细胞表型检测-细胞增殖

表型检测：增殖
细胞增殖的定义：
Cell Counting Kit-8 （CCK-8）分析细胞增殖的原理：
CCK-8 测细胞增殖操作流程：
CCK-8 测细胞增殖实验分组设计：
数据处理与绘图：
Tips：
1. 第一次做实验时，先做几个孔摸索接种细胞数量和加入CCK- 8 试剂后的培养时
间。

2. 铺板要混匀：a）可以先往孔里加50ul 培养基，再接种50ul 细胞悬液；b)不时地混
匀细胞悬液，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下；c)铺完板后，还可以轻敲板底，帮助细胞分散均匀。

或者用振荡器摇板帮助细胞分散。

3. 培养板周围一圈孔容易蒸发，为了减少误差，培养板的四周只加无菌PBS，而不作
为指标检测孔。

4. 使用新鲜的完全培养基稀释cck8，完全混匀，把待测孔中旧的培养基吸掉，加入配
制好的含cck8 的培养基。

5. 加液时，枪尖贴着孔内壁慢慢加，避免出现气泡。

6. 每次测定都需要在同一块板上设置调零孔。

如果细胞培养时是含药物的，那么调零
孔里也要含有相应的药物。

7. 使用双波长检测，检测波长450nm-490nm，参比波长600-650nm。

450nm 最灵
敏。

CCK-8 法测细胞增殖适用范围：
⏹ 适用于检测贴壁细胞和悬浮细胞数量
⏹ 不能检测组织中的细胞数量
⏹ 不能确认细胞数量的变化是由细胞增殖增多还是细胞凋亡减少引起的，需要配合其
他实验结果进行综合判断
5。