禽流感病毒的致病性研究进展

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禽流感(AI)的研究

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１１临床症状．
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高致病性禽流感没有特定的发病
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症状，禽类在发病前也没有特别的异常现象，鸡发生禽流感都是突然发病。病禽体温急剧上升，精神沉郁，食欲减退或消失，活动减少，毛松乱，羽
明，直到１５９５年，学家才证实其科致病病毒为Ａ型流感病毒（Ｉ），ＡＶ此后，种疾病被更名为禽流感。禽流这
在生产中危害很小，高致病性禽流感不仅感染鸡、鸭等禽类，也可能感染＾，导致＾死亡。现在世界上还没有特效药物治疗禽流感，因此，日常养殖生产在和生活中，
ＣｅＬ（ｎｒｍｔｊｎｎｔｔｔ，ｎｕｉｈｎｅｉＩｆｏａｏＩｓｉｕｅＡｈ
ＡＣａｄｅｍＹｏｆＡｇｒｉＣＵｌｔｕｒａＩ
摘要禽流感（ｖａＩｆｕｎａＩＡｉｎｎｌｅｚ，Ａ）是由甲型流感病毒的一种亚型引起的禽类传染病，是危害世界养禽业的主要疫病之一。介绍了禽流感的发病症状、流行趋
ＫｅｏｒＡｉｎｎｌｅｚ（Ｉ：ｙｗｄｓｖａＩｆｕｎａＡ）
Ｓｍｐｏ；Ｄａｎｓ；Ｒｓａｃｙｔｍｉｇｏｅｅｅｒｈ
感被发现１００多年来，人类并没有掌握特异性的预防和治疗方法，能以仅消毒、隔离、大量宰杀禽畜的方法防
收稿日期
陈磊（９７），男，安徽合肥人，副研究员，从事农村信息化及农业信息分析工作，Ｅｍｉｃｅｌｉｈｎ＠１３ｎｔ１７一－ａｌｈｎｅｃｉａ６．。：ｅ

禽流感病毒致病机制的研究进展

文献综述禽流感病毒致病机制的研究进展摘要：禽流感对畜禽养殖业造成巨大经济损失，并对人类健康造成威胁，已成为各国公共卫生关注的人畜共患病。

本文从禽流感病毒（Aｖiａn Ｉnｆｌuenza Vｉruｓ .AＩＶ）的分子学特性,跨越种属的传播机制以及各基因组份与致病性的作用等方面进行简述。

关键词：禽流感病毒;传播机制;致病机制1前言禽流感(ＡviaｎInfluenza．AＩ）是由正粘病毒科A型流感病毒(Avian Inｆluenza Ｖｉrus. AIV)引起的禽类急性传染病，被世界动物卫生组织和我国《家畜家禽防疫条例》列为A类烈性传染病。

禽流感病毒根据其核蛋白（NＰ)和基质蛋白(Ｍ1）抗原性及其基因特性的不同可划分为A、B、C型。

其中Ａ型流感病毒感染范围最广、危害最大,常以流行性的形式出现,并能引起世界性人流感的大流行。

Ａ型流感病毒也可以从各种动物体中分离到,例如人、猪、马、海洋哺乳动物、猫、狗和鸟类等[1]。

根据对鸡致病性的不同，AIV可以分为高致病性禽流感（Hｉｇhly PathoｇeniｃＡviaｎInfluｅnzａ.HPAI）和低致病性禽流感（Ｌow PathoｇenｉｃAviａn Iｎflｕenｚa.ＬＰAI)。

高致病性AＩV 由于其传染性极强，可引起家禽全身性感染，造成多个组织器官严重病理损伤,致死率达１０0%，其感染禽类达88种,主要是鸡、鸭、鹅，除此之外,还可感染猪、猫、狗、老虎等哺乳动物和人类，是一种人畜共患病,对各国的公共卫生构成严重的危害［2]。

近年来不断增加的H5N1亚型禽流感病毒（AIV)直接感染人、致人死亡的事件不断增加。

本文对禽流感病毒致病机制的研究进展综述如下,以期提高人们对公共卫生学意义上禽流感防控紧迫性的认识。

２AＩV生物学特征流感病毒属正黏病毒科，是一种呈球形或杆状、有包膜的单股负链RNA病毒,其基因组分为8个节段,编码血凝素（hemaｇglｕtiｎｉｎ,HA）)，神经酰胺酶（neuｒａminidaｓｅ, NA）,基质蛋白(mａtrｉx protein,M)M1和离子通道M２,非结构(ｎoｎsｔructｒuaｌ，NＳ）蛋白NS1和NＳ2，核蛋白(nucleo protein，NP）以及三个聚合酶PB1、PB２(polymｅrａse basic１，2）和PA(ｐｏlyｍerasｅaciｄiｃ）以及新发现的与有道细胞凋亡有关的ＰB1－F2蛋白［３]等10种蛋白。

禽流感病毒对BALBc小鼠的致病性研究实验方案

禽流感病毒对BALB/c小鼠的致病性研究实验方案1 实验目的使用新分离到的H5N6亚型禽流感病毒（AIV）在BALB/c小鼠上进行致病性实验，分析该毒株对哺乳动物的致病力。

2 实验材料4～6周龄SPF级雌性BALB/c小鼠（11～14g）50只。

9～11日龄鸡胚通胚（大华农）60枚。

双抗（青霉素和链霉素）、96孔V型微量反应板、1%鸡红细胞悬液、PBS （pH 7.2～7.4）、1.5 mL离心管、2 mL离心管、15 mL离心管、50 mL离心管、75%酒精、医用棉花、大中小3中病料袋、冰盒、甲醛、高锰酸钾、铁盒（熏蒸用）、4%多聚甲醛、Marker笔。

SPF小鼠隔离器、生物安全柜、37℃恒温孵化箱、组织研磨仪、振荡器（涡旋仪）、小型低温离心机、解剖台、电子秤、各种量程移液枪。

毒株：B6和B7。

3 实验方案3.1 病毒EID50值的测定在生物安全柜内使用无菌PBS将病毒尿囊液连续10倍倍比稀释至10-10，取6个稀释度（10-5～10-10）的病毒稀释液接种9～11日龄非免鸡胚（采用鸡胚尿囊腔接种法），每个稀释度接种5枚胚，每胚接种0.2 mL，接种后置于37℃恒温孵化箱中孵育，每日观察鸡胚状况（期间发现死胚，立即取出，暂存于4℃冰箱），72 h后将所有鸡胚放置于4℃冰箱4 h以上，然后再收获各胚的尿囊液并分别测定其HA效价，记录每个稀释度的阳性结果（HA效价大于3 log2时，判定为阳性），并按Reed-Muench氏法计算EID50值。

Reed-Muench法计算公式：logEID50=高于50%的病毒稀释度的对数+距离比例×稀释系数的对数距离比例=（高于50%感染率的百分数-50%）/（高于50%感染率的百分数-低于50%感染率的百分数）3.2 HA试验具体操作及判断标准可参照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936—2003）中的HA试验方法。

3.3 小鼠致病性实验（six-week-old female BALB/c mice）实验前先将动物房打扫清洁干净，并对动物房及SPF小鼠隔离器进行甲醛熏蒸消毒1d，之后通风2d散掉残余甲醛后再开始动物实验。

禽流感病毒致病性的分子基础研究进展

（北科技师范学院动物科学系河北省预防兽医学重点实验室，北昌黎０６０）河河６６０
摘要：流感的暴发给畜禽业造成了巨大经济损失，禽近年来对禽流感病毒的致病性的研究取得了一定进展。禽流感病毒的毒性不但与血凝索裂解位点处的氨基酸序列、经氨酸酶茎部的氨基酸丢失、神非结构蛋白的截短、除及ＮＳ删１蛋白Ｃ末端的４个氨基酸残基等有关，而且，还发现在病毒基因编码的蛋白中有许多单个氨基酸决定病毒的毒力。这些毒力因子对动物的致病性并不是单独起作用，而是多种基因的毒力因子
ｌ血凝素（ＨＡ）与禽流感病毒致病性的关系
流感病毒感染的第一步是病毒吸附于细胞膜上，然后ＨＡ经过蛋白酶切割裂解为ＨＡ１和ＨＡ２
两个亚单位，才具有感染性，ＨＡ的裂解性由以下两个结构特征决定。
致病的分子基础。
的两个毒株Ａ／ｌｒ／ａｏｇＳ２０（称ＳｍａｌｄＨｕｄｎ／／０５简ａ
病毒）Ａ／ｌｒ／ａｏｇＹ／０３简称Ｙ病和ｍａｌｄＨｕｄｎ／２０（ａ毒）ＨＡ裂解位点处氨基酸不同，者的ＨＡ基的前因在３２位是亮氨酸（）３９位氨基酸缺失；２Ｌ，２而后者的ＨＡ基因在３２位是谷氨酰胺（，２２Ｑ）３９位是赖

禽流感病毒的免疫研究进展

禽流感病毒的免疫研究进展禽流感是由禽流感病毒（avian influenza virus）引起的家禽呼吸系统疾病，主要感染家禽，如鸡、鸭、鹅等，但极少数情况下也可以传染给人类。

自从2003年中国发生了SARS疫情以来，禽流感疫情就被公众所关注。

禽流感的爆发不仅对家禽养殖业产生了巨大的经济影响，更是对人类健康造成了巨大的威胁。

因此，对禽流感的病毒学特性和免疫学研究已经成为了当前研究的热点之一。

禽流感病毒的病理学特性禽流感病毒是一种RNA病毒，属于正反式病毒科（Orthomyxoviridae），分为A、B、C、D四种型号。

其中只有A型和B型病毒会引起流感病毒，而D型病毒则主要感染牲畜。

A型病毒具有高变异率和广泛感染性，可以感染多种动物和人类。

据统计，自2003年开始，全球已经发生了多次禽流感大规模暴发，间歇性地在全球不同地区爆发。

1.清洁蛋白材料。

禽流感病毒外表皮有两种糖蛋白质：血凝素和神经氨酸酯化酶。

其中血凝素是禽流感病毒的主要清洁标记物，其血凝素亚型不同决定了其毒性和致病性的差异。

2.覆盖膜。

每个病毒都包含了一层薄膜，这是由病毒在宿主细胞内复制过程中夺取细胞膜形成的。

病毒的薄膜的主要成分是磷脂类物质和覆盖蛋白质。

3.病毒复制能力。

禽流感病毒具有强大的复制能力和变异能力，可以在任何宿主内复制。

病毒的感染和复制也受到宿主细胞的限制，禽流感病毒能感染和复制于多种宿主细胞中，然而只在特定环境下才会产生足够的病毒产生细胞，从而继续传播病毒。

禽流感病毒的病原学特性决定了其研究的重要性，研究其免疫学特性则是控制禽流感疫情的重要途径之一。

禽流感病毒的免疫学特性主要涉及以下几个方面。

1.病毒抗原结构分析。

研究禽流感病毒血凝素、内质膜蛋白、核蛋白、非结构蛋白等多种蛋白结构，寻找高度保守的免疫原性表位，为开发新型疫苗提供理论依据。

2.疫苗研发。

目前，研究禽流感病毒免疫学特性主要集中在疫苗的研制上。

禽流感病毒的血凝素亚型具有多样性，不同亚型的血凝素互相之间没有交叉保护能力。

新发高致病性禽流感H5N1病毒的致病性、传播力研究及进化分析

向选择事件。
【关键词】Ｈ５Ｎ１病毒；致病性；传播力；进化分析【中图分类号】Ｒ３３２【文献标识码】Ａ【文章编号ｌ１６７１ — ７８５６（２０１４）Ｏ１０４５ — ０７
ｄｏｉ：１０．３９６９．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１．７８５６．２０１４．００１．Ｏ１１
ｈｅａｄｅｄｇｕｌｌｉｓｏｌａｔｅｄｎｅｗｅｍｅｒｇｉｎｇｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓＨ５ＮＩｖｉｒｕｓｗｈｉｃｈｗａｓｅｘｉｓｔｅｄｉｎｔｈｅｅｎｄｏｆ２０１１．ＭｅｔｈｏｄｓＴｏｖｅｒｉｆｙｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅｄｅａｄｂｌａｃｋｈｅａｄｅｄｇｕｌｌｉｓｏｌａｔｅｄＨ５Ｎ１ｃｏｕｌｄｉｎｆｅｃｔｈｕｍａｎｓｏｕｒｃｅｃｅｌｌｓ，ａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎａｂｉｌｉｔｙ，ｖｉｒｕｌｅｎｃｅａｎｄｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙｉｎＭＤＣＫｃｅｌｌｓａｎｄＢＡＬＢ／ｃｍｏｕｓｅｍｏｄｅ１．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｎｅｗｅｍｅｒｇｉｎｇｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓＨ５Ｎ１ｗｉｌｌｂｅｔｅｓｔｅｄｕｓｉｎｇｍｏｕｓｅｍｏｄｅ１．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｄｏｎｅｂａｓｅｄｏｎＨＡ

禽流感病毒的免疫研究进展

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陈志染，导致疫情不断扩大。目前来看，AIV的主要的传播形式是横向传播，但也不能否定没有垂直传播的可能性，呼吸道和消化道是AIV感染的主要途径。 2.3.3 潜伏期
１禽流感的研究进展
禽流感（Avian Influenza, AI）是由A型流感病毒引起的一种急性禽类传染病，主要发生在家禽和野鸟之间，存在多种表现形式，常见的临床症状有轻度上呼吸道感染以及急性致死等，高致病性AI被世界动物卫生组织确定为 A类急性传染病，我国也将其列为一类动物疫病[1-2]。 1.1 AI的发现
1878年，Perroncito[3]首次报道在意大利鸡群中暴发AI 的情况，最初怀疑是鸡瘟病毒，而在1901年，Centannic 和Sarunozzi[4]两位研究者分离了该病的病原并对该病原进行了详细描述，直到1955年，Schafer[5]证实这种疑似鸡瘟的病原实际上就是现在的A型流感病毒。 1.2 AI的分布
AIV的主要易感群体是家禽，并且在世界范围内均广泛感染，一些野禽也属易感动物。家禽包括鸡、火鸡、石鸡、珍珠鸡、鹤鹑、雉、鹅等，野禽包括天鹅和燕鸥等都是AIV的易感动物群体[18]。 2.3.2 传播途径
AIV的传染源主要包括病禽的排泄物、分泌物及病禽尸体。当AIV的传染源污染到饮用水、饲料或者其他禽类能接触到的物体时，正常健康的易感动物就会通过直接
第13卷第18期 Vol.13 No.18
南方农业 South China Agriculture
2019年6月 Jun. 2019
禽流感病毒的免疫研究进展
陈志雄1，姜平2，赵志辉2
（1. 原南京军区司令部农副业基地，江苏南京 210016；2. 广东海洋大学，广东湛江 524088）

禽流感致病机理及防控技术研究进展

试验研究ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．３，２０２２基金项目：重庆市技术创新与应用发展项目（２０２３４）禽流感致病机理及防控技术研究进展吉雅图１，许国洋２，３通信作者（１．乌拉特后旗动物疫病预防控制中心，内蒙古巴彦淖尔０１５５４３；２．重庆市畜牧科学院，重庆４０２４６０；３．重庆市兽用生物制品工程技术研究中心，重庆４０２４６０）摘　要：禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ，ＡＩ）是由正黏膜病毒科，多形螺旋对称的Ａ型流感病毒引起的一种传染性疾病综合征，该病毒属于ＲＮＡ病毒［１］。

被世界动物卫生组织（ＯＩＥ）认定为Ａ类传染病。

禽流感病毒致病性的强弱与多个因素有关，致病机理较为复杂，而禽流感的防治原理也因方法的选择而有所差异，作用效果也各不相同。

对禽流感致病机理和疫病防控进行综合分析，为禽流感的科学防控和机制探索提供理论基础。

关键词：禽流感；病毒类型；治病机理；防控技术ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２２．０３．００５　引言禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ，ＡＩ）在早期被称为鸡瘟，依据报道，１８７８年该病在意大利最早出现，随着科学技术的发展，该病被证实是由甲型病毒引起的一种传染性疾病，后被命名为禽流感。

依据禽流感病毒致病性的差异，可将其分为高致病性、低致病性及非致病性３类。

禽流感可在多个季节发生，火鸡和鸡最易感染，感染后多呈急性致死性暴发［１］。

鸭和鹅感染率较低，但均可携带病毒，并且可以形成隐形感染，为病毒的传播提供了可能，感染后，情况较严重的也可出现大批死亡。

禽流感病毒主要存在于病禽的分泌物、尸体、粪便和污水中，健康宿主可通过呼吸道和消化道被感染。

禽类是禽流感感染的主要对象，但随着病毒的不断变异，其致病性越来越大，危害对象的范围也逐渐扩大，高致病性的禽流感已可感染多种哺乳动物，严重的可造成宿主的死亡［２］。

禽流感不仅可以对禽类健康状况造成巨大的危害，同时也可以给人类带来严重的经济损失，甚至危害到人类的健康以及生命安全。

禽流感病毒免疫研究进展

体滴度的高低依次为：＞野鸡＞火鸡＞鹌鹑＞鸭子，活鸡灭
用鼠单克隆抗体与待测血清竞争结合禽流感病毒ＮＰ虽白，二抗是抗鼠单克隆抗体的抗体。该方法能够检测除鼠以外
的多种禽类和哺乳动物血清中的流感病毒抗体。
火鸡体内感染的流感病毒，现出高进化率和高变异率－，呈３】鼠，产生的Ｎ抗体能增强Ｈ抗体的保护作用。用只含所ＡＡ有ＮＡ基因的ＤＡ疫苗免疫后进行攻毒试验证明，Ａ抗体能ＮＮ减少病毒的排放，只含有Ｈ而Ａ蛋白的疫苗却能完全保护【。５】
粘膜免疫反应产生的分泌性抗体对保护宿主和防御病毒的进一步感染可能起重要的作用，特别是对主要以粘膜感
染为主的低致病性禽流感（Ａ）但是对抗高致病性禽流ＭＰＩ，
疫苗免疫的结果与此一致。鸭血清中存在５７ｓ和７８Ｓ的．两种不同的ＩＹ。５７Ｓ的ＩＹ是主要的抗体，重链上有２ｇ．ｇ在
感（Ｐ）ＨＡＩ感染也可能有作用，因为ＨＡ病毒颗粒最初是通ＰＩ过粘膜表面而感染的。流感病毒不同分离株感染鸭子后，能
在胆汁中检测到ＩＡ抗体，是根据ＩＡ基因的表达模式，ｇ但ｇＩＡ抗体也可能存在别的粘膜表面。目前报道的有新城疫ｇ病毒和传染性支气管炎病毒感染后产生的ＩＡ抗体能产生ｇ

H5N1亚型禽流感病毒研究进展

H5N1亚型禽流感病毒研究进展郝会元【摘要】自1997年香港发现首例人感染H5N1禽流感病毒以来，不断有人禽流感病例报道，到目前为止，全球共有15个国家和地区的393人感染，其中248人死亡，死亡率63％。

中国从03年至今有31人感染禽流感，其中21人死亡。

因此它可能成为新一轮流感大流行的病原，引起了全球的高度关注，目前WHO 对其已是3级预警。

人类对流感病毒的认识既了解又不十分清楚，尤其是其致病性仍有很多不清楚的问题，这是由于流感病毒的致病性取决于病毒毒力和受感染宿主等诸因素，影响因素比较复杂之故。

本文就目前H5N1禽流感病毒来源，跨越物种传播的机制，致病力决定因素及人间传播能力等几个关键的基础问题研究进展进行综述。

【期刊名称】《家禽科学》【年(卷),期】2016(000)003【总页数】3页(P53-55)【关键词】禽流感;人禽流感;H5N1【作者】郝会元【作者单位】山东省济南章丘市兽医站，山东济南 250200【正文语种】中文【中图分类】S838.315.3禽流感病毒属于正粘病毒科流感病毒属，根据核蛋白(NP)和基质蛋白(MS)抗原性的不同，禽流感病毒分为A、B、C 3个血清型[1]。

根据禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)抗原性的差异，又可将禽流感病毒分为不同的亚型。

目前，A型禽流感病毒有16种特异的HA和10种特异的NA，A型流感病毒的自然宿主是水禽[2]，鸟类之间多通过直接或间接接触粪便污染的气溶胶、水、食物而传播，可以为无症状感染，轻微病变和严重的全身致死性疾病，多为无症状感染，其中H5和H7可引起高致病性禽流感。

偶尔病毒发生变异或重组穿过物种屏障，从而感染其他动物，如人类或家禽[3]。

遗传进化分析结果表明1918年的H1N1流感病毒可能是通过变异由禽类直接传染人类，而1957年和1968年的流感毒株都是禽流感毒株和当时流行的人流感毒株的重组体，同样地，引起1968年香港流感的H3N2毒株是感染鸭的病毒株H3、PB1基因和当时流行的人流感H2N2重组。

h5n9禽流感

h5n9禽流感H5N9禽流感：病原体、传播途径和防控措施的综述摘要：H5N9禽流感是一种由高致病性禽流感病毒H5N9引起的传染病，对禽类产业和公共卫生造成了巨大的威胁。

本文将探讨H5N9禽流感的病原体特性、传播途径和防控措施，为禽类养殖者和公共卫生机构提供参考。

第一部分：引言禽流感是由禽流感病毒引起的一群呼吸道传染病，不仅对家禽养殖业造成严重损失，还会危及人类健康。

其中，H5N9禽流感是近年来引起广泛关注的一种病毒株。

由于其高致病性和传播速度快，对禽类产业和公共卫生构成了极大威胁。

因此，了解H5N9禽流感的病原特性、传播途径和防控措施对防止疫情扩散和减少经济损失至关重要。

第二部分：H5N9禽流感的病原体特性H5N9禽流感是一种高致病性禽流感病毒，属于A型流感病毒。

该病毒的基因组由8个单链RNA分子组成，每个RNA分子编码了不同的病毒蛋白。

H5和N9代表了病毒表面的两种糖蛋白，分别被用来分类病毒株的血凝抑制和神经氨酸酶抑制活性。

H5N9禽流感病毒通过与呼吸道上皮细胞的受体结合，进入细胞并开始感染过程。

第三部分：H5N9禽流感的传播途径H5N9禽流感的传播途径主要有以下几种：直接接触感染的禽类、飞沫传播和间接接触传播。

直接接触感染通常发生在家禽养殖场或市场上，在这些场所，病毒可以通过禽鸟之间的接触直接传播。

飞沫传播是指感染禽流感的禽鸟在咳嗽、打喷嚏或呼吸时释放病毒颗粒，造成空气中的病毒浓度增加，其他禽鸟吸入后感染。

间接接触传播主要发生在病毒污染的环境中，例如饲养设施、车辆、器械等，通过这些环境的污染，禽鸟会被感染。

第四部分：H5N9禽流感的防控措施为了有效防控H5N9禽流感的传播，以下措施可以采取：1. 感染禽鸟的隔离：一旦发现禽流感病例，感染禽鸟应立即被隔离，以减少传播风险。

隔离期间，应采取合适的饲养、喂食和生活管理措施，以保证其健康状况和禽鸟的禽流感病毒清除。

2. 卫生措施的加强：保持养殖场和市场的清洁和卫生非常关键。

禽流感病毒致病性的分子生物学基础及研究近况

２病毒的基因组结构
禽流感病毒８个ＲＡ片断分别以片断ｌ片断２片断３Ｎ、、等命名，每个片段编码一种蛋白，２个最小的Ｒ但ＮＡ片断各有２个重叠基因ｔ具有不同的凄码框架，分别编码２种蛋白，所以禽流感病毒有１０种蛋白：血凝素、经氨酸酶、神核蛋白、基质蛋白（分为ＭＩ和Ｍ２、）聚合酶（为Ｐ１Ｐ２和Ｐ及非结构蛋分ＢＢＡ）白（分为Ｎ１Ｎ２。Ｓ和Ｓ）禽流感病毒的ＲＡ片断有如下共同特点：１所有片段的５Ｎ（）
禽流感病毒致病性的分子生物学基础及研究近况
郑肆，枝华陈
（福建出人境植疫检验局，建福州３００）幅５０１
中圈分类号：８８３￥５
文献标识码：Ｃ
文章编号：０４７３｛０２０ —０４ —０１００序列为ＧＡＣ￣ＡＧｐｐ２ＧＡ＆＆．ＵＡｐ５ｃ（）Ｇ３端有１２个高度保守的校昔酸，列为３ＨＵＣＵＵＵ一序ＯＧ
流感病毒属、Ａ型流感病毒，１７自８８年首次分离至今已有［ＯＤ多年历史。流感病毒根据核蛋白（）ＮＰ和基质蛋白（）ＭＳ抗原性的不同，为Ａ、Ｃ三个血清型，分Ｂ、可通过琼脂扩散试验、补体结合试验测出它们之间抗原性的差别。禽流感病毒的血清亚型多而复杂，同一血清亚型内有不同变异株，同变异株对不同禽娄的致病性又有很大差异。现有不三种方法用于禽流感致病力分类：第一，接种易感鸡．测定禽是流感病毒毒力的经典标准、对鸡致死率选７％或更高为高致５病型（）反之为温和致病型（）即低致病型和无致病ＨＰ，ＭＰ（型）。第二，通过基因序列分析，血凝素蛋白裂解位点存在多个碱性氨基酸，指示该病毒对鸡及相近禽种有高致病力或可能有高致病力。第三，如果一株禽流感病毒对接种鸡的致死率低于７％，５但能在细胞培养上生长而无需舔加促生长酶（：直Ｉ胰蛋白酶）该病毒就是高致病力毒抹。，禽流感病毒的抵抗力不强，乙醚、【、对集仿丙酮等有机溶剂、热及紫外线均敏感，使用常用消毒药如淡毓酸钠、酚类化台物、季胺盐类消毒剂、福尔马林和其它醛类及碘类化台物：５６℃加热３ａｉ：０℃加热１ａｎ６ —７０ｒｎ６０ｒ；５０℃加热数分钟，ｉ直射阳光下４～４０８ｈ均可灭活该病毒。在自然条件下，在于存鼻腔分泌物和粪便中的病毒，由于受到有机物保护．具有极大抵抗力。１４多型性据ＨＡ和ＮＡ抗原性差异，流感病毒可分为不同亚型。禽迄今为止，已发现Ｈ６种，Ｈ１Ａｌ即～ＨＩ；１６ＮＡ０种，Ｎｌ即～Ｎ１，０任一种ＨＡ与任一种ＮＡ结合后即为一种血清亚型理论上禽流感病毒至少有１０个血清亚型．已从禽类中分离到６现８种，１而且还有新的ＨＡ和ＮＡ不断被发现。禽流感病毒的多型性给防治禽流感带来极大难度。

影响禽流感病毒致病性和传播的关键氨基酸位点的研究进展

融合时ＨＡ蛋白裂解为ＨＡ１和ＨＡ２，ＨＡ的裂解位点不
感病毒引起的急性或慢性呼吸道传染病，根据临床症状不
同划分为高致病性禽流感（Ｈｉ曲ｌｙｐａｔｈｏｇｅｎｉｃａｖｉａｎ
ｉｎｌｆｕｅｚａｎ，ＨＰＡＩ）和低致病性禽流感（Ｌｏｗｐａｔｈｏｇｅｎｉｃａｖｉａｎ
吞和脱壳。ＨＡ的影响主要体现在以下两个方面。
１．１ＨＡ裂解位点处氨基酸序列对致病性的影响Ａ１Ｖ借
１０种ＮＡ亚型。禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｌｆｕｅｎｚａ，ＡＩ）是由Ａ型流
助ＨＡ吸附于细胞膜，引起感染，其多个碱性氨基酸裂解位点对ＡＩＶ致病性起着决定性作用。病毒囊膜与细胞膜
别并裂解，因而病毒增殖只发生在呼吸道和消化道等局
部，从而导致温和性感染。１．２ＨＡ蛋白中氨基酸位点对致病性的影响香港流感
即ＮＳ２）；非结构蛋白：ＮＳ１、ＰＢ１．Ｆ２。哈尔滨兽医研究所首次在国内分离到Ｈ５Ｎ１亚型
同影响了流感病毒的组织嗜性。ＨＰＡＩＶ的ＨＡ裂解位点
处存在连续４个以上碱性氨基酸（．ＲＲＲＲ．），可以被多种蛋
ｉｎｌｆｕｅｚａｎ，ＬＰＡＩ）。ＨＰＡＩ以急性死亡、高致死率和传染性

禽流感的研究及可能对人类的威胁

禽流感是由甲型流感病毒引起的以呼吸系统症状为主要表现的禽类传染性疾病。Ｐｒｏｃｔ于ｅｒｎｉｏ１７８８年首次报道了禽流感在意大利的流行，至今已经有一百多年的历史。１５９５年，Ｓｈｆｒｃａｅ …首次证实
作者简介：王全意，副研究员，研究方向：传染病流行病学。
病毒的根源，也是基因重组出现新亚型的根源。原因是中国南方农村是小农经济模型，、猪家禽往往混养，
ＷｓｉｅＶｉｕｉｈｎｔｄＳａｅｅｔＮ１ｒｓｎｔｅＵｉｅｔｔｓ：Ｇｉｅｉｅｕｄｌｎｓｆｒｓｒｅｌａｃ，ｐｅｅｔｏｎｏｔｏ，２０．ｏｕｖｉｌｎｅｒｖｎｉｎａｄｃｎｒｌ０３
但对人类的威胁越来越大。了解禽流感研究进展，认
真分析其对人类的潜在危害，并总结人类防控禽流感
的经验具有重要的意义。
致感染鸡群全军覆灭；ＬＡＰＩ禽流感常引起呼吸道症
状，产蛋率、受精率及孵化率下降，死亡率不高但病
毒有转化为ＨＡＰＩ的可能性。
从１５９９年起至今共爆发了数十次高致病性禽流１禽流感的特点和历史
感，总的趋势是爆发越来越频繁，范围越来越广。
１９９７年５月ｌ１日～ｌ２月２８日，以往被认为只能感染禽类的ＨＮ５１亚型病毒在香港引起人群暴发，导致ｌ人感染发病，６８人死亡，引起全世界的轰动。２世纪ｌ

禽流感病原学研究进展

许多纤突，包括ＨＡ和ＮＡ两种糖蛋白，也是病毒主
要的表面抗原［２１。
№
根据流感病毒血凝素（ＨＡ）和神经氨酸酶（ＮＡ）差异，可将Ａ型流感病毒分为不同亚型。迄今为止，ＨＡ已发现１６种，ＮＡ有９种，分别以Ｈ１～ＨＩ６、Ｎ１～Ｎ９表示。它们之间可发生随机组合，从而形成许多不同亚型。目前已经发现的流感病毒亚型至少有８０余种，其中高致病性亚型主要是Ｈ５和Ｈ７。
２禽流感病毒的形态和结构
电子显微镜下可明显看到表面纤突分为两类，一类呈棒状，由血凝素分子的三聚体构成；另一类呈蘑
Ａ型流感病毒的致病性与毒株和宿主均有很大
关系，不同毒株对同一宿主或同一毒株对不同宿主的致病性差异很大，根据毒力强弱将禽流感病毒划分为无致病性、低致病性禽流感（１ｏｗｐａｔｈｏｇｅｎｉｃａ —
的病毒型。
点。Ａ型流感病毒共编码ｌ１种病毒蛋白，其中８种是病毒的组成成分（ＨＡ、ＮＡ、ＮＰ、Ｍ１、Ｍ２、ＰＢ１、ＰＢ２
和ＰＡ），另外长度最小的ＮＳ基因编码是两个非结构
蛋白ＮＳ１和ＮＳ２，还有病毒粒子外的脂质囊膜伸出
而转变为具有严重致死性的高致病性禽流感病毒，至今高致病性禽流感病毒包括Ｈ７和Ｈ５亚型中的部分毒株，由于其传染性极强，可引起家禽全身性感染，造成多个组织器官严重病理损伤，致死率可

禽流感病毒诊断技术研究进展

禽流感病毒诊断技术研究进展一、引言禽流感是一种高致病性病毒性疾病，目前已在世界范围内造成大量的家禽死亡和经济损失。

禽流感病毒的快速检测和准确诊断对于疫情的防控和阻断至关重要。

该文将介绍目前禽流感病毒诊断技术的研究进展。

二、免疫学诊断技术1. 细胞培养法细胞培养法是禽流感病毒的最早诊断方法之一，通过将感染样品接种细胞培养物中，观察是否有细胞损伤和病毒分离情况。

但由于该方法需要特定实验室条件，并且需要较长时间，因此已渐被其他更先进的诊断技术所取代。

2. 补体结合反应（CFT）CFT是一种免疫学诊断方法，它通过观察血清中禽流感特异性抗体和禽流感病毒抗原之间的补体结合情况来诊断病毒。

但是，由于该方法对试剂质量和操作技巧要求较高，且存在假阴性和假阳性等问题，因此不常用于临床检测。

3. 酶联免疫吸附试验（ELISA）ELISA是一种快速、准确和经济的诊断方法。

该方法利用特异性抗体与抗原之间的特异性结合，通过酶标记活性物质，使结合物可定量检测。

目前，ELISA已被广泛应用于疫情监测和疫苗效果评估等方面。

4. 荧光素酶联免疫吸附试验（F-ELISA）F-ELISA是一种对传统ELISA方法的改进，它利用荧光素作为标记物，从而提高了灵敏度和特异性。

F-ELISA操作简单、快速、可靠，已被广泛用于临床检测和疫情监测。

三、分子诊断技术1. 聚合酶链反应（PCR）PCR是一种高度敏感和特异的分子诊断技术，它能够从样品中扩增病毒DNA或RNA片段，从而进行病毒诊断。

PCR具有快速、准确、可靠的优点，因此已成为禽流感病毒诊断的首选方法之一。

2. 实时荧光定量PCR（RT-qPCR）RT-qPCR将常规PCR与荧光标记技术相结合，能够快速、准确地扩增、检测禽流感病毒。

该方法可用于样品的快速筛选和诊断。

此外，RT-qPCR还可用于研究禽流感病毒的毒株差异和基因变异。

3. 巢式PCR巢式PCR是将PCR的灵敏度和特异性提高到更高水平的方法。

H5N1亚型高致病性禽流感病毒对鸽的致病性分析

１１实验室条件．
１３３鸽感染试验１．．２只４周龄鸽，９只经点眼滴鼻途径接种１ＥＤ。１０Ｌ的含病毒尿囊液，０Ｉ。０／每
毒传播中所起的作用尚未明确。在以往的研究中，不少学者报道鸽对ＡＩ仅有极弱的敏感性或对其Ｖ
具有耐受力口。然而，近的研究表明，最近年分离
到的Ｈ５亚型ＡＩＮ１Ｖ可引起鸽的感染发病，病毒且能在鸽体内复制Ｌ１。２００４年华南农业大学兽医学院禽病研究室从
胜鸽业有限公司，验前用ＨＩ验检验证明无抗 ห้องสมุดไป่ตู้试试
ＨＳＮ１亚型ＡＩＨ９Ｖ、Ｎ２亚型ＡＩＶ和新城疫病毒ＨＩ
抗体。
１３方法．
次报道在野生鸽体内分离到Ｈ５Ｎ１亚型ＡＩ６，ＶＬ但］
鸽对Ｈ５亚型ＡＶ的易感性以及其在禽流感病Ｎ１Ｉ
动物医学进展，０ｌ３（０ｌ一８２１，２１）：５ｌ
ＰｒｇｒｓｎＶｅｅｉｒｅｉｉｏｅｓｉｔｒｎａｙＭｄｃｎｅ
Ｈ５Ｎ１亚型高致病性禽流感病毒对鸽的致病性分析
乔立旺，焦培荣△，东霞，张李芳，自立，海玲，胡刘辛朝安，廖明，开健罗
禽流感（Ａｖａｆｅｚ，Ａ是由Ａ型流感ｉｎｉｌｎａＩ）ｎｕ病毒引起的一种禽类的感染／病综合征。该病被疾

鹅源禽流感病毒株的分离鉴定及其致病性实验研究的开题报告

鹅源禽流感病毒株的分离鉴定及其致病性实验研究的开题报告一、选题背景和意义禽流感是由禽流感病毒引起的一种急性、高度接触性传染病，在全球范围内广泛存在。

目前，主要病原体有H5N1、H7N9、H9N2等亚型病毒，其中H5N1病毒对家禽和人类的致病性高，并具有高度致死性。

鹅源禽流感病毒是一种新出现的禽流感病毒亚型，其致病性和传播性等特征还需进一步明确。

因此，为了更好地防范禽流感疫情的发生和流行，有必要对鹅源禽流感病毒进行分离鉴定及其致病性实验研究。

二、选题研究内容和方法1. 鹅源禽流感病毒的分离鉴定：从鹅源反应阳性的样品中提取病毒RNA，进行RT-PCR扩增和酶联免疫吸附测定（ELISA）检测，筛选出病毒阳性样品，再经过病毒分离和传代，最终确定鹅源禽流感病毒株。

2. 鹅源禽流感病毒的致病性实验研究：利用已分离出的鹅源禽流感病毒株，进行动物实验研究，观察其感染不同动物后的致病性和传染性等指标。

三、预期研究结果和意义1. 鉴定出一株具有代表性的鹅源禽流感病毒株，为后续相关研究提供实验基础；2. 分析鹅源禽流感病毒株的致病性特征和传播途径，探讨防控鹅源禽流感疫情的有效措施，为保障家禽产业和公共健康作出贡献；3. 丰富禽流感病毒的分类和特征，为研究不同禽流感病毒亚型的传染性和致病性提供参考。

四、研究方案和预算1. 研究方案：（1）样品采集和处理（2）RNA提取和RT-PCR检测（3）ELISA检测和病毒筛选（4）病毒分离和传代（5）动物实验研究2. 预算：包括实验室耗材费用、动物试验费用、实验室人员工资、设备折旧等费用，总计50万元。

五、进度安排1. 第一年：完成样品采集和处理、RNA提取和RT-PCR检测、ELISA检测和病毒筛选等工作，并初步筛选出病毒阳性样品。

2. 第二年：进行鹅源禽流感病毒的分离和传代，并确定出一株具有代表性的病毒株。

3. 第三年：进行动物实验研究，观察鹅源禽流感病毒株的致病性和传染性等指标，并分析研究结果。