絮凝剂产生菌的筛选、培养及产物性质研究
微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件研究
68·FOOD INDUSTRY 刘云 王琳 河南格瑞德环境检测公司 贾保军 河南理工大学资源环境学院和分离划线法进行菌种的分离。
对培养2-3d的培养皿进行观察,根据形态和颜色的差异,分离得到较纯的微生物菌株。
将分离得到的菌株接种到筛选培养基中,于32±0.5℃,150r/min培养72h,对发酵液进行初步絮凝活性的检测,得到絮凝活性较高的菌株。
絮凝活性的测定。
在50mL具塞比色试管中加入2mLl%CaCl2溶液,0.2g高岭土,定容,调节pH值为9,再加入3mL培养液摇匀,静置10min,吸取上清夜于比色皿中,于紫外可见分光光度计在660nm处测定上清夜的吸光度(OD660),以不加发酵液的培养基为对照。
通过计算确定其絮凝活性。
絮凝率(%)=(A-B)/A×100%式中:A——对照在660nm处的吸光度B—样品在660nm处的吸光度培养条件的优化。
对筛选出来的四株菌株, 分别改变培养条件, 如培养基的成分及初始pH值、培养温度、摇床转速等因素,测定培养液的絮凝活性, 以确定微生物产絮凝剂的最优培养条件。
结果与分析分离筛选结果。
通过菌种的分离,并将纯化后的菌株经初筛和复筛后共获得4株具有较生物絮凝剂是利用微生物技术,通过生物发酵、抽提、精制而得到的一种具有生物分解性和较高安全性的新型、高效、无毒的廉价水处理剂,目前国内外研究者已经筛选到了许多能够产生絮凝剂的微生物。
产生絮凝剂菌分布广泛,在土壤与污水中分布较多,且种类繁多。
目前对微生物絮凝剂的研究还多局限于实验室水平的菌种筛选及特性研究。
获得高活性微生物絮凝剂产生菌, 研究其培养条件, 降低生产成本是后续研究和开发应用的基础。
本文通过对污水处理厂活性污泥的分离筛选,得到4株具有较高絮凝活性的菌株,并分析其最优的培养条件,为高活性微生物絮凝剂的产生及其实际应用提供了基础数据。
材料与方法菌种的来源。
本研究以某污水处理厂的活性污泥为对象,筛选得到4株具有絮凝活性的微生物絮凝剂产生菌,并对其最佳培养条件进行优化实验。
高效微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件研究
高效微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件研究微生物絮凝剂是利用微生物菌株产生的特殊物质,能够在水中吸附、结合悬浮的颗粒物,加速其沉降和分离。
为了开发高效的微生物絮凝剂,需要对产生菌株进行筛选并优化其培养条件。
本文将对高效微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件进行研究。
首先,对高效微生物絮凝剂产生菌的筛选是关键。
可以从自然环境中采集含很高浊度的水样,如污水处理厂出水口、湖泊或河流等,然后进行菌落筛选。
将水样稀释后接种在絮凝剂作用相关基质上,例如含有多糖、蛋白质等的琼脂平板上,利用菌落形态和色素等性状筛选出菌株。
筛选出的菌株需要经过初步的絮凝性能检测,可以采用旋转絮凝法或沉降实验等方法评价其絮凝效果。
选择絮凝效果较好的菌株进行进一步的研究。
接下来,需要对菌株的培养条件进行优化。
菌株的培养条件包括温度、pH值、培养基组分等方面。
首先是温度的优化。
不同菌株对温度的适应范围有所不同,需要通过调整培养温度来提高絮凝效果。
可以在不同温度下进行培养,比较其絮凝效果,找出菌株的最适生长温度。
其次是pH值的优化。
菌株在不同pH值下的生长和絮凝效果也会有所差异。
可以通过改变培养基的初始pH值来研究菌株的最适生长pH范围。
最后是培养基组分的优化。
培养基的优化包括碳源、氮源、无机盐等组分的选择和浓度调节。
可以尝试不同的碳源和氮源,比较不同组分对菌株絮凝性能的影响,并通过改变浓度来优化菌株的产量和絮凝效果。
此外,还可以通过添加激素、维生素等辅助因子来提高菌株的絮凝性能。
这些辅助因子可以在培养基中添加,比如添加微量的铜离子、锌离子等金属离子,可以有效提高菌株的絮凝效果。
总之,高效微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件研究需要从自然环境中筛选出具有絮凝能力的菌株,并通过优化温度、pH值、培养基组分等条件来提高菌株的絮凝效果和产量。
这些研究成果对于开发高效的微生物絮凝剂具有重要的指导意义。
微生物絮凝剂产生菌的筛选和特性研究12页word
微生物絮凝剂产生菌的筛选和特性研究微生物絮凝剂是一类由微生物产生的有絮凝活性的次生代谢产物。
已经知道的微生物絮凝剂有糖蛋白、多糖、蛋白质、纤维素和DNA等[1--4],均为分子量高于105的生物大分子,尽管性质各异,但均能快速絮凝各种颗粒物质,尤其具有废水脱色的独特效果。
微生物絮凝剂产生菌来源广泛,种类多。
此外,微生物絮凝剂具有高效、无毒、无二次污染、使用条件粗放等特点。
目前在细菌、霉菌、放线菌、酵母菌中均有发现,种类有数十种之多,其中微生物絮凝剂产品的报道最多的主要是:以酱油曲霉AJ7002(Aspergillus)[5-6]为原料生产的AJ7002微生物絮凝剂、拟青霉素(Paecilomyces sp.)[7]微生物生产的PF101絮凝剂、红平红球菌(Rhodococcus erythropo-lis)[8-9]、微生物生产的NOC-1絮凝剂等。
本文从活性污泥中筛选分离到一株高效微生物絮凝剂产生菌,并对该菌产絮凝剂的效率和特性进行了初步研究。
1 材料和方法1.1 菌种及筛选培养基菌种源液:取自广州市的污水处理厂生活污水。
筛选培养基:葡萄糖20g,KH2PO42g,K2HPO45g,(NH4)SO40.2g,NaCl0.1g,脲0.5g,酵母膏0.5g,pH7.5-8。
1.2 筛选方法将样品富集培养后,用平板划线分离方法获得单菌落,将纯化后的菌种编号,各菌30℃摇床培养72h后,通过测定各菌培养液的絮凝活性进行初筛,对初筛获得的菌,采用平行发酵培养,定量测定发酵液的絮凝活性,进行复筛。
1.3 絮凝活性的测定100mL量筒中加入80mL蒸馏水,0.4g高岭土,5mL1%CaCl2溶液,2mL发酵液,然后加蒸馏水至100mL,调节PH至7.5,然后倒入150mL烧杯中,放在磁力搅拌器上搅拌2min,静止5min,吸取上清液50mL处的液体采用722型分光光度计在550nm处测定吸光度(以A 表示),以不加发酵液的吸光率(以B表示)为对照,来计算发酵液的絮凝程度。
微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件的研究
2 0 年 2月 08 第 2期 ( 总第 1 ) 1期 1
广 西 轻 工 业
G A G I O R A FL H D S R U N X U N L O I TI U T Y J G N 食 品 与 生 物
微 生物 絮凝 剂 产 生 菌 的筛 选及 培 养条 件 的研 究
表 2 不同氮源对该 茵生絮凝荆的影响
氮源 蛋白 胨 牛肉青 豆芽汁 马铃薯汁 №l N 卜 0 ⅡN 3
1 材料 与 方法
11 菌 种 来 源 . 污水 沟 污水 和 污 水 处 理 厂 的活 性 污 泥 。 12 培 养基 . 蔗 糖 3 gL Na 0 . / ,Mg 0 ,H: . L, K 1 0 /, N 330 L g S 47 0 5 0 C 05 / e O . gL K HP . /, H 自然 。 .gL F S 40 1/, 2 O4 1 L p 0 0 g
15 培 养基组分和培养条件对该茵产絮凝剂的影响 . 改变培养基碳源 、 源、 氮 初始 p 培养时间 、 H、 培养 温度及摇 床振荡速度等条件 , 测定培养 液絮凝率 。
二
蓉 o 4
!O
培 #时间 ( r h)
图 2 3  ̄ 时培养时间对絮 凝活性 的影响 02 (
絮凝取 % 4. )7 6
5. 6 8. 8 7 6
86 Z
骶2
5. 5 3
223培养基初始 p .. H值 的影响 实验结果表明,H值在 5 — , 菌体生长量多, p .7 0 0时, 絮凝效果 好。尤其是 p H值在 6 . 菌体生长最好, 0时, 絮凝率接近 9 %。 0
2. . 4培养 时间的影响 2
2 结果 与讨论
生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝性能研究
生 物 絮 凝 剂 是 一 类 由 微 生 物 产 生 的 有 絮 凝 活 性 的 代 谢 产 物 , 多 糖 、 白 质 、 维 素 等 … 。从 其 来 源 有 蛋 纤 看 , 属 于 天 然 有 机 高 分 子 絮 凝 剂 , 此 它 具 有 天 然 有 机 高 分 子 絮 凝 剂 的 一 切 优 点 。生 物 絮 凝 剂 是 一 种 也 因 新 型 、 效 、 价 、 毒 、 二 次 污 染 的 水 处 理 剂 , 能 快 速 絮 凝 各 种 颗 粒 物 质 , 其 在 废 水 脱 色 、 浓 度 有 高 廉 无 无 它 尤 高 机 物 去 除 等 方 面 效 果 独 特 。 目前 , 国 生 物 絮 凝 剂 的 应 用 大 部 分 还 处 于 实 验 室 研 究 阶段 , 正 工 业 化 的 我 真 较 少 。 土 壤 和 活 性 污 泥 被 认 为 是 筛 选 和 分 离 絮 凝 剂 产 生 菌 的 最 好 源 泉 , 其 是 活 性 污 泥 , 是 絮 凝 剂 产 尤 它 生菌 的 主要来 源 , 为活性 污 泥本 身就 是 以絮凝 性 细菌 为 中心形 成 的各种 微 生物 的聚 集体 因 液模 拟 待处理 的废 水 , 用 生物 絮凝 剂 进行 实验 , 其 絮 凝活 性及 絮凝 条 件进 行优 化研 究 。 利 对 。 所 以 本 实
活 性 较 高 且 稳 定 的 菌株 , 别 命 名 为 M1M2 M3 N 。 对 其 中 l株 进 行 絮凝 活 性及 絮凝 条 件 的研 究 , 絮凝 活 性 物 分 、 、 、5 其 质 主 要 为 菌 体 分 泌 物 , 菌 可 产 生高 絮凝 活 性 的 最 佳 絮 凝 条 件 : 于 浓 度 为 1~ g L的 高 岭 土 , 佳 助 凝 剂 为 1 该 对 9/ 最 % 的 C C 投 入 量 为 4 / ,H 值 为 9 絮凝 率 可 达 9 % , 有 良好 的热 稳 定 性 , 于 工 业 化 生产 。 a 1, 0mgL p , 8 具 适 关 键 词 : 凝 剂 产 生菌 ; 物 絮凝 剂 ; 絮 生 絮凝 活性 ; 絮凝 条 件
微生物絮凝剂产生菌的筛选_鉴定及其培养条件的优化研究
中国生物工程杂志 China B i otechnol ogy,2005,25(8):76~81微生物絮凝剂产生菌的筛选、鉴定及其培养条件的优化研究3陶 然 杨朝晖33 曾光明 邓恩建 李 晨(湖南大学环境科学与工程系 长沙 410082)摘要 采用常规细菌分离方法从土壤中筛选出一株高效絮凝剂产生菌,编号为B6。
经过形态学特征、生理生化反应及16S r DNA 序列(GenBank accessi on No .DQ115363)同源性比较鉴定该菌株为恶臭假单胞菌,命名为Pseudo m onas putida B6。
对其培养基进行研究,确定其最佳的碳源和氮源,并通过正交试验确定其最佳的培养基成分配比(ρ/g L 21)为葡萄糖15、果糖3、KH 2P O 41.0、K 2HP O 43.0、MgS O 40.1、NH 4NO 30.8、(NH 4)2S O 41.5、酵母汁0.2、NaCl 0.1。
同时对其培养条件进行研究,确定最佳的培养基初始pH 值为8.0、培养温度为30℃、摇床速度为160r/m in,以及产絮凝剂的周期变化过程。
用高岭土悬浮液对其絮凝条件进行研究,确定培养液最佳的絮凝条件。
关键词 微生物絮凝剂 絮凝微生物 16S r DNA 序列 培养条件 正交试验收稿日期:2004212226 修回日期:20052072113国家自然科学基金资助项目(50478053),湖南省自然科学基金资助项目(04JJ3004),湖南大学科学基金重点资助项目33通讯作者,电子信箱:yzh@hnu .cn 微生物絮凝剂(MBF )是由絮凝微生物在生长过程中代谢产生的一类具有絮凝活性的高分子化合物,能够聚集、沉淀水中的悬浮颗粒、金属离子、色素及有机物质,具有絮凝效果好、可生物降解的特性,对环境和人类无毒无害,不会产生二次污染,是一种高效安全的絮凝剂[1],因此越来越受到研究者的关注。
目前国外的研究者已经开发出一系列微生物絮凝剂[2~6],有的已经应用到相关废水处理和工业处理中[7~10]。
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性
环境工程学报
Chinese Journal of Environmental Engineering
Vol. 3 , No. 7 Jul . 2 0 0 9
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性
邱忠平 1 茆灿泉 1 刘源月 2 杨立中 1 王艳捷 1 肖开勇 1
2 结果与讨论
奠定初步的基础 。
211 菌种筛选和初步鉴定
1 材料与方法
经筛选得到的菌株 LB1 对高岭土悬浊液絮凝率 为 8815% , 多 次 传 代 培 养 后 絮 凝 活 性 仍 然 高 于
111 样品来源
80% ,说明具有絮凝活性的遗传稳定性 ,适合进行后
含菌样品取自成都市长安垃圾填埋场的垃圾渗 续研究工作 。LB1 的形态学特征 : 菌落不透明 , 圆 滤液 。生活污水取自西南交通大学家属区下水道污 形 ,隆起 ,边缘不整齐 ,表面湿润 、光滑 、有光泽 、粘状
Key words m icrobial flocculant ; flocculating activity; Pseudonom as sp1 LB1 ; screening; wastewater treat2
m en t
絮凝在给水和排水中均发挥着不可缺少的重要 生物工程手段实现产业化 [ 7, 8 ] ,因此 ,研究和开发微
利用 722N 型分光光度计 (上海精密科学仪器公司 ) 力实验为阳性 ;精氨酸双水解酶 、苯丙氨酸 、赖氨酸 、
在波长 550 nm 下测定 ,使其吸光度 OD550在 1125~ 鸟氨酸均为阳性 ;硝酸盐 、尿素和硫化氢实验阴性 ;
1135之间 。
不液化明胶 ,不水解淀粉 ;能利用葡萄糖 、山梨醇 、侧
微生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝特性的研究
水资 源 的短缺尤 其 是 现 实 可利 用 的 淡 水 资 源 的缺 少 日 受到 重视 , 体 的污染及 各种 污水 的处 理成 为 了学 者 益 水 们关 注 的热点 , 絮凝技 术 以其 基建 投 资 少 , 处理 时 间短 的 特点 广 泛 应 用 于 水 处 理 领 域 , 其 是 各 种 污 水 的 预 处 尤 理 。微 生 物 絮 凝 剂 ( c b l l cl t B f cu Mioi o ua 或 i oc- r a fc n o l l t为通 过直 接利用 微生 物 细胞 、 提取 物或 代谢 产 物 a) n 细胞 提取 、 制而得 到 的有 絮凝 活性 的物 质 , 精 克服 了无 机 和 有 机 高分 子 絮凝剂本 身 固有 的成本 高 、 絮凝 效果 有 限及 存在 二 次污染 且对 人体 有 害的缺 陷 , 成为 了一 种 高效 、 毒 、 无 无
过 一定 时 间的发酵 培 养 , 培 养 液进 行 絮 凝试 验 , 选 出 用 筛 具 有絮凝 活性 的絮凝剂产 生菌 。 12 1 微 生 物 絮凝 剂产 生菌初 筛 在 试 管 中加 入 lm .. OL 浓度 为 4/ gL的高 岭土悬 浊液 ,% 的 CC 1 a 1溶液 10 L .m 及 絮凝 剂样 品 10 L 轻轻 振 荡 , 置 1mn 目测 絮 凝 剂样 .m , 静 0 i, 品的絮凝 活性 判断标 准 : 与不加 絮凝剂 样 品的悬 浊 液对 先 比 , 入 絮凝剂 的高 岭土悬 浊液 是否 比不加 絮凝 剂 的悬 看加 浊液 沉降 的快 , 动 试 管 , 沉 降 下来 的颗 粒 是否 凝 聚 再摇 看
高效絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究
d i 1 .6 6 in 1 0 —5 0 2 1 .50 2 o: 03 9  ̄.s .0 7 5 X.0 00 .0 s
中图分 类号 :Q9 6 文献标识码 :A 3
到推广 应 用 的关 键 所在 。。研 究拟 从 活 性污 泥 中分 离具 有较 高絮 凝 活 性 的菌 株 ,并 对其 絮 凝特 性进 行 研 究 ,为 该菌 株 今后 的 实践 应 用 提供 相 关 参 考数 据
和 理论依据 。
将采集 的各种分 离样 品用无菌水稀释制备成 1~ 0、 1一 1 悬液 ,然 后涂 布到 基础培 养基 平板 上 ,于 0 、 0菌
高岭 土具有较 高絮凝 活性的 菌株 ,并对该 菌株 的絮凝特 性进行 了研 究 。 结果表 明 ,该菌株 絮凝最佳培 养基 和培
养条件 为 :以葡 萄糖作 为碳 源 、硫酸铵作 为氮 源,初始p H为75 .,培养 温度 为3  ̄ 0 C,培养基装量 为5mL 0 ,接 种量 为1 %,培养3d 可获得 具有 高絮凝 活性的 生物 絮凝剂 。在 以上操作条件 下 ,该 菌株 对 高岭 土悬 浊液 的絮凝 率达到
3 ℃下倒置 培养4h 7 8 ,挑取 潮湿 、光滑 的单菌落编号并 接至新鲜斜面培养基上培养并保存备用。 14 菌株 筛选 . 14 1初 筛 ..
配 制絮凝 培养基 ,在2 0 L 5m  ̄角瓶 中装入 5 【 0 mJ 培
1材 料 与方 法
1 1菌种来源 . 福 州祥坂污 水处理厂 曝气池 各点 的活性污泥 混合
接 入 初 筛 所得 具 有 絮 凝 活 性 的 菌株 ,在 1 0 / i 、 4 rm n 3  ̄恒温摇床 中振荡培养7 h 0C 2。
微生物絮凝剂产生菌的筛选
随着人类经济活动的不断发展和生活水平的日益提高,相应产生出越来越多的各种生产生活废弃物,对环境造成了巨大的破坏作用。
废水、废气、固体废弃物三大公害污染物中以废水的危害尤为突出,世界各国对于由污染而引起的水环境质量恶化现象十分重视,各种污水治理方法不断地被开发应用,其中污水的絮凝处理得到了广泛的认可和推广,絮凝剂也被广泛地应用于给水净化、工业用水与废水及城市污水处理以及污泥脱水等水处理工艺中,而且在发酵工业后处理、食品工业、选矿等的固液分离中也得到了较好的应用。
水处理工程中常用的絮凝剂有无机絮凝剂、有机高分子絮凝剂和天然高分子絮凝剂。
无机及有机高分子絮凝剂都具有一定的毒性,且会对环境造成二次污染等,会对人类健康与生态系统产生严重影响[1]。
在给水处理中使用最多的无机絮凝剂主要是无机铝盐,如聚合氯化铝(PAC),其对与原水浊度的去处有很好效果,但也会造成处理后出水中铝离子含量过高而易引起老年痴呆症等问题,聚丙烯胺(PAM)作为合成有机高分子絮凝剂的代表,虽然用量少,絮体沉降速度快等优点,但其单体有强烈的神经毒性和佷强的致畸、致癌、致突变效应,在应用上也受到很大的限制[2]。
许多国家已禁止或限制使用此类絮凝剂。
同样无机铁盐也是无机絮凝剂的主要代表,但在其使用过程中的不安全性和对环境的潜在二次污染越来越引起人们的重视。
在实际应用中使用无机絮凝剂会导致处理后的水中残留金属离子,同时产生大量的含铁等污泥,处理处置难度大。
此外铁盐有一定腐蚀性,而且容易残留铁离子,使被处理后的水带有颜色,影响水质感官。
市场上已有被替代的趋势。
有机合成高分子絮凝剂往往需要进行化学改性,而且其絮凝效能大都不如合成高分子絮凝剂,在研究和应用上有较大的局限性。
因此,研究开发安全无毒,絮凝活性高效,廉价,易于降解,不造成二次污染,和对环境友好的新型絮凝剂具有特别重要意义。
所以,微生物絮凝剂已成为该领域的研究热点,为水处理技术研究提供了一个新方向,幷引起国内外环保工作者的高度重视。
微生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝特性的研究
参考文献 【 R E F E R E N C E S 】
[ 1 ] H U T C H L N S O N J . T h e F i m l i s o f F l o w e i r n g p l a n t s I Mo n o - c o t y l e d o n s [ M] . S h a n g h a i H o u s e , S h a n g h a i ( i n C h i n e s e ) 1 9 5 5 , 7 1
贵 州 科 学3 5 ( 6 ) : 2 0 1 7
G u i z h o u S c i e n c e 5
微生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝特性的研究 木
黄雅 玲 , 强 微 , 邱成 书▲
( 成都师范学院 摘 化学与生命科学学院 , I  ̄ l J t I 成都 6 1 0 0 0 0 )
要 : 从成都 市温江区踏水镇 土壤 、 污水及 河底活性污泥 中分 离得 到 1 4支菌株 , 用高岭土 悬液来检 测分 离到 的菌株 的絮
凝 效果 , 经 多次 筛选得到 两株具有较 高絮凝 率的 菌株 , 标记 为 T一 8—1和 N一8— 2 。用 高岭土悬浮液对其絮凝条件进行研究 ,
a n C o r e s s p o n d e n t , B o t i n i c Ge r d e n Ri o d e y e n e i r o, 1 9 5 1 .
束 兰紫 色 。紫露 草 属 叠 叶草 又称 重扇 ( T r a d e s c a n t i a n a v i c u l a r s i R u p p e x , L . ) 原 产 墨西 哥东北 部 , 我 国南 北 皆有 栽培 观 赏 , 多 年生 肉质植 物匍 匐性 生长 。
生物絮凝剂产生菌的筛选及性能研究
第 3 卷 第 1 5 期
2 8笠 00
北 京 化 工 大 学 学 报
J OURNAL JNG OF BEII UNI VERS TY I OF CHEM I CAL TE CHNOL OGY
v0 . 135. No. 1 200 8
测 定 吸 光 度 As , 同 时 搅 拌 的 、 加 待 测 样 品 的 s 以 。 不 高 岭土 悬浊 液上 清 液 测 定 的 吸光 度 作 为 对 照 。 确 来 定 发 酵 液 或 絮 凝 剂 的 絮 凝 活 性 ( 絮 凝 率 来 表 用
征) 1 c。 3
本 文 主要是 从 活性污 泥和 土壤 中分 离和 筛选 产
X MX~1 模 拟 洗 煤 废 水 的 应 用 研 究 表 明 。 F对 其应 用 到处 理 实 际 洗 煤 废 水 中的 前 景 是 可 观 的 。
关键词 :微生物絮凝剂 ; 价培养 基 ; 廉 絮凝条件 ;多糖 ;红外光谱 ; 洗煤废水
中图 分 类 号 :Q 3 95
引 言
微 生物 絮 凝剂 是 利 用 生物 技 术 , 过 微 生物 发 通 酵 、 离提 取 而得到 的 一种新 型 、 分 高效 、 安全 、 能 自 且 然降 解的新 型 水 处理 剂 。 与 传统 絮凝 剂 相 比, 它不 仅可 以提高 被 絮凝 物 质 的沉 降性 能 , 且 对环 境 无 而
( Ertrp l ) R. yh o oi 所产 絮凝 剂 NO - s C 1的絮 凝效果 最 好 [ 。 目前对 微 生 物 絮 凝 剂 的 研 究 大 多停 留在 实 1 ] 验室研 究 阶段 , 远未 达 到 大 规 模 的 应 用和 工 业 化 生 产 阶段 。制 约 微生物 絮 凝剂发 展 的关键 问题 在 于生 产成本 过 高和 产量过 低 。
微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件研究
微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件研究微生物絮凝剂是一种能够有效地聚集悬浮于水中的微生物的物质,在
环境工程领域得到了广泛的应用。
而微生物絮凝剂主要由产生菌分泌的活
性物质构成,因此,对于微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件进行研究
具有重要意义。
首先,对于微生物絮凝剂产生菌的筛选,可以通过以下步骤进行:首先,首先是从水样、土壤、污泥等环境样品中获得微生物样品。
然后,利
用培养基进行菌落计数法进行初步筛选。
对于产生菌的鉴定,可以利用生
化试剂盒对筛选出的菌株进行鉴定。
接下来,对于筛选出的菌株进行传代
培养,分离纯化。
最后,通过菌落PCR或16SrRNA测序技术对菌株进行进
一步鉴定。
接下来,对于微生物絮凝剂产生菌的培养条件,可以采用以下方法进
行研究。
首先,选择正确的基础培养基,包括碳源、氮源、矿质盐和辅助
因子等。
其次,对于培养温度的选择,可以通过在一定温度范围内进行试验,观察絮凝剂的产生情况。
再次,对于培养pH的选择,也可以通过调
节培养基的pH值,观察絮凝剂的产生情况。
此外,还可以研究培养时间
和培养条件的改变对絮凝剂产出量的影响,如培养时间、培养槽容积等因素。
最后,通过培养条件的优化,如添加诱导因子、优化培养基成分等,
进一步提高微生物絮凝剂的产量和活性。
综上所述,对于微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件的研究,可以
通过菌株的初步筛选、鉴定和培养条件的优化等步骤进行。
通过这些研究,不仅可以获取高产微生物絮凝剂的菌株,还可以获得适合产菌的培养条件,为微生物絮凝剂的应用提供了有效的基础。
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其培养基成分优化
第卷第期年月兰州交通大学学报自然科学版文章编号微生物絮凝剂产生菌的筛选及其培养基成分优化李剑王拯谢春娟兰州交通大学环境与市政工程学院甘肃兰州摘要!通过菌种富集分离纯化从天然土壤中筛选出三株具有较高絮凝活性的微生物絮凝剂产生菌并对其中絮凝活性最高的培养基成分进行了正交实验找出了最佳培养基成分比例经优化后对高岭土悬浊液的絮凝率可达关键词!微生物絮凝剂培养基正交实验絮凝活性中图分类号!文献标识码!引言微生物絮凝剂是利用生物技术从微生物絮凝剂产生菌体或其分泌物提取纯化而获得的一种安全高效且无二次污染的新型水处理剂自从世纪年代日本学者在酚酞酯生物降解过程中发现具有絮凝作用的微生物培养液以来日本在微生物絮凝剂这一领域的研究工作一直处于领先地位发表了很多研究论文并获得了多项专利我国是世纪年代才开始有关研究的起步较晚目前主要还停留在实验室的研究阶段还未出现大规模工业应用本研究从天然土壤中筛选出三株絮凝活性较高的絮凝剂产生菌并对其中絮凝活性最高的的培养基成分进行正交实验探讨了培养基成分对微生物絮凝剂的产生菌的絮凝活性的影响实验部分主要仪器设备电热恒温培养箱可见分光光度计恒温振荡器离心沉淀机电子天平压力蒸汽灭菌锅材料与方法培养基的成份培养基的成份如表所示表培养基种类及成份编号培养基种类培养基成分蒸馏水中灭菌条件肉汤培养基牛肉膏蛋白胨氯化钠培养基酵母膏马丁培养基蛋白胨葡萄糖自然葡萄糖蛋白胨培养基蛋白胨葡萄糖葡萄糖酵母膏培养基葡萄糖酵母膏淀粉培养基可溶性淀粉硝酸钠氯化钾菌种的筛选菌种来源兰州交通大学某花卉培养基地内肥沃土壤筛选方法将土壤样品取溶解于蒸馏水中充分搅拌后各吸取分别接种于已编号的含培养基的锥形瓶中于恒温振荡培养后取接种入新培养基如此反复进行几次直到絮凝率提高收稿日期作者简介李剑男广州番禺人硕士研究生第期李剑等微生物絮凝剂产生菌的筛选及其培养基成分优化幅度不大为止而后选择絮凝效果较好的培养基做成固体培养基分离培养基并将其富集培养液稀释后用平板划线法进行菌种分离再将培养皿里长出来的单菌落接种入斜面培养基进行纯化培养如此反复几次直到纯化出的菌落单一不出现异类菌落为止絮凝活性的测定在比色管中加入高岭土悬浊液的及培养液上清液加上盖子上下颠倒次后静置取处上清液并以蒸馏水为参比溶液用可见分光光度计于处测量其吸光度并用以下公式计算其絮凝率絮凝率式中为原高岭土悬浊液上清液处的吸光度值为处理后的高岭土悬浊液上清液处的吸光度值结果与讨论富集培养实验将土壤样品接种入培养基于恒温振荡培养后接种入新的培养基如此反复培养次取每次培养液于的高岭土悬浊液自然沉淀后上清液在处的吸光度值为中测定其絮凝活性结果如表所示表富集培养数据培养基类型第次富集絮凝率第次富集絮凝率第次富集絮凝率第次富集絮凝率第次富集絮凝率第次富集絮凝率从表可以看出和培养基经次富集培养后絮凝活性较高则极有可能筛选出絮凝活性高的微生物絮凝剂产生菌对于培养基虽然也有一定的絮凝效果但絮凝活性不高分离难度较大故选择及培养基进行菌种分离纯化实验菌种分离!纯化经过对及富集培养液的菌种分离纯化得到了三株絮凝活性较高的微生物絮凝剂产生菌其菌落外部特征如表所示表菌落外部特征编号特征米黄色表面凸状半透明有粘性球状生长快革兰氏阳性菌白色椭圆潮湿较粘稠革兰氏阴性菌乳白色圆形半透明有光泽极粘稠表面微凸生长快革兰氏阴性菌!及对高岭土净化实验将接种入其富集培养基中恒温振荡培养后放入的离心沉淀机中后取上清液其对高岭土净化实验结果如图所示无论从投加量还是沉淀时间来看的絮凝活性都比和好而且的生长快极有必要对其培养基成分进行研究优化其培养基成分配比使达到更好的絮凝效果兰州交通大学学报自然科学版第卷图投加量与高岭土悬浊液絮凝率的关系图絮凝率随时间变化曲线对培养基成分正交实验实验采用培养基作为研究对象为了考查各成分对絮凝剂产生的影响在其他培养条件固定的情况下改变培养基成分的投加量做正交实验找出培养基成分的最佳配比本培养基共种成分为了简化实验采用五因素四水平正交实验表因素与水平见表培养基成分正交实验结果见表表培养基成分正交实验因素与水平水平淀粉硝酸钠氯化钾表培养基成分正交实验结果实验号因素淀粉硝酸钠氯化钾絮凝率第期李剑等微生物絮凝剂产生菌的筛选及其培养基成分优化从培养基成分正交实验结果表中分析组配比实验中第组的絮凝效果最佳达到可达从极差影响分析可见影响絮凝率的培养基成分因素主次顺序依次为淀粉氯化钾硝酸钠即最佳组合为即淀粉氯化钾硝酸钠结论利用肉汤培养基和淀粉培养基从土壤样品中分离筛选出了及三株微生物絮凝剂产生菌它们在投加量为沉淀时间为时对的高岭土悬浊液的絮凝率均达到以上在对培养基成分正交实验中找到了影响絮凝活性的培养基成分因素的主次顺序和最佳水平组合即为经培养基成分优化对高岭土悬浊液的絮凝率可达到参考文献!胡勇有高健微生物絮凝剂的研究与应用进展环境科学进展王镇王孔星微生物絮凝剂的研究概况微生物学通报-。
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究
微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究
从活性污泥中分离得到6株产絮凝剂的菌株,经复筛,有3株絮凝活性保持在80%以上.研究了其中一株生长能力强、絮凝活性高的M08菌株的絮凝特性,该菌种产絮凝剂的最佳条件为碳源为甘油、氮源为酵母膏、磷酸盐为K2HPO4·3H2O(5g/L)、C/N比为15、起始pH值为6、接种量为3%(v/v)、发酵温度为30℃.在此条件下以120 r/min摇床培养72h,其发酵液对高岭土悬浊液的絮凝率高于90%.活性分布表明,该菌的絮凝有效成分主要为分泌到胞外的代谢产物.
作者:张建龙慕钰文孔维宝刘雄雄马海玲作者单位:张建龙,慕钰文,刘雄雄,马海玲(西北师范大学,甘肃,兰州,730070) 孔维宝(西北师范大学,甘肃,兰州,730070;中国科学院兰州化学物理研究所羰基合成与选择氧化国家重点实验室,甘肃,兰州,730000) 刊名:甘肃农业英文刊名:GANSU NONGYE 年,卷(期):2009 ""(11) 分类号:X7 关键词:微生物絮凝剂筛选培养条件絮凝特性。
微生物絮凝剂产生菌的筛选与研究的开题报告
微生物絮凝剂产生菌的筛选与研究的开题报告一、研究背景及意义微生物絮凝剂具有结构独特、生物可降解、无毒无害等优点,是一种环保型的水处理药剂。
为获取高效的微生物絮凝剂,需要对产生细菌进行筛选和研究。
研究在市政污水处理、工业废水处理、水产品养殖等领域具有广阔的应用前景和实际意义。
二、研究内容本研究旨在从自然界中收集多种微生物,通过试管筛选和涂布分离法分离高效细菌,针对其结构和代谢特征进行分析和研究,最终选出一种高效的微生物絮凝剂菌株。
具体研究内容包括以下几个方面:1.微生物菌群分析:从自然界收集多种微生物,进行菌群分析,筛选出具有活性的微生物菌株。
2.微生物分离与筛选:采用试管筛选和涂布分离法对微生物进行分离和筛选,筛选出高效细菌。
3.菌株鉴定和结构分析:通过鉴定学和生化试验对筛选出的高效细菌进行鉴定和结构分析。
4.菌株代谢特征分析:研究代谢途径和产物组成,了解细菌的生长条件和活性。
5.微生物絮凝剂制备并性能研究:采用培养基培养筛选出的高效细菌,利用培养液提取微生物絮凝剂,通过实验测试其在处理废水中的性能表现。
三、研究方法本研究采用多种方法进行细菌的筛选和研究,具体包括:1.微生物菌群分析:采用16S rRNA基因PCR扩增和测序,对自然界中收集的微生物进行分类和分析。
2.微生物分离和筛选:采用试管筛选法和涂布分离法进行微生物细胞的分离和筛选。
3.菌株鉴定和结构分析:采用鉴定学和生化试验进行菌株的鉴定和结构分析。
4.菌株代谢特征分析:采用色谱等技术对菌株的代谢途径和代谢产物进行分析。
5.微生物絮凝剂制备和性能测试:采用培养基培养细菌,提取微生物絮凝剂,并通过实验测试其在处理废水中的性能表现。
四、研究目标1.筛选出具有高效絮凝作用的微生物细菌。
2.对高效微生物菌株的鉴定和结构分析进行深入研究,探究其代谢途径和产物组成。
3.制备高效的微生物絮凝剂,并对其性能进行测试。
4.得出高效微生物絮凝剂的制备工艺和使用方法,为水处理领域提供一种绿色、有效的新型水处理药剂。
高效絮凝剂产生菌的筛选及特性研究的开题报告
高效絮凝剂产生菌的筛选及特性研究的开题报告一、研究背景与意义水处理是当前全球环保领域的研究热点之一,其中污水的处理是其中的重要部分。
现行的污水处理技术中,絮凝技术是一种广泛应用的方法,其目的是将水中的悬浮物或颗粒物聚集成较大的颗粒,便于后续的沉淀或过滤处理。
传统的絮凝剂多从天然环境中提取,具有生物降解性和生态友好性等优点,对于化学品污染物的净化也有良好的效果。
但这类絮凝剂的制备需要较长的时间,投加量也较大,制备成本相对较高。
因此,传统絮凝剂的盛行促进了高效絮凝剂的研究。
高效絮凝剂具有结构简单、制备方便、使用量少、絮凝效果好等优点,更能适应于污水中的各种物质净化。
因此,本文将着重从高效絮凝剂产生菌的筛选和颗粒特性展开探究,为污水处理技术的完善和创新提供一定的参考与指导。
二、研究内容及方法本研究主要分为两部分:1.高效絮凝剂产生菌的筛选通过采用筛选固体培养基(Sludge Medium)培养出产生絮凝剂的菌株,对这些菌株进行形态学、生理生化、分子生物学等方面的鉴定,筛选出表现出较强絮凝效果的菌株,以明确这些菌株的种类、优越性和有效性。
2.高效絮凝剂颗粒特性的表征将最终筛选出的细菌菌株培养并提取制备出细菌菌体质粒,经酶切、PCR扩增测序等方法,对其基因组结构和功能特点进行初步探究。
此外还需对细菌组分的颗粒形态、污染物净化能力、投加量等指标进行测试,以提供数据支撑和对应用环境上的适用性作出评估。
三、预期研究成果通过对高效絮凝剂产生菌的筛选研究和高效絮凝剂颗粒特性的表征,我们将得到以下具体成果:1. 筛选出多株产生高效絮凝剂的菌株,明确其基本分类、种类表征和优越性用于实践中的应用。
2. 对高效絮凝剂的形态、颗粒形态、污染物净化能力、投加量等指标进行测试。
3. 对高效絮凝剂颗粒的基因组结构和功能特点进行初步探究。
4. 本文的研究结果将为高效絮凝剂的生物性制备和应用提供参考,对水体及有机废水的净化也将有益的推动作用。
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白、 多糖、 脂类 、 纤维素和核酸等高分子聚合物 。较无机和
有机 合成 絮凝 剂 , 微生 物絮 凝剂 具有 产生 菌易 得 、 效 、 高 无 毒 、 分解 等优点 , 易 可广 泛应 用 于污 水 处 理 、 药 工业 、 医 矿 产工 业等 方 面 。 目前微 生 物絮凝 剂 研究 中需 要 解 决 的 主要 问题 是 筛
2 0/ i 振 荡 培养 1 h 然后 以 5 的接 种 量接 到 盛 有 0 rm n下 2, % 发 酵培 养基 的发 酵 罐 中 ,O【,0 rmi 3 。 5 0/ n下进 行发 酵培 养 。 =
1 材料 与方 法 1 1 实验 材料 . 样 品来 源 : 集 污 水 处 理 厂 、 水 养 殖 场 、 流 人 海 采 海 河
满刻度 , p 调 H值 至 70 振 荡均匀后放置 5 i, 1m ., mn 取 0 L
上 清液并 以蒸馏水 为参 比溶液 , 用 紫外 可见 分光光 度 计 应 在 50 m下 测定 其 吸光度 , 5n 并用 以下 公式 计算 其 絮凝 率 。 絮凝 率 =( B / 0 A— )AX 0 % 1
微 生物 絮凝 剂 ( co i lcua t, S 是 一 类 由 Mi ba Foclns MB ) r l
微生 物产 生 的具 有 絮 凝 活 性 的次 生 代 谢 产 物 , 括 糖 蛋 包
在 2 mL比色 管 中 加 入 2 mL 0 5 高 岭 土 悬 浊 液 、 5 0 .% 1 1 C C,溶液 以及 0 5 mL % a 1 . mL发 酵上 清 液 , 馏水 补 加 至 蒸
口、 活 污水排 放 口等污 染严 重地 区 的污泥 。 生 细 菌 筛 选 培 养 基 : 萄 糖 2g 酵 母 汁 05 , 葡 0, .g
( H )N 30 5 , H P 42 , 2 P 45 , S 4・H2 N 4 2 O . g K 2 O g K H O g Mg O 7 O 0 2 , e O "H O 0 0 g N C . g H2 L, H值 7 2 . g F S 47 2 . 1 , a 10 5 , O 1 p .。 发 酵 培 养 基 : 萄 糖 2 g ( H )NO . g K P 2 , 葡 0 , N 2 ,1 5 , H: O g
株 WH一1 对 其 进行 了菌 种 鉴定 和 培 养 条件 的优 化 ’ , ,
并进行 了絮凝剂 理化 性质 的初 步研究 。
留上 清液 , 用生 理盐 水 将 菌 体 细胞 洗 涤 两 次 , 稀 释至 利 再
原体 积 , 制备 成 菌细胞 悬 液 , 后分 别 测 定 发 酵 上 清 液和 然
K2 O g HP 45 ,Mg O ・H2 . g C C20 1 , e O ・H2 S 47 O 0 2 , a 1 . g F S 47 O 0 0 g N C . g H 0 1 p . l , a 1 1 , 2 L,H值 7 2 0 .。
碳 源种 类 的选择 : 分别 采用 2 的葡 萄糖 、 % 蔗糖 、 溶 可
第2 5卷 第 5期 20 0 8年 1 O月
生 物 学 杂 志
J OUR NAL O I O F B OL GY
V0 No 5 L25 .
Oc , 00 t2 8
絮 凝 剂 产 生 菌 的 筛 选 、 养 及 产 物 性 质 研 究 培
李 红
2 6 0 40 ) ( 庆 医药 高等 专科 学校 ,安 庆 安
菌细 胞悬 液 的絮凝 活性 , 以确 定絮凝 活性 的分 布 。 14 培养 条件 优 化 . 采 用单 因素实 验 , 别 改 变 培养 基 中碳 源 、 源种 类 分 氮 及 初始 p H值 、 培养 温 度 等 因 素 , 定 菌 体 生 长 密 度 和 发 测 酵 液 的絮凝 率 , 出适 合该 菌株 产 絮凝剂 的最 佳发 酵培 养 找 条 件 。首先 将待 测菌 株从 斜 面转 接 到 培 养基 中 , 3 ̄ 于 0C,
培养温度为 3  ̄ 0C。性质研 究分析显 示, 絮凝 剂纯品 的热稳 定性差 , 其在 p H值 2 0~ . . 8 O的范 围内可以保持较 高的
絮凝活性。
关键词 : 茵种 筛选 , 微生物絮凝剂 , 培养条件 ; 絮凝 活性
中 图分 类 号 :9 . Q 33 文 献 标 识 码 : 2 20 )5— 0 1 0
摘
要 : 活性污泥 中筛选 出一株 高效产絮 凝剂 菌株 , 从 经鉴 定 为嗜 温鞘 氨 醇杆 菌( p i oat im t l p i m) Shn bc r a ohl 。 g eu h p u
采用单 因素 实验 , 结果显示该茵产絮凝 剂的最适碳 源为可溶性 淀粉 , 最适 氮源 为硫 酸铵 , 最适初 始 p H值 7 0 最适 .,
式中: A为样 品上清液在 5 0m处的吸光度值 ; 5n B为
蒸馏水 在 50 m处 的吸光 度值 。 5n
取待 测菌 株发 酵液 1 mL 8 0 rmi 离心 1 m n 预 0 ,0 0/ n下 5 i,
选新型微生物絮凝剂产生菌、 降低培养成本以及提高絮凝
活性 。
本 文研 究从 污泥 中筛 选 得 到 一 株 高效 产 絮 凝 剂 的 菌
性淀粉、 乙醇以及甘油作为发酵培养基 中的碳源 , 其余培
养 条件 不变 , 选 出最 佳碳 源 。 筛 氮 源种类 的选择 : 别 采 用 15 的硫 酸 铵 、 化 铵 、 分 .% 氯
12 菌种 筛选 及鉴 定 . 将所 采 集 样 品置 于 带 玻 璃 珠 的无 菌 水 中 , 荡 均 匀 振 后, 吸取稀 释 的样 品溶 液接种 于 分别含 上述 3 液体 培 养 种