线粒体tRNA～LeuUUR3243A→G突变所致糖尿病的临床特征及治疗

新医学 $%%& 年 &% 月第 ’$ 卷第 &% 期
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论
著
线粒体 $%&’()* + ,,% - .!/.’!0 突变所致糖尿病 的临床特征及治疗
中山医科大学附属第一医院内分泌科 ( !&%%"% . 修玲玲 梁 伟 吴 华 余斌杰
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5摘
要6
目的：探讨线粒体 *+,-/01
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引
言
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’$3’ -! 4 突变所致糖尿病是单基因病变，已被列为糖 尿病的特殊类型 5 & 6 ，了解本病的临床特征对进一步 指导治疗有着重要的临床意义。本文从 &77# 年 & 月至 $%%% 年 &$ 月对 ’’" 例无亲缘关系的糖尿病 患者进行基因筛查，现将结果报道如下。
线 粒 体 转 运 核 糖 核 酸 ( )*+,- .
序号 % 、# 为同一家系；& @ ; 同一家系；< 、 " 同一家系；= @ %% 同一家系；%# 、%& 为不同家系
糖尿病中检出 # 例，检出率为 $> <8 。除 % 例不能 确认有无糖尿病家族史外，其它 ! 例均有糖尿病家 族史。& 例 # 型糖尿病患者 ) 肽水平正常，其他病 人的胰岛 " 细胞功能均有不同程度的减退，因 此，除 % 例外其余病人都需用胰岛素进行治疗。全 部患者既往无肥胖史，大多数病人的 ./0 为正常 或 体 重 不 足 者 。 %$ 例 伴 有 不 同 程 度 的 神 经 性 耳 聋，耳聋与糖尿病发病不一致。总之，多数患者发 病初期的临床表现类似 # 型糖尿病，而正常对照组 未发现此突变者。 本组有 % 例女性 ; 年前基因检测发现该突变， 当时口服葡萄糖耐量试验 ’ A3BB ( 正常，胰岛功 能正常。经数年随访，随着年龄的增加， A3BB 由 正常渐变为葡萄糖耐量降低，最终发展为糖尿病， 胰岛功能也随之下降，年仅 %" 岁。其表姐也于 #$ 岁发生糖尿病。另一对母女于 : 年前同时被诊断为 糖尿病，母亲为 # 型糖尿病，其女则为 % 型糖尿病 合并神经性耳聋，两者均需用胰岛素治疗。
’
结
果
在 ’’" 例糖尿病病人中，共检测出 8 个先证 者 ( &9 "K . 为 )*+,-/01 ( 22+ . ’$3’ - ! 4 突变，并 在这 8 个家系调查中共发现 &’ 例同类患者，详细 临床情况见表 &。其亲属中有糖尿病的 &&$ 例患者 的检出率为 !9 3K ，无家族史患者中未发现突变 者。 8$ 例 & 型糖尿病检出 3 例 ( 8K . ，$#8 例 $ 型
B*’&’%C’&37， D 链 B*’3$’C’3%’。用聚合酶链反应 C 限制性片段长度多态性 ( E;+C+F/E . 技术 5 $ 6 进行 基因筛查。 E;+ 扩增条件： 73G 变性 $ )?B； 73G &! H， 8&G &! H， #$G &! H，共进行 ’% 个循环， 最后 #$G 延伸 $ )?B。 E;+ 产物经 -I<J 酶切后， 突变者 :,- 在 $K 琼脂糖凝胶电泳带上为一 3$# 个碱基对 ( =I . 的片段和两个 $&3 =I、$&’ =I 片段 ( 重 叠 为 一 条 带 . ， 无 突 变 者 只 有 3$# =I 一 个 片 段。此外，对筛选出先证者的直系亲属进行家系 临床调查，包括发病年龄、体重指数 ( LMJ . 、血 清 ; 肽水平、糖化血红蛋白 -& N ( 4D=-& N . 、谷氨 酸脱羧酶抗体 ( 4-: . 、听力及治疗情况。
2C9E6 突 变 的 细 胞 起 到 保 护 作 用 ， 但 突 变 的 2C9E6 其复制速率往往超过野生型，是突变得以 积累的一个重要原因，补偿和积累对不同的组织 或细胞可能会有较大的差异。由于线粒体的数量 在不同组织细胞中是不同的，含线粒体的组 从不同人种群体研究的情况分析，除了存在 着疾病分布不均的因素以外，影响诊断准确性的 最 主 要 因 素 是 2C9E6 的 异 质 性 。 2CDE6-FG ’ HHD ( &#:& 6!3 突变的发病有一个明显特征是同家系中 下一代发生糖尿病时，他 ’ 她 ( 们的发病年龄明显 较上代年轻，同时在这些人的血白细胞中 2C9E6 突变比率也比上代有增多趋势，即使尚未发病者 其突变比率也是如此 I ! J 。这种与一般的线粒体疾病 在中老年中发生较多的情况有所不同，单以突变 积累产生的年龄相关性不易解释这些现象。 2CDE6-FG ’ HHD ( &#:& 6 ! 3 突变糖尿病是首个 进入临床基因诊断的糖尿病亚型。有以下情况者 的应进行基因筛查诊断： # 有母亲遗传家族史的 糖尿病患者； $ 起病早 ’ :$ 岁前发病 ( 的体型偏瘦 的 # 型糖尿病患者； % 胰岛素分泌功能进行性低 下，需用胰岛素治疗者； & 伴神经性耳聋的糖尿 病。因 2CDE6-FG ’ HHD ( &#:& 6 ! 3 突变所致糖尿病 为胰岛 " 细胞功能缺陷型，因此对携带该突变者 应进行随访 I ; J 。治疗原则： # 由于患者体型偏瘦， 不宜过严限制饮食； $ 本病为进行性胰岛 " 细胞 功能缺陷型糖尿病，已确诊的患者在可能的条件
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对象与方法
对 象
随机抽样对无亲缘关系的 ’’" 例糖尿病患者 进行基因筛查，不分类型、性别、年龄、有无家 族史等。其中男 &83 例，女 &#3 例；年龄 &! 岁至 "" 岁，中位年龄 !$ 岁；病程 & 个月至 ’& 年，平 均病程 89 $ 年。正常对照组为本院健康职工 &’$ 名，男 !$ 名，女 "% 名；年龄 $& 岁至 !" 岁，中 位年龄 ’7 岁。 !" ! 研究方法 按常规方法提取患者外周血细胞的 :,-，根 据 人 )*:,- ;<)=>?@A0 序 列 合 成 引 物 ： / 链
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