产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检测及耐药性分析

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临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析及耐药基因和Ⅰ类整合子的检测

因。
自１８９３年在德国首次从肺炎克雷伯菌中分离到质粒介
四、ＳＬ表型测定ＥＢｓ
导的超广谱Ｂ内酰胺酶以来，一随着广谱抗菌药物尤其是１一３内酰胺类药物的大量使用，ＥＢｓ的肠杆菌科细菌耐药性产ＳＬ
日益严重，目前已成为医院感染的主要病原菌，临床治疗和给
材料与方法
一
采用ＫＢ琼脂扩散法检测８ — ５株大肠埃希菌和４株肺炎１克雷伯菌对１８种抗菌药物的耐药性，严格按照美国临床实验
室标准化委员会（ｒｉ文件２０版标准规程操作。ｃｓ）０８
六、模板制备与ＰＲ扩增Ｃ采用煮沸裂解法制备模板ＤＡ。参照文献．设计合成Ｎ３
严格按照ＮＣＳ规定的确证试验方法操作，Ｍ —Ｈ琼ＣＬ在
脂上分别贴上含及不含克拉维酸的头孢他啶及头孢噻肟纸片
对比。任何一种含克拉维酸的药敏纸片比不含克拉维酸的相应纸片抑菌环直径 ≥５ｍＥ为ＥＢｓ表型阳性，ＳＬ大肠埃希菌ＡＣ５２ＴＣ２９２在每二对纸片间直径差 ≤２ｈ肺炎克雷伯菌ｉｍ，
ＡＣ０６３在头孢他啶一对纸片中的抑菌直径差 ≥５ｍＴＣ７００Ｅ，
控制医药感染造成很大困难 … 。大肠埃希菌和肺炎克雷伯
菌是产ＥＢｓＳＬ的主要病原菌。近年来，ＥＢｓ的大肠埃希产ＳＬ
菌和肺炎克雷伯菌的检出率不断增加，且不同国家、区而地ＥＢｓＳＬ的流行株各有差异，携带的耐药基因型各不相同，其水

产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

・４・６
生虽感染控制杂志２１年１００月第９卷第１期
ＣｉＪＩｆｔｏｔｌｏ９ｏ１ａ１ｈｎｅｎｒｌＪｎ００ｎｃＣｏＶＮ２
．
实验研究．
产ＥＢｓ大肠埃希菌、ＳＬ肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析
ＧＵ－ｎ，ＨＵ－ＮＧａ－ｎ，ＣＡＲｕ — ｕ（ｕａｏｉｃａＰｅｐｌＬｅｐｉｇＡＸｉｏｐｉｇｌｉｙｎＨｎｎＰｒｖｎｉｌｏｅ’５Ｈｏｐｉｌｓｔ，ａ
Ｃｈｎｓａ４０５ａｇｈ１０。０
ｉａｎ）
［ｓａｔＯｊｃｉＴｏｓｕｙｔｅｄｓｒｂｔｎａｄｄｕ－ｅｉａｃｆｃｅｉｉｌＥｏｉｎｅｓｌＡｂｔｃｒ］ｂｅｔｅｖｔｄｉｕｕｉｎｒｇｒｓｔｎｅｏｈｒｈａｃｉ（＿ｃｌ）ａｄＫｌｉｌｈｔｏｓＥｓｃｏｂｅａ
ｐｏｕｅＢ．ＭｏｔＥＳＬｓｐｏｕｉｇｓｒｉｓｗｅｅｉｌｔｄｆｏｓｕｕ（５ｔａｎｄｃｄＥＳＬｓｓＢ－ｒｄｃｎｔａｎｒｓａｅｒｍｐｔｍ５７ｓｒｉｓ９８ｏｎｒｎ１９
顾乐平，晓平，黄蔡瑞云
（湖南省人民医院，湖南长沙［摘
方法
４００）１０５
要］目的了解某院大肠埃希菌、炎克雷伯菌产超广谱内酰胺酶（ＳＬ）肺ＥＢｓ的分布及耐药特点。

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性及产ESBLs菌株的分析

·论　著·大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性及产ＥＳＢＬｓ菌株的分析孙立群，梁金花，李荣辉（牡丹江医学院红旗医院检验科，黑龙江牡丹江１５７０１１）摘要：目的　了解２０１０年牡丹江医学院红旗医院临床分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性变化，为临床合理用药提供依据。

方法　取自２０１０年医院各临床科室送检的全部标本，对其进行菌种鉴定及药物敏感性分析，对仪器提示为产ＥＳＢＬｓ的菌种，进行确证试验。

结果　２０１０年医院大肠埃希菌检出８０株，其中产ＥＳＢＬｓ为１９株，阳性率为２３．８％；肺炎克雷伯菌检出８９株，其中产ＥＳＢＬｓ为１９株，阳性率为２１．３％；产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为０，对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ＥＳＢＬｓ菌株（Ｐ＜０．０５）。

结论　产ＥＳＢＬｓ菌株在临床的检出率越来越高，耐药率明显高于非产ＥＳＢＬｓ株，且呈多药耐药性，给临床诊治带来极大困难；加强产ＥＳＢＬｓ菌株的监测及耐药性分析，指导临床合理应用抗菌药物，对控制产ＥＳＢＬｓ菌株的播散和流行具有重要意义。

关键词：大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐药性；产超广谱β－内酰胺酶中图分类号：Ｒ３７８文献标识码：Ａ文章编号：１００５－４５２９（２０１３）０２－０４５５－０３Ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ａｎｄ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ａｎｄａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓＳＵＮ　Ｌｉ－ｑｕｎ，ＬＩＡＮＧ　Ｊｉｎ－ｈｕａ，ＬＩ　Ｒｏｎｇ－ｈｕｉ（Ｈｏｎｇｑｉ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｍｕｄａｎｊｉａｎｇ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ１５７０１１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ａｎｄ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａ　ｔｈａｔ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｈｏｎｇｑｉ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｉｎ　２０１０ｓｏ　ａｓ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｈｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ　ａｎａｌｙｚｅｒ　ｉｎ　ａｌｌ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ　ｆｒｏｍ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓ．ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｆｉｒｍｅｄｗｉｔｈ　ｄｏｕｂｌｅ　ｄｉｓｃ　ｍｅｔｈｏｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ａ　ｔｏｔａｌ　ｏｆ　８０ｓｔｒａｉｎｓ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｉｎ　２０１０，ａｍｏｎｇ　ｗｈｉｃｈ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　１９ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　２３．８％，ａｎｄ　８９ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａ　ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄ，ａｍｏｎｇ　ｗｈｉｃｈ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　１９ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　２１．３％．Ｔｈｅ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　Ｅ．ｃｏｌｉ　ａｎｄ　Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｔｏ　ｉｍｉｐｅｎｅｍ　ａｎｄ　ｍｅｒｏｐｅｎｅｍ　ｗｅｒｅ０％．Ｔｈｅ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｔｏ　ｍｏｓｔ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔｏｆ　ｔｈｅ　ｎｏｎ－ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＴｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｓｔｒａｉｎｓ　ｉｓ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｙ，ｔｈｅ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｗｈｉｃｈ　ｉｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｏｎ－ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｄ　ｓｔｒａｉｎｓ　ａｒｅ　ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ，ｗｈｉｃｈ　ｂｒｉｎｇ　ｇｒｅａｔ　ｄｉｆｆｉｃｕｌｔｉｅｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｉｔ　ｉｓ　ｎｅｃｅｓｓａｒｙ　ｔｏｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｏｆ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓ　ａｎｄ　ｇｕｉｄｅ　ｔｈｅ　ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ　ｓｏ　ａｓ　ｔｏ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｓｐｒｅａｄ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎｓ．Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ；Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ；Ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ＥＳＢＬｓ收稿日期：２０１２－０９－１５；　修回日期：２０１２－１１－１０随着广谱抗菌药物的大量应用，细菌耐药性越来越严重，已引起全社会的广泛关注。

临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析邹自英;刘媛;朱冰;曾平;连丽莎;刘霞;熊杰【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2013(034)020【摘要】目的分析该院产ESBLs大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)临床分离株耐药性.方法采用法国生物梅里埃公司的VITEK2-COMPACT全自动微生物分析仪对菌株进行鉴定和药物敏感性分析.结果 466株ECO临床分离菌株中,产ESBLs菌株297株,占63.73%;ESBLs阴性菌株169株,占36.27%.对3类以上抗菌药物耐药ECO357株,占76.61%,其中,产ESBLs菌株287株,占61.59%.329株KPN临床分离菌株中,产ESBLs菌株81株,占24.62%,ESBLs阴性菌株248株,占75.38%.对3类以上抗菌药物耐药KPN157株,占47.72%,其中,产ESBLs菌株79株,占总菌株数的24.01%,占产ESBLs菌株数的97.53%.已出现亚胺培南耐药ECO 和KPN.对于临床常用的青霉素类、头孢菌素类、氟喹诺酮类、单酰胺类抗菌药物和部分氨基糖苷类,与ESBLs阴性菌株相比,产ESBLs菌株的MIC值显著升高,耐药率显著升高(P<0.05).而对头霉素类、含酶抑制剂的哌拉西林/他唑巴坦和碳青霉烯类药物的敏感性ESBLs阳性组与ESBLs阴性组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论该院产ESBLs菌株检出率高,对多种抗菌药物耐药,及时监测ESBLs菌株的发生率及耐药趋势,对于指导临床用药至关重要.【总页数】2页(P2662-2663)【作者】邹自英;刘媛;朱冰;曾平;连丽莎;刘霞;熊杰【作者单位】成都军区总医院检验科,四川成都,610083;成都军区总医院检验科,四川成都,610083;成都军区总医院检验科,四川成都,610083;成都军区总医院检验科,四川成都,610083;成都军区总医院检验科,四川成都,610083;成都军区总医院检验科,四川成都,610083;成都军区总医院检验科,四川成都,610083【正文语种】中文【相关文献】1.产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童分离株的耐药性和基因型检测 [J], 李万华;秦惠宏;张泓;孔菁;王春2.临床产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析及耐药基因和I类整合子的检测 [J], 陶勇;姚杰;贾建安;江志奎3.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株的临床分布及耐药性监测 [J], 李光庭; 林湛; 柯水源4.老年患者尿路感染产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析 [J], 张文婧; 王佳贺5.产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌医院感染及耐药性分析 [J], 仝静因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药分析

１２质控菌株ＥＢｓ阴性质控菌为大肠埃希菌．ＳＬ（ＴＣ５２，ＥＢｓ阳性质控菌为肺炎克雷伯菌ＡＣ２９２）ＳＬ
（ＴＣ０６３。ＡＣ７００）
１３培养基由杭州天和微生物试剂有限公司生产，．抗生素纸片由英国Ｏｏ公司生产。ｘｉｄ
国临床实验室国家标准化委员会（ＬＩ２０年标准进行。以ＣＳ）０５
敏感（）中敏（）耐药（）ｓ、Ｉ、Ｒ报告结果。１６ＥＢｓ测采用ＮＣＳ９９年推荐的酶抑制剂增强．ＳＬ检ＣＬ１９纸片扩散试验，ＫｒｙＢｕｒ按ｉ－ａｅ法操作，ｂ单存纸片（头孢他啶、头
ｌ４７６
ＧａｇｉｄＺＪｕｎＺＮｖ２０Ｖ１３Ｎｏ１ｕｎｘＭｅｗａｏｒａ，ｏ．０８，ｏ．０，．１
产ＥＢｓＳＬ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药分析
马风玲
（广西南宁市第八人民医院，南宁市５００）３０１
【关键词】大肠埃希茵；肺炎克雷伯茵；广谱Ｂ内酰胺酶；超耐药性
感外，ＥＢｓ株对氨苄西林、苄西彬舒巴坦、产ＳＬ菌氨派拉西林、庆大霉素、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、曲南耐药率氨较高均在８．％以上。对阿米卡星、４８环丙沙星、方新诺明耐复药率均在＞２３以上耐药率有显著差异，四代头孢菌素５．％对如头孢吡肟敏感性较高，见表１。

产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性分析

产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性分析随着第三代头孢菌素的广泛大量使用，细菌因产生超广谱β-内酰胺酶致病菌对抗生素的耐药是临床抗感染治疗过程中经常面临的棘手问题。

抗生素耐药不仅仅是一个重要的医学问题，且已经逐渐发展成为一个严重的社会问题。

抗生素的滥用问题造成了耐药菌株的大量出现，给临床消炎和抗感染治疗造成了很大困难。

现对2007年1月至2009年12月分离得到的产ESBLs的大肠埃希菌的耐药性进行分析，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。

主要执行过程1 资料与方法1.1 菌株来源菌株为2007年1月至2009年12月住院患者的标本中分离的大肠埃希菌。

1.2菌种鉴定参照《全国临床检验操作规程》分离培养。

临床标本鉴定方法均经常规鉴定技术鉴定，采用法国Bio-Merieux公司GNB鉴定卡确认。

1.3药敏试验方法采用K-B纸片扩散法,培养基采用M-H琼脂。

药敏纸片头孢他啶(CAZ)、头孢他啶+克拉维酸(CD02)、头孢噻肟(CTX)、头孢噻肟+克拉维酸(CD03)均为英国Oxoid公司产品。

GNB鉴定卡、和 MH 培养基 ( 干粉 ) 均为法国Bio-Merieux公司产品。

其他药敏纸片为杭州天和微生物试剂有限公司产品,M-H培养基由本科室自行配制,操作方法与判断标准均严格按美国临床实验室标准化研究所美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCL S)标准。

1.4 ESBLs检测方法抗生素纸片组合为CAZ和CD02，CTX和CD03。

按标准KB法操作，35 ℃培养过夜。

如两组纸片中有任一组含克拉维酸的纸片抑菌环直径比不含克拉维酸的纸片抑菌环直径>5 mm时，即为ESBLs阳性。

1.5质量控制。

质控菌株:大肠埃希菌ATCC25922(头孢他啶:头孢他晓+克拉维酸≤2mm;肺炎克雷伯菌ATCC700603(头孢他啶:头孢他啶+克拉维酸≥5mm)。

结果评价2．1 2007-2009年共检出大肠埃希菌196 株，其中产ESBLs54株。

产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性分析

产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性分析发表时间：2013-05-22T16:52:31.310Z 来源：《中外健康文摘》2013年第13期供稿作者：肖家凤张敏徐毅[导读] 统计学方法采用WHONET5.6软件进行数据统计分析。

肖家凤张敏徐毅（四川省邛崃市医疗中心医院检验科四川邛崃 611530）【中图分类号】R969 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）13-0165-02 【摘要】目的了解本院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况，为临床合理使用抗生素提供指导。

方法收集2011年6月至2012年9月本院门诊及住院患者送检的各类细菌培养标本，采用VETEK-2全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏检测。

结果 2011年6月至2012年9月本院门诊及住院患者分离出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为361、365株，其中产ESBLs菌株分别为204株（56.5%）、69株（18.8%），产ESBLs菌株对亚胺培南、厄他培南、加替沙星全部敏感，对哌拉西林／他唑巴坦、阿米卡星敏感性较高，对其他B一内酰胺类抗菌药几乎全部耐药。

结论医院及时监测产ESBLs菌的发生率及其耐药趋势以指导临床用药至关重要。

【关键词】 ESBLs 肺炎克雷伯菌大肠埃希菌耐药性Resistant analysis of Escherichia.coli and Klebsiella.pneumoniae producing extended-spectrum β-lactamases. Xiao jiafeng, Zhangmin , Xuyi(Qionglai Medical Center Hospital , Sichuan, Chengdu) 【Abstract】 Objective To investigate detection rate of two common strains of Enterobacteriaceae (Escherichia.coli and Klebsiella.pneumoniae) producing extended spectrum β-lactamases(ESBLs) and to analyze their drug resistance. Methods The VETEK-2 automicroscan sysmex was used to identify the pathogenic bacteria and conduct drug resistance test. Results The detection rates of ESBLs-producing E.coli were 204(56.5%) stains, The detection rates of ESBLs-producing K.Pneumoniae Were 69(18.8%) stains, The drug resistant spectrum of Klebsiella.pneumoniae was similar to Escherichia.Coli.All tested strains , however, producing extended spectrum β-lactamases(ESBLs) were sensitive to imipenew and meropenem. The resistance rates were low to Piperacillin-tazobactam , amikacin, and they could be used clinically. Conclusion Monitoring the incidence of ESBLs producing strains and their drug resistant trend is essential to guide clinical administration. 【Key words】 extended spectrum β-lactamases(ESBLs) antimicrobial Escherichia coli Klebsiella pneumonia 产ESBLs菌株的耐药问题是当前全球最重要的医院耐药问题之一。

我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析(一)

我院产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析(一)摘要]目的：了解我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药情况，指导临床合理用药。

方法：对我院2005年7月～2007年12月的临床标本分离的大肠埃希菌218株，肺炎克雷伯菌195株，采用纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测，用K-B法做药敏试验。

结果：在413株菌中共检出产ESBLs菌株106株，总检出率为25.7%；产ESBLs 细菌对所有青霉素类抗生素产生耐药，对三代头孢类抗生素耐药率也达到90%以上，对磺胺类、喹诺酮类耐药率为50%～90%，对亚胺培南均敏感。

结论：产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌逐年上升，应根据药敏结果结合临床合理使用抗生素。

关键词]ESBLs；大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐药性Abstract]Objective：Tostudythedistributionandcharacteristicaboutantibioticresistanceofextend ed-s pectrumβ-lactamases(ESBLs)producingKlebsiellapneumoniaeandEsche richiacoliforguidingtheclinicaldrugusing.Methods：218isolatesofE.coliand195isolatesofK.pneumoniaestrainswerecollectedfro mJuly2005toDecember2007.ESBLs-producingisolatesweredetectedbyinhibi tor-potentiateddiscdiffusiontest.Thebacterialsusceptibilitytestingwasdone byK-Bargrdiffusionmethod.Results：Among413E.coliandK.pneumoniaeisolates,106wereESBLs-producingstrains ,theratiowas25.7%.AlloftheESBLsproducingstrainwereresistanttopenicillins,theresistantrateof3rdcephalosporinwereabove90%,theresisitantrateofsulfo namidesandquinoloneswere50%～90%,allisolatesweresusceptbletoimipenem.Conclusion:TheprevalenceofES BLs-producingE.coliandK.pneumoniaeseemsincreasing,itisveryimportantto useantibioticsreasonablyandadopteffcitivemeasureinclinical. Keywords]ESBLs;Escherichiacoli;Klebsiellapneumoniae;Antibioticresistance 目前，随着三代抗生素的应用，产ESBLs的细菌越来越多，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是最常见的产ESBLs细菌。

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药分析

ａｎｄｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍｌｉｎｅｓｔｒａｉｎｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎａｎｄｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓｏｆＥＳＢＬｓ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄ
ＣｏｌｉａｎｄＫｌｅｂｓｉｅｌｌａＰｎｅｕｍｏｎｉａｅ
ＺＨＵＧｕｏｙａｎ
Ｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｎｃｈａｏｙａｎｇｈｏｓｐｉｔａｌｃｌｉｎｉｃａｌｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｈａｏｙａｎｇ，ＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ１２２０００，Ｃｈｉｎａ
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｘｐｌｏｒｅＥＳＢＬｓｐｒｏｄｕｃｉｎｇＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄＫｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．
ＭｅｔｈｏｄｓＦｏｒＪｕｎｅ２０１３Ｊｕｎｅ－２０１４ｈｏｓｐｉｔａｌｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｃｅｎｓｏｒｓｈｉｐｓｐｅｃｉｍｅｎｓｗｅｒｅｃｕｌｔｕｒｅｄｕｓｉｎｇＶＩＴＥＫｂａｃｔｅｉｒａｌｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ

产ESBLS大肠埃希菌和克雷伯菌的耐药性分析

１３细菌鉴定．
细菌鉴定、结果判断菌株鉴定使用的ＡＩ０Ｐ一２Ｅ鉴定板条结合法国生物梅里埃ＡＩＰ鉴定系统进行鉴定判断。药敏试验采用ｋ—Ｂ纸片扩散法，判断标准按美国国家临床实验室标准委员会（ＣＬ）０３版标准执行。ＮＣＳ２０
耐药。
关键词：ＳＬ；ＥＢＳ大肠埃希菌；克雷伯菌；药敏试验中图分类号：４６Ｒ４文献标识码：Ａ文章编号：７２３（０８０一０９们１２— ６９２０）４Ｏ０一６
随着Ｂ一内酰胺酶抗菌药物在Ｉ的广泛应用，临床其耐药菌株也迅速增加，尤其是产超广谱Ｂ一内酰胺酶（ＳＬ）ＥＢＳ菌株引起的耐药问题引起临床高度重视，ＳＬ主要产于大ＥＢＳ其肠埃希菌及克雷伯菌，ＳＬＥＢＳ能水解绝大多数头孢菌素类，青霉素和１一内酰胺类抗生素，３且对氨基糖苷类，喹诺酮类和磺胺类交叉耐药，已成为临床治疗难度最突出的问题。为此，对延安大学附属医院２００ — １～０７—１３０５— １３２０２— １分离的产ＥＢＳ的大肠埃希菌及克雷伯菌耐药性对比分析如下：ＳＩ
素的耐药率比较，大肠埃希菌非产ＥＢＳ大肠埃希菌９ＳＬ６株
和产ＥＰＳＳＢ大肠埃希菌ｌ，０株克雷伯菌非产ＥＢＳ菌９ＳＬ７
株，ＥＢＳ克雷伯菌菌株１，产ＳＬ３株对抗生素的耐药见表１：
生，
砜
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ＥＢＳ菌ＳＫ和非产ＥＢＳ菌对抗生素的耐药率（）ＳＬ％

产ESBLs酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

ｔｅｓｔ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＥ．ｃｏｌｉｐｒｏｄｕｃｉｎｇＥＳＢＬｓｗａｓ２７．１％．ａｎｄｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＫ．ｐｎｃｕｍｏｎａｅｉｐｒｏｄｕｃ — ｉｎｇＥＳＢＬｓｗａｓ４０．５％，ＥｃｏｌｉａｎｄＫｐｃｕｎｍｏｎｉａｅｈａｄ１００％ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｒａｔｅｔｏｉｍｉｐｅｎｅｍａｎｄｍｅｒｏｐｅｎｅｍ，ａｎｄｔｈｅｙｗｅｒｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅｔｏｃｅｆｏｘｉｔｉｎ，ｐｉｐｅｒａｃｉｌｌｉｎ／ｔａｚｏｂａｃｔａｍ，ａｍｉｋａｃｉｎ，ｂｕｔｔｏｏｔｈｅｒａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓ，ｈｅｔｒｅｓｉｓａｎｔｃｅｒａｔｅｏｆｈｅｔｍｗｅｒｅｈｉｇｈ．Ｔｏｔｈｅｓａｍｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ，ＥＳＢＬｓｐｏｓｉｔｉｖｅｓｒａｔｉｎｓｈａｄｈｉｇｈｅｒｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｔｅｔｈａｎＥＳＢＬｓｎｅｇａｔｉｖｅＥＳＢＬｓｓｒｔａｉｎｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＡｃｃｏｒｄｔｏｔｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｄｒｕｇｓｅｎｓｉｔｉｖｅｔｅｓｔ，ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｃｏｕｌｄｂｅｔｈｅｂｅｓｔｃｈｏｉｃｅｔｏ

大肠埃希菌ESBLs检测及其耐药性分析

大肠埃希菌ESBLs检测及其耐药性分析发表时间：2011-02-15T11:49:53.967Z 来源：《中外健康文摘》2010年12月第34期供稿作者：吴玉芳[导读] 目的调查我院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠杆菌（EC）阳性率及其耐药性吴玉芳（常州市武进中医医院常州武进 213161）【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）34-0038-02【摘要】目的调查我院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠杆菌（EC）阳性率及其耐药性。

方法采用k-B纸片扩散法对大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶进行筛选，药敏试验同样用纸片法。

结果 127例大肠杆菌78例为ESBLS。

结论我院ESBLS阳性率较高,临床要合理使用抗生素,控制滥用抗生素,防止ESBLs的产生与传播。

【关键词】大肠埃希菌 ESBLs 耐药性ESBLs producing Escherichia coli detection and analysis of drug resistance Wu Yufang The traditional Chinese medicine hospitale of Changzhou Wujin （ Jiangshu Changzhou 213161) 【Abstract】Objective To investigate the positive rate and drug resistance of ESBLs-producing Escherichia coli in maternity department of our hospital. Methods K-B slip method was used To select ESBLs produced by Escherichia coli, the same way to susceptibility test Results 78 of 127 Escherichia coli strains produced ESBLs. Conclusions The positive rate of ESBLs was high in our hospital, to prevent the production and dissemination of ESBLs , the antibiotics should be used reasonable and should be controlled. 【Key words】Escherichia coli ESBLs drug resistance 细菌的耐药早已成为全球性问题,随着广谱抗生素的广泛使用和不合理应用，细菌耐药性日趋严峻。

产ESBLS大肠埃希菌检出率及耐药性分析

产ESBLS大肠埃希菌检出率及耐药性分析医学检验杂志2010年l2月箜鲞塑!』型ry'竺.:307【检测报告】【DetectionReport】产ESBLS大肠埃希菌检出率及耐药性分析DETECTIONRATEANDDRUGREsISTANCEOFESBLS—PRODUCINGCHERICHIACOld权小玲徐修礼陈潇(1.陕西杨凌示范区医院检验科,陕西杨凌712100;2.第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心,西安710032)摘要[目的]了解近三年产超广谱p内酰胺酶(ESBLS)的大肠埃希菌检出率和对抗菌药物的耐药情况.[方法]细菌培养分离采用常规方法,细菌鉴定应用VTECK一2全自动细菌鉴定分析仪.ESBL酶株检测采用双纸片确认法,抗菌药物敏感试验采用K—B纸片扩散法,按CLSI规定的标准进行.[结果]3年内从临床感染的标本中共分离获得l5l0株大肠埃希菌,产ESBL酶的百分率为57.5%?;各年度产ESBL酶检出率分别为54.4%,55.5%和63.0%.产酶菌对头孢呋辛,头孢曲松,头孢他啶几乎全部耐药,对氨苄西彬舒巴坦,哌拉西林/他唑巴坦,头孢哌N/舒巴坦耐药率分别为40.0%,10.0%和1.0%左右,对环丙沙星和阿米卡星耐药率分别为70.0%以上和20.0%左右,对亚胺培南和美罗培南全部敏感.[结论]三年来,产ESBLS大肠埃希菌检出率呈上升趋势,产酶菌对含酶抑制剂复合抗菌药物耐药性也呈上升趋势,这与近几年来头孢类抗菌药物临床广泛,大量应用有关,应引起临床医师高度重视.对产酶菌引起的重度感染,应首选碳青酶烯类治疗.关键词大肠埃希菌;超广谱B内酰胺酶;抗菌药物;耐药性DetectionrateanddrugresistanceofESBLs—producingEscheHchiacoliOuanA2aoling,XuXiuli,ChenXiao.DepartmentofLaboratoryTests,Y anglingHospital,Ya ngling712100,ChinaAbstract[0bjective]Tostudythedetectionrateanddrugresistanceofextended—spectrump —Lactamases(ESBLs)inEscherich～acoliduringthelastthreeyearsinahospita1.IMethodsConventionalmethodswereemploye dforthecultivation.isolationanddetectionofbacteria,andtheVTECK一2analyzerwasalsousedfortheautomaticidentification.Thedouble—disksynergytestwasperformedtocon—firmESBLs—producingstrains,andKirby—Bauer(K—B)methodwasusedfortheantimicrobialsusceptibilitytestinaccordancewiththe standardissuedbyClinicalandLaboratoryStandardsInstitute(CLSI).[Results]1510Eseher ichiacolistrainshavebeenisolatedinspeci—menscollectedfrompatientsinlastthreeyears.andtheprevalenceofESBLswas57.5%.Thea nnualdetectionrateofESBLswas54.4%.55.5%.63.0%respectively.ESBLs—producingstrainswerefoundtohaveresistancetoalmostallofcefuroxime.ceflriaxoneandC efiazi—dime.Theresistanceratetoampicillin/sulbactam,piperacillirv'tazobactam,cefoperazone/s ulbactam,ciprofloxacin,amikacin,imipen—em,meropenemwas40%,10%,1%,70%,20%,0%,0%respectively.[Conclusion]Thedetec tionrateofESBLs—producingEsch～erichiacoliisontheriseinthehospitalduringlastthreeyears.ToB—lactamaseinhibitorsoneofcompositeantimicrobialagents,thedrug resistanceofESBLs—producingEscherichiaeolia]soshowsanupwardtendency.Thisisowingtoextensiveandabu ndantclinicalapplica～tionofcephalosporinantibioticdrugsinrecentyears.Therefore,moreattentionshouldbepai dtobyclinicaldoctors.ThesevereinfectedpatientscausedbyESBLs—producingEscherichiacolishouldbepriorcureusingofcarbopenems. KeywordsEscherichiacoli;Extended—spectrumbetalactamasc;Antimicrobialagen~;Drugresistance[中图分类号]R378.2[文献标识码]B[文章编号]1606—8025(2010)06—307—02大肠埃希菌是临床感染的重要病原菌,其ESBLS的产生播散已日趋严重,产ESBLS大肠埃希菌耐药率也越来越高.对大肠埃希菌产ESBLS情况及产ESBLS菌耐药情况的监测是临床微生物检验的重要内容.为了有效治疗大肠埃希菌引起的感染,指导临床合理使用抗菌药物,我们把我院近三年临床分离的大肠埃希菌产酶状况及耐药性进行了汇总分析,现报道如下.1材料与方法1.1材料1.1.1菌株来源收集2007年1月～2009年12月临床各种感染标本中分离出的大肠埃希菌共1510株.[作者简介]权小玲(1980一),女,检验师,主要从事I『缶床检验工作.通信联系人,E—mail:***************.en1.1.2培养基和药敏纸片M—H琼脂培养基购于北京奥博星生物有限公司;抗菌药物纸头孢吡肟(FEP),阿米卡星(AMK),氨苄西舒巴坦(SAM),哌拉西林/他唑巴坦(TZP),头孢呋辛(CXM),头孢曲松(CRO),头孢他啶(CAZ),环丙沙星(CIP),头孢哌酮/舒巴坦(CFS),亚胺培兰(IPM),美罗培兰(MEN),头孢噻肟,头孢噻肟/克拉维酸,头孢他啶/克拉维酸均购于温州康泰公司和英国OXOID公司.1.1.3仪器VTECK一2全自动细菌鉴定分析仪和麦氏比浊仪购于法国生物梅里埃公司.1.2方法1.2.1菌株分离与鉴定常规方法培养分离和纯化,细菌应用VITEK一2全自动细菌鉴定仪鉴定到种.1.2.2ESBLS筛选试验将临床分离的大肠埃希菌在进行常规药敏试验时,如抑菌圈直径,头孢他啶≤22mm,氨曲南≤匡堂捡验查箜笙!鲞笙塑seJournalofMedicalLaboratoryTeehno10.Dec2010.V o1.11N0.627mm,头孢噻胞≤27am或头孢曲松≤25mm,有其中之一者疑为产ESBLS菌株,需要进行确证试验.1.2.3ESBLS确证试验采用CLSI推荐的酶抑制剂增强纸片扩散试验.将0.5麦氏单位菌液均匀涂布M一H平皿,将头孢噻肟(30g)和头孢噻肟/克拉维酸(30l0g),头孢他啶(30g)和头孢他pY_/克拉维酸(3010g)贴在涂有菌液的M—H平皿上,35~C孵育18h,测量抑菌圈直径,两对纸片或其中一对直径相差i>5mill,即为产ESBLS菌株.1.2.4药敏试验采用K—B纸片扩散法,将0.5麦氏单位菌液均匀涂布M—H平皿上,静置10min,贴上药敏纸片,每个纸片中心至少相距24mm,35~(2孵育18h,结果按CLSI2009年规定的进行.2结果2.1产ESBL酶大肠埃希菌的检出率3年中共分离出大肠埃希菌1510株,产ESBLS的比率为57.5%,各年度的产酶率见表1.表1产ESBLS大肠埃希茵的检出率Tab1DetectionrateoftheESBL—producingE.co//2.2产ESBLS大肠埃希菌对抗菌药物的耐药率各年度产ESBL酶大肠埃希菌对11种抗菌药物的耐药率见表2.表22007年一2009年产ESBLS大肠埃希菌对抗菌药物的耐药率Tab2DrugresistantrateoftheESBL—producingE.coliduring2007—20093讨论随着第三代头孢菌素等超广谱13～内酰胺类抗菌药物的广泛使用,临床检出的大肠埃希菌产ESBLS率不断上升.ESBLS 可水解这些广谱头孢菌素类药物而使其失活,同时由于质粒介导,可以通过结合,转化和转导等形式,使耐药基因在不同细菌中传递扩散而导致耐药细菌的广泛传播..本次调查显示大肠埃希菌产ESBL酶的比率呈逐年上升趋势,这与国内诸多报道基本一致,同时也存在地区性差异,这可能与各地区抗菌药物的使用种类有关.本院产ESBLS 大肠埃希菌检出率处于较高水平,主要原因可能为:(1)第三代头孢菌素的广泛应用,由于第三代头孢菌素可能诱导细菌产生ESBLS,应用越多,细菌产ESBLS越普遍,即产生了抗生素选择性压力j,;(2)患者多为复杂疑难病症,并发症多,住院时间长,疗程长,抗菌药物使用周期长且不规范,使病原菌发展产生耐药.表2药敏结果可见,产ESBLS大肠埃希菌耐药情况严重,对同一药物的耐药率有逐年上升趋势.对1—3代头孢菌素几乎全部耐药,临床不应使用这些药物治疗产ESBLS菌引起的感染.对第四代头孢菌素耐药率为50%左右,因根据药敏结果使用.含酶抑制剂复合抗生素头孢哌酮/舒巴坦,哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低(可能为舒巴坦和他唑巴坦对质粒介导产生的各种ESBLS是不可逆的抑制剂)可作为治疗产Es—BLS菌引起感染的理想药物;对氨苄西林/舒巴坦耐药率为4(】%以上,可能与复合剂中所含基础抗菌药物的抗菌谱较窄以及酶抑制剂的种类及含量有关,导致其对ESBLS菌株的活性较差,应根据药敏结果使用.对亚胺培南和美罗培南均敏感,故对产ESBLS菌引起的重症感染,应首选碳青酶烯类抗菌药物治疗.环丙沙星耐药率连续三年均在70%以上,故对产酶菌引起的感染应慎用此类药物,如临床需要使用,可采用与阿米卡星联合应用,以减少耐药突变体的产生.总之,大肠埃希菌产ESBLS的检出率及产ESBLS菌耐药率有逐年上升趋势,这与近几年来头孢类抗菌药物临床广泛,大量应用有关,应引起临床医师高度重视.临床应大力加强抗菌药物合理使用,特别是头孢类和喹诺酮类,这对有效控制产ESBLS菌株产生和流行扩散具有重要现实意义.参考文献[1jClinicalandLaboratoryStandardInstitute(CLSI)Performancestand—ardsforantiulierobialsusceptibilitytesting;19thinformationalsupple—ment[M].2009,CLSI,MIO0一S19.[2]顾乐平,黄晓平,蔡瑞云.产ESBLS大肠埃希菌肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析[J].中国感染控制杂志,2010,9(1):46—48.[3]陆丽,应春妹.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析[J].中国感染与化疗杂志,2009,9(5):360—364.[4j周田美,董晓勤,赵洪峰,等.产超广谱D一内酰胺酶菌的检测及药敏分析[J].中华医院感染学杂志,2003,13(5):484—485.[5]刘明涛,孙恩华.环丙沙星与阿米卡星联合减少大肠埃希菌耐药突变体的研究[J].中华医院感染学杂志,2009,19(17):2245—2247.(收稿日期:2010-07—16)。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检测及耐药分析

（）材；于Ｐ１取用ＣＲ和尿索酶试验的各二块粘膜标本
分别取自胃窦部和胃体中下部。如为癌肿，取材处பைடு நூலகம் 则
距癌变病灶４ｍ以上。ｃ
（）速尿素酶实验：用ＨＰ２快采ＵＴＳ — ＨＬ０Ｑ４型试剂盒（建三强生化有限公司）阳性呈淡黄色一桔红福。色，性无显色反应。阴（）Ｃ法检测，试剂来源：圳海得威有限公司）３ＰＲ（深操作按试剂盒说明书进行。（）计学处理：组病例Ｃｇ阳性率比较采用４统四ａＡ
维酸的纸片问抑菌环直径相差≥５ｍｍ，可证实为即
ＥＳＢＬｓ阳性。
１１菌株来源：有菌株来源于我院住院及门诊病．所人送检的各类型标本，肠埃希菌２２株，炎克雷大３肺伯菌７６株。１２仪器及鉴定卡：法国梅里埃生物公司生产的．用全自动微生物分析系统ＶＩＫ６ＴＥ０进行检测，定卡鉴
ＥＳＬ，标准纸片扩散法进行操作，要符合下面任Ｂｓ按只何一项指标，怀疑产ＥＳＬ。头孢他啶 ≤ ２ｍｍ，即Ｂｓ２头孢噻肟 ≤ ２ｍｍ，孢曲松 ≤ ２ｍｍ，曲南 ≤ ２ｍｍ。７头５氨７
维普资讯
山西预防医学２０年８月第ｌ眷第＿塑０２１苎Ｉ

产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药分析

产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药分析摘要】目的监测并分析我院2010年1月至2012年12月间临床分离的2341株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药变化,为临床合理使用抗菌药物提供依据。

方法对分离的2341株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,用筛选和确证试验确认产ESBLs菌株,用WHONETS.5软件进行数据分析。

结果 1807株大肠埃希菌产ESBLs的有982株,占54.3％; 534株肺炎克雷伯菌产ESBLs的有206株,占38.6％.产ESBLs菌株的耐药性显著高于非产ESBLs菌株(P＜0.05),产ESBLs菌株呈多重耐药。

结论三年来产ESBLs菌的检出率与耐药率呈总体上升趋势,在抗感染治疗过程中,临床应根据药敏结果合理选择抗菌药物,特别是加强对产ESBLs菌株及其耐药性监测,以减缓细菌耐药性的产生。

【关键词】大肠埃希菌肺炎克雷伯菌 ESBL 耐药性大肠埃希菌和肺炎克雷伯氏是社区和医院获得性感染常见的致病菌，临床抗生素的不合理使用往往导致其在抗生素的选择性压力作用下获得并维持耐药性，通过质粒、整合子等多种介质在相同或不同种属之间传播转移，感染的多重耐药情况日益严重，对β-内酰胺类、氨基糖普类、哇诺酮类抗生素的耐药尤其明显，给临床治疗带来很大困难。

现将本院3年来分离的株大肠埃希菌氏和肺炎克雷伯氏的耐药情况和产ESBLs作一分析,以期为临床感染治疗提供有效的实验依据,报告如下：1 材料与方法1.1标本来源：取自2010年1月～2012年12月本院门诊及住院患者各类标本,包括痰液、尿、脓液、胆汁、血液、白带等。

1.2采用法国生物梅里埃ATP细菌分析仪和配套ID32E鉴定卡。

1.3 药敏实验：18种抗生素纸片由英国Oxoid公司提供。

用纸片扩散法(K-B)法进行常规药敏检测, 药敏结果判断及质量控制采用美国NCCLS2012年标准。

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析

文章编号:1006-3110(2004)06-1142-03【论　著】产ESBL s肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析张阮章,王沙燕,卢月梅,何　林,陈升汶摘要:　目的　了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。

　方法　用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株,用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC),分别用TEM、SHV 和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR),并对结果进行分析。

　结果　产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100%);其次为头孢吡肟(84.4%),哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71.9%和70.3%。

PCR 扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81.3%、65.6%和18.8%;53.1%的菌株同时携带多个基因。

　结论　该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高;最常见的基因型是SHV,其次为CTX-M。

关键词:　肺炎克雷伯菌;超广谱β-内酰胺酶;药敏试验;基因分型中图分类号:R-331 文献标识码:AAn Analysis of G enotype and Antibiotic R esistance of ESB Ls-producing K lebsiella Pneumoniae　ZHAN G Ruan-zhang, WAN G Sha-yan,L U Yue-mei,et al.(Shenzhen People’s Hospital,2nd Aff iliated Hospital of Medical College,J inan University,Shenzhen518020)Abstract:　Objective　T o understand the profile of genotype and antibiotic re sistance of strains producing extended spectrum beta-lactamase s(ESBLs).　Methods　46ESBLs-producing K lebsiella pneumoniae strains were determined by phennotyic con firmatory te st.MICs of antibiotic to the isolate s were determined b y the agar dilution method.The pre sence of the TE M,SH V and CTX-M gene s were determined by specific PCR assays.　R esults　MIC te st show the se strains were 100%susceptible to imipenem,84.4%to cefepime,71.9%to piperacillin/tazobactam,70.3%to ciprofloxacin.Of all ES2 BLs,81.3%were SH V,65.6%were CTX-M and18.8%were TE M.53.1%of strains carried more than one type of ES2 BLs gene.　Conclusions　ESBLs-producing K lebsiella pneumoniae showed mo st susceptibility to imipenem.The mo st commom ESBLs in K lebsiella pneumoniae was SH V in our ho spital,and the next was CTX-M.K ey w ords:　K lebsiella pneumoniae;Extended spectrum beta-lactamase s;Antibiotic re sistance;Genotyping 超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum beta-lactamases, ESBLs)是由质粒介导的耐药性酶,它不仅能水解青霉素和第一、二代头孢菌素,还能水解第三、四代头孢菌素及氨曲南等,给临床抗感染的治疗带来极大挑战。

产β-ESBLS大肠艾希氏菌和肺炎克雷伯病原菌的耐药性分析

转导等方式在细菌种属之间进行传递，导致耐药现象的扩引如表中所示，一旦该菌产一ＳＬ，不但耐药。ＥＢＳ作者单位：河南省郑州市第七人民医院（５０６）４００
治疗对及控制院内感染的暴发举足轻重．以说合理使所用抗菌药物迫在眉睫。ＥＢＳ阳性菌株的产生是细菌长期在抗菌药物的ＳＬ作用下为适应环境而不断变异的结果。产一ＥＢｓＳＬ菌株的出现与传播除与住院患者的细胞免疫功能下降、器官移植、介入治疗、呼吸机应用等危险因素相关外，在很大程度上取决于临床广谱内酰胺类抗生药物特别是第三代头孢菌素的使用。随着３，４代头孢的使用增加阳性菌株检出率升高，给临床治疗带来了极大的困难。本分析中，分离出的ＥＢＳ阳性菌株大多ＳＬ是住院时间较长、免疫力低下、器官移植、上呼吸机的病人。所以说，临床上应加强对以上病人的监测，
ＥＢＳ（＝８耐药率（ＳＬ＋ｎ３）％）
肺炎克雷伯菌３４
ＥＢＳ（＝９耐药率（ＳＬ＋ｎ２）％）
对分离出的产ＥＢＳ大肠艾希氏菌和肺炎克雷伯病原ＳＬ进行耐药分析．现将结果汇总如下。
１资料与方法
１资料菌株２０年１．１０８月至２１００年１月从临床科室送检的１８０３份标本，进行普通培养、鉴定及药敏。去除同一患者，同一部位，７ｄ内感染的重复病原菌。１细菌鉴定及药敏试剂根据《－２全国临床检验操作规程》第三版操作要求分离培养；应用ＢｃＩＴ全自动微ａｔＳ — 生物分析系统。药敏结果参照美国国家临床试验室标准化委员会（ＣＳ临床试验室标准化研究所（ＬＩＮＣＬ）／ＣＳ）所制定的药敏试验执行标准。１质控菌株金黄色葡萄球ＡＣ２９３大肠埃希氏＿３ＴＣ５２菌ＡＣ２９２铜绿假单胞菌ＡＣ２８３产ＥＢＳ肺ＴＣ５２ＴＣ７５ＳＬ炎克雷伯菌均购自卫生部临检中心。

产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的监测及其耐药特性分析

中图分类号：Ｒ４４６文献标识码：ＢＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７１．３１４１．２０１３．１２．１６９
０引罱随着三、四代头孢菌素等新型Ｂ一内酰胺类抗生素在临床上广泛使用，导致大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌等革兰阴性杆菌极易产生超广谱Ｂ一内酰胺酶，因其耐药范围广，流行呈增长趋势 …。为此，我们对我院２０１２年１月至２０１２年１２月分离检测出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ＥＳＢＬｓ情况进行研究，并就其对ｌ５种抗生素的耐药性进行分析。
进行细菌培养和分离；确证试验为ＣＬＩＳ／ＮＣＣＬＳ推荐的纸片扩散确认法；药敏试验采用Ｋ — Ｂ纸片扩散法。结果判断按ＣＬＩＳ／ＮＣＣＬＳ的标准， “ 中介 ”结果归人 “ 耐药 ”统计。
１．２．２ＥＳＢＬｓ检测
１．２．３质量控制使用大肠埃希菌标准株ＡＴＣＣ２５９２２与铜绿假单胞菌标准株ＡＴＣＣ２７８５３，对细菌鉴定和药敏试验Ｋ —Ｂ法进行质
量控制；使用大肠埃希菌ＡＴＣＣ５１４４６（ＥＳＢＬｓ阳性株）和肺炎克雷伯Ｌｓ阳性株）对ＥＳＢＬｓ确证试验进行质量控制。试验结果表明，上述质控结果均符

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文章编号:1009-2811(2009)02-71-02产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检测及耐药性分析刘水音1,何晓锋2,吴　镝2,张　虎2,焦力群2(1黑龙江省大庆龙南医院检验科,大庆　163453;2空军总医院感染控制科,北京　100142) 摘要:目的　研究产ESBL s大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检测及耐药性,指导临床合理应用抗菌药物。

　方法　采用初筛试验和确证试验对临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌进行检测,以确定产ESBLs菌株,并进行抗生素耐药性分析。

　结果　产ESBL s菌在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的检出率分别为44.8%和23.6%,对亚胺培南最为敏感,对头孢唑啉和氨苄西林耐药。

　结论　临床对产ESBLs细菌治疗以碳青霉烯类药物为首选,含酶抑制剂复合药物部分有效。

关键词:β内酰胺酶类;大肠杆菌;克雷伯菌,肺炎;药物耐受性中图分类号:R971.3 文献标识码:AESBLs producing escherichia coli and klebsiella pneumoniaedetection and analysis of drug resistanceLIU Shui-yin,HE X iao-f eng,WU Di,et al(Hei long j iang Daqing Long South Hospital Laboratory Medicine,Daqing163453,China) Abstract:Objective　To study the ESBLs producing Escherichia coli and Klebsiella pneum oniae detectio n and drug resistance to guide clinical rational use of antimicro bial agents.　Methods　The screening test and confirmato ry test ag ainst clinical iso lates of Escherichia co li,Klebsiella pneum oniae testing to determine the strains producing ESBLs and conduct analy sis of antibiotic resistance.　Results　The bacteria producing ESBLs in E.coli and Klebsiella pneum oniae in the detection rates we re44.8%and 23.6%,the most sensitive to imipenem,fo r cefazo lin and am picillin resistance.　Conclusion　ESBLs pro ducing bacteria on the therapy to carbapenem drug s of choice and compound drugs containingβ-lactamases inhibitor s partially effective.Key words:Beta-lactamases;Esche richia coli;Klebsiella pneumo niae;Drug Tolerance 超广谱β-内酰胺酶(ex tended-spectrumβ-lac-tamases,ESBLs)主要是由质粒介导,它能赋予细菌对头孢菌素类、青霉素类、单酰胺类和氨曲南等抗菌药物的耐药。

ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生,以临床常见的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,所以,ESBLs的产生增加了临床治疗的难度。

为了解我院近期ESBLs菌的产生情况和耐药特性,指导临床合理用药,我们对2007年7月1日～2009年收稿日期:2009-06-105月30日以来从住院病人送检标本中分离出的致病菌进行了总结,对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况及耐药特点进行了分析,现报告如下:1　材料和方法1.1　菌株来源:实验菌株均来自2007年7月1日～2009年5月30日我院住院病人送检的标本。

质控菌株为大肠埃希菌A TCC25922,肺炎克雷伯菌A TCC700603。

1.2　抗生素纸片　购自英国OXOID公司。

1.3　仪器　采用V IEK2-co mpact公司全自动微生物鉴定仪鉴定至种的水平。

1.4　方法　常规药敏试验采用Kirby-Bauer纸片扩散法。

ESBLs的确证试验:采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)的规定的判定标准,使用两组抗菌药物,分别是用头孢他啶(CAZ,30g/片)和头孢他啶加克拉维酸(CAZ/CLV30μg/10μg)、头孢噻肟(CTX, 30μg/片)和头孢噻肟加克拉维酸(CTX/CLV,30μg/ 10μg)。

两组抗菌药物中,任何一组的抑菌环直径差值≥5mm判断为ESBLs阳性。

2　结果2.1　不同菌种产ESBLs的检出率　自2007年1月1日～2009年5月30日以来,我院住院病人细菌总数为5002株,其中大肠埃希菌检出402株,肺炎克雷伯菌检出269株。

大肠埃希菌检出产ES-BLs菌180株,占大肠埃希菌总数的44.8%;269株肺炎克雷伯菌67株,占肺炎克雷伯菌总数的23.6%。

2.2　大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性　大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对临床常用的氨苄西林、头孢唑啉和庆大霉素的耐药性比较强,对头孢他啶和头孢吡肟保持较高的敏感性,对亚胺培南的敏感率为100%。

另外,对含有酶抑制剂的抗生素复方制剂的敏感性高于同种抗生素单方制剂。

具体结果见表1。

表1　大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药率(%)抗生素大肠埃希菌株数耐药率(%)肺炎克雷伯菌株数耐药率(%)氨苄西林16195.025792.6头孢唑啉22744.131278.8庆大霉素39963.426733.3阿米卡星40118.226911.5头孢西丁37914.824914.5头孢他啶40123.926819.4头孢噻肟39869.126533.2头孢吡肟37344.025118.3头孢哌酮/舒巴坦3745.92492.4头孢曲松40071.526936.1头孢哌酮40171.826837.7亚胺培南4010.02680.0哌拉西林40884.326948.3哌拉西林/他唑巴坦1298.51006.0阿莫西林/克拉维酸40116.226811.9环丙沙星38980.525838.0安曲南40147.626828.03　讨论细菌的耐药早已成为全球性问题,并在世界范围内流行。

ESBLs是β-内酰胺酶个别氨基酸的突变形成的,迄今为止从TEM来源的有70多种, SH V来源的也有20多种[1]。

ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生,其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌较多见。

本研究中产ESBLs菌的检出率在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中分别为44.8%和23.6%,与文献报道基本一致[2]。

由于广泛使用三代头孢菌素使得临床上产ES-BLs的菌株不断增加,由于该类菌具有多重耐药性和经质粒介导传播迅速的特点,可以通过接合,转化和转导等形式使耐药基因在细菌中扩散。

ESBLs 介导耐药的隐蔽性,CLSI规定,如确正为产ESBLs 菌株,不管体外药敏试验结果如何,对所有青霉素类、头孢菌素类和安曲南均报告为耐药[3]。

ESBLs 的产生大多来源于(TEM-1,T EM-2,SH V-1)基因突变(称A类ESBLs)。

因此,ESBLs会使医院感染变得复杂化,正确使用抗菌药物有助于控制其播散与爆发流行[4]。

显示我院近两年产ESBLs402株大肠埃希菌的检出率44.8%。

269株肺炎克雷伯菌的检出率23.6%。

根据目前所有文献报道碳青霉烯类抗生素(亚胺培南.美罗培南)ESBLs最有效,可作为首选药物,本实验中药敏结果也可证实这一点。

从表1中可以看出头孢派酮+舒巴坦的耐药率为5.9%左右与文献[5]报道相近。

在选择β内先胺类抗生素/酶抑制复合物治疗产ESBLs细菌所致感染时,应看体外药敏试验结果。

临床调查发现,产ESBLs菌株患者绝大多数在送检标本前因感染较重而使用过第三代头孢菌素,甚至长期使用广谱抗生素,提示不合理使用广谱抗生素可能是导致细菌耐药基因突变和播散的重要原因。

临床使用抗菌药物时,应严格遵守《抗菌药物临床应用指导原则》,限制广谱头孢菌素的使用。

ES-BLs的产生很大程度上是由于β-内酰胺类抗生素的滥用引起的,要控制产ESBLs细菌的流行,不能光靠治疗,首先要做到正确合理的使用抗生素。

所以作为医护人员尤其是微生物检验人员,加强防范意识,严格执行消毒隔离制度,加强对细菌及耐药的检(下转第74页)在治疗1.5h后出现血浆成分分离器有堵塞,即用生理盐水冲洗管路,治疗继续,病人无不良反应。

3.4　防止溶血的发生　严密观察两个分离器滤出液量的情况,并根据血浆滤出液量的多少随时调节血泵的流速。

如果血流速不好,血浆分离流速过快时易发生溶血。

本组患者的血流速保证在160～200ml/min时,血浆分离的流速在40～60ml/min,无一例发生溶血。

3.5　患者的护理　密切观察患者的生命体征及意识状态,尤其是血压的变化。

由于体外循环血量多,如果心血管功能代偿不佳,血容量减少,易发生低血压。

患者在上机时每15～30min测血压、脉搏1次,随时注意血压变化,并准备好液体。

当发生血压低时,应减慢血浆滤出量,迅速补充容量,用50%葡萄糖注射液或生理盐水快速输入,静滴20%白蛋白或其他胶体溶液。

本组5例因分离速度过快,患者出现头晕、出汗、恶心、低血压,即补充20%白蛋白50～100ml,减慢血流速,症状缓解,血压逐渐恢复正常。

3.6　注意保温　在2h的治疗过程中,由于血液体外循环会损失部分热量,给病人身下垫远红外暖毯来补充热量。

4　并发症的护理4.1　过敏反应　在双重血浆分离治疗过程中会丢弃富含大分子球蛋白的血浆而回输富含白蛋白的血浆,可诱发过敏反应[2]。

本组在应用血浆前静脉给予地塞米松5～10mg,同时认真执行“三查七对”,血浆输注速度不宜过快。

4.2　出血　双重血浆分离治疗中抗凝剂输入过多血小板破坏,患者易发生出血倾向。

要求治疗前常规检测患者的凝血功能,确定抗凝剂的用量。

治疗中严密观察患者皮肤和黏膜有无出血点;护士在进行血管穿刺时要准确,避免反复穿刺;治疗结束时本组患者均用鱼精蛋白中和肝素,穿刺点用无菌纱布加压包扎4～6h,无出血发生。

4.3　感染　由于患者疾病原因和血路管与两个分离器衔接处较多,容易发生感染。