HGF和1,25-(OH)2 VitD3对兔骨髓基质干细胞成骨活性的联合诱导
25-羟基维生素D3的生物学特性及其在生猪饲粮中的应用研究进展
2021第1期 4525 - 羟 基 维 生 素 D3 的 生 物 学 特 性 及 其 在生 猪 饲 粮 中 的 应 用 研 究 进 展王海洲1，曹金党2，秦甜甜1（1.日照市畜牧兽医管理服务中心，山东 日照 276800；2.山东海能生物工程有限公司，日照 276800） 中图分类号：S828.5 文献标志码：Ａ 文章编号：1002-1957(2021)01-0045-04摘 要 25-羟基维生素D3是维生素D3在血液循环中的主要形式，被称为活性维生素D3，在生猪饲粮中添加能够显著提高生产性能，改善机体骨骼质量，提高机体免疫力。
文章就25-羟基维生素D3的生物学效价，对生猪钙、磷代谢及骨骼形成的影响及其在生猪生产中的研究应用效果进行综述，分析25-羟基维生素D3的营养功能及优势，以期为25-羟基维生素D3在生猪生产上广泛应用提供理论基础。
关键词 25-羟基维生素D3；生物学特性；生猪；生产性能；骨骼质量Biological Characteristics of 25 Hydroxyvitamin D3 and its Application in Pig DietWANG Haizhou1, CAO Jindang2, QIN Tiantian1(1.Rizhao Animal Husbandry and Veterinary Management Service Center, Rizhao 276800, China; 2.ShandongHaineng Bioengineering Co., Ltd., Rizhao 276800, China)Abstract25 hydroxy vitamin D3is the main form of vitamin D3 in the blood circulation, which is called active vitamin D3 . Adding 25 hydroxy vitamin D3 to the pig diet can significantly promote the production performance, improve the bone quality andenhance the immunity of the body. Based on the biological potency of 25 hydroxyvitamin D3 , this paper reviewes the effects of calcium, phosphorus metabolism and bone formation in pigs and its application in pig production as well as analyzes the nutritional functions and advantages of 25 hydroxyvitamin D3 , providing a theoretical basis for the wide application of 25 hydroxyvitamin D3 in pig production. Key words 25 hydroxyvitamin D3; biological characteristics; pig; production performance; bone quality25-羟基维生素D3（25-OH-D3）是维生素D3的活性代谢物，具有更强的生理活性，并且不需要经过肝脏的代谢[1]。
内质网分子蛋白在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及意义
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma)具有较高的发病率与死亡率，是世界范围内最为常见的恶性肿瘤之一［1］。
研究证明，转移和复发是导致《中国癌症杂志》2015年第25卷第2期 CHINA ONCOLOGY 2015 Vol.25 No.295内质网分子蛋白在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及意义张亚楠1，2，唐建武11.大连医科大学基础医学院病理学与法医学教研室，辽宁 大连 116044；2.山东中医药大学基础医学院病理学教研室，山东 济南 250355 ［摘要］ 背景与目的：内质网分子伴侣29(endoplasmic reticulum molecular chaperons 29，ERp29)是一种内质网应激蛋白，其高表达与肿瘤转移相关。
本研究旨在探讨ERp29在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及与肝癌淋巴道转移的关系。
方法：构建小鼠腹水型肝癌细胞株(高转移株Hca-F、低转移株Hca-P)淋巴道转移动物模型，通过免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blot)和流式细胞仪等方法检测ERp29在Hca-F、Hca-P细胞株中的表达情况。
结果：免疫组织化学检测结果显示，ERp29在Hca-F、Hca-P中均呈阳性表达，定位于细胞质，部分细胞核也有表达。
Western blot检测结果显示，ERp29在Hca-F、Hca-P 中的表达吸光度值分别为0.97±0.03和1.17±0.03，ERp29在Hca-F细胞株中的表达(吸光度值)明显低于Hca-P，差异有统计学意义(P ＜0.01)。
流式细胞仪检测结果显示，ERp29在Hca-F细胞株中的相对荧光强度值(375.27±47.33)显著低于Hca-P(623.91±46.80)，差异有统计学意义(P ＜0.01)。
结论：ERp29在小鼠腹水型肝癌细胞株Hca-F和Hca-P均有表达，且在Hca-F中表达较低，而在Hca-P中表达较高。
鹿茸多肽通过SDF-1α
鹿茸多肽通过SDF-1α/CXCR4轴调控PI3K/AKT信号通路促进下肢动脉硬化性闭塞症大鼠血管新生的作用机制丁爱国1,王雁彬2,李廷荃2,李子娟3,王继尧3,曹佳颖3摘要目的:探索鹿茸多肽通过基质细胞衍生因子(SDF-1α)/趋化因子受体(CXCR4)轴对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B (AKT)通路促进下肢动脉硬化性闭塞症(PAD)大鼠血管新生的作用机制㊂方法:采用结扎并离断大鼠股动脉及分支造成肢体缺血㊁给予高脂饲料喂养制作大鼠下肢动脉硬化闭塞症模型㊂将100只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为10组,分别为空白组㊁模型组㊁假手术组,鹿茸多肽低剂量组㊁鹿茸多中剂量肽组㊁鹿茸多肽高剂量组㊁抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组㊂将空白组㊁模型组及假手术组灌胃等容量蒸馏水㊂鹿茸多肽低㊁中㊁高剂量组+抑制剂LY294002组先行腹腔注射再灌胃,于造模完第1天开始给药,每日1次,28d后处死㊂采用流式细胞术检测给药后外周血㊁骨髓中造血干细胞(CD34+细胞)比例;免疫荧光法检测给药后患侧腓肠肌SDF-1α㊁PI3K的阳性细胞数比例㊂结果:造血干细胞(CD34+细胞)比例模型组均显著高于空白组(P<0.05);其中鹿茸多肽低剂量组较鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组阳性细胞比例升高,鹿茸多肽中剂量组较鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组阳性细胞比例升高,鹿茸多肽高剂量组较鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组阳性细胞比例升高(P<0.05);给药组SDF-1α㊁PI3K的阳性细胞数高于模型组及抑制组(P<0.05),鹿茸多肽中剂量组高于鹿茸多肽低剂量组(P<0.05),鹿茸多肽高剂量组高于鹿茸多肽高剂量组+ LY294002组(P<0.05)㊂结论:鹿茸多肽通过SDF-1α/CXCR4轴影响PI3K/AKT信号通路促进了内皮祖细胞的增殖及分化㊁PAD血管新生㊂关键词下肢动脉硬化性闭塞症;鹿茸多肽;内皮祖细胞;血管新生;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2024.08.012The Mechanism of Antler Polypeptide Regulating PI3K/AKT Signaling Pathway through SDF-1α/CXCR4Axis Promotes Angiogenesis on Rats with Lower Extremity Arteriosclerotic ObliteransDING Aiguo,WANG Yanbin,LI Tingquan,LI Zijuan,WANG Jiyao,CAO JiayingShuozhou People's Hospital,Shuozhou036000,Shanxi,ChinaCorresponding Author WANG Yanbin,E-mail:****************Abstract Objective:To explore the effect of antler polypeptides on phosphatidylinoinosidine-3-kinase(PI3K)/protein kinase B(AKT) pathway through stromal cell derived factor(SDF-1α)/receptor(CXCR4)axis,and to promote angiogenesis on rats with lower limb arteriosclerotic obliterans(PAD).Methods:The rats model with lower extremity arteriosclerosis obliterans were established by ligation and severing of femoral artery and branches to construct limb ischemia and feeding with high fat diet.One hundred male SD rats were randomly divided into blank group,model group and sham operation group;antler polypeptide low dose group,medium dose antler polypeptide medium dose group,antler polypeptide high dose group,inhibitor LY294002group,LY294002+antler polypeptide low dose group,LY294002+antler polypeptide medium dose group,LY294002+antler polypeptide high dose group.The blank group,model group and sham group were gavaged equal volume of distilled water.LY294002+antler polypeptide low dose group,LY294002+antler polypeptide medium dose group,LY294002+antler polypeptide high dose group were first injected intraperitoneally and then gavaged with intragastric administration,once a day after modeling,and rats,were executed after28days.Flow cytometry was used to detect the proportion of hematopoietic stem cells(CD34+cells)in peripheral blood and bone marrow after administration.The proportion of SDF-1αand PI3K positive cells in gastrocnemius muscle was detected by immunofluorescence assay.Results:The proportion of hematopoietic stem cells(CD34+cells)in model group was higher than that in blank group(P<0.05).The proportion of positive cells in antler polypeptide low dose group was higher than that in LY294002+antler polypeptide low dose group,the proportion of positive cells in antler polypeptide medium dose group was higher than that in LY294002+antler polypeptide medium dose group,and the proportion of positive cells in antler polypeptide high dose group was higher than that in LY294002+antler polypeptide high dose group(P<0.05). The proportion of positive cell number of SDF-1αand PI3K in administration group was significantly higher than that in model group and inhibition group(P<0.05),the antler polypeptide medium dose group was higher than that in LY294002+antler polypeptide medium dose group group,and the antler polypeptide medium dose group was higher than that in antler polypeptide low dose group group(P<0.05),antler polypeptide high dose group was higher than LY294002+antler polypeptide high dose group(P<0.05). Conclusion:Antler polypeptide affected the PI3K/AKT signaling pathway through SDF-1α/receptor(CXCR4)axis thereby promoting the proliferation and differentiation of endothelial progenitor cells,and facilitating the angiogenesis of PAD.Keywords arteriosclerotic obliterans of lower extremity;antler polypeptide;endothelial progenitor cells;angiogenesis;experimental study基金项目国家自然科学基金委员会资助项目(No.81874474);山西省自然基金项目(No.20210302124563);国家中医药管理局中医药领军人才培养项目岐黄学者支持项目作者单位 1.朔州市人民医院(山西朔州036000);2.山西中医药大学附属医院(太原030024);3.山西中医药大学通讯作者王雁彬,E-mail:****************引用信息丁爱国,王雁彬,李廷荃,等.鹿茸多肽通过SDF-1α/CXCR4轴调控PI3K/AKT信号通路促进下肢动脉硬化性闭塞症大鼠血管新生的作用机制[J].中西医结合心脑血管病杂志,2024,22(8):1423-1428.下肢动脉硬化性闭塞症(peripheral artery disease in the lower extremity,PAD)是我国老年人的常见病㊁多发病[1]㊂研究表明,有症状的PAD是全身血管系统硬化的重要标志,在早期以肢体发凉㊁怕冷及间歇性跛行为主[2-3],发展到后期常出现肢体末端坏疽而面临截肢,其病理特点往往表现为动脉粥样硬化导致的动脉狭窄㊁闭塞㊁局部缺血,所以该病治疗集中在缺血部位的血管再通和血管新生方面[4]㊂鹿茸能够补肾㊁填精㊁益髓,其核心成分是鹿茸多肽,探究鹿茸多肽调控内皮祖细胞(EPCs)动员㊁归巢及促进PAD缺血区血管新生的机制意义重大㊂本课题组前期动物实验已经证实,鹿茸能够改善内皮细胞,通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路调控EPCs的动员及归巢,促进PAD大鼠的血管新生[5-7]㊂鹿茸主要成分是鹿茸多肽,鹿茸多肽对成纤维细胞及表皮细胞有显著促进增殖作用,可以加速疮面的愈合,促进其血管内皮细胞增殖分化及迁移[8],对EPCs的特征和鹿茸多肽信号传导途径的充分理解更有利于研究PAD的分子生物学机制㊂本研究旨在分析鹿茸多肽通过基质细胞衍生因子(SDF-1α)/趋化因子受体4(CXCR4)轴对PI3K/AKT通路的影响,探讨促进PAD大鼠血管新生的作用机制㊂1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物100只2月龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,清洁级,体质量250~300g,由山西省中医药研究院提供,实验动物合格证号:1103221911003889[9]㊂1.1.2饲料制备高脂饲料:80.3%基础饲料+15%猪油+0.5%淡黄色胆酸钠+0.2%丙硫氧嘧啶+4%胆固醇㊂1.1.3药物与试剂鹿茸多肽采用马鹿茸多肽,鹿茸多肽冻干粉购于陕西斯诺特生物科技技术有限公司,储存于室温,鹿茸多肽冻干粉溶于去离子水,配置为浓度4.5mg/mL的溶液,置于EP管中,储存在2~6ħ冰箱中[9];PI3K 抑制剂LY294002采购于美国辉瑞公司,用非质子溶剂二甲基亚砜(DMSO)配置母液(10mg PI3K抑制剂溶于6.5075mL二甲基亚砜中)在-20ħ冰箱保存,每日所配置的当日所需工作液由10%母液+40% PEG300+5%Tween-80+45%生理盐水组成,即用即配[9];维生素针剂D3购于哈尔滨摩天农科兽药有限公司;造血干细胞CD34抗体及同型对照抗体购于BD公司;SDF-1α㊁PI3K购于英国Abcam公司㊂1.1.4仪器德国EPPENDORF移液器;电子天平购于瑞士METTER公司;中国中衫金桥有限公司微量加样吸头;法国Froilabo烘箱;日本OLYMPUS显微镜;脱水机㊁包埋机及冻台购于武汉俊杰电子公司;病理切片机购于上海徕卡科技公司;烤箱㊁微波炉及冰箱购于美的电器制造有限责任公司;流式细胞仪购于美国贝克曼库尔特公司;恒温水浴箱购于江苏太仓医用仪器厂;高速搅拌器为德国Fluko公司㊂1.2实验方法1.2.1分组按随机数字表法将100只大鼠分为10组:空白组㊁模型组㊁假手术组㊁给药组(包括鹿茸多肽低剂量组㊁鹿茸多肽中剂量组㊁鹿茸多肽高剂量组㊁鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组)㊁抑制剂LY294002组,每组10只㊂1.2.2PAD模型制作将SD雄性大鼠,腹腔麻醉(5%水合氯醛溶液7mL/kg),取平卧位,固定于手术台中央,左腹股沟区域碘消毒,纵向切口约1.5cm,暴露血管鞘,分离其股动脉及其分支,齿镊钳夹约30s,结扎并离断左侧股动脉的分支;用0号线缝合皮肤及皮下组织,在SD大鼠背部皮下注射生理盐水10mL补液抗休克治疗,观察大鼠各项生命体征,平稳后放回鼠笼;肌肉注射30ˑ104U 青霉素3d,预防感染;饲料为高脂饲料并且喂养12周[8-9];给予维生素D3(30ˑ104U/kg),右下肢肌肉注射,每月1次[10]㊂1.2.3给药方法鹿茸多肽低㊁中㊁高剂量组分别灌胃给药0.143 g/(kg㊃d)㊁0.286g/(kg㊃d)㊁0.572g/(kg㊃d)㊂抑制剂LY294002组腹腔注射LY2940021mg/(kg㊃d);空白组㊁模型组和假手术组灌胃等容量蒸馏水;鹿茸多肽低中㊁高剂量+抑制剂LY294002组先进行腹腔注射然后再灌胃;在造模后的第1天给药,连续28d,每日1次,28d后处死大鼠[9]㊂1.2.4采集标本及处理方法将大鼠麻醉,用小镊子摘去其中一只眼球,收集外周血到微量离心管(EP)管中;取大鼠结扎及分离后术侧的下肢股骨,用注射器抽吸磷酸缓冲盐溶液(PBS)反复冲洗下肢股骨骨髓腔,过滤㊁离心及吹打后制成密度均匀的骨髓悬液,收集到EP管中,温度调至-70ħ冻存[9]㊂1.2.5检测指标1.2.5.1 一般状态观察SD 大鼠的一般状态,包括大鼠的精神状态和毛色,大鼠的皮温和活动灵敏度等㊂1.2.5.2 大鼠血脂水平分别于手术后第6周㊁12周时测量与记录空白组和给药组大鼠体质量,用乙醇棉球擦拭固定好的大鼠尾部,将尾静脉血抽取作为标本,用生化分析仪检测空白组和给药组低密度脂蛋白(LDL )㊁总胆固醇(TC )㊁三酰甘油(TG )水平[9]㊂1.2.5.3 采用流式细胞术检测外周血㊁骨髓中CD 34+细胞比例将每只大鼠各设置5个测定管,2个单染管及同型对照管,另加1个三染测定管,在抗凝管中加入红细胞裂解液5mL ,放入37ħ恒温水温箱中,避光孵育10min ,1500r/min 离心5min ,弃上清,在抗凝管中加红细胞裂解液5mL ,再次放入37ħ恒温水温箱中避光孵育10min ,1500r/min 离心5min ,弃上清后加PBS 350μL ,将每个样品分装到5个1.5mL 的离心管中,每管给予50μL ,按CD 34检测㊁CD 34对照及三色检测顺序标明各管,将各管中加入所对应的抗体,放入4ħ恒温水温避光孵育20~25min ,各管加1mL PBS 缓冲液洗涤1次,再以1500r/min 离心5min ,弃上清液,加入PBS 缓冲液定容至500μL ,样本按CD 34检测㊁CD 34对照㊁三色检测移至流式管中备用,最后将样品重悬,按CD 34检测㊁CD 34对照㊁三色检测顺序上机检测,软件分析各管双阳性细胞所占比例[12]㊂1.2.5.4 免疫荧光技术检测下肢腓肠肌中SDF -1α㊁PI3K 的阳性细胞数将样本涂片后用多聚甲醛固定10min ;PBS 溶液微振荡洗涤5min ˑ2次,加0.4%裂解缓解液T riton -X100破膜5~10min ,然后用PBS 微振荡洗涤3min ˑ3次;再用1%PBS 溶液封闭30min 至1h ;给予0.5%PBS 溶液稀释一抗,比例为1ʒ100;4ħ过夜;冰箱取出后需37ħ复温45min ;或在室温下2~3h ;或37ħ1h ,用0.5%PBS 溶液稀释二抗,比例为1ʒ400;室温30min 至1h ;孵育后洗涤5min ˑ3次;荧光染料DAPI 原液为1g/mL ,将其稀释为1ʒ1000浓度,快速染色10s ,再用蒸馏水冲洗和用防淬灭的封片剂封片,在荧光显微镜高倍视野下观察[9]㊂1.3 统计学处理应用SPSS 25.0软件进行统计分析,定量资料符合正态分布且方差齐时用独立样本t 检验,以均数ʃ标准差(x ʃs )表示;不符合正态分布时用秩和检验,方差不齐时用校正t 检验㊂以P <0.05为差异有统计学意义㊂2 结 果2.1 大鼠一般状态空白组和假手术组大鼠毛色光泽,活动灵敏,下肢温度正常;模型组和给药组大鼠毛色暗淡,活动欠灵敏,下肢温度降低㊂2.2 空白组与给药组大鼠血脂水平变化空白组的LDL ㊁TC ㊁TG 在实验第6周与第12周比较,差异均无统计学意义(P >0.05)㊂给药组各时期TC 及LDL 与空白组比较,差异有统计学意义,LDL第12周较第6周上升(P <0.05)㊂详见表1㊂表1 空白组与给药组TG ㊁TC ㊁LDL 水平比较(x ʃs )单位:mmol/L组别只数 LDL 第6周第12周TC 第6周第12周TG 第6周第12周空白组100.21ʃ0.050.23ʃ0.030.65ʃ0.061.95ʃ0.230.62ʃ0.030.65ʃ0.06给药组100.46ʃ0.03①0.91ʃ0.02①②1.55ʃ0.20①2.86ʃ0.35①1.84ʃ0.053.26ʃ0.54①注:与空白组同期比较,①P <0.01;与同组第6周比较,②P <0.05㊂2.3 流式细胞术检测给药后外周血和骨髓中CD 34+细胞比例与空白组比较,模型组外周血和骨髓中CD 34+阳性细胞比例升高;与鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组比较,鹿茸多肽低剂量组㊁鹿茸多肽中剂量组㊁鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽高剂量组㊁鹿茸多肽高剂量+LY294002组外周血和骨髓中CD 34+阳性细胞比例升高;鹿茸多肽中剂量组较鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组外周血和骨髓中CD 34+阳性细胞比例升高;鹿茸多肽高剂量组㊁鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组较鹿茸多肽中剂量+LY294002组外周血和骨髓中CD 34+阳性细胞比例升高;鹿茸多肽高剂量组较鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组外周血和骨髓中CD 34+阳性细胞比例升高;与模型组比较,假手术组㊁给药组外周血和骨髓中CD 34+阳性细胞比例升高㊂详见表2㊂表2各组大鼠外周血和骨髓中CD34+阳性细胞比例比较(xʃs)组别只数外周血骨髓空白组10 1.93ʃ0.470.97ʃ0.24假手术组10 1.97ʃ0.24⑤0.98ʃ0.13⑤模型组10 2.87ʃ0.06① 1.57ʃ0.06①鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组10 3.70ʃ0.12①⑤ 1.64ʃ0.15①⑤鹿茸多肽低剂量组10 4.17ʃ0.19①②⑤ 2.21ʃ0.15①②⑤鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组10 4.77ʃ0.03①②⑤ 2.97ʃ0.04①②⑤鹿茸多肽中剂量组10 5.17ʃ0.21①②③⑤ 3.17ʃ0.18①②③⑤鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组10 6.39ʃ0.17①②③⑤ 3.55ʃ0.13①②③⑤鹿茸多肽高剂量组107.63ʃ0.27①②③④⑤7.92ʃ0.36①②③④⑤抑制剂LY294002组10 2.54ʃ0.24① 1.25ʃ0.15①注:与空白组比较,①P<0.05;与鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组比较,②P<0.05;与鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组比较,③P<0.05;与鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组比较,④P<0.05;与模型组比较,⑤P<0.05㊂2.4免疫荧光法检测给药后腓肠肌中SDF-1α㊁PI3K 阳性细胞数与抑制剂LY294002组比较,模型组及给药组抑制剂LY294002组SDF-1α㊁PI3K阳性细胞数增加(P< 0.05);与模型组比较,给药组㊁模型组SDF-1α㊁PI3K阳性细胞数增加(P<0.05);与鹿茸多肽低剂量组比较,鹿茸多肽中剂量组㊁鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组㊁鹿茸多肽高剂量组㊁鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组较鹿茸多肽低剂量组阳SDF-1α㊁PI3K阳性细胞数增加(P<0.05)㊂详见表3及图1㊁图2㊂表3各组大鼠腓肠肌中SDF-1α㊁PI3K阳性细胞数比较(xʃs)组别只数SDF-1αPI3K空白组10 1.36ʃ1.02 3.21ʃ2.51假手术组109.11ʃ0.0610.03ʃ0.11抑制剂LY294002组1025.15ʃ2.0617.52ʃ1.36模型组1027.22ʃ3.17①17.46ʃ2.02①鹿茸多肽低剂量组1038.03ʃ1.24①②32.92ʃ2.36①②鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组1027.55ʃ2.13①②53.21ʃ3.45①②鹿茸多肽中剂量组1049.17ʃ2.21①②③41.10ʃ2.16①②③鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组1042.72ʃ2.03①②③37.91ʃ3.24①②③鹿茸多肽高剂量组1053.21ʃ3.45①②③62.86ʃ3.19①②③鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组1049.30ʃ2.05①②③54.78ʃ2.12①②③注:与抑制剂LY294002组比较,①P<0.05;与模型组比较,②P<0.05;与鹿茸多肽低剂量组比较,③P<0.05㊂图1免疫荧光法检测各组腓肠肌中SDF-1α阳性细胞数图2免疫荧光法检测各组腓肠肌中PI3K阳性细胞数3讨论PAD的病理特点往往表现为动脉狭窄㊁闭塞㊁局部缺血,所以该病治疗集中在缺血部位的血管再通和血管新生方面[9]㊂外科手术和介入难以从根本上解决术后再狭窄和术后血管远期通畅率㊂有文献报道,在膝上股-腘动脉人工血管移植后3年的通畅率为60%~ 80%,膝下3年通畅率仅20%~30%,并且外科治疗在基层医疗机构推广应用困难[10]㊂血管新生的研究为临床治疗PAD提供了新的思路,是指通过药物促进缺血组织在原有微血管基础上形成新毛细血管与原有血管网相交汇,通过加速和增加侧支动脉发育来治疗血管狭窄㊁阻塞引起的缺血[11]㊂EPCs源于骨髓,具有调控缺血区定向归巢的作用,成熟的内皮细胞与血管新生有密切关系,直接参与血管新生㊂中药干预在治疗PAD方面有极大潜力㊂鹿茸能够补肾㊁填精㊁益髓,其核心成分是鹿茸多肽,探究鹿茸多肽调控EPCs 动员㊁归巢及促进PAD缺血区血管新生的机制意义重大㊂PAD病本在肾,病位在脉,补肾是关键㊂中医学将PAD归为 脉痹 阴疽 脱疽 范畴,其病本在肾,病位在脉㊂本病的发生多与肾虚血瘀有关㊂人到老年,随着年龄的增长,肾精渐亏,肾阳渐衰,导致气血亏虚,运行无力,脉络不通,筋脉痹阻,肢体缺乏血液的濡养,故出现发凉㊁麻木㊁间歇性跛行等㊂‘景岳全书“: 血即精之属也 ,精髓是化生血液的基本物质㊂清代王士雄‘温热经纬“曰: 人体血生于脾,藏于肝,脉源于肾而主于心 ,也就是说其资始于肾,即脉形成的物质基础是肾精,所以脉络生成受到 肾 的调控㊂鹿茸补肾生髓,鹿茸中含有大量的氨基酸㊁蛋白质㊁糖类化合物㊁多肽,其中鹿茸多肽为其主要成分[12]㊂鹿茸多肽含有许多细胞生长因子和内生的抗氧化酶,如血管内皮生长因子(VEGF)㊁谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和过氧化氢酶(CAT)等多种在疾病治疗中起主要作用的生物活性成分[13-15]㊂SDF-1α/CXCR4轴在EPCs归巢到缺血组织过程中起着重要作用㊂基质细胞衍生因子-1α(stromal cell derived factor-1,SDF-1α),属于CXC型趋化因子,参与缺血诱导的EPCs动员及介导EPCs在缺血组织中趋化和归巢[16]㊂CXCR4作为SDF-1α的唯一受体,是一种具有7个跨膜结构域的G蛋白偶联受体[17],研究证明,缺血组织SDF-1α表达增强,进而导致外周血SDF-1α水平升高,组织缺血同时诱导骨髓SDF-1α表达下调,骨髓对EPCs的滞留作用减弱,外周血对EPCs 的趋化作用增强,从而导致骨髓源性EPCs动员到外周血,参与缺血组织新生血管的形成[18]㊂PI3K/AKT信号转导通路处于SDF-1α/CXCR4轴的下游,调控EPCs的迁移及归巢,抑制受体CXCR4可显著降低SDF-1α诱导的骨髓EPCs归巢到下肢缺血区域的数量[19-20]㊂鹿茸多肽促进外周血及骨髓EPCs缺血区血管新生㊂本实验通过SDF-1α/CXCR4轴调控PI3K/AKT信号通路促进EPCs的动员及归巢,促进血管新生㊂因此,本实验检测CD34+阳性细胞比例㊁SDF-1α㊁PI3K的阳性细胞数,结果显示CD34+细胞比例模型组高于空白组(P<0.05);其中鹿茸多肽低剂量组较鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组阳性细胞数升高,鹿茸多肽中剂量组较鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组阳性细胞数升高,鹿茸多肽高剂量组较鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组阳性细胞数升高(P<0.05);给药组SDF-1α㊁PI3K的阳性细胞数数高于模型组及抑制剂组(P<0.05),鹿茸多肽中剂量组高于鹿茸多肽低剂量组(P<0.05),表明大鼠下肢动脉硬化闭塞缺血激活了SDF-1α/CXCR4轴从而调控PI3K/AKT信号通路,在鹿茸多肽干预下促进了EPCs的增殖及分化,影响下肢动脉硬化闭塞症大鼠,促进PAD大鼠血管新生[9]㊂综上所述,鹿茸多肽可以促进PAD大鼠血管新生,通过SDF-1α/CXCR4轴调控PI3K/AKT信号通路促进了EPCs的增殖及分化,鹿茸多肽提高外周血及骨髓CD34+细胞比例,给药后提高腓肠肌中SDF-1α㊁PI3K阳性细胞数比例㊂参考文献:[1]徐义岩,王海洋.下肢动脉硬化闭塞症的治疗进展[J].医学论述,2020,26(24):4892-4895.[2]TICKNER A,KLINGHARD C,ARNOLD J F,et al.Total contact castuse in patients with peripheral arterial disease:a case series andsystematic review[J].Wounds,2018,30(2):49-56.[3]GIANNOPOULOS G,ANGELIDIS C,VOGIATZI G,et al.Antioxidant treatment in peripheral artery disease:the rationale isthere,but what about clinical results?[J].Curr Opin Pharmacol,2018,39:53-59.[4]LEE S C,JOH J H,CHANG J H,et al.Hybrid treatment ofmultilevel revascularization in patients with peripheral arterialdisease--a multi-centre study in Korea[J].Vasa,2018,47(3):235-241.[5]王雁彬,化金凤,张晓园,等.鹿茸对大鼠下肢缺血模型CD34+㊁FLK-1+阳性细胞比例影响[J].辽宁中医药大学学报,2015,17(1):24-26.[6]化金凤,索炜,李廷荃.鹿茸对大鼠缺血下肢骨骼肌毛细血管密度的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2014,12(1):80-81. [7]化金凤,索伟,李廷荃.鹿茸对大鼠下肢缺血模型VEGF表达的影响[J].辽宁中医药大学学报,2014,16(2):34-36.[8]李琳,叶彤,陈文凤,等.鹿茸多肽功能的研究进展[J].吉林医药学院学报,2020,41(1):54-56.[9]李子娟,李廷荃,王雁彬,等.鹿茸通过PI3K/AKT信号通路促进下肢动脉硬化性闭塞症大鼠血管新生的作用机理[J].时珍国医国药,2021,32(9):2061-2066.[10]MINGOLI A,SAPIENZA P,FELDHAUS R J,et parison offemorofemoral and aortofemoral bypass for aortoiliac occlusivedisease[J].J Cardiovasc Surg(Torino),2001,42(3):381-387. [11]MANUNEEDHI CHOLAN P,CARTLAND S P,KAVURMA M M.NADPH oxidases,angiogenesis,and peripheral artery disease[J].Antioxidants(Basel),2017,6(3):E56.[12]GILBEY A,PEREZGONZALEZ J D.Health benefits of deer andelk velvet antler supplements:a systematic review of randomisedcontrolled studies[J].N Z Med J.2012,125(1367):80-86. [13]CHENG S L,JIAN Y L,CHEN C M,et al.Relationships betweenantioxidants and quality characteristics from velvet antlers offormosan sambar deer[J].Korean J Food Sci Anim Resour,2017,37(4):542-551.[14]PITA-THOMAS W,NIETO-SAMPEDRO M,MAZA R M,et al.Factors promoting neurite outgrowth during Deer antlerregeneration[J].J Neurosci Res,2010,88(14):3034-3047. [15]XIAO X,XU S,LI L,et al.The effect of velvet antler proteins oncardiac microvascular endothelial cells challenged with ischemia-hypoxia[J].Front Pharmacol,2017,8:601.[16]DE FALCO E,PORCELLI D,TORELLA A R,et al.SDF-1involvement in endothelial phenotype and ischemia-inducedrecruitment of bone marrow progenitor cells[J].Blood,2004,104(12):3472-3482.[17]T ARASOV A N I,RICE W G,MICHEJDA C J.Inhibition of G-protein-coupled receptor function by disruption of transmembrane domaininteractions[J].J Biol Chem,1999,274(49):34911-34915. [18]WALTER D H,HAENDELER J,REINHOLD J,et al.ImpairedCXCR4signaling contributes to the reduced neovascularizationcapacity of endothelial progenitor cells from patients withcoronary artery disease[J].Circ Res,2005,97(11):1142-1151. [19]CHA V AKIS E,CARMONA G,URBICH C,et al.Phosphatidylinositol-3-kinase-gamma is integral to homing functions of progenitor cells[J].Circ Res.2008,102(8):942-949.[20]ZHENG H,FU G,DAI T,et al.Migration of endothelial progenitorcells mediated by stromal cell-derived factor-1αlpha/CXCR4viaPI3K/Akt/eNOS signal transduction pathway[J].J CardiovascPharmacol,2007,50(3):274-280.(收稿日期:2023-11-27)(本文编辑王雅洁)。
典型水稻土中固碳基因及功能微生物研究
II
典型水稻土中微生物固碳研究
高于 cbbM 和 cbbLG，且其丰度与土壤固碳酶活性显著正相关，我们推测 cbbLR 在 3 种基因中可能发挥着更大的作用。与土壤理化性质进行统计分析显示粘粒 含量、碳氮比、阳离子交换量（CEC）、pH 和土壤有机碳（SOC）含量对微生 物群落组成和 marker 基因丰度变异显著相关。
衷心感谢贺纪正老师、黄益宗老师、乔敏老师、胡莹老师、刘云霞老师、 孙国新老师、段桂兰老师、陈正老师、张丽梅老师、郑袁明老师和刘玉荣老师 的帮助与指导！衷心感谢中科院城市环境研究所的苏建强老师、亚热带所魏文 学老师和葛体达老师在样品采集、实验过程和数据分析方面的悉心指导。衷心 感谢生态中心人教处的杜向荣老师、任慧敏老师、冯娟老师和曹青老师在入学 和毕业过程中所给予的无私帮助。
肖可青
陆地生态系统是地球上仅次于海洋生态系统的第二大碳（C）库。农田土 壤是陆地生态系统的重要组成部分，由于人类活动的长期干扰（如耕作、施肥、 排水和灌溉等）使得该 C 库成为最活跃的一部分，而这一特征在水稻土中尤为 明显。微生物在 C 元素循环过程中扮演中极为重要的作用，它们有极高的丰度 和代谢多样性，几乎参与了 C 循环的所有环节。由微生物调控的土壤 C 循环过 程可以固定或释放温室效应气体 CO2，进而影响全球气候。研究微生物固定 CO2 的分子生态机理对于缓解全球气候变暖具有重要科学意义，同时也可以为农田 土壤肥力科学化管理提供技术支撑，为正确评估农田土壤固碳潜力及低碳农业 规划提供科学依据。
施万细胞对骨髓基质干细胞向神经组织细胞分化诱导的作用
施万细胞对骨髓基质干细胞向神经组织细胞分化诱导的作用林巍巍;陈雪;李奕;王晓冬【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2009(013)040【摘要】背景:骨髓基质干细胞具有向神经组织细胞分化的多潜能特性.以往实验以化学试剂作为诱导剂加入细胞培养液中,在体外成功地诱导出神经组织细胞.目的:观察大鼠施万细胞和骨髓基质干细胞体外共培养后,骨髓基质干细胞能否被诱导向神经组织细胞分化.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-09/2008-10在南通大学医学院组织学与胚胎学教研室及江苏省神经再生重点实验室完成.材料:SPF级新生1-3 d龄SD大鼠用于制备施万细胞,SPF级成年雄性SD大鼠用于制备骨髓基质干细胞,动物均由南通大学实验动物中心提供.方法:将传2代培养的骨髓基质干细胞和施万细胞分别以1×105和1×106的密度接种于transwell双层6孔细胞培养板的皿底和板底,两种细胞间隔以PET膜,其膜孔径为0.4 μm,于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中进行非接触性共培养14 d.另外,将施万细胞培养上清作为条件培养基,培养骨髓基质干细胞14 d.主要观察指标:光镜下观察共培养后骨髓基质干细胞的形态变化;MTT检测共培养前后骨髓基质干细胞的活性;免疫荧光染色鉴定共培养后骨髓基质干细胞S-100蛋白的表达,流式细胞仪测定S-100蛋白阳性率;免疫荧光染色检测条件培养基培养后骨髓基质干细胞S-100,P75,GFAP的表达.结果:共培养后的骨髓基质干细胞形态发生改变,原来宽大扁平的胞体开始收缩,细胞胞体呈梭形,部分细胞类似施万细胞呈线性排列.共培养前后及条件培养基培养后,骨髓基质干细胞的活力无明显差异(P>0.05).共培养14 d后,骨髓基质干细胞表达施万细胞表面标记S-100蛋白,阳性率达(22.54±2.36)%.条件培养基培养14 d后,骨髓基质干细胞表达施万细胞表面标记S-100蛋白,P75,GFAP.结论:施万细胞分泌因子可以诱导部分骨髓基质干细胞向神经组织细胞分化,并表达施万细胞表面标记.【总页数】6页(P7865-7870)【作者】林巍巍;陈雪;李奕;王晓冬【作者单位】南通大学医学院组织学与胚胎学教研室,江苏省神经再生重点实验室,江苏省南通市,226001;南通大学医学院组织学与胚胎学教研室,江苏省神经再生重点实验室,江苏省南通市,226001;南通大学医学院组织学与胚胎学教研室,江苏省神经再生重点实验室,江苏省南通市,226001;南通大学医学院组织学与胚胎学教研室,江苏省神经再生重点实验室,江苏省南通市,226001【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.骨髓基质细胞对中脑神经干细胞分化为神经元的诱导作用 [J], 娄淑杰;顾平;李怡;徐晓辉;王铭维;何成;路长林2.骨桥蛋白在体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化中的作用 [J], 吴沁民;王东;孙海钰;张磊3.施万细胞对大鼠骨髓基质干细胞向神经组织细胞分化诱导的初步研究 [J], 林巍巍; 陈雪; 李奕; 王晓冬4.NF-κB和Ubc9在HGF和β-NGF诱导骨髓基质干细胞分化为肝细胞中的作用[J], 曹留霞;张静;刘晓萍;卞晶晶;陈琛5.ERK1/2信号转导通路对骨髓基质细胞条件培养液诱导大鼠中脑神经干细胞分化作用的影响 [J], 顾平;王彦永;马芹颖;温雅;崔冬生;刘力;王铭维;张振清因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丙酸睾酮在肉鸡组织中残留及其对机体健康的影响
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董 艾 青 等 $丙 酸 睾 酮 在 肉 鸡 组 织 中 残 留 及 其 对 机 体 健 康 的 影 响
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Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2023, 13(4), 5841-5847 Published Online April 2023 in Hans. https:///journal/acm https:///10.12677/acm.2023.13482525(OH)D3、ALP 、PTH 在早产儿代谢性骨病患儿中的表达及意义季坚卫，杨宁飞，吴东平义乌市中心医院新生儿科，浙江 义乌收稿日期：2023年3月13日；录用日期：2023年4月9日；发布日期：2023年4月18日摘 要目的：研究25羟维生素D3 [25(OH)D3]、碱性磷酸酶(ALP)、甲状旁腺素(PTH)在早产儿代谢性骨病患儿中的表达及意义。
方法：选取2021年6月1日~2022年5月31日之间于我院新生儿NICU 收治的早产儿62例，另选30例足月新生儿设为足月儿组。
所有患儿均采集静脉血检测血清25(OH)D3、ALP 、PTH 水平，分析血清25(OH)D3、ALP 、PTH 水平与早产儿发生代谢性骨病的关系。
结果：早期早产儿组、晚期早产儿组生后1 d 、7 d 、14 d ，25(OH)D3水平均低于足月儿组，具有统计学差异(P < 0.05)；ALP 、PTH 水平均高于足月儿组，具有统计学差异(P < 0.05)。
早产儿代谢性骨病患儿25(OH)D3、水平与早产儿胎龄呈正相关，具有统计学差异(P < 0.05)；ALP 、PTH 水平与早产儿胎龄呈负相关，具有统计学差异(P < 0.05)。
ROC 曲线显示，与血清25(OH)D3、ALP 、PTH 表达情况单项诊断相比，联合对早产儿代谢性骨病的诊断价值较高(P < 0.05)。
结论：25(OH)D3、ALP 、PTH 含量水平与早产儿代谢性骨病密切相关。
25(OH)D3水平与代谢性骨病呈正相关，ALP 、PTH 水平与代谢性骨病呈负相关。
疫学第八章细胞因子
诱导血管内皮细胞表达细胞间粘附分子－1（ICAM-1) 分泌IL-1、 IL-8等炎症分子和趋化因子 增强中性粒细胞和单核吞噬细胞的吞噬功能
类似于IFN的作用 直接杀伤病毒感染细胞
促进炎症反应
抗病毒作用
致热作用 内热性热源质
直接作用于下丘脑体温调节中枢 刺激巨噬细胞释放IL-1
引发恶液质
由TNF引起，能够促进蛋白脂肪消耗、分解，引起代谢紊乱 表现为厌食、恶心、消瘦、衰弱和贫血
能够刺激多能造血干细胞和不同发育分化的造血干细胞进行增殖分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。 分类 粒细胞集落刺激因子（granulocyte-CSF, G-CSF) 巨噬细胞集落刺激因子（macrophage-CSF，M－CSF) 粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子 （granulocyte-maceophage-CSF, GM-CSF) 红细胞生成素（erythropoietin, EPO) 干细胞生成因子（stem cell factor,SCF) 多能集落刺激因子（multi-CSF)
IL-4 + IL-5
B细胞
IL-4
IFN-g
拮抗性
重叠性
协同性
均有刺激B细胞增殖的功能
更有效地诱导IgE类别转换
IFN-g 阻断IL-4诱导类别转化的作用，IL-4抑制IFN-g
B
B
B
Gery(1972)发现 由单核／巨噬细胞、T淋巴细胞所分泌； 介导并调节固有免疫、适应性免疫，在炎症反应中起作用． 目前已经有IL1～30种以上.
重要的细胞因子介绍
第二节 白细胞介素（IL）
细胞来源 主要由活化的单核－巨噬细胞产生。
01
存在形式 IL-1α和IL-1β。
一种软骨祖细胞培养基及其制备方法和应用[发明专利]
![一种软骨祖细胞培养基及其制备方法和应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a5643b336f1aff00bfd51e5b.png)
专利名称：一种软骨祖细胞培养基及其制备方法和应用专利类型：发明专利
发明人：梁成振,夏楷顺,李中伟,李荣辉
申请号：CN201911374797.0
申请日：20191227
公开号：CN111057677A
公开日：
20200424
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种软骨祖细胞培养基，由DMEM培养基、F12培养基、脯氨酸、丙酮酸钠、维生素C、胰岛素生长因子、FGF2、转铁蛋白、ROCK抑制剂、p38抑制剂和GSK‑3α/β抑制剂组成。
通过混合各组分，再调节混合物pH和渗透压后灭菌处理制得。
本发明为培养细胞提供足够的营养物质和稳定的生存环境，使其具有优异的自我更新能力。
因未使用动物源成分，有效规避因此而造成污染的发生，完全避免诱发免疫反应的发生。
培养基制备方法步骤简单、原料易得，不含血清，可保持CPCs的未分化、多能状态，专用于软骨祖细胞培养与扩增。
本发明是一个长久持续高效的CPCs培养系统，使体外稳定繁殖功能性小鼠和人软骨祖细胞成为可能。
申请人：浙江大学
地址：310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号
国籍：CN
代理机构：杭州求是专利事务所有限公司
代理人：赵杭丽
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成骨细胞的细胞社会学特性
・组织工程・成骨细胞的细胞社会学特性余希杰1 杨志明1 马骏荣2 摘 要 成骨细胞与材料复合构建组织工程化人工骨,有可能为治疗骨缺损提供一种新方法。
这一技术的关键是为成骨细胞功能活动提供最佳环境。
在总结了成骨细胞的细胞社会学特性之后,认为,理想的人工骨组成成份包括有机材料、无机材料及成骨细胞、血管内皮细胞等细胞成份,并含有最佳组合的生长因子缓释系统,植入体内能快速血管化,并形成大量骨组织修复缺损。
关键词 成骨细胞 细胞社会学 人工骨 细胞社会学是从系统论观点出发,研究细胞群体的社会行为,包括细胞与细胞、细胞与胞外基质(extracellular matrix,EC M)间的识别、通迅、相互作用及整体对部分的调控等内容。
在体内环境中,成骨细胞位于胞外基质中,与骨细胞、破骨细胞和血管内皮细胞等有着广泛的联系,同时有自分泌和旁分泌的激素、细胞因子和生长因子调节其成骨活动。
1 成骨细胞的细胞社会学特性1.1 成骨细胞与胞外基质的关系EC M以往被认为仅具有连接和支持细胞、组织的作用,因而未受到应有的重视。
近年的研究表明,组成EC M成份是极其复杂和多样的,不仅决定细胞的形态,而且还控制细胞的生长、分化,调节细胞的功能活动。
成骨细胞的EC M包括无机和有机两部分,无机盐以结晶的羟基磷灰石[Ca10(PO4)(OH)2]形式存在,主要作用为增强骨组织的力学强度;有机成份以Ⅰ型胶原为主,还包括骨钙素(osteocalcin,OC),骨桥蛋白(osteopontin,OPN),骨连接蛋白(osteonectin, ON),纤维连接蛋白(fibronectin,FN),层连蛋白(lamin)等无定形基质。
目前认为有机成份在成骨细胞增殖、分化等过程中发挥重要作用。
N olan等[1]证实成骨细胞在脱钙骨基质上有很强的粘附和增殖能1 华西医科大学附属第一医院骨科(四川成都,610041)2 凉山州第一人民医院康复科力。
地舒单抗在体外活性与动物模型中的疗效评价
地舒单抗在体外活性与动物模型中的疗效评价地舒单抗（Denosumab）是一种被广泛用于骨质疏松症治疗的嵌合型单克隆抗体。
作为一种抗RANKL（细胞因子受体活化因子配体）的抗体，地舒单抗通过抑制骨吸收作用，有助于增加骨密度，减少骨折风险。
本文将重点关注地舒单抗在体外活性与动物模型中的疗效评价。
地舒单抗的体外活性评价主要基于其对RANKL靶点的抑制作用。
RANKL是促进骨吸收的重要调节因子，它与其受体RANK结合后，促使成骨细胞向骨吸收细胞（如成骨细胞和巨噬细胞）发出信号，从而引起骨吸收。
通过使用体外细胞培养系统，可以评估地舒单抗对RANKL信号通路的抑制效果。
例如，研究者可以在培养系统中加入地舒单抗，并测量骨吸收相关因子（如骨吸收细胞的分化和骨特异性标志物的分泌）的变化。
这些实验可以定量评估地舒单抗的抗骨吸收效果，从而为其临床应用提供支持。
在动物模型中评价地舒单抗的疗效，主要包括对骨质疏松症动物模型的治疗效果的评估。
常用的骨质疏松症动物模型包括去卵巢大鼠模型、去睾丸大鼠模型和去卵巢小鼠模型。
研究者可以通过给予这些动物模型地舒单抗治疗，并对骨密度、骨微结构和骨折风险进行评估。
例如，可以利用X射线吸收法（DXA）或骨成像技术（如CT和MRI）测量骨密度和骨结构参数的变化。
此外，通过进行力学测试，如三点弯曲试验和压缩试验，还可以评估地舒单抗对骨力学性能的影响。
这些试验结果可以提供地舒单抗治疗骨质疏松症的疗效和安全性的初步证据。
除了骨质疏松症，地舒单抗还被应用于其他骨相关疾病的动物模型中。
例如，地舒单抗可以用于治疗原发性高PTH增生病（PHPT）的小鼠模型。
通过评估地舒单抗对PTH水平、血清钙水平和肾脏功能的影响，可以评估其对PHPT治疗效果的贡献。
此外，地舒单抗还可以在畸形性骨炎（osteitis deformans）的小鼠模型中进行疗效评估。
通过测量炎症标志物的变化和骨病变区域的改善情况，可以评估地舒单抗对畸形性骨炎的治疗效果。
新型肿瘤标志物(PIVKAII)临床应用进展及评价
healthy liver
Chronic hepatitis
Cirrhosis
慢性炎症以及逐渐加深的肝脏损伤
Cancer (HCC)
Viral marker
Fibrosis marker
Tumor marker
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现有肝癌相关肿瘤标志物
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后又随之增加。血清甲胎蛋白的含量与异常凝血酶原水平基本不具相关性。
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Research design:
Song et al. (2002)
Tsai et al. (1997)
Tsai et al. (2003)
Hsia et al. (2007)
Hsia et al. (2007)
Cui et al. (2003)
Yoon et al. (2004)
Cutoff value 2.0 ng/ml
Sensitivity 51%
• Tumor-Derived Autoantibody (TAA)
Etc.
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Markers GPC3 GP73
TGF-β1
IGF-II IL-6 IL-10 GGT HCCR
References
Hippo et al. (2004)
Marrero et al. (2005)
脂肪干细胞与富血小板血浆治疗大鼠膝骨关节炎疗效比较
浙江临床医学2021年5月第23卷第5期• 653••实验研究•脂肪干细胞与富血小板血浆治疗大鼠膝骨关节炎疗效比较楼袁美严佳民邱天文杨锦荧单乐天【摘要】目的比较富血小板血浆（P R P)和脂肪千细胞（A D S C s)对膝骨关节炎（K O A)大鼠模型关节疼痛和软骨修复的作用。
方 法随机选取4只雄性SD大鼠，心内采血分离制备P R P并取其腹股沟脂肪组织培养收集ADSCs。
选取雄性SD大鼠32只，随机分为空白组、KOA模型组、P R P组、ADSCs组，每组各8只，除空白组外均以碘乙酸注射膝关节腔建立大鼠KOA模型。
P R P组、ADSCs组分别用l x l〇6个/m l浓度的PR P和l x1〇6个/ml浓度的ADSCs对大鼠双侧膝关节采纳注射干预，注射1次/周，共8周，定时察看大鼠的生理行为，评估疼痛指标，8周后取膝关节进行组织病理学染色并进行O A RSI评分。
结果压痛实验结果表明，造模后第8周，模型组压痛阈值比空白组明显降低（P<0.01)，用药干预后的P R P组和ADSCs组压痛阈值与模型组相比有所提高（P<0.01)，PR P组压痛阈值与ADSCs组相比有所提高(P<0.05)。
热痛结果表明，造模后第8周，模型组热痛阈值比正常组明显降低（P<0.01)，用药干预后的PR P组和ADSCs组压痛阈值比模型组提高（P<0.01)。
PR P组和ADSCs组热痛阈值差异无统计学意义（P>0.05)。
病理学结果表示，与空白组比较，KOA模型组大鼠膝关节软骨表面明显存在残缺，损害处软骨细胞显著缺失，软骨面明显变薄，软骨下骨出现纤维化退行性变；P R P组、ADSCs组均可改善KOA模 型大鼠关节软骨损害，镜下可观察到大量的软骨细胞，软骨表面平整。
其中ADSCs组软骨仍有少量软骨细胞丢失，软骨层轻度变薄，仍可见少量肥大软骨细胞，软骨下骨有少量纤维化退变；P R P组软骨基本复原，软骨面增厚。
基质血管组分(SVF)临床分离技术研究
中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology2021，43( 1):73-82 DOI: 10.11844/cjcb.2021.01.0010基质血管组分(SVF)临床分离技术研究李智国张方方刘悦刘建兴金亮*(中国药科大学，南京211100)摘要 脂肪组织易获取、组织相容性好且对供体影响小，可作为获得成体干细胞的重要来源。
基质血管组分(S V F)是从脂肪中分离出来的包括脂源性干细胞(A D S C)和基质细胞的异质性细 胞群。
S V F促进组织的修复和再生已被大量的临床实验所证实，尤其是在美容整形和组织修复中的应用。
早期，S V F通过酶消化法获得，随着近年来在临床中扩大应用，为确保患者安全和质量可控，开发出新型自动分离设备。
同时，为符合一些国家监管要求，避免酶的使用，采用非酶消化法获取 S V F。
因此，该文主要针对基于酶消化法和非酶消化法已经发表临床分离方法和上市的相关设备 作详细论述。
关键词基质血管组分;酶消化法;非酶消化法;分离设备；The Research of Clinical Separation of SVF (Stromal Vascular Fraction)LI Zhiguo,Z H A N G Fangfang,L I U Y u e,L I U Jianxing,JIN Liang*{China Pharmaceutical University, Nanjing 211100, China)Abstract Adipose tissue is an important source of stem cells because i t is easy to access and has a g o o d histocompatibility and l i t t l e influence on donors.S V F(stromal vascular fraction)is a heterogeneous group of cells isolated from adipose tissue,including A D S C(adipose derived stem cell)and stromal cells.According to a large n u m b e r of clinical trials,S V F has been proved that i t can promote tissue to repair and regenerate,especially in cosmetic surgery and tissue repair.In the early stage,S V F w a s obtained by e n z y m e digestion.With the extensive application of S V F in clinical practice during recent years,in order to ensure patient safety and quality control,s o m e n e w automatic separation equipment w a s developed.M e a n w h i l e,in order to meet the regulatory requirements of s o m e countries and avoid the use of e n z y m e,non-enzymatic digestion m e t h o d b e c o m e s a w a y of obtaining S V F. Therefore,current essay i s primary to m a k e a detailed discuss about reported clinical separation w a y s a nd related equipments based on the e n z y m e digestion and non-enzyme digestion.K e y w o r d s stromal vascular fraction;enzymatic digestion;non-enzymatic digestion;separation equipmentI960年，R O D B E L L l[11首次将大鼠脂肪通过胶 原酶消化，离心后脂肪分成三个不同密度层，最下 层为颗粒层，该层包含多种细胞群体。
p53半剂量缺失纠正1,25(OH)_(2)D_(3)缺乏小鼠的骨质疏松
p53半剂量缺失纠正1,25(OH)_(2)D_(3)缺乏小鼠的骨质疏松张维;倪进荣;周俊;刘畇;张群虎【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2024(44)4【摘要】目的:探索p53半剂量缺失杂合子小鼠能否通过增强抗氧化能力纠正活性维生素D(1,25(OH)_(2)D_(3))缺乏引起的骨质疏松。
方法:取10周龄高钙高磷饮食喂养的同窝野生型(wild type,WT)小鼠、p53半剂量缺失杂合子(p53^(+/-))小鼠、1α-羟化酶基因敲除[1α(OH)ase^(-/-)]小鼠及p53半剂量缺失的1α羟化酶基因敲除[1α(OH)ase^(-/-)p53^(+/-)]小鼠的长骨,利用X线、micro-CT、组织病理学和分子生物学等方法,比较各组小鼠血清学、长骨骨矿化、骨形成、骨吸收以及氧化应激等表达变化。
结果:与WT小鼠相比,p53^(+/-)小鼠血清钙、磷、甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)和1,25(OH)_(2)D_(3)水平差异无统计学意义,骨密度、总胶原(total collagen,T-col)阳性面积、成骨细胞数量、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,Col-Ⅰ)阳性面积均有所增加,活性氧水平降低,抗氧化酶SOD1表达增加。
与1α(OH)ase^(-/-)小鼠相比,1α(OH)ase^(-/-)p53^(+/-)小鼠血清钙、磷和PTH差异无统计学意义,血清中检测不到1,25(OH)_(2)D_(3),骨密度、T-col阳性面积、成骨细胞数量、ALP和Col-Ⅰ阳性面积均明显增加,破骨细胞数量减少,活性氧水平降低,抗氧化酶SOD1表达增加。
结论:p53半剂量缺失可通过增强抗氧化能力纠正1,25(OH)_(2)D_(3)缺乏小鼠的骨质疏松。
【总页数】8页(P455-461)【作者】张维;倪进荣;周俊;刘畇;张群虎【作者单位】南京医科大学康达学院基础医学部人体解剖学系;南京医科大学附属宿迁第一人民医院骨科;南京医科大学附属宿迁第一人民医院风湿免疫科【正文语种】中文【中图分类】R591.44【相关文献】1.1,25(OH)2D3缺乏对小鼠下颌骨体及髁突骨形成的影响2.内源性1,25(OH)_2D_3缺乏对哺乳期小鼠牙齿矿化和牙本质形成的影响3.1,25(OH)_(2)D_(3)通过Bcl-2/Bax/cleaved caspase-3凋亡机制抑制小鼠气道平滑肌细胞的增殖4.1,25-二羟基维生素D_(3)对糖尿病小鼠周围神经功能影响的研究5.绝经后骨质疏松症患者血清1,25-二羟维生素D_(3)胰岛素样生长因子-1及三酰甘油的水平与意义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超生理剂量维生素D3致小鼠动脉硬化及机制
超生理剂量维生素D3致小鼠动脉硬化及机制康海仙;吴铁;崔燎【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2009()4【摘要】目的探讨超生理剂量维生素D3致小鼠动脉硬化及其机制。
方法SPF级KM小鼠40只,随机分为对照组、超生理剂量维生素D3组和常量维生素D3组。
超生理剂量维生素D3组给予小鼠40万u/(?.d)维生素D3灌胃诱导小鼠动脉硬化,连续给药3次,观察42d,取血管标本制作主动脉病理切片,Vonkossa染色计算钙化面积百分比,离子型发射光谱仪检测血管钙、磷含量。
结果超生理剂量维生素D3组小鼠主动脉中膜严重钙化,动脉中膜平滑肌细胞表型改变为类软骨细胞,血管钙化面积百分比显著高于对照组(P<0.01),血管钙、磷含量较对照组均升高(P<0.05)。
结论超生理剂量维生素D3可致小鼠主动脉硬化,机制与其诱导血管平滑肌细胞发生类软骨样细胞改变,同时导致大量钙、磷在血管内沉积有关。
【总页数】3页(P294-296)【关键词】维生素D3;动脉硬化;血管平滑肌细胞;软骨细胞;超生理剂量【作者】康海仙;吴铁;崔燎【作者单位】广东医学院药理教研室【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.维生素E对大剂量维生素D3所致心肌损伤保护作用的实验性研究 [J], 郭文萃;许立新;谢伟2.维生素E对大剂量维生素D3所致心肌损伤的保护作用 [J], 郭文萃;曾宪惠;杨文娟3.芝麻对大剂量维生素D3致大鼠动脉钙化的治疗作用 [J], 李琴;吴铁;崔燎4.高剂量维生素D3致乳鼠肾脏超微结构和钙含量变化 [J], 宋爱利5.超剂量服用维生素D2片致幼儿维生素D中毒 [J], 刘宗炎;陈超阳;谢娴婷;张桂青;周颖;崔一民因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
IGF`-1过表达质粒转染BMSCs联合纳米纤维多孔支架修复兔软骨缺损效果
IGF`-1过表达质粒转染BMSCs联合纳米纤维多孔支架修复兔软骨缺损效果IGF-1是一种重要的生长因子，可以促进软骨细胞增殖和分化，对软骨损伤的修复起到重要作用。
直接注射IGF-1的疗效有限，因为其在体内很快被降解，无法维持有效浓度。
寻找一种能够持续释放IGF-1的载体成为研究的热点。
纳米纤维多孔支架因其具有较大的比表面积和良好的生物相容性，成为载体的理想选择。
本文旨在探讨IGF-1过表达质粒转染BMSCs联合纳米纤维多孔支架修复兔软骨缺损的效果。
我们将IGF-1基因构建到适宜的载体中，通过质粒转染技术将其导入到兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）中。
IGF-1过表达的BMSCs具有较高的生长因子水平，可以促进软骨细胞增殖和分化。
而且，BMSCs本身具有很强的自我更新和分化潜能，在修复软骨缺损中也具有重要作用。
我们制备了纳米纤维多孔支架，并将IGF-1过表达的BMSCs植入到支架中。
纳米纤维多孔支架具有类似天然骨组织的微纳结构，可以提供良好的细胞附着和生长环境。
而且，多孔结构使得支架具有较大的载药空间，可以实现对IGF-1的持续释放，为软骨修复提供持续的营养支持。
我们将IGF-1过表达的BMSCs植入到兔软骨缺损部位，并观察其修复效果。
结果显示，与单纯植入BMSCs或注射IGF-1相比，IGF-1过表达质粒转染BMSCs联合纳米纤维多孔支架具有更好的软骨修复效果。
组织学和免疫组化分析表明，修复后的软骨组织形态完整，软骨细胞数量增多，软骨基质合成增加，软骨缺损得到了良好的修复。
我们还观察到，IGF-1过表达质粒转染BMSCs联合纳米纤维多孔支架对软骨缺损周围组织的影响较小，没有出现明显的免疫排斥反应和异物反应。
说明该修复方法具有较好的生物相容性和安全性。
IGF-1过表达质粒转染BMSCs联合纳米纤维多孔支架是一种有效的软骨缺损修复方法，可以提供持续的生长因子支持，促进软骨细胞的增殖和分化，为软骨缺损的修复提供了新的思路和方法。
同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨支架材料修复兔胫骨缺损的实验研究
［１１］刘娣，鞠海艳，栗洪波，等． 金骨莲胶囊治疗类风湿关节炎（风湿痹 用和机制研究［Ｊ］． 临床和实验医学杂志，２０１８，１７（２０）：２１５８ －２１６１．
阻证）的临床研究［Ｊ］． 中国中医骨伤科杂志，２０１６，２４（５）：３９ －４３． ［１６］杜茂端，邱德文，许建阳． 金骨莲胶囊对类风湿性关节炎（ＲＡ）病
【 】 Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｒａｂｂｉｔ ｔｉｂｉａ ｄｅｆｅｃｔｓ ｗｉｔｈ ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ａｄｉｐｏｓｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｄｅｃａｌｃｉｆｉｅｄ ， （ ｂｏｎｅ ｓｃａｆｆｏｌｄ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｉｇｈｔ ｐａｉｒｓ ｏｆ Ｎｅｗ Ｚｅａｌａｎｄ ｗｈｉｔｅ ｒａｂｂｉｔｓ ｗｅｒｅ ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ． Ｌｔｄ． ａｎｉｍａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｃｅｎ ）， ， ｔｅｒ ｗｈｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ｔｗｏ ｐａｉｒｓ ｏｆ ｗｈｉｔｅ ｒａｂｂｉｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｅｖｅｎｌｙ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ； ｓｃａｆｆｏｌｄ ｂｙ ｒｅｐｅａｔｅｄ ｄｒｏｐｐｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ｄｅｃａｌｃｉｆｉｅｄ ｂｏｎｅ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｈｅ ｒｅｍａｉｎｉｎｇ ６ ｐａｉｒｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ， ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｒａｂｂｉｔ ｔｉｂｉａ ｂｏｎｅ ｄｅｆｅｃｔ ｍｏｄｅｌｓ． Ａｆｔｅｒ ｔｈａｔ ｓｉｍｐｌｅ ｄｅｃａｌｃｉｆｉｅｄ ｂｏｎｅ ｍａｔｅｒｉａｌ ｗａｓ ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｒｉｇｈｔ ｄｅｆｅｃｔ ａｒｅａ ａｓ ｔｈｅ ， ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｒａｂｂｉｔ ａｄｉｐｏｓｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ － ｄｅｃａｌｃｉｆｉｅｄ ｂｏｎｅ ｓｃａｆｆｏｌｄ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗａｓ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｌｅｆｔ ｄｅｆｅｃｔ ａｒｅａ ａｓ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉ ， ， ｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ． Ａｔ １２ ｗｅｅｋｓ ａｆｔｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｔｈｅ ｒａｂｂｉｔｓ ｗｅｒｅ ｓａｃｒｉｆｉｃｅｄ ｂｙ ａｉｒ ｅｍｂｏｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｂｉｌａｔｅｒａｌ ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ ｔｉｂｉａ ｂｏｎｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｗｈｉｔｅ ｒａｂ
活性维生素D检测你知多少？
活性维生素D检测你知多少？发布时间：2022-01-19T07:10:28.813Z 来源：《健康世界》2021年23期作者：和昱辰刘家云【通讯作者】[导读] 在很多人老传统的观念里，孩子长不高，成人人骨质疏松，还是因为缺钙，和昱辰刘家云【通讯作者】空军军医大学第一附属西京医院（陕西西安）710000在很多人老传统的观念里，孩子长不高，成人人骨质疏松，还是因为缺钙，其实，很早之前，人民卫生出版社的医学专业教材里，早已改版为“维生素D缺乏性佝偻病”和“维生素D缺乏性手足抽搐症”。
小儿佝偻楼病，成人骨质疏松，不是因为钙不足，而是体内活性维生素D3不足，而导致钙不能被充分吸收利用。
维生素D是一种脂溶性类固醇衍生物，其在人体内主要有两种表达形式:维生素D2(麦角骨化醇)和维生素D3(胆骨化醇)，其中有活性的1,25-二羟维生素D3,，它占人体维生素D总量的90%～95%，也是我们身体维生素D3工作的主要功臣，其最主要的摄取途径是经紫外线照射皮肤时由7-脱氢胆固醇转化而来，另外，也可以通过食物而获得的维生素D。
在我们人体内，维生素D3需要先与维生素D结合蛋白(VDBP)相结合，继而被转移到肝脏，在25-羟化酶的作用下转变为25-(OH)D3，最后在肾脏和其他组织中的1-α羟化酶作用下，转变成维生素D的生物活性形式1,25-(OH)2D3(骨化三醇)。
这个时候，因为1,25-OH)2D3由细胞内特异的VDR介导，具有激素样的生理特性，可以参与多种生物学进程，我们临床称它为活性维生素D3，其有着重要的生理意义，主要包括有：调节钙磷代谢、促进骨骼生长、调节细胞生长及分化、抑制甲状旁腺分泌、和控制细胞增殖和分化、增加胰岛素分泌缓，解胰岛素抵抗，促进适应性免疫，增强天然免疫等、调控免疫应答，及抗炎、抗肿瘤等作用。
随着科学技术的发展，越来越多的研究发现，心脏病、肺病、癌症、糖尿病、高血压、精神分裂症和多发性硬化等疾病形成都与缺乏维生素D密切相关。
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细胞 成 骨活性 的联 合 诱 导
祁 玉林 刘 丽梅 （ ．青海 省人 民医院 骨科 ；．第 三军 医大 学西南 医院病理 科 ） １ ２ 摘 要 目的 观察肝 细胞 生长 因子 （ Ｇ ） １２ Ｈ Ｆ 和 ，５一（ Ｈ）Ｖｔ Ｏ ｉ 对兔 骨髓 基质 干细胞 （ｏｅ Ｄ ｂｎ
１２ ，５一（ Ｈ）Ｖ ｔ３ ｅｅｏ ｖ ｕｌ ｈｇｅ ａ ｏｅｏ ｅｃｎ ｏ ａ ｄｆ ｒｎ ｅｐｒ ｅｔｉ ｅ（ ０ ０ ） ｏ ・ Ｏ ２ ｉ ｒ ｂｉ ｓ ｉ ｒｈ ｎｔ ｓ ｆｈ ｏ ｔ ｌ ｔ ｉｅｅ ｔ ｘ ｅｉ ｎ ｍ Ｐ＜ ． １ ．Ｃ ｎ Ｄｗ ｏ ｙ ｈ ｔ ｈ ｔ ｒ ｆ ｍ ｔ ｃ ｓ ｎｔｅｏｔ ｇ ｎ ｉｅｅｔ ｔ ｎｃｐ ｃ ｙｏ ＭＳ ｓｃｕｄｂ ｄ ｃｄｂ Ｇ ｎ ，５一（ Ｈ） ｉ ３ ｌ ｉ ｓ ｎ ｅ ｉ ｄ ｆ ｎｉ ｉ ａａｉ ｆ ｕｏ ｈ ｅ ｃ ｆｒ ａｏ ｔ Ｂ Ｃ ｏ ｌ ｅｉ ｕｅ ｙＨ Ｆａｄ １２ ｎ Ｏ ２ ｔ ． ＶＤ Ｋ ｙｗ ｒ ｓ Ｂ ｎ ａ ｏ ｔ ｍ ｌ ｅ ｓ Ｈ Ｆ １ ２ ｅ ｏｄ ｏ ｅｍ ｒ ｗ ｓ ｏ ａ ｃｌ Ｇ ，５一（ Ｈ） ｉ ３Ｏ ｔ ｇｎｃｃｐ ｃ ｙ Ｏ ｔ ｇｎｃｉ－ ｒ ｒ ｌ Ｏ ２ ｔ ｓ ｏｅ ｉ ａ ａｉ ｓ ｎ ｅ ｉ ｎ ＶＤ ｅ ｔ ｅ
Ｑ ｕｉ ＬｕＬｍｅ ｉ ｌ ， ｉ ｉ ｉ Ｙ ｎ （ ． ｉ ｈ ｉ ｒｖｎ ｉ ｏｐ ａ；． ｅａｔ ｅ ｔ ｆ ａ ｏ ｇ ， ｈｒ Ｍ ｄｃｌ ｎｖｒｉ ） １ Ｑｎ ａ ｐｏｅ ｃ ｌ ｓｉ ｌ Ｄ ｐ ｒ ｎ ｏ ｔ ｌ ｙ Ｔ ｉ ｅ ｉ ｉ ｓｙ ｇ ａｈ ｔ ２ ｍ ｐ ｈｏ ｄ ａＵ ｅ ｔ Ａ ｓ ａｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｎｅｔ ａ ｅｏｅｇｎｃｃｐｃｔ ｏ ｂ ｉ Ｂ Ｓ ｓ（ ｏ ｅｍ ｒ ｗ ｓ ｏ ａ ｃｌ ） ｂｔ ｃ ｒ ｊｃｉ ｏｉｖｓｇｔ ｔ ｓｏｅ ｉ ａａｉ ｆ ａ ｂｔ Ｍ Ｃ ｂ ｍ ａ ｏ ｔ ｍ ｌ ｅ ｓ ｖ ｉ ｅｈ ｙ ｒ ｒ ｌ ｉ ｕ ｅ ｙＨ Ｆ（ ｅ ａ ｃｔ ｇｏ ｔ ｃ ｒ ｎ ，５一（ Ｈ） ｉ ３ Ｍｅｈ ｄ ｅｒｂ ｉＢ Ｃ ａ ｕｔ ｅ ｎ ｃｄｂ Ｇ ｈｐ ｔ ｙ ｒｗｈｆ ｔ ）ａｄ１２ ｄ ｏ ｅ ａｏ Ｏ ２ ｔ ． ｔｏ ｓ ｈ ｂｔ ＭＳ ｓ ｓ ｌ ｒｄｉ ＶＤ ｔ ａ ｗ ｃ ｕ ｎ ｖｒ ｎ ｄ ｃｄｂ Ｇ ｎ ，５一（ Ｈ）Ｖｔ ３ ｔｅ ｅｏｔｏｃ ｉ ｄｆ ｒｎｉ ｉ ａ ａｉ ａ ｅｎｃｌ ｒｄ ｉｏａ ｄｉ ｕ ｅ ｙＨ Ｆａ ｄ１２ ｔ ｎ Ｏ ２ ｉ ， ｈ ｎｔ ｓ ｇｎｃ ｉｅｅ ｔ ｔ ｎｃｐ ｃ ｙｈｄｂｅ ｕｔ ｅ Ｄ ｈ ｅ ｆ ａｏ ｔ ｕ
ｍａ ｏ ｒｍ ｌｅｓ Ｂ Ｃ ） 骨活性 的诱导作 用 。方法 采 用 Ｈ Ｆ和 １２ ｒ ｗｓｏ ａ ｃｌ ， ＭＳ ｓ成 ｒ ｔ ｌ Ｇ ，５一（ Ｈ）Ｖｔ 合诱 Ｏ ｉ 联 Ｄ 导兔 Ｂ Ｓ ｓ Ｍ Ｃ 后检 测其碱 性磷 酸酶 （ｌ ｌ ｅｐｏｐａａｅ Ａ Ｐ 活性 、 ａ ａｉ ｈｓｈｔ ， Ｌ ） ｋ ｎ ｓ 骨钙 素和胶 原蛋 白 ＩＩ 的含 量 、Ｉ 并观 察其 成骨分化 特性 的 变化 。 结果 ＨＧ Ｆ和 １２ ，５一（ Ｈ）Ｖｔ 合 诱 导 的兔 Ｂ Ｓ ｓ的 Ａ Ｐ Ｏ ，ｉ 联 Ｄ ＭＣ Ｌ
ｄ Ｃ ｉｎ Ｕｔ ０
各 种创伤 和骨病 导致 的骨缺损 是临 床上 的常 见 疾病 ， 组织工 程 的发 展 为 解决 这 一难 题 提供 了新 的 治疗 途 径 。骨 髓 基 质 干 细 胞 （ｏｅｍ ｒ ｗ ｓｏ ａ ｂｎ ａ ｏ ｔ ｍ ｌ ｒ ｒ ｃｌ ，ＭＳ ｓ具有 很强 的扩增 能力 并 能被诱 导 分化 ｅｓＢ Ｃ ） ｌ
活性 、 骨钙素水平和胶原蛋 白ＩＩ在细胞中表达水平均明显高于对照组细胞。结论 、 Ｉ
一
Ｈ Ｆ和 １２ Ｇ ， ５
（ Ｈ）Ｖｔ Ｏ ｉ 联合诱导作用可以促使兔 Ｂ Ｓ ｓ Ｄ Ｍ Ｃ 明显表现出成骨分化特性。 关键词 骨髓基 质干 细胞 Ｈ Ｆ １２ Ｇ ，５一（ Ｈ）Ｖｔ 成 骨分化 成 骨诱 导 Ｏ ｉ Ｄ
Ｒｅ ｕ ｔ ｈ ｃ ｉａｉｎ ｏ ａ ｄ ｅ ｐ ｅ ｓ ｎ ｏ ｓｅ ｃ ｌｉ ｎ ｏ ｌｇ ｎ Ｉａ ｄ Ｉ ｏ ｓ ｌ Ｔ ｅ ａ ｔ ｔ ｆＡＩ ｎ ｘ ｒ ｓ ｉ ｆ ｔｏ ａｃ ｎ ａ ｄ ｃ ｌ ｅ ｎ Ｉ ｆＢＭＳ ｓｉ ｄ ｃ ｄ ｂ ｓ ｖ ｏ ｏ ｏ ａ Ｃ ｎ ｕ ｅ ｙ ＨＧＦ ａ ｄ ｎ
中图分 类号 Ｑ １ Ｒ ３． ８ ７ ３ ７ 文献标识 码 Ａ
ＯＳ ＴＥＯＧＥＮＩ ＤＩ Ｃ ＦＦＥＲＥＮＴＩ ＯＮ ＣＡＰＡＣＴＩ ＯＦ Ｙ ＲＡＢＢＩ ＢＯＮＥ ＡＲＲＯＷ ＴＲＯＭ ＡＬ Ｔ Ｍ Ｓ ＣＥＬＬＳ
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第２ ８卷
第 ４期
青 海 医 学 院 学 报
Ｊ ＲＮ Ｌ Ｏ Ｉ ＧＨＡ Ｄ Ｃ Ｌ Ｃ Ｌ Ｇ ＯＵ Ａ Ｆ Ｑ Ｎ ＩＭＥ Ｉ Ａ ＯＬ Ｅ Ｅ
Ｖ０． ８ Ｎ ． １２ ｏ ４ ２ ０ ０７
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Ｈ Ｆ和 １２ Ｇ ，５一（ Ｈ） Ｖｔ３对 兔 骨 髓 基 质 干 Ｏ ２ｉ Ｄ
ｂ ｅ ｃｉ ｅａｔ ａ ｏ ｆ Ｌ （ ｌａ ｅｐ ｏｐ ａ ｅ ｎ ｅｅｐｅｓ ｎｏ ｓ ｏａ ｉ ａ ｄｃｌ ｇｎＩａｄ Ｉ ｙｄｔ ｔ ｇｔ ｃ ｖｔ ｎｏ Ｐ ａｋｌ ｈ ｓｈｔ ）ａｄ ｔ ｘｒｓｉ ｆ ｔ ｃｌ ｎ ｎ ｏ ａｅ ｎ Ｉ ｅ ｎ ｈ ｉ ｉ Ａ ｉ ａ ｈ ｏ ｏｅ ｃ ｌ ．