／ ． ８ ａ／ ａ ａ ａ ６ ｂ ６ ｂ ｂ为 １ ４ ． ％， １
２ ＭＤ ． １ Ｈ同工酶基因的表达
各两性生殖品系卤虫的ＭＤＨ为二聚体酶， 个基因座位 １ 个等位基因编码。本研究共发现７ 由５ ０ 种基因型：
（ ６ ｂ／ ／ ／ ； ａ ／ ／ ／ ／ ； ａ／ ／ ／ ／ ； ｂ／ ／ ／ ／ ； ａ １ ／ ａ ａ ａ （） ａ ｂ ａ ｂ （） ａ ａ ａ ａ （） ａ ｂ ａ ｂ （） ）ａ ｂ ｂ ｂ ｂ ２ ｂ ａ ｂ ｂ ｂ ３ ｂ ｂ ６ ６ ｂ ４ ｂ ａ ｂ ｂ ｂ ５ ｂ
ห้องสมุดไป่ตู้
Ａ ｓ ａｔ ｘ ｒ ｓ ｎ ｍ ｌｅ ｙ ｒｇｎｓ Ｉ ｚｍｃ ｅ ｏ １ ｂｓ ｕｌ ｅ ｉ ｓ ａｎ ｆ ｍ ｉ ｂｔ ｃ Ｅ ｐｅ ｉ ｏ ａ ｔｄｈ ｄｏｅ ａ ｓ ｙ ｉｇｎｓ ２ ｅ ａ Ａ ｔ ａ ｉ ｒ Ｃ ｎ ｒ ｓｏ ｆ ａ ｅ ｅ ｏ ｅ ｆ ｉｘ ｒ ｍ ｔ ｓ ｒ ｏ ｈａ ｗ ｓ ｄ ｄ ｍ ａ ｓ ｐｌ ｃ ｌ ｉ ｇｌ ｔ ｐ ｏｅｉｍ ｔｏ ， ｅｐｒ ｅ ｔ ｒｓｌ ｓｏ ｅ ａｅ ａ ｓ ｉ ｂ ｅｎ ｏ ｏｙ ｒ ａ ｄ ｅｅ ｃｒ ｈ ｒ ｓ ｈｄ Ｔ ｅ ｅｉ ｎａ ｅ ｔ ｈ ｗ ｄ ｔ ｅ ｙ ｕ ｆ ａ ｙ ｍ ｅ ｌ ｏ ｅ ｓ ｅ ｈ ｘ ｍ ｌ ｓ ｕ ｒ ａ ｆｌ ｗ，（）Ｂ ｃｕ ｏ ｌ ｆ ｑ ｅｃ ｏ ｓｍ Ｉ ｚｍｉｓｂ ｎ ｓ ｉｎ ｅｃ ｏｈｒ ｓ ａ ｎ ｍ ｓ ｏ ｓ １ ｅａｓ ｆ ｒ ｕｎｙ ｏ ｅ ｙ ｃ ｕ ｉ ｃｍｂ ｉ ａｈ ｅ ａ ｄ ｌ ｕ － ｏｌ ｅ ｏ ｅ ｗ ｆ ｓ ｏ ｕ ｔ ｏ ｎ ｇ ｔ ｎ ｍ ｌ
ｓａ ｉｉｐ ｌ ｏｐ ｉ ｔ ｉ ｓ ｏｙ ｒｈ ． ｒ ｎ ｓ ｍ ｃ Ｋ ｙ ｒｓ ｉ ｘａＡ ｔ ｉｓ ａ ｓ ｍ ｉ ， ｌ ｅ ｙ ｒ ｅａｅ ｚｍ ， ｅｃ ｒ ｓ ｎ ｅ ｗ ｄ Ｂｓ ｕｌ ｅ ａ ｉ ｆ Ｃ ｎ Ｍａ ｔｄｈｄｏ ｎ ｓｉ ｙ ｅ Ａｌｉｅｐｅ ｉ ， ｏ ｅ ｒｍ ｔ ｎ ｒ ｒ ｏ ｈａ ａ ｅ ｇ ｓ ｏ ｌｌ ｘ ｓ ｏ Ｐ ｐ ｌ ｉ ｇｎｔｓ ｏ ｕ ｔ ｎ ｅｉ ａｏ ｅ ｃ