地高辛Digoxin酶联免疫分析ELISA
Digoxin Elecsys地高辛
地高辛用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的地高辛（digoxin）含量。
用于诊断地高辛治疗过量以及地高辛治疗过程中药物含量的监测。
电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys1010、2010和E170（Elecsys模块）免疫测定分析仪。
概述：地高辛被广泛应用于充血性心功能衰竭的治疗和各种心率失常。
地高辛能改善心肌收缩的强度,增加心脏血液输出,缩小心脏,降低静脉压和血容量。
地高辛治疗也可稳定和抑制室性心率。
由于地高辛使用的经常性和治疗过程中的不谨慎,容易引起地高辛中毒。
更危险的是地高辛中毒症状常以心率失常形式表现出来,而病人正是由于这种症状而用地高辛治疗的。
公认的血清或血浆地高辛治疗浓度是0.9-2.0ng/ml。
人类地高辛中毒症状一般只出现在地高辛浓度超过2.0ng/ml，但有时低至1.4ng/ml也可出现中毒症。
地高辛中毒可出现在以下几种情况a)药物疗效比率较低(如达到治疗效果的组织浓度与产生中毒的组织浓度之间差异很小；b)个体对地高辛的反应程度不相同；c)各种地高辛药片的吸收率差异可达二倍以上d)年龄增高,对地高辛中毒的易感性明显增强。
与其它临床资料结合,监测地高辛浓度可以为医生及时调整用药剂量提供有用的信息,从而达到理想的治疗效果,避免药物不足或过量引起中毒。
Elecsys地高辛测定方法采用竞争法原理和一种地高辛特异的单克隆抗体。
标本中的地高辛与生物素化的地高辛衍生物竞争钌标记的单克隆抗体。
原理：采用竞争法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：10µl标本与钌（Ru）标记的抗地高辛单克隆抗体混匀，形成免疫复合物，其数量取决于标本中分析物的浓度。
·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒和生物素化的地高辛衍生物，后者与钌标记的单克隆抗体上未占据的位点结合，形成抗体-半抗原复合物。
形成的完整复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。
酶联免疫法(ELISA)测定植物激素含量
酶联免疫法（ELISA）测定植物激素含量姓名：李希东专业：植物学学号：200808201 日期：09.5.10 成绩：一、实验目的：掌握间接法测定植物激素的原理和方法；了解逆境对玉米根系ABA和IAA含量的影响。
二、实验原理：酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbert assay，简称ELISA)是在免疫酶技术(immuno enzymite technique)的基础上发展起来免疫测定技术。
其建立在两个重要的生物化学反应基础之上的，即①抗原抗体反应的高度专一性和敏感性；②酶的高效催化特性。
ELISA把这二者有机地结合在一起，即被分析物先与其相应的抗体或抗原反应，然后再检测抗体或抗原上酶标记物的活性，从而达到定性或定量测定的目的。
间接法是将过量的与蛋白质连接的待测植物激素(实验前将该激素与牛血清白蛋白等蛋白质连接成[激素一蛋白质复合物])吸附在固相支持物上，然后加入待测植物激素和相应抗体，使抗体与待测植物激素及激素蛋白质复合物结合，再加入酶标抗体(标记酶与非特异第二抗体的复合物)，就形成〔蛋白质·激素·第一抗体·第二抗体·酶复合物〕，加入底物后就生成有色产物，测定其吸光率，可计算待测抗原的量。
如果抗体、激素一蛋白质复合物和酶标抗体的量一定，并且[激素·蛋白质复合物]和待测激素的总量超过抗体的量，那么生成的[蛋白质·激素·第一抗体·第二抗体·酶复合物]的量就受待测激素含量的限制，因此待测抗原的量将与吸光率成反比。
图A表示间接酶联免疫方法的基本原理：A.间接酶联免疫原理示意图示反应板（固相载体）示激素特异抗体（一抗）示激素（抗原）示非特异二抗示蛋白质·激素复合物示标记酶本实验所采取的方法，则是利用游离抗原和吸附抗原与游离抗体的竞争性结合反应，它的原理可用下式表示:Ab十H十HP=AbH十AbHP其中Ab表示抗体，H表示游离激素，HP表示吸附在板上的激素一蛋白质复合物。
化学发光酶免疫法测定血清地高辛浓度
地高辛线性范 围 ＯＯ ５０ ， Ｌ平 均回收率为 ．一 ． ／ ， ￣ｍ
９． ％和 ９． ． 内和批 问 路Ｄ分别为 ３５ ％和 ５６％． ４６ ５ ３醇％ 批 ． ８ ． ３ 与放射 免疫 法相关 良好 （ ＝Ｏ９５） ． ６ 。结 论 ３
地高辛（ｉ ￣ ） ａ ｏｔ 是一种作用于心脏 的强心甙类 ｇ ｎ 药物 ， 主要用于某些心力 衰竭和心律失常等。由于
１ 材料 与方 法
１４ 标本采集 ．
患者 口服地高辛 ０ １ ｍ ／（每 日 ． ５ｇ ． ２ ￣，
２ ． 次 连服 ６ 以上 ， 在末次服药后 ６ 小 时采 天 并 —８ 血分离血清 ， 小时以内测定血清地高辛浓度 。 ４ １５ 方法 化 学发光采用微 粒子 固相 免疫竞争 ． 法。原理 ： 顺磁性铁固体颗粒外包被羊抗兔 Ｉ 与 包被地高辛单克隆抗 体结合 后再 与抗体 标本 中的 地高辛或定量标 记的碱性礴 酸酶 一地高辛竞 争形 成免疫复合物 ， 掉未结合 的标记物 ， 加碱性磷 洗 再 酸酶发光底物 Ｌｍ — ｌＢ５０底 物去磷酸化放 出 ｕ ｉ ｐ０’３ ， １
光， 测定 其放 出的光量子 与标 准 比较 定量 。
化学发光免疫分析法监测地高辛血药浓度及其结果分析
化学发 光免疫 分析法监测地 高辛血药浓度及 其结果分析
刍 Ｂ 德琴 （ 江西省南昌 大 学第一附 属医院药 剂科 南昌 ３ ３ ０ ０ ０ ６ ）
摘要 ： 目 的： 综合分析我院 ２ ０ １ ０ ～ ２ ０ １ ２ 年地高辛血 药浓度监测结果 ， 为临床 合理用药提供参 考。方法 ： 应 用化学发光酶免疫法测
） 等。我院地高辛血药浓度监测采用的是 Ｃ Ｌ Ｉ Ａ法， 使用的仪 １ ． １ 一般资料 ： ２ ０ １ ０ 年９ 月一 ２ ０ １ ２年 １ ２ 月我院进行地高辛血 Ａ 器是我省最新引进的美国雅培 Ｉ ｌ Ｏ ０ ０ 全自动免疫发光分析仪， 药浓度测定的患者 １ ４ ４例，其中， ６ ９ 例为住院患者， ７ ５ 例为 测定结果的准确性及稳定性均优于上述方法，非常适合临床 门、 急诊或外院送检的样本。男 ５ ９ 例， 女８ ５ 例， 年龄 ２ ～ ８ ６ 岁， 本研究观察到， 地高辛血药浓度低于０ ． ５ ｇ ・ Ｌ － ｔ 时， 平均 ６ ５ 岁。Ｉ ＞６ ０ 岁的 １ ０ １ 例， 占７ ０ ． １ ４ ％。 服用剂量成人为地 常规测定。 少部分患者心功能得到一定的改善，但大部分患者没有达到 高辛０ ． １ ２ ５ ｍ ｇ 或０ ． ２ ５ ｍ ｇ ， ｑ ｄ ， １ ０ 岁以下儿童按体重计算。所患 血药浓 度在治疗 窗 ０ ． ５ — ２ ． Ｏ ｔ ＊ ｇ ・ Ｌ － 的范 围内时， 可达到 比 病种主要为高血压、 心律失常、 风湿性心脏病、 心肌梗死、 房 疗效 ；
定地高辛血 药浓度 ， 并对结果进行统计分析。结果 ： 我院２ ０ １ ０ ～ ２ ０ １ ２年地 高辛血 药浓度共监测 １ ４ ４例 ， 在 有效浓度 范围 内（ ０ ． ５ — ２ ． ０ ｇ ・ 【 『 ） 为７ ２例 ， 占５ ０ ． Ｏ ％， 小于 ０ ． ５ ｇ ・ Ｌ － 。 的为 ６ １ 例， 占４ ２ ． ４ ％， 大于 ２ ． ０ ｐ ， ｇ ・ Ｌ － 的ｌ １ 例， 占７ ． ６ ％。 结 论 ： 影 响 地 高辛 血 药 浓 度的原因 多样 而复杂 ， 应重视监测 ， 以保证 临床 疗效 ， 减少毒性反应的发生。 关键词 ： 地 高辛 血 药浓度监测 化学发光免疫分析法 中图分类号 ： Ｒ ９ ６ ９ ． １ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ３） ０ ２ － ０ ０ ８ ４ － ０ １
地高辛(Digoxin )标准操作程序SOP文件
·Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970
·Elecsys添加剂液（SysWash）货号11930346
·Elecsys系统清洗液支架（Adapter for SysClean)）货号11933159
·Elecsys 2010反应杯（Assay Cup)货号11706802
概述：
地高辛被广泛应用于充血性心功能衰竭的治疗和各种心率失常。地高辛能改善心肌收缩的强度,增加心脏血液输出,缩小心脏,降低静脉压和血容量。地高辛治疗也
可稳定和抑制室性心率。由于地高辛使用的经常性和治疗过程中的不谨慎,容易引起地高辛中毒。更危险的是地高辛中毒症状常以心率失常形式表现出来,而病人正是由于这种症状而用地高辛治疗的。公认的血清或血浆地高辛治疗浓度是0.9-2.0ng/ml。人类地高辛中毒症状一般只出现在地高辛浓度超过2.0ng/ml，但有时低至1.4ng/ml也可出现中毒症。地高辛中毒可出现在以下几种情况a)药物疗效比率较低(如达到治疗效果的组织浓度与产生中毒的组织浓度之间差异很小；b)个体对地高辛的反应程度不相同；c)各种地高辛药片的吸收率差异可达二倍以上d)年龄增高,对地高辛中毒的易感性明显增强。与其它临床资料结合,监测地高辛浓度可以为医生及时调整用药剂量提供有用的信息,从而达到理想的治疗效果,避免药物不足或过量引起中毒。Elecsys地高辛测定方法采用竞争法原理和一种地高辛特异的单克隆抗体。标本中的地高辛与生物素化的地高辛衍生物竞争钌标记的单克隆抗体。
原理：
采用竞争法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：10µl标本与钌（Ru）标记的抗地高辛单克隆抗体混匀，形成免疫复合物，其数量取决于标本中分析物的浓度。
地高辛 检验标准-概述说明以及解释
地高辛检验标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述地高辛（Digoxin）是一种常用的心脏强心剂，广泛用于治疗心力衰竭、心律失常等心脏疾病。
在临床应用中，合理确定地高辛的用药剂量对患者的病情控制至关重要。
因此，准确、可靠的地高辛检验标准对于医生的判断和患者的治疗非常重要。
地高辛的检验标准是根据药物的药代动力学、药效学和临床应用经验等综合因素而建立的。
通过对血浆或血清样本进行测试，可以测量出地高辛的浓度，从而判断患者体内地高辛的血药浓度。
地高辛的合理用药与其血药浓度密切相关。
如果血药浓度过高，可能会导致地高辛中毒的风险增加，出现恶心、呕吐、心律失常等不良反应；而血药浓度过低，则可能无法达到治疗效果。
因此，了解和掌握地高辛检验标准对于有效、安全地使用该药物至关重要。
目前，地高辛的检验标准一般采用药物的血药浓度范围来进行评价。
根据临床实践和研究，常用的地高辛治疗血药浓度范围一般为0.5-2ng/mL。
在这个范围内，地高辛的治疗作用最为显著，同时不会引起严重的不良反应。
然而，需要注意的是，地高辛的检验标准可能会因患者的情况、用药方案、年龄、肝肾功能等因素而有所不同。
因此，在进行地高辛检验时，应该综合考虑患者的个体差异和临床表现，结合相关指南和专家建议，制定合理的测量和解读标准。
总之，地高辛的检验标准是临床用药中不可或缺的重要指标。
通过准确测量地高辛的血浆或血清浓度，医生可以更好地判断患者的用药状况并进行个体化的治疗。
而患者在接受地高辛治疗时，也应积极配合医生的监测和调整药物剂量，以确保药物的疗效和安全性。
文章结构部分是对整篇文章的组织和布局进行介绍，它会将文章的各个部分进行概括和归纳。
在本篇文章中，文章结构部分可以如下所写：文章结构：本文主要由引言、正文和结论三个主要部分组成。
1. 引言部分：引言部分是文章的开篇，主要包括概述、文章结构和目的三个方面。
1.1 概述：在概述部分，将介绍地高辛的背景信息，包括其定义、作用和使用范围等内容，用以引起读者对地高辛检验标准的兴趣。
地高辛免疫分析质量控制与血药浓度监测
8145 % 17148 % 13187 % 13155 % 10153 %
200111 30
2001 年
200112
30
200113 30
第一次 200114
30
200115 30
21595 11693 1108101257 01243 01338 01499
15103 % 15118 % 22148 % 13197 % 11186 %
放射免疫学杂志 2004 年第 17 卷第 1 期 J of Radioimmunology2004 ,17 (1)
地高辛免疫分析质量控制与血药浓度监测
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中国药品生物制品检定所 (100050) 徐立根
地高辛 (Digoxin) 属于洋地黄类药物 ,是临床上最常用的 强心甙类药物之一 。它具有正性肌力作用 ,即加强心肌收缩 性 ,可以增加心脏的每搏输出量 ;主要用于治疗充血性心力 衰竭与心房纤颤等[1] 。然而 ,临床上地高辛的治疗量与中毒 量非常接近 ,而且不同的患者对洋地黄类药物治疗反应的个 体差异极大 。因此 ,地高辛的血药浓度监测对于指导临床个 体化给药方案的实施具有重要价值 。
国内地高辛血药浓度测定主要用放射免疫分析法 ( Ra2 dioimmunoassay ,RIA) 、荧光偏振免疫分析法 ( Fluoresence poliza2 tion immunoassay , FPIA) 、化学发光免疫分析法 ( Chemilumines2 cence immunoassay ,CLIA) 、时间分辨荧光免疫分析法 ( Time resolved fluoresence immunoassay , TRFIA) 和克隆酶免疫分析法 (Cloned enzyme donor immunoassay ,CEDIA) 等[2～6] 。FPIA 法由 于其灵敏度高 (最小可检出量为 0101μg/ L) 、方法简便 、耗时 较少等优点 ,受到广大临床用户的青睐 ;CLIA 法则可进行全 自动分析 ,使误差达到最小化 ,而且可以随时插入急诊血样 分析 ,从而为患者争得宝贵的治疗时机 ; RIA 法历史悠久 、结 果可靠 、价格便宜 ,至今仍在治疗药物监测 ( Therapeutic Drug Monitoring ,TDM) 活动中占有一席之地 ,在中西部广大中小城 市的经济欠发达地区更是常用的方法 。
地高辛(Dig)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求yuande
地高辛（Dig）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中的地高辛（Dig）的含量。
1.1 产品规格试剂盒规格为48人份/盒、96人份/盒。
1.2 主要组成成分表1 地高辛（Dig）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）主要组成成分a) 酶结合物以含1% BSA的0.9%Nacl缓冲液配制的联接HRP的Dig抗原，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂。
b) 反应抗体以含1% BSA的0.9%Nacl缓冲液配制的兔抗Dig，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂。
c) 校准品校准品以100%小牛血清为稀释液，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂，校准品A～F中含Dig的目标浓度分别约为0、0.5µg/L、1.0µg/L、2.0µg/L、3.0µg/L、5.0 µg/L。
校准品具体浓度详见标签及试剂盒参数IC卡。
d) 发光液发光液A主要成份为鲁米诺，发光液B主要成份为过氧化脲，两者均以pH8.6的Tris-HCl缓冲液配制。
e) 包被微孔板包被有羊抗兔抗体的白色聚苯乙烯微孔板，用铝箔袋真空包装。
f) 质控品（备选）以100%正常人血清为基质制备的冻干品，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂，靶值浓度范围为1.62 µg/L～2.31 µg/L。
质控品具体浓度详见质控品参数表。
不同批号试剂盒中的相同组分不能互换。
2.1 外观a）液体组分应澄清，无沉淀或絮状物，实际装量应不小于标示装量；b）冻干组分呈白色或淡黄色疏松体，加水后应在3分钟内完全溶解；c）所有组分均无包装破损，标示清楚。
2.2 准确度试剂盒内校准品与相应浓度的国家标准品（编号：100015）同时进行分析测定，用Logit-Ln模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t检验）；以国家标准品为对照品，试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在0.900～1.100之间。
地高辛Digoxin酶联免疫分析ELISA
地高辛(Digoxin)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
1 使用目的：本试剂盒用于血液、血清、尿液等样本中地高辛(Digoxin)残留的定量检测。
2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有地高辛(Digoxin)偶联抗原，加入地高辛(Digoxin)标准品或样品，游离地高辛(Digoxin)与微孔条上预包被的地高辛(Digoxin)偶联抗原互相竞争地高辛(Digoxin)抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中地高辛(Digoxin)含量成反比，通过标准曲线计算样品中地高辛(Digoxin)的含量。
3 试剂盒组成3.1 预包被的地高辛(Digoxin)偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2地高辛(Digoxin)标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/L, 0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35 ug/L3.3抗地高辛(Digoxin)抗体酶结合物：1瓶（6ml）。
3.4显色液A：1瓶（6ml）。
3.5显色液B：1瓶（6ml）。
3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9说明书一份。
4 需要而未提供的材料4.1 设备4.1.1波长450nm酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2 试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存6 注意事项6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
地高辛的血药浓度监测及分析
地高辛的血药浓度监测及分析目的：为地高辛(Digoxin)的临床合理用药提供参考。
方法:应用荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定血药浓度，对结果作综合分析。
结果:共监测121例，其中在有效治疗血药浓度范围内的为82例（占67.8%），小于0.5 μg/ L的为21例（占17.3%），大于2.0 μg/ L的为18例（占14.9%）,中毒表现为13例(占10.7%)。
结论：口服地高辛有必要加强血药浓度监测,特别是老年患者的血药浓度监测，并结合临床表现和用药特点进行分析，达到保证临床疗效，减少毒性反应发生的目的。
标签：地高辛；血药浓度；监测；用药分析洋地黄治疗充血性心力衰竭(Congestive heart failure，CHF) 已有200多年的历史，近年来经大规模临床试验及与其它正性肌力药的对照，再次肯定了洋地黄强心苷类药物的疗效。
地高辛作为中效洋地黄强心苷类药物，临床常用于治疗慢性或充血性心力衰竭以及心房纤颤、房扑等，其有效治疗血药浓度范围为0.5~2.0 μg/ L，因其安全范围窄和药动学、药效学个体差异大等原因,洋地黄中毒仍是临床上遇到的最普遍的不良反应之一，因此测定地高辛血药浓度(Blood drug level , BDL)并作综合分析的研究具有重要意义。
本文通过121例口服地高辛的CHF患者进行临床分析，对于每一例地高辛血药浓度测定值过高或过低的情况都认真询问病史、查阅病历，与经治医生讨论，从病理状态、药物相互作用、用药特点和采样时间等各个层面做综合分析，对其测定结果作解释，并采取相应措施，使地高辛的使用达到个体化。
1 对象与方法1.1 对象本组121例，其中男性63例，女性58例，年龄40~91岁，平均65岁，>70岁为73例，>60岁为106例。
冠心病45例，肺心病16例，风心病42例，心力衰竭8例，高血压性心脏病8例，其他2例。
所有患者口服地高辛0.125~0.750 mg/d，根据病情需要均同服其他药物。
化学发光免疫分析法应用于地高辛血药浓度的测定
化学发光免疫分析法应用于地高辛血药浓度的测定目的探讨化学发光免疫分析法应用于地高辛血药浓度的测定价值。
方法收集2011年全年来海南省人民医院行体检的50例患者，给予患者地高辛，剂量0.125 mg/d，共计1周。
采用化学发光免疫法分析患者的血药情况。
结果50例患者中出现中毒症状者9例（18.0%），其地高辛平均血药浓度为（2.41±0.20）μg/L。
> 65岁患者地高辛血药浓度为（1.90±0.04）μg/L，年龄越大，浓度越高。
不同性别间各浓度分布比例差别不大[平均浓度，男：（1.25±0.02）μg/L；女：（1.28±0.03）μg/L]。
结论针对患者的生理状况，结合临床表现及用药情况，合理调整给药方案及剂量。
对于老年患者，应给予个体化的给药方案。
标签：化学发光免疫分析法；地高辛；血药浓度；测定地高辛是从毛花洋地黄叶中提取的一种二级苷，是临床上应用于治疗心脏疾病的强心苷类药物之一，对急慢性充血性心力衰竭、室上性心动过速、心房颤动和心房扑动等病症的治疗效果明显[1-3]。
但该药物的作用机制较为复杂，治疗指数不高，有效治疗的浓度范围较窄，且药动学和药效学在不同个体间差异较大，很容易导致中毒。
另外有报道显示，地高辛中毒症状和药物剂量不足的临床表现较为相近，监测其血药浓度便显得至关重要[4-5]。
本研究采用化学发光免疫分析法对地高辛血药浓度进行检测，旨在为临床监测提供不同的指导。
1 资料与方法1.1 一般资料收集2011年全年来海南省人民醫院行心脏疾病治疗的50例患者，对其进行地高辛血药浓度监测，其中男32例，女28例；年龄18～74岁，其中年龄>65岁者36例，45～65岁者11例，<45岁者3例；患病类型：湿性心脏病20例，冠心病14例，二尖瓣脱垂6例，心肌梗死5例，扩张型心肌病3例，慢性支气管肺气肿病1例，其他1例。
所有患者均知情同意，并签署同意书，且本研究经海南省人民医院医学伦理委员会通过。
酶联免疫吸附法测定食品中的重金属含量的过程
酶联免疫吸附法测定食品中的重金属含量的过程酶联免疫吸附法（ELISA）听起来是不是有点高深莫测？别担心，咱们今天就把它拆开了聊，告诉你它到底是怎么一步步帮我们测定食品中的重金属含量的，顺便也给大家普及一下这个不那么神秘的过程。
想想看，咱们平常吃东西，多少都有些担心里面是不是有点儿啥不该有的东西，像是铅、汞这些对身体有害的重金属，尤其是那些海鲜、蔬菜啥的。
吃得开心可不意味着就能放心呀！就像咱们去餐馆吃饭，总得看看盘子里是不是干净，不能随便给你端一碗灰头土脸的东西，对不？所以，用酶联免疫吸附法来测量食品里的重金属，简直就是现代食品安全的一道“守门员”，给我们提供了有力的保障。
这个酶联免疫吸附法啊，说白了就是利用了抗原和抗体之间的结合反应来检测特定物质的含量。
你可以把它理解成一个“捉迷藏”的游戏。
这个游戏的参与者是一种叫做“抗体”的物质，它能在迷宫里精准找到“重金属”这个小家伙。
一旦抗体找到它，它们之间就会“勾搭”在一起，形成一个特殊的复合物。
这时候，实验人员只需要观察这个复合物的“表现”就能知道，里面重金属的含量是高是低。
简单吧？就像你玩“找茬”游戏，眼睛一眼扫过去，就能看到问题的根源。
不过，光知道抗体可以“捉住”重金属是不够的。
要让这个过程变得更加“高效”，我们还得借助一种酶的帮忙。
这酶就像是“信号员”，一旦它和抗体发生反应，它会产生一些可以被检测到的信号。
这个信号越强，说明食品中的重金属含量就越高。
好比你参加比赛，赛道上的标志牌越亮，代表你离终点越近。
通过测量这个“亮度”或者“信号强度”，咱们就能知道食品中的重金属到底有多少。
这不就像是在做一道数学题，给你一个信号，告诉你答案是什么。
接下来就是样本处理的过程了，实验人员要先从食品中提取出相关的成分。
像是把食品切开、压碎、过滤，弄出一堆液体样品，这可不简单。
就像你做菜，食材准备的好坏直接决定了味道对不对。
然后，这些样品要与酶标记的抗体混合，抗体一看见重金属就开始动作，开始发挥作用，反应中的变化就是我们要关注的重点。
地高辛血药浓度监测方法新进展
地高辛血药浓度监测方法新进展目的调查分析地高辛血药浓度测定的方法，为开展血药浓度监测提供依据。
方法通过Cnki、PubMed数据库中检索近年来地高辛相关文献并整理分析。
结果地高辛的血药浓度监测方法很多，主要有放射免疫测定法，酶免疫测定法，荧光免疫测定法，化学发光免疫测定法，干化学测定法等。
结论新监测方法的应用使地高辛的检测技术日益成熟、规范。
标签：地高辛；血药浓度监测；合理用药New progress of blood drug concentration monitoring method for digoxinREN?Hongxin1??HAN?Lei2??ZHAO?Ningmin2??QIN?Yuhua2??LV?Pin2??C HAI?Dongyan2??FENG?Jing21.The Drug Control Institute of Zhoukou City，Zhoukou 466000，China；2.Henan Provincial People’s Hospital，Zhengzhou 450002，China[Abstract] Objective To investigate and analysis the methods of digoxin plasma concentration determination for the development of blood concentration monitoring. Methods Retrievaled the related articles of digoxin by Cnki，PubMed，Web of Science database to retrieve and analyze. Results Digoxin blood concentration monitoring in many ways，mainly determined by radioimmunoassay，enzyme immunoassay，fluorescence immunoassay，chemiluminescence immunoassay，dry chemical assay，et al. Conclusion The application of new monitoring methods digoxin detection techniques become more sophisticated and norms.[Key words] Digoxin；TDM；Rational drug地高辛（digoxin）是临床治疗充血性心力衰竭（congestive heart failure，CHF）的常用药物，疗效较佳。
PCR-ELISA DIG检测系统生产辣根过氧化物酶共轭的抗地高 辛抗体
PCR-ELISA DIG检测系统生产辣根过氧化物酶共轭的抗地高辛抗体Pooria Gill, Mehdi Forouzandeh, Fatemeh Rahbarizadeh,Reihaneh Ramezani, and Mohammad Javad Rasaee伊朗德黑兰Tarbiat Modarres医药生物科技大学摘要有几种方法用来观察最终产品的聚合酶链式反应。
ELISA-based检测系统(PCRELISA)是其中的一种方法。
它是非常敏感的,可以由一个比色法来测量定量PCR产物。
根据这种方法, 从基因组复制的DNA片段和用注册的digoxigenin -11-dUTP进行PCR扩增。
用碱使微量滴定板中的样品变性并用生物素标记的核酸探针转到链霉亲和素涂层板上。
使用所产生的结合辣根过氧化物酶抗地高辛抗体和底物和2,20-azino-di-3-ethylbenzthiazolinsulfonate(ABTS)探测到突变的DNA。
这种系统中的一个核心做法是抗体是结合辣根过氧化物酶的抗地高辛抗体。
这里描述的是准备,纯化,标记用在PCR-ELISA检测系统中的结合辣根过氧化物酶的抗地高辛抗体。
几个生化协议和修改用于增加产品结合的敏感性和特异性及完善性。
关键词:牛血清蛋白地高辛结合物,结合辣根过氧化物酶的抗地高辛抗体引言聚合酶链式反应(PCR)是一种最常用的分子生物技术，它是用来扩增核酸的。
Tarbiat Modarres,伊朗德黑兰大学Mehdi Forouzandeh生物医药科技部的通信地址：E-mail:foroz@modares.ac.irsequences.[1] 针对不同不敏感性的PCR产品检测程序有所不同。
使用一个比色板ELISA-based检测系统开发的提供高敏感性及定量检测PCR产物PCR-ELISA在一个microtiter allele-specific杂交格式增的进行PCR扩组合。
聚合酶活性信号检测地高辛方法的建立
聚合酶活性信号检测地高辛方法的建立袁矜;夏东元【摘要】目的：建立以聚合酶活性信号为检测对象的反应体系，使用具有高灵敏度和精密度的均相分析方法，实现地高辛血药浓度的自动化检测。
方法设计特异的DNA 模板及其引物，引物上特定位点连接有Digoxinge‐nin‐11‐dUTP（Dxin），使得样品中地高辛（Dig）与引物上的 Dxin 在抗 Dig 抗体存在时形成竞争反应，影响DNA 聚合酶与引物结合，从而根据合成的双链量即可检测出样品Dig 浓度。
结果选择 D2p 作为 Dxin 在引物上的结合位点，17 nmol／L 模板及引物浓度、33 nmol／L 的抗 Dig 抗体浓度。
试剂可报告范围为0．3～39．0 ng／mL ，CV ＜10％。
结论聚合酶活性信号检测技术可以实现高灵敏度的地高辛均相分析。
%Objective To establish a reaction system with the polymerase activity signal as the detection object and to realize the automatic detection of digoxin (Dig ) blood concentration by using the homogeneous phase assay method with high sensitivity and high precision .Methods The specific DNA template and its primer which conjuga‐ted with Digoxingenin‐11‐dUTP(Dxin) at specific site were designed .Dig in serum sample was formed the competing reaction with Dxin on the primer when anti‐Digoxin antibody existed ,which influenced the combination of DNA poly‐merase with primer ,thus the dig content in the sample could be detected according to the synthesized double chain a ‐mount .Results D2p as the binding site of Dxin on the primer ,17 nmol/L template ,primer concentration and 33 nmol/L anti‐Dig concentration were selected .The reportable range of reagent was 0 .3 - 39 .0 ng/mL ,CV < 10% . ConclusionThe polymerase signal detection technology can realize the Dig homogeneous phase analysis with high sensitivity .【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2016(013)005【总页数】3页(P633-634,637)【关键词】地高辛;DNA 聚合酶;均相反应【作者】袁矜;夏东元【作者单位】复旦大学生命科学学院，上海 200433;苏州博泰安生物科技有限公司，江苏昆山 215325【正文语种】中文地高辛是临床上治疗充血性心力衰竭的经典药物，对室上性心动过速、心房颤动、心房扑动等病症疗效明显[1-3]。
全自动微粒子化学发光免疫分析仪监测地高辛血药浓度
全自动微粒子化学发光免疫分析仪监测地高辛血药浓度欧阳栋;卢玉山;黄忠英;张竞;孔令和【摘要】采用全自动微粒子化学发光免疫分析仪对服用了地高辛的120例成年患者进行血药浓度监测分析。
地高辛血药浓度＜0.5ng/ml 共22例次（7.69%）、0.5~2.0ng/ml 有效范围内242例次（84.62%）、2.0~3.0ng/ml 范围内18例次（6.29%）、≥3.0 ng/ml共4例次（1.40%）。
根据监测结果适当调整患者地高辛药物服用剂量之后，120例患者均在7d内接受多次全自动微粒子化学发光免疫分析仪监测并显示血清标本中地高辛浓度在有效范围0.5~2.0ng/ml之内，未见死亡病例。
使用全自动微粒子化学发光免疫分析仪可准确测定患者服用地高辛后的血清药物浓度，及时调整用药量，保证疗效、避免意外。
【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2013(000)016【总页数】1页(P3666-3666)【关键词】全自动微粒子化学发光免疫分析仪;地高辛;血药浓度【作者】欧阳栋;卢玉山;黄忠英;张竞;孔令和【作者单位】九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000【正文语种】中文【中图分类】R969.4地高辛是一类典型的强心苷类药物，用药量控制不当极易引发中毒意外，临床用药量需要严格控制，其毒性作用直接取决于用药后患者体内血清药物浓度［1，2］。
全自动微粒子化学发光免疫分析技术是最新的血药浓度监测手段［3，4］，本次研究使用全自动微粒子化学发光免疫分析仪进行120例地高辛治疗患者血药浓度监测分析，现报告如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取服用了地高辛的120例肝肾功能正常的成年患者，共接受地高辛血药浓度监测共286例次。
其中男 69 例，女51例；年龄 20～83（59.4±2.6）岁； 88 例患者地高辛服用剂量为 0.125～0.25mg/d，4例患者用药量＜0.125mg/d，全体患者其他辅助药物治疗模式相同，常见辅助药物为美托洛尔等β-受体阻滞剂、阿司匹林、氢氯噻嗪等利尿剂、西拉普利等血管紧张素转换酶抑制剂等等。
地高辛Digoxin
地高辛Digoxin来源：小动物药物手册编辑：黄淑成地高辛Digoxin【作用】抑制Na-K ATP酶，使细胞内钠增多。
钠与钙交换，导致细胞内钙增多，且因此产生正向肌力作用。
地高辛使心率降低，通过降低窦房结兴奋并抑制房室结传导。
这些作用主要源于对副交感神经兴奋和交感神经抑制，虽然该药对结节组织(nodal tissue)也有直接的抑制作用。
心率减慢结合心收缩力增强而使室上性快速性心律失常的患病动物心输出量增加。
地高辛可改善压力感受器的反射，该反射在心力衰竭时是削弱的。
【应用】用于心力衰竭和室上性快速性心律失常的治疗。
主要控制心力衰竭并发心房纤颤时的心室速率。
用于治疗雪貂和兔的扩张型心肌病。
应在用药5～7d后复查药物的血清水平，服药后至少8h取样较佳。
地高辛的生物利用度在不同制剂与规格之间各不相同：静脉注射=l00%；片剂=60%;酏剂=75%。
如果出现毒性作用或药物无效时，需评估血清地高辛水平。
理想的治疗水平是血清浓度为1ng/ml，此时作用最佳且不良反应最小，推荐范围为0.6～1.2 ng/ml。
应该注意到这低于以前的推荐治疗浓度(1.0～2.0 ng/ml)，且使用的剂量低于之前推荐的剂量。
在老年动物、肥胖动物或显著肾功能不全的动物，应根据需要减少剂量或延长给药间期。
不建议静脉滴注途径，如果静脉滴注，速度须非常慢且必须看护。
【安全性和操作】常规注意事项。
【禁忌证】频繁的心室性心律失常或房室传导阻滞。
【不良反应】猫对地高辛的毒性作用比犬敏感。
低钾血症易诱发所有物种对该药的毒性。
中毒性症状包括厌食、呕吐、腹泻、沉郁或心律失常（例如房室传导阻滞、二联律、阻滞伴发的阵发性室性或房性心动过速、多种室性期前收缩）。
利多卡因、苯妥英钠和普鲁卡因胺可控制地高辛相关的心律失常。
静脉给药或会导致血管收缩。
【药物相互作用】抗酸剂、化疗药物（环磷酰胺、阿糖胞苷、多柔比星和长春新碱）、西咪替丁和甲氧氯普胺可降低地高辛通过胃肠道的吸收。
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地高辛(Digoxin)酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
1 使用目的：
本试剂盒用于血液、血清、尿液等样本中地高辛(Digoxin)残留的定量检测。
2 实验原理
本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有地高辛(Digoxin)偶联抗原，加入地高辛(Digoxin)标准品或样品，游离地高辛(Digoxin)与微孔条上预包被的地高辛(Digoxin)偶联抗原互相竞争地高辛(Digoxin)抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中地高辛(Digoxin)含量成反比，通过标准曲线计算样品中地高辛(Digoxin)的含量。
3 试剂盒组成
3.1 预包被的地高辛(Digoxin)偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2地高辛(Digoxin)标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/L, 0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35 ug/L
3.3抗地高辛(Digoxin)抗体酶结合物：1瓶（6ml）。
3.4显色液A：1瓶（6ml）。
3.5显色液B：1瓶（6ml）。
3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9说明书一份。
4 需要而未提供的材料
4.1 设备
4.1.1波长450nm酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2 试剂
4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存
5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻
5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存
6 注意事项
6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2 不要使用过期试剂盒。
6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。
6.4 标准品中含有地高辛(Digoxin)，使用时应特别注意，操作时应带手套。
6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。
6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。
6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果
6.9 混合试剂时应避免起泡。
7 工作液准备
7.1地高辛(Digoxin)标准品溶液：0ug/L, 0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35 ug/L
7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用
7.3 样本稀释液：备用
7.3 显色剂：已备用，避免光线直照
7.4 反应终止液：已备用
8 样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）
8.1取10g粉碎的样品，加20ml 70%甲醇溶液
8.2强力振荡3分钟
8.3用Whatman No 1滤纸过滤
8.4取100µl处理后的样品，加入400µl样本稀释液
8.5取50μl稀释液进行分析（稀释倍数10）
动物组织前处理
8.6准确称取1±0.05 g匀浆后的组织样品到50 ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min
8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干
8.8加入2mL1×样品稀释液Ⅰ, 750rpm涡旋20s
8.9取100μl用于分析
饲料前处理方法
8.10准确称取1±0.05 g粉碎饲料样品到50 ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml 丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min
8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干
8.12加入1mL1×样品稀释液Ⅰ,涡旋20s，取出100μl加到900μl 1×样品稀释液Ⅰ，混匀后取100μl用于分析
牛奶前处理方法
8.13取1 ml牛奶样品到2 ml离心管中；用1×样品稀释液Ⅱ稀释30倍，混匀后取100μl用于分析
奶粉前处理方法
8.14准确称取0.3g奶粉样品到7 ml的聚苯乙烯离心管中；加入2ml 1×样品稀释液Ⅲ，2 ml 正己烷，震荡混匀
8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中间层，取下层溶液100μl到300μl 1×样品稀释液Ⅲ
8.16混匀后取100μl用于分析
9 酶免分析步骤
9.1 实验须知
9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。
回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
注：一定保证回温充分，否则影响检测的精确度和准确度。
9.1.2 使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
9.1.3 请不要改变分析程序
9.1.4 请使用精确的微量移液器
9.1.5 操作一旦开始，请不要中断任何程序
9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作
9.1.7 为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
9.1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
9.2 分析步骤
9.2.1 预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测
9.2.2 取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3 样品稀释液（10×）、浓缩洗涤液（20×）稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
9.2.4 在B0孔中加入50µl0.0 ug/L标准品溶液
9.2.5 在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
9.2.6 在各样品孔中加入50µl样品溶液
9.2.7 在所有孔中加入50µl的抗地高辛(Digoxin)抗体酶结合物
9.2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。
9.3 37℃温浴30min （温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）
9.3.1 甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
9.4 反应
9.4.1 洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50µl显色液A，再加50µl显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀
9.4.2 37℃温浴10min
9.4.3 每孔中加入50µl终止液，混匀
9.4.4 在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。
10 结果计算
10.1定量分析
10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以第一个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以100%，即百分吸光度值。
B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
B0—0 ug/L标准溶液的平均吸光度值
10.1.2以地高辛(Digoxin)浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。
根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为地高辛(Digoxin)浓度的对数值，求得反对数即为测定液中地高辛(Digoxin)浓度C（ug/L）
10.1.3由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
10.2 半定量测定
10.1.1目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
10.1.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
11 特异性
物质交叉反应
地高辛(Digoxin) 100%
12 试剂盒参数
本试剂盒检测下限为0.01 ug/L
B0吸光度最佳值应大于1.0
试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。
用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80％。
13 标准曲线模式（仅供参考）
试剂盒提供的标准曲线范围为0.01ug/L ~1.35ug/L。
14 分析限制
本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。