谷氨酰t-RNA还原酶基因(hemA)的高效表达

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某大学生物工程学院《生物化学》考试试卷(636)

某大学生物工程学院《生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（95分，每题5分）1. 转氨酶催化的反应不可逆。

（）答案：错误解析：2. 在大肠杆菌里表达人组蛋白，可直接从人基因组中获取目的基因。

（）答案：正确解析：组蛋白基因不含内含子，因此可从基因组中直接获取它的基因。

3. 从低等的单细胞生物到高等的人类，能量的释放、储存和利用的主要形式均是ATP。

答案：正确解析：4. 嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的生物合成过程相同，即先合成碱基再与磷酸核糖连接生成核苷酸。

（）答案：错误解析：5. DNA复制时，冈崎片段的合成需要RNA。

（）[山东大学2016研]答案：正确解析：冈崎片段的合成需要RNA引物。

6. DNA分子中没有修饰的C发生自发脱氨基引发突变的可能性比修饰后的5甲基胞嘧啶自发脱氨基引发突变的可能性低得多。

（）答案：正确解析：DNA分子中没有修饰的C发生自发脱氨基后转变为U，很容易被细胞内的BER系统识别和修复。

5甲基胞嘧啶自发脱氨基后转变为T，而T是DNA分子中正常的碱基，不容易被识别和修复，经过一轮复制以后，将导致CG碱基对突变为TA碱基对。

7. 若1个氨基酸有3个遗传密码，则这3个遗传密码的前两个核苷酸通常是相同的。

（）答案：正确解析：8. 具有时空表达特征的基因是奢侈基因。

（）[浙江大学2010研]答案：正确解析：奢侈基因是指不同类型细胞中特异性表达的基因，其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与功能。

9. 抑制磷酸果糖激酶可导致果糖6磷酸的积累。

（）答案：正确解析：10. 酰基载体蛋白（ACP）是饱和脂酸碳链延长途径中二碳单位的活化供体。

（）答案：错误解析：线粒体酶系、微粒体酶系与内质网酶系都能使短链饱和脂酸的碳链延长，每次延长两个碳原子。

病理学技术(主管技师)：分子生物学考试题(最新版).doc

病理学技术(主管技师)：分子生物学考试题（最新版）考试时间：120分钟考试总分：100分遵守考场纪律，维护知识尊严，杜绝违纪行为，确保考试结果公正。

1、单项选择题可以稳定已解开的DNA 单链的是（）A.单链DNA 结合蛋白 B.DNA 连接酶 C.pol 和pol D.pol E.解链酶本题答案：A 本题解析：真核生物的至少5种，分别为DNA 聚合酶α、β、γ、δ、ε，其中DNA 聚合酶γ存在于线粒体，其余都在细胞核。

DNA 聚合酶α和δ是复制中起主要作用的酶。

复制开始首先要从复制起始点解开一段双螺旋成单链，单链的稳定需要单链DNA 结合蛋白。

2、单项选择题基因表达中的诱导现象是指（）A.阻遏物的生成 B.细菌利用葡萄糖作碳源 C.细菌不用乳糖作碳源 D.由底物的存在引起代谢底物的酶的合成 E.细菌营养过剩本题答案：D 本题解析：底物作为诱导剂。

姓名：________________ 班级：________________ 学号：________________ --------------------密----------------------------------封 ----------------------------------------------线----------------------3、单项选择题组成核糖体的是（）A.tRNAB.mRNAC.hnRNAD.snRNAE.rRNA本题答案：E本题解析：动物细胞内主要含有mRNA、tRNA、rRNA三种核糖核酸。

其中mRNA含有遗传密码，作为蛋白质合成的模板；tRNA活化、转运氨基酸并识别mRNA上的密码，参与蛋白质的合成，其一级结构中含有较多的稀有碱基；rRNA与蛋白质组成核糖体作为蛋白质合成的场所。

hnRNA是mRNA的前体，在snRNA参与下剪接成成熟的mRNA。

4、单项选择题与5＇-IGC-3＇反密码子配对的密码子是（）A.5＇-GCU-3＇B.5＇-CCG-3＇C.5＇-CGC-3＇D.5＇-CCC-3＇E.5＇-GGC-3＇本题答案：A本题解析：密码子的第1、2碱基分别与反密码子的第3、2碱基配对，密码子的第3碱基与反密码子的第1碱基配对不严格，称”摆动配对”。

大肠杆菌hemA基因的高效表达及对5-氨基乙酰丙酸合成的影响

隆ｈｍｅＡ基因克隆到载体，构建表达载体ｐＴ８ —ｈｍ以探讨更佳的重组大肠杆菌ｈｍＥ２ａｅＡ，ｅＡ基因的表达效果。对其蛋白质进行纯化，测得发酵菌液上清液中５一ＡＡ含量达到４．ｇＬ并对上清提取液中卟啉类物质的积累Ｌ２５ｍ／；
维普资讯
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２０．— ６． —
江苏农业科学
２００７年第４期
大肠杆菌ｈｍｅＡ基因的高效表达及对５一氨基乙酰丙酸合成的影响
袁新宇，刘锦妮，王晶，杨琼，雪珍，姜发堂吴，杨明明＇
速酶，ｈｍ由ｅＡ基因编码。本试验在ｐＸ２ｈｒ．ｃｌＤ５￣ＥＴ０一ｅＡＥｏＨｃ表达载ｎｉ体的基础上，质粒ｐＸ２ｈｍ从ＥＴ０～ｅＡ克隆ｈｍｅＡ基因克隆到ｐＴ８表达载体上，建ｐＴ８Ｅ２ａ构Ｅ２ａ—ｈｍｅＡ
合成的反应步骤多、化率低，生产成本居高不转使
下，而且存在着比较严重的环境污染。因此近
大肠杆菌菌株ＥｏｉＨｃ由本实验室保存，．ｃｌＤ５￣大肠杆菌表达宿主Ｂ２１Ｄ３和表达载体ｐＴ８Ｉ（Ｅ）Ｅ２ａ
ＥｏｉＩ（Ｅ）达载体，其蛋白进行纯化。．ｃｌＢ２１Ｄ３表对并对发酵菌液中的５一ＡＡ、Ｌ卟啉类物质的积累量进行初步测定，探讨更佳的重组大肠杆菌ｈｍ以ｅＡ

谷氨酰t_RNA还原酶基因_hemA_的高效表达_李爽

中国生物工程杂志 Ch i n a B iotechnology ,2007,27(6):82~86谷氨酰t -RNA 还原酶基因(he mA )的高效表达李爽1李恒鑫1刘辉1袁新宇2,3杨明明1,3龚月生1*(1西北农林科技大学动物科技学院杨凌 712100 2湖北工业大学生物工程学院武汉 430068)(3武汉阳光广济医药开发有限公司武汉 430068)摘要枯草芽孢杆菌(Bacill u s s ubtilis )中的he mA 基因编码谷氨酰t R NA 还原酶,该酶是B.subtilis 代谢途径中由谷氨酸到5-氨基乙酰丙酸(5-ALA )反应的限速酶。

将B.subtilis 的he mA 基因克隆到pET28a 载体上,并在大肠杆菌(E scherich i a coli )BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE 电泳分析,表达的目的蛋白占总蛋白的20%。

通过分离纯化得到谷氨酰t R NA 还原酶。

重组菌发酵液上清中5-ALA 含量达40.2mg /L ,菌液呈红色,过筛试验和紫外分光光度检测验证显色物质为卟啉类,实验表明,表达的重组蛋白促进了5-ALA 的合成和代谢。

关键词枯草芽孢杆菌谷氨酰-t RNA 还原酶基因高效表达 5-ALA 中图分类号 Q812收稿日期:2007-01-01 修回日期:2007-03-16*通讯作者,电子信箱:gongyuesheng @sohu .co m5-氨基乙酰丙酸(5-a m i nolevui nic aci d ,5-ALA )是生物体内合成四吡咯类物质(血红素、细胞色素、维生素B 12等)的前体。

5-ALA 作为光动力药物,可以用来诊断治疗皮肤癌、食道癌等疾病。

在农业生产中可以作为除草剂、杀虫剂、壮苗剂、增产剂,还能提高植物的抗盐、抗冻能力[1~3]。

近些年国内外学者对其化学合成进行了大量研究,相比之下生物合成具有原料价廉易得,环境相容性好的特点[1,4],成为近几年研究热点。

重组谷氨酰胺转胺酶基因的原核表达研究

ＧｅｅｗｅｅａｏｌｗｓＰｉａｏｃｎｒｔｎ１０ｍｍｏ／ｎｒｓｆｌｏ：ＩＴＧｆｌｎｅｔａｉ．ｎｃｏｌＬ，ｒｔｔｏｐｅ５／ｎ，ｉｄｃｎｅｅａｕｅ３ｏａｉｎｓｅｄ２０ｒｍｉｎｕｉｇｔｍｐｒｔｒ７
ｌｉａｓ中进行克隆与表达［］上述研究的ＭＴｉｄｎｖ１．Ｇ
表达水平均很低，通过包涵体也难以达到工业生且产ＭＴ规模的要求．有文献报道［，过使用Ｇ另８通］Ｃｒｎｂｃｒｕｌｔｍｃｍ作为宿主系统高效的ｏｙｅａｔｉｍｇｕａｉｕｅ
ＡｂｔａｔＡｒｋｒｏｉｅｐｅｓｏｅｔｒＥ．ｏｉＢ１ｐｓｒｃｐｏａｙｔｃｘｒｓｉｎｖｃｏ — ｃｌＬ２／ＥＴ３ａＭＴＧ（０— ＤＥ３ｗａｏｓｒｃｅｎｈｆｅｔｆ）ｓｃｎｔｕｔｄａｄｔｅｅｆｃｓｏ
部分载体为诱导型启动子，ＬｃＴｃ，如ａ和ａ等此类型
载体可控制目的基因在菌体生长的某个阶段表达，既可避免生长前期蛋白高表达对菌体产生不利影
响，可避免蛋白酶对蛋白的降解．ｐＴ０又Ｅ３ａ与Ｅ．
关键词微生物谷氨酰胺转胺酶；组；因；达重基表
Ｒ３４３文献标识码Ａ文章编号１７ — ３１２Ｌ）４０３ — ５４．１６２４２（ＯＯ０ — ０２０

川大学-生物技术-综合实验报告-学生版

川⼤学-⽣物技术-综合实验报告-学⽣版⽣物技术综合实验⽢薯γ-⾕氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因的克隆和原核表达学⽣：学号：同实验者：<研究背景>⾕胱⽢肽(glutathione, GSH) GSH具有多种重要⽣理功能, 抗⾃由基和抗氧化应激作⽤, 保护细胞膜的完整性等。

γ-GCS是植物细胞中GSH⽣物合成的限速酶, 可以调控GSH的⽣物合成量。

GSH在⽣物体抵御冷害、⼲旱、重⾦属、真菌等胁迫过程中起着重要作⽤, 说明γ-GCS也与植物抗逆过程密切相关。

实验⼀⽢薯叶⽚RNA提取⼀、实验⽬的1. 了解真核⽣物RNA提取的原理；2. 掌握Trizol提取的⽅法和步骤。

⼆、实验原理Trizol?试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制⽽成的单相的快速抽提总RNA的试剂，在匀浆和裂解过程中，能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。

TRIzol的主要成分是苯酚。

苯酚的主要作⽤是裂解细胞，使细胞中的蛋⽩，核酸物质解聚得到释放。

苯酚虽可有效地变性蛋⽩质，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中还加⼊了8－羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基⼄醇等来抑制内源和外源RNase（RNA酶）。

%的8－羟基喹啉可以抑制RNase，与氯仿联合使⽤可增强抑制作⽤。

异硫氰酸胍属于解偶剂，是⼀类强⼒的蛋⽩质变性剂，可溶解蛋⽩质并使蛋⽩质⼆级结构消失，导致细胞结构降解，核蛋⽩迅速与核酸分离。

β-巯基⼄醇的主要作⽤是破坏RNase蛋⽩质中的⼆硫键。

在氯仿抽提、离⼼分离后，RNA处于⽔相中，将⽔相转管后⽤异丙醇沉淀RNA。

⽤这种⽅法得到的总 RNA中蛋⽩质和DNA污染很少。

1.材料⽢薯（Ipomoea batatas Lam）叶⽚，品种为徐薯182. 试剂①⽆RNA酶灭菌⽔：加⼊%的DEPC，处理过夜后⾼压灭菌；② Trizol试剂；③氯仿；④异丙醇、75％⼄醇；⑤ TBE缓冲液；⑥上样缓冲液（6×）3. 仪器⾼压灭菌锅、微量移液器、台式离⼼机、超净⼯作台、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、塑料离⼼管、枪头和EP管架四、实验⽅法1. 将叶⽚取出放⼊研钵中，加⼊适量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物叶⽚加⼊1 mL Trizol试剂，室温放置5 min，使样品充分裂解；2. 每1 mL Trizol试剂加⼊200 µL氯仿，⽤⼿剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min 使其⾃然分相；3. 4℃ 12,000 rpm 离⼼15 min，吸取上层⽔相转移到新管中；在上清中加⼊等体积冰冷的异丙醇，室温放置15 min；4. 4℃ 12,000 rpm 离⼼10 min，弃上清，RNA沉淀于管底；5. RNA沉淀中加⼊1 mL 75%的⼄醇（⽤RNase-free⽔配制），温和震荡离⼼管，悬浮沉淀；4℃ 8,000 rpm离⼼2 min，弃上清；6. 室温放置10 min晾⼲沉淀；7. 沉淀中加⼊20µL RNase-free ddH2O，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存；8. ⽤1%的琼脂糖凝胶电泳进⾏检测，⽤EB染⾊并照相。

高效转化谷氨酰胺合成L-茶氨酸的大肠杆菌菌株及其应用[发明专利]

专利名称：高效转化谷氨酰胺合成L－茶氨酸的大肠杆菌菌株及其应用
专利类型：发明专利
发明人：殷志敏,沈青红,吕志祥,王正才,傅珒,张正平
申请号：CN200910035096.4
申请日：20090915
公开号：CN101643712A
公开日：
20100210
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及微生物学领域，具体涉及一种生物转化合成茶氨酸的大肠杆菌菌株及其应用。

所说的高效转化L－谷氨酰胺和乙胺的大肠杆菌，是大肠杆菌(Escherichia coli)南师一号CCTCC No.M 209166。

该菌株高产茶氨酸合成酶，高效转化谷氨酰胺和乙胺为L－茶氨酸并在工业化生产过程中获得成功；对谷氨酰胺的转化超过80％。

申请人：南京师范大学,常州阿格罗生物科技有限公司
地址：210046 江苏省南京市亚东新城区文苑路1号
国籍：CN
代理机构：南京知识律师事务所
代理人：卢亚丽
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谷胺酰胺转氨酶的基因工程法制备流程

谷胺酰胺转氨酶的基因工程法制备流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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trypanothione reductase 谷胱甘酰亚精胺还原酶

trypanothione reductase 谷胱甘酰亚精胺还原酶
谷胱甘酰亚精胺还原酶（Trypanothione reductase，TR）是一种酶，存在于原虫种Trypanothione reductase_Udp-glucuronosyltransferase_opens_into_new_tab的细胞中。

它是原虫生存的关键酶之一，负责维持细胞内还原环境。

谷胱甘酰亚精胺还原酶的主要功能是将氧化态的谷胱甘酰亚精胺（T(SH)2）还原为还原态的谷胱甘酰亚精胺（T(SH)），从而维持细胞内巨观机体的还原环境。

谷胱甘酰亚精胺还原酶的还原活性依赖于NADPH（还原型辅酶Ⅱ磷酸腺苷二磷酸）、FAD（核黄素腺嘌呤二核苷酸）和葡萄糖6-磷酸酸化酶等辅因子的参与。

由于谷胱甘酰亚精胺还原酶在原虫中是独特的代谢途径，与脊椎动物细胞中的谷胱甘肽还原酶结构和功能差别较大，因此谷胱甘酰亚精胺还原酶被视为一个重要的药物靶标。

一些抑制剂已被开发出来，用于治疗原虫引起的疾病，如非洲锥虫病和血吸虫病等。

中医大16年6月考试《生物化学(本科)》复习题

中医大16年6月考试《生物化学（本科）》复习题一.单选题1.下列哪一种氨基酸是亚氨基酸A.脯氨酸B.焦谷氨酸C.亮氨酸D.丝氨酸E.酪氨酸2.关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是A.天然蛋白质分子均有这种结构B.有三级结构的多肽链都具有生物学活性C.三级结构的稳定性主要是次级键维系D.亲水基团聚集在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基3.含有Ala，Ap，Ly，Cy的混合液，其pI依次分别为6．0，2．77，9．74，5．07，在pH为9环境中电泳分离这四种氨基酸，自正极开始，电泳区带的顺序是 A.Ala，Cy，Ly，ApB.Ap，Cy，Ala，LyC.Ly，Ala，Cy，ApD.Cy，Ly，Ala，ApE.Ap，Ala，Ly，Cy4.亚基与亚基之间呈特定的三维空间排布，并以非共价键相连接的结构称之为A.模体B.二级结构C.三级结构D.四级结构E.结构域5.形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和它相邻的两个α-碳原子处于A.不断绕动状态B.可以相对自由旋转C.同一平面D.随不同外界环境而变化的状态E.不同平面6.下列有关谷胱甘肽叙述正确的是A.谷胱甘肽N端的羧基是主要的功能基团B.谷胱甘肽中谷氨酸的α-羧基是游离的C.谷胱甘肽是体内重要的氧化剂D.谷胱甘肽的C端羧基是主要的功能基团E.谷胱甘肽所含的肽键均为α肽键7.蛋白质的等电点是A.蛋白质带正电荷或负电荷时的溶液pH值B.蛋白质溶液的pH值等于7时溶液的pH值C.蛋白质分子呈兼性离子，净电荷为零时溶液的pH值D.蛋白质分子呈正离子状态时溶液的pH值E.蛋白质分子呈负离子状态时溶液的pH值8.关于蛋白质亚基的描述，哪项正确A.整条多肽链呈螺旋结构B.两条以上多肽链形成三级结构C.两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质D.每个亚基都有各自的三级结构E.每个亚基都具有生物学功能9.下列关于肽单元的叙述，正确的是A.是组成多肽链的三级结构的基本单位B.C＝O、N－H四个原子在同一个平面C.肽键中的氢和氧总是顺式结构D.在肽单元中与α－碳相连的单键不能自由旋转E.相邻两个肽单元的相互位置与α－碳两侧单键旋转无关10.DNA分子的腺嘌呤含量为20%，则胞嘧啶的含量应为A.20%B.30%C.40%D.60%E.80%11.酶的活性中心是指酶分子A.其中的必需基因B.其中的辅基C.与底物结合部位D.催化底物变成产物的部位E.结合底物并发挥催化作用的关键性三维结构区12.关于酶的化学修饰的叙述，错误的是A.有活性与无活性两种形式B.有放大效应C.两种形式的转变有酶催化D.两种形式的转变有共价变化E.化学修饰不是快速调节13.某一酶促反应的速率为最大速率的80%时，Km等于A.［S］B.1/2［S］C.1/4［S］D.0．4［S］E.0．8［S］14.反竞争性抑制剂的动力学效应是使A.Km值升高，Vma某不变B.Km值降低，Vma某不变C.Km值不变，Vma某升高D.Km值不变，Vma某降低E.Km值和Vma某均降低15.全酶是指A.酶蛋白—底物复合物B.酶蛋白—抑制剂复合物C.酶蛋白—别构剂复合物D.酶蛋白的无活性前体E.酶蛋白—辅助因子复合物16.同工酶的特点是A.催化作用，分子组成和理化性质相同，但组织分布不同的酶B.催化作用分子组成相同，辅酶不同C.多酶体系中酶组分的统称D.一类催化作用相同，分子组成和理化性质不同的酶E.催化同一底物起不同反应的酶的总称17.有机砷化合物对酶的抑制作用，可用下列哪种方法解毒A.加入适量的半胱氨酸B.加入过量的GSHC.加入适量的甲硫氨酸D.加入适量的二巯基丙醇E.超滤18.1分子葡萄糖有氧氧化时，经底物水平磷酸化方式可产生的ATP是A.2B.3C.4D.6E.819.与丙酮酸在线粒体内氧化无关的酶促反应是A.苹果酸酶反应B.琥珀酸脱氢酶反应C.异柠檬酸脱氢酶反应D.丙酮酸脱氢酶反应E.α-酮戊二酸脱氢酶反应20.磷酸戊糖途径的限速酶是A.6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶B.内酯酶C.6-磷酸葡萄糖脱氢酶D.己糖激酶E.转酮醇酶21.存在于肌肉、脂肪组织中的葡萄糖转运体是A.GLUT1B.GLUT2C.GLUT3D.GLUT4E.GLUT522.与脂酸β-氧化无关的酶是A.脂酰辅酶A脱氢酶B.β-羟脂酰辅酶A脱氢酶C.Δ2-烯酰辅酶A水化酶D.β-酮脂酰辅酶A硫解酶E.β-酮脂酰还原酶23.关于酮体的叙述，正确的是哪一项A.不能为机体所利用B.是甘油在肝脏代谢的特有中间产物C.主要为肝脏本身利用D.在肝细胞的线粒体中生成E.在血中与清蛋白结合运输24.合成酮体的限速酶是A.HMGCoA合酶B.HMGCoA裂解酶C.HMGCoA还原酶D.脂酰CoA 合成酶E.乙酰CoA羧化酶25.催化甘油磷脂水解变为溶血磷脂的酶是A.磷脂酶AB.磷脂酶B1C.磷脂酶B2D.磷脂酶CE.磷脂酶D26.胆固醇合成原料乙酰CoA从线粒体运至胞液的途径是A.蛋氨酸循环B.葡萄糖－丙氨酸循环C.鸟氨酸酸循环D.柠檬酸－丙酮酸循环E.嘌呤核苷酸循环27.蛋白质含量最高的血浆脂蛋白是A.HDLB.IDLC.LDLD.VLDLE.CM28.ApoCII可激活A.LPLB.LCATC.HLD.ACATE.HSL29.有关甘油磷脂的叙述正确的是A.除脑组织外，几乎全身各组织均可合成B.其结构特点是2位通常结合不饱和脂酸C.心磷脂是细胞膜中最丰富的磷脂之一D.在PLB的作用下产生溶血磷脂E.其主要生理功能是氧化供能30.苹果酸-天冬氨酸穿梭涉及下列哪种氨基酸A.AnB.GluC.AlaD.LyE.Val31.不是琥珀酸氧化呼吸链的成分为A.铁硫蛋白B.FMNC.CoQD.CytcE.Cytc132.呼吸链中不具有质子泵功能的是A.复合体ⅠB.复合体ⅡC.复合体ⅢD.复合体ⅣE.复合体Ⅰ和复合体Ⅳ33.1分子NAD+在电子传递链中作为递氢体，可接受A.2个氢原子B.2个电子C.2个氢原子和1个电子D.2个氢原子和2个电子E.1个氢原子和1个电子34.S-腺苷甲硫氨酸的主要作用是A.生成腺嘌呤核苷B.合成四氢叶酸C.补充甲硫氨酸D.合成同型半胱氨酸E.提供甲基35.体内转运一碳单位的载体是A.维生素B12B.叶酸C.四氢叶酸D.生物素E.S-腺苷甲硫氨酸（S-腺苷蛋氨酸）36.决定蛋白质营养价值高低的是A.氨基酸的种类B.氨基酸的数量C.必需氨基酸的数量D.必需氨基酸的种类E.必需氨基酸的数量、种类及比例37.下列不属于一碳单位的是A.=CH－B.－CH2－C.―CH3D.―CHOE.CO238.可与谷丙转氨酶共同催化丙氨酸和α-酮戊二酸反应产生游离氨的酶是A.谷氨酸脱氢酶B.谷草转氨酶C.谷氨酰胺酶D.谷氨酰胺合成酶E.α-酮戊二酸脱氢酶39.精氨酸分解的产物除了尿素外还有1分子A.鸟氨酸B.瓜氨酸C.天冬氨酸D.谷氨酸E.延胡索酸40.ALT活性最高的组织为A.心肌B.脑C.肝D.骨骼肌E.肾41.以整个分子掺入嘌呤环的氨基酸是A.丝氨酸B.天冬氨酸C.甘氨酸D.丙氨酸E.谷氨酸42.HGPRT（次黄嘌呤-鸟嘌磷酸核糖转移酶）参与下列哪种反应A.嘌呤核苷酸从头合成B.嘌呤核苷酸补救合成C.嘧啶核苷酸从头合成D.嘧啶核苷酸补救合成E.嘌呤核苷酸分解代谢43.别嘌呤醇治疗痛风的机制是该药抑制A.黄嘌呤氧化酶B.腺苷脱氨酸C.尿酸氧化酶D.鸟嘌呤脱氢酶E.黄嘌呤脱氢酶44.嘧啶环中第二位C原子来自A.谷氨酰胺B.天门冬氨酸C.氨甲酰磷酸D.乙酸E.CO245.在体内能分解为β-氨基异丁酸的核苷酸是A.CMPB.AMPC.TMPD.UMPE.IMP46.生物体内物质代谢调节最基础的水平是A.细胞水平B.激素水平C.神经调节D.整体水平E.器官水平47.关于糖、脂、氨基酸代谢的叙述，错误的是A.乙酰CoA是糖、脂、氨基酸分解代谢共同的中间代谢物B.三羧酸循环是糖、脂、氨基酸分解代谢的最终途径C.当摄入糖量超过体内消耗时，多余的糖可转变为脂肪D.当摄入大量脂类物质时，脂类可大量异生为糖E.糖、脂不能替代蛋白质48.糖类、脂类、氨基酸氧化分解时，进入三羧酸循环的主要物质是A.异柠檬酸B.α-酮酸C.苹果酸D.乙酰CoAE.草酰乙酸49.底物对酶含量的影响，通常是A.阻遏酶蛋白的合成B.诱导酶蛋白的合成C.促进酶蛋白的降解D.抑制酶蛋白的降解E.使酶蛋白的含量不变50.通过细胞膜受体起作用的激素是A.雌激素B.肾上腺素C.孕激素D.糖皮质激素E.甲状腺素51.DNA复制中，不需要下列哪种酶A.DNA指导的DNA聚合酶B.DNA指导的RNA聚合酶C.DNA连接酶D.拓扑异构酶E.限制性核酸内切酶52.DNA连接酶的作用是A.解决复制解链过程中的打结、缠绕现象B.合成RNA引物C.使DNA形成负超螺旋结构D.连接DNA双链中的单链缺口E.去除引物，填补空缺53.冈崎片段的生成是由于A.真核生物具有多个复制起始点B.DNA复制速度过快C.RNA引物合成不足D.随从链的复制方向与解链方向相反E.DNA连接酶缺失54.真核生物复制延长过程中，主要起催化作用的聚合酶是A.DNA-polαB.DNA-polβC.DNA-polγD.DNA-polδE.DNA-polε55.DNA复制的方向性是指A.新链只能从5＇端向3＇端延长B.DNA双螺旋上两股单链走向相反，一股从5＇→3＇延长，一股从3＇→5＇延长C.两股单链走向相同D.两股均为连续复制E.多个复制起始点，有多种复制方向56.转录是A.以前导链为模板B.以DNA的两条链为模板C.以编码链为模板D.以DNA的一条链为模板E.以RNA为模板57.原核生物转录作用生成的mRNA是A.多顺反子B.内含子C.插入子D.单顺反子E.间隔区序列58.AATAAA是A.启动子的辨认序列B.真核生物的顺式作用元件C.真核生物的反式作用因子D.真核生物转录加尾修饰点E.线粒体的起始密码序列59.体内核糖核苷酸链合成的方向是A.3＇→5＇B.C→NC.N→CD.5＇→3＇E.既可自3＇→5，亦可自5＇→3＇60.能特异性抑制原核细胞mRNA聚合酶的是A.假尿嘧啶B.鹅膏蕈碱C.亚硝酸盐D.氯霉素E.利福平61.真核细胞的TATABO某是A.DNA合成的起始位点B.RNA聚合酶与DNA模板稳定结合处C.RNA聚合酶的活性中心D.翻译起始点E.转录起始点62.真核生物mRNA的聚腺苷酸尾巴A.由模板DNA上的聚T序列转录生成B.是输送到胞质之后才加工接上的C.可直接在初级转录产物的3＇-OH末端加上去D.维持DNA作为转录模板的活性E.先切除部分3＇端的核苷酸，然后加上去63.遗传密码的阅读方向A.没有方向性B.3＇→5＇C.5＇→3＇D.N末端→C末端E.C末端→N末端64.嘌呤霉素抑制蛋白质生物合成的机制是A.抑制氨基酰-tRNA合成酶的活性,阻止氨基酰-tRNA的合成B.其结构与酪氨酰-tRNA相似,可和酪氨酸竞争与mRNA结合C.抑制转肽酶活性D.可与核糖体大亚基受位上的氨基酰-tRNA形成肽酰嘌呤霉素E.可与给位上的肽酰-tRNA形成肽酰嘌呤霉素65.真核生物蛋白质合成时，正确的叙述是A.70S核蛋白体首先进入核蛋白体循环B.70S核蛋白体不能进入核蛋白体循环C.50S核蛋白体亚基首先进入核蛋白体循环D.60S核蛋白体亚基首先进入核蛋白体循环E.80S核蛋白体解离后进入核蛋白体循环66.管家基因的表达A.不受环境因素影响B.较少受环境因素影响C.极少受环境因素影响D.有时受，也有时不受环境因素影响E.特别受环境因素影响c阻遏蛋白由A.Z基因编码B.Y基因编码C.A基因编码D.I基因编码E.以上都不是68.基因表达的基本调控点是A.基因活化B.转录后加工C.转录起始D.翻译后加工E.翻译起始69.下列哪一种不是操纵子的组成部分A.结构基因B.启动子C.操纵基因D.阻遏物E.pribnow盒70.基因表达过程中仅在原核生物中出现而真核生物没有的是A.tRNA 的稀有碱基B.AUG用作起始密码子C.冈崎片段D.DNA连接酶E.σ因子71.转录因子A.是原核生物RNA聚合酶的组分B.是真核生物RNA聚合酶的组分C.有α、β、γ等各亚基D.是转录调控中的反式作用因子E.是真核生物的启动子72.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是A.化学合成法B.差异显示法C.基因组文库法D.cDNA文库法E.聚合酶链反应(PCR)73.直接针对目的DNA进行筛选的方法是A.青霉素抗药性B.分子筛C.电源D.分子杂交E.氨苄青霉素抗药性74.某限制性核酸内切酶切割5＇-GGGGGG↓AATTCC-3＇序列后产生A.5＇突出末端B.3＇突出末端C.平末端D.5＇及3＇突出末端E.5＇或3＇突出末端75.下面有关肾上腺素受体的描述，正确的是A.具有催化cAMP生成的功能B.与激素结合后，释出催化亚基C.与催化cAMP生成的蛋白质是各自独立的D.特异性不高，可与一些激素结合E.与激素共价结合76.关于第二信使Ca2+的叙述不正确的是A.Ca2+能激活Ca2+-CaM激酶B.Ca2+能激活PKCC.细胞外Ca2+浓度远大于细胞内D.IP3可促使内质网的Ca2+释入胞质E.内分泌等变化持续数小时，细胞内Ca2+也升高数小时77.下列哪种因素不参与血红素合成代谢的调节A.促红细胞生成素（EPO）B.ALA合酶C.ALA脱水酶D.亚铁鳌合酶E.原卟啉原Ⅸ氧化酶78.血红素的合成部位在A.线粒体与胞液B.胞液与内质网C.微粒体与核糖体D.线粒体E.内质网与线粒体79.下列哪一种胆汁酸是次级胆汁酸A.甘氨鹅脱氧胆酸B.甘氨胆酸C.牛磺鹅脱氧胆酸D.牛磺胆酸E.脱氧胆酸80.能编码具有GTP酶活性的癌基因是A.myc基因B.ra基因C.i基因D.rc基因E.myb基因二.名词解释1.蛋白质的三级结构2.肽单元3.Tm值4.DNA变性5.核酸酶6.多酶体系7.必需基团8.酶的变构调节9.糖酵解10.糖异生11.Cori循环12.HSL13.呼吸链14.ATP合酶15.氮平衡16.必需氨基酸17.物质代谢调节18.应激19.基因20.复制叉21.领头链22.随从链23.中心法则24.点突变25.cDNA26.结构基因27.内含子28.剪接29.不对称转录30.操纵子31.增强子32.结构基因33.基因组文库34.转导作用35.PCR36.克隆37.DNA重组38.受体39.第二信使40.小G蛋白三.填空题1.按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为()，蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为()。

4种化学物质对HaCaT细胞氧化应激相关基因表达的影响

Vol.34No.3May 2022收稿日期：2021-10-12；修订日期：2022-02-224种化学物质对HaCaT 细胞氧化应激相关基因表达的影响段惠娟1，2，孙照刚1，2，郝卫东3，4，魏雪涛3，4，褚洪迁1，2，*(1．北京市结核病胸部肿瘤研究所耐药结核病研究北京市重点实验室，北京101149；2．首都医科大学附属北京胸科医院转化医学研究室，北京101149；3．北京大学公共卫生学院毒理学系，北京100191；4．食品安全毒理学研究与评价北京市重点实验室，北京100191)Effects of four chemicals on the expression of oxidative stress-related genes in HaCaT cellsDUAN Huijuan 1,2,SUN Zhaogang 1,2,HAO Weidong 3,4,WEI Xuetao 3,4,CHU Hongqian 1,2,*(1.Beijing Key Laboratory of Drug-resistant Tuberculosis Research,BeijingTuberculosis and Thoracic Tumor Research Institute,Beijing 101149;boratory of Translational Medicine,Beijing Chest Hospital,CapitalMedical University,Beijing 101149;3.Department of Toxicology,School of Public Health,Peking University,Beijing 100191;4.Beijing Key Laboratory of Food Safety ToxicologyResearch and Evaluation,Beijing 100191)【摘要】目的：探讨过氧化氢、姜黄素、槲皮素及叔丁基对苯二酚对84种氧化应激相关基因表达的影响。

微生物谷胺酰胺转氨酶在蛋白质修饰中的应用

微生物谷胺酰胺转氨酶在蛋白质修饰中的应用程孝中12,赵鑫锐1,洪皓飞I,杨敏I,周志昉1,吴志猛料(1.江南大学教育部糖化学与生物技术重点实验室，江苏无锡214122；2.亳州学院生物与食品工程学院，安徽亳州236800)摘要：谷胺酰胺转氨酶能催化蛋白质中谷氨酰胺与赖氨酸间的酰基转移反应，广泛应用于食品、纺织等工业。

近年来，微生物来源的谷胺酰胺转氨酶，具有易得、反应条件温和、不依赖钙离子调节等优点，被广泛应用于蛋白质的定点修饰。

通过基因工程手段，在蛋白质的特定部位引入谷胺酰胺转氨酶特异性识别的Q-Tag和K-Tag,谷胺酰胺转氨酶能催化抗体与小分子之间、蛋白质与蛋白质之间、蛋白质与聚合物之间、蛋白质与糖类物质之间、蛋白质与脂质体之间的定点偶联以及短肽的自身环化。

这些蛋白质定点修饰产物在药物化学、化学生物学以及生物材料等领域有着广泛的用途。

本文作者综述了近年来微生物谷胺酰胺转氨酶在蛋白质定点修饰中的最新进展。

关键词：谷胺酰胺转氨酶；蛋白质；定点修饰；多肽；聚合物；糖中图分类号:Q51文章编号:1673-1689(2019)06-0001-10DOI：10.3969/j.issn.1673-1689.2019.06.001Recent Applications of Microbial Transglutaminase in Protein ModiflcaitonCHENG Xiaozhong12,ZHAO Xinrui',HONG Haofei',YANG Min',ZHOU Zhifan^,WU Zhimeng'(1.Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology,Ministry of Education,Jiangnan University,Wuxi214122,China；2.Department ofBiological and Chemical Engineering,Bozhou university,Bozhou236800,China)Abstract:Transglutaminases are a family of enzymes to ligate the carbonyl group of glutamines andthe£・amine group of lysine to form an amide bond between proteins.This conjugation technologywas widely used in food and textile industry initially.Recently,microbial transglutaminases(MTGase)mediated ligation was developed into a useful tool for site-specific modification ofprotein because of the advantages,such as easy availability,mild reaction condition andCa2+-independent etc.By introducing MTGase recognized Q-tag and K・tag into protein using geneticengineering technology,many molecules,including small molecular drugs,proteins,polymers,oligosaccharides and lipids are conjugated to proteins,and peptide cyclized through this site-specificacyl transfer reaction.These conjugates were extensively used in the fields of medicinal chemistry,chemical biology and biomaterials.This review focused on the recent progress of MTGase mediated收稿日期：2016-12-09基金项目：国家自然科学基金项目(21472070)；江苏省特聘教授项目(2014)；江苏省“六大人才高峰”项目(2014-SWYY-017)；江苏省创新团队项目(2014)。

理性代谢工程改造促进谷氨酸棒杆菌高效合成L-谷氨酰胺

理性代谢工程改造促进谷氨酸棒杆菌高效合成L-谷氨酰胺乔郅钠;吕青兰;李翔飞;王晴;徐美娟;饶志明【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2022(41)8【摘要】L-谷氨酰胺(L-glutamine,L-Gln)是人体液中含量最丰富的一种半必需氨基酸,具有多种营养和药理功能,被广泛应用于医药、食品添加剂、营养保健品、饲料等领域。

目前,微生物发酵法是生产L-Gln的主要方法,发酵产酸效率低、副产物多、菌种性能欠缺等问题严重限制了其工业化应用。

为解决这一问题,作者以实验室前期构建的L-Gln生产菌株CGQ03为出发菌株,通过强化谷氨酸脱氢酶表达及辅因子NADPH供应促进前体L-谷氨酸合成、增强辅因子ATP胞内含量、过表达溶氧相关蛋白VHb提高细胞携氧能力、增强关键酶谷氨酰胺合成酶催化活性及发酵工艺优化等策略提高了L-Gln产量。

最终的基因工程菌CGQ08/pDXW10-glnASc-gdhCg在5 L发酵罐上补料分批发酵66 h,L-Gln的产量最高达(94.5±1.8)g/L,糖酸转化率为34.8%,生产强度为1.43 g/(L·h)。

本研究为L-Gln及其相关化合物的工业化生产提供了借鉴。

【总页数】10页(P65-74)【作者】乔郅钠;吕青兰;李翔飞;王晴;徐美娟;饶志明【作者单位】江南大学生物工程学院【正文语种】中文【中图分类】Q815【相关文献】1.谷氨酰胺合成酶基因的过量表达有效提高谷氨酸棒杆菌中L-谷氨酰胺产量2.利用谷氨酸棒状杆菌高效表达枯草芽孢杆菌的谷氨酰胺合成酶发酵生产L-谷氨酰胺3.代谢工程改造谷氨酸棒状杆菌促进L-异亮氨酸发酵合成的研究进展4.代谢工程改造谷氨酸棒杆菌合成四氢嘧啶5.代谢工程改造枯草芽孢杆菌促进L-赖氨酸高效合成研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

谷氨转氨酶的原理

谷氨转氨酶的原理
谷氨转氨酶（glutamate-pyruvate transaminase，简称ALT）是一种酶，其主要功能是催化转氨反应，将谷氨酸（glutamate）和丙酮酸（pyruvate）相互转化。

谷氨转氨酶催化的反应为谷氨酸与丙酮酸之间的转氨反应，反应方程式如下：
谷氨酸+ α-酮戊二酸（丙酮酸）酒石酸+ α-酮戊二酸的氨基酸（谷氨酰酸）
具体来说，谷氨转氨酶是一种转氨酶类酶，在催化反应过程中，它通过接受谷氨酸的氨基基团并将其转移给丙酮酸，同时丙酮酸的羧基在反应中发生还原，生成酒石酸。

转氨酶类酶通常需要使用辅助因子，例如辅酶A或者辅酶B6等，来完成转氨反应。

谷氨转氨酶的催化反应在许多生物体的身体内部都起到重要的作用，例如在人体中，谷氨转氨酶主要存在于肝脏细胞中，并且参与了氨基酸代谢过程。

因此，谷氨转氨酶的活性也常常被用作评估肝脏功能的指标，例如在临床中通过检测血液中的谷氨转氨酶酶活性，可以判断肝功能是否正常。

α酮戊二酸转氨基

α酮戊二酸转氨基α-酮戊二酸转氨酶（Alpha-ketoglutarate transaminase），简称α-KG转氨酶，又称谷氨酰酶（glutamate dehydrogenase），是一种重要的酶类，在多种生物体内起到关键的生物学功能。

在本文中，我们将从α-酮戊二酸转氨酶的结构、功能、调控机制等方面进行综合的阐述。

一、结构特点α-酮戊二酸转氨酶是一种酶类蛋白质，其基本结构包括酶的活性中心和辅助结构。

活性中心部分包括积酶共同酶活性中心和典型的叶酸（tetrahydrofolate, THF）共同酶活性中心。

积酶共同酶活性中心由共同酶和互补酶组成，互补酶可用于酶的辨识性质和催化性质。

典型的叶酸共同酶活性中心则对于酶的遮断需要具有特异性，其结构要求严格，对酶机理有重要影响。

而辅助结构则包括非活性质，即通常在酶基因中形成的非活性质，可起到辅助酶的功能。

二、功能调控1. 催化反应α-酮戊二酸转氨酶可催化α-酮戊二酸转变为谷氨酸，同时与谷氨酸的转化为α-酮戊二酸相互调控。

α-酮戊二酸转氨酶在能量代谢中扮演着关键的角色，参与琥珀酸途径和三羧酸循环中谷氨酸的代谢，并与谷氨酰胺、谷氨酸途径中的互补作用发挥一系列的生物学功能。

2. 能量代谢调控α-酮戊二酸转氨酶参与能量代谢调控的机理非常复杂，其催化过程受许多内外因素的调节。

在能量供应充足的情况下，由于氧化环节电子传递衰竭，无法继续进行氧化以供能。

此时，转氨酶活化，以积酶形式活化，进一步使氧化环节供能继续进行。

反之在能量供应不足的情况下，则积酶保持抑制状态，不活化转氨酶。

这样，α-酮戊二酸转氨酶可作为能量代谢的调控因子，使细胞的正常能量代谢得以进行。

3. 反应物浓度调控α-酮戊二酸转氨酶受到反应物浓度的调控也是非常重要的。

α-酮戊二酸的浓度增加，谷氨酸合成增加，反之则减少。

可见，α-酮戊二酸转氨酶对反应物浓度的敏感性非常高。

4. pH值和温度调控α-酮戊二酸转氨酶对pH值和温度非常敏感。