微量热法研究药物对肿瘤细胞的诱导分化作用
2019年高考真题全国3卷生物(附答案解析)
绝密★启用前2019年普通高等学校招生统一考试生物试题卷一、单选题1．下列有关高尔基体、线粒体和叶绿体的叙述，正确的是A．三者都存在于蓝藻中B．三者都含有DNAC．三者都是ATP合成的场所D．三者的膜结构中都含有蛋白质2．下列与真核生物细胞核有关的叙述，错误的是A．细胞中的染色质存在于细胞核中B．细胞核是遗传信息转录和翻译的场所C．细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心D．细胞核内遗传物质的合成需要能量3．下列不利于人体散热的是A．骨骼肌不自主战栗B．皮肤血管舒张C．汗腺分泌汗液增加D．用酒精擦拭皮肤4．若将n粒玉米种子置于黑暗中使其萌发，得到n株黄化苗。
那么，与萌发前的这n 粒干种子相比，这些黄化苗的有机物总量和呼吸强度表现为A．有机物总量减少，呼吸强度增强B．有机物总量增加，呼吸强度增强C．有机物总量减少，呼吸强度减弱D．有机物总量增加，呼吸强度减弱5．下列关于人体组织液的叙述，错误的是A．血浆中的葡萄糖可以通过组织液进入骨骼肌细胞B．肝细胞呼吸代谢产生的CO2可以进入组织液中C．组织液中的O2可以通过自由扩散进入组织细胞中D．运动时，丙酮酸转化成乳酸的过程发生在组织液中为bb的受精卵全部死亡。
现有基因型均为Bb的该动物1000对（每对含有1个父本和1个母本），在这种环境中，若每对亲本只形成一个受精卵，则理论上该群体的子一代中BB、Bb、bb个体的数目依次为A．250、500、0B．250、500、250C．500、250、0D．750、250、0二、非选择题7．回答下列与细菌培养相关的问题。
（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。
通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是________。
硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是____________。
医学免疫学名词解释 (2)
第一章免疫（immuｎｉty)机体识别与排除抗原性异物，维持机体正常生理平衡与稳定得功能.免疫防御(immune deｆeｎｓｅ)防止外界病原体得入侵及清除已入侵病原体(如细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体、寄生虫等）及其她有害物质。
免疫监视(immune ｓurｖｅillａnｃe)随时发现与清除体内出现得“非己”成分,如肿瘤细胞与衰老、凋亡细胞。
免疫自身稳定（imｍunｅｈomeostaｓis）通过自身免疫耐受与免疫调节两种主要得机制来达到免疫系统内环境得稳定．免疫应答(immune respｏnse)就是指免疫系统识别与清除抗原得整个过程。
第二章造血诱导微环境(ｈeｍｏｐｏieｔiｃindｕctive miｃroenviｒonｍent，ＨIM)由基质细胞及其所分泌得多种细胞因子(ＩL—3、IＬ—4、IL—6、IL—7、SＣF、GＭ—CSＦ等）与细胞外基质共同构成得造血细胞赖以分化发育得环境。
脾集落形成单位（colｏny formiｎg unit-sｐleｅｎ,ＣFU-S）应用同系小鼠骨髓细胞输注给经射线照射得小鼠，可在受体小鼠脾脏内形成由单一骨髓干细胞发育分化而来得细胞集落,包括红细胞、粒细胞与巨核细胞等，此称为脾集落形成单位。
体外培养集落形成单位(ｃｏlony fｏrminｇｕnit—ｃulture,CＦＵ—C）用半固体培养技术,在有造血生长因子存在得条件下，干细胞在体外可以分化为不同谱系得细胞集落，称为体外培养集落形成单位。
初始淋巴细胞（naïve lymphocyte)尚未接触过抗原得成熟B、T细胞被称为初始淋巴细胞。
淋巴细胞归巢(lymphoｃｙｔe hｏmiｎg）成熟淋巴细胞离开中枢免疫器官后,经血液循环趋向性迁移并定居于外周免疫器官或组织得特定区域,称为淋巴细胞归巢。
淋巴细胞再循环(lyｍphocｙｔｅrｅｃircuｌation)淋巴细胞在血液、淋巴液、淋巴器官与组织间反复循环得过程称为淋巴细胞再循环.第三章抗原(antｉgen,Aｇ)就是指能与Ｔ细胞、B淋巴细胞得TCR或BCR结合,促使其增殖、分化，产生抗体或致敏淋巴细胞,并与之结合,进而发挥免疫效应得物质。
热疗法治疗肿瘤的研究进展
热疗法治疗肿瘤的研究进展在现代医学中，热疗法已经成为治疗癌症的一种重要手段。
热疗法通过提高肿瘤局部温度，抑制癌细胞生长和增殖，同时增强免疫反应，促进组织修复，是一种安全、有效的治疗方式。
近年来，热疗法在治疗肿瘤方面得到了广泛的研究和应用。
热疗法的分类热疗法可分为局部热疗和全身热疗两种。
局部热疗是指将热源直接应用于肿瘤的局部，使周围组织达到高温状态，从而达到杀伤癌细胞的目的。
全身热疗则是将人体整体加热，通过提高体温来刺激免疫系统产生反应，从而达到治疗肿瘤的效果。
局部热疗主要有热凝、热化学疗法、微波、射频和激光等。
其中，热凝治疗是应用高频电场，将肿瘤组织加热至65℃以上，使其凝固坏死。
热化学疗法是通过将抗癌药物注入肿瘤周围组织并加热，促使药物产生更强的杀伤作用。
微波和射频则是将电磁波直接应用于肿瘤，使其产生高温而被破坏。
激光是指将激光直接照射肿瘤组织，产生热效应杀灭肿瘤细胞。
目前，局部热疗在临床中已经应用于多种癌症治疗中，如肝癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌等。
热凝治疗在肝癌治疗中广泛应用，其对中晚期肝癌的治疗效果明显，同时相对其他治疗方案副作用较少。
热化学疗法在膀胱癌和前列腺癌治疗中应用广泛，其能够在短时间内大幅提高药物效应，从而产生更好的治疗效果。
微波和射频在临床上已经形成规模，被广泛应用于肝癌、肺癌等各类肿瘤的治疗中。
局部热疗的优点是具有创伤小、安全、术后恢复快等优点，同时对肿瘤疗效有一定的提高。
但其缺点也明显，主要表现为对肿瘤的局部控制能力较强，不能对远处转移的癌细胞造成直接的影响。
全身热疗主要有温泉疗法和热感应疗法两种。
其中，温泉疗法通常是将患者放置于温泉浴池中，以提高体温，刺激人体免疫系统产生反应，增强身体的免疫力。
热感应疗法则是通过将患者放入热箱或使用其他局部热源，提高人体体温，达到类似于温泉疗法的效果。
全身热疗对于癌症的治疗效果也已经得到了逐步认可。
一项研究显示，全身热疗可以增强人体免疫力，减轻化疗和放疗对身体的损伤，同时提高癌症患者的生存率。
癌症肿瘤微环境对肿瘤侵袭转移的影响
癌症肿瘤微环境对肿瘤侵袭转移的影响癌症是一类具有高度侵袭性和转移能力的恶性肿瘤，其对人类健康造成了巨大的威胁。
近年来，研究人员发现，在肿瘤发展过程中，肿瘤微环境起着至关重要的作用。
本文将探讨癌症肿瘤微环境对肿瘤侵袭转移的影响，并分析其中的机制。
一、肿瘤微环境的概念及组成肿瘤微环境是指肿瘤细胞周围的细胞和非细胞组分的综合体，包括肿瘤细胞、肿瘤相关的免疫细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞和肿瘤相关的细胞外基质。
肿瘤微环境的组成多样化，每个组分都对肿瘤的发展和转移起着特定的作用。
二、肿瘤微环境与肿瘤侵袭转移的关系1. 细胞外基质与肿瘤细胞相互作用细胞外基质 (ECM) 是肿瘤微环境中的重要组分，它由一系列的结构蛋白组成，如胶原、纤维连接蛋白和透明质酸等。
细胞外基质通过调节细胞粘附、迁移和侵袭，对肿瘤侵袭转移起到关键的作用。
改变细胞外基质基质蛋白的表达或功能可以抑制肿瘤的侵袭能力，从而有效地治疗肿瘤。
2. 肿瘤相关免疫细胞的作用肿瘤相关免疫细胞包括肿瘤相关巨噬细胞、肿瘤相关淋巴细胞和肿瘤相关树突细胞等。
这些免疫细胞在肿瘤微环境中发挥重要的免疫调节和抗肿瘤作用。
然而，肿瘤细胞通过操纵这些免疫细胞的活性，从而减弱免疫反应，促进肿瘤的生长和转移。
3. 血管生成与肿瘤侵袭转移肿瘤细胞生长和转移所需的氧和营养物质来自于新生的血管。
血管生成是肿瘤发展过程中一个重要的因素，它不仅可以为肿瘤提供养分，还可以为肿瘤转移提供通道。
因此，肿瘤微环境中的血管生成对于肿瘤的侵袭和转移具有重要影响。
三、肿瘤微环境对肿瘤侵袭转移机制的影响1. 肿瘤微环境调节肿瘤细胞的上皮间质转化上皮间质转化（EMT）是肿瘤细胞获得侵袭性和转移能力的重要过程。
研究发现，肿瘤微环境中的细胞外基质成分和细胞间通讯分子可以调节肿瘤细胞的EMT过程。
EMT的发生使肿瘤细胞从极性上皮细胞转变为侵袭性间质细胞，增强了肿瘤的侵袭能力。
2. 肿瘤微环境对肿瘤免疫逃逸的调节肿瘤细胞通过改变肿瘤微环境中免疫细胞的活性，减弱免疫反应，从而逃避免疫系统的攻击。
肿瘤微环境研究方法
肿瘤微环境研究方法
肿瘤微环境是指肿瘤细胞周围的细胞、基质和分子等环境因素，它们与肿瘤细胞相互作用，影响肿瘤的生长、转移和治疗反应。
肿瘤微环境的研究对于肿瘤的预防、诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍肿瘤微环境研究的方法。
1. 细胞培养
细胞培养是肿瘤微环境研究的基础。
通过细胞培养，可以获得大量的肿瘤细胞和非肿瘤细胞，用于研究它们之间的相互作用。
细胞培养的方法包括原代培养、细胞系培养和三维培养等。
2. 动物模型
动物模型是肿瘤微环境研究的重要手段。
通过建立小鼠、大鼠等动物模型，可以模拟肿瘤在体内的生长、转移和治疗反应，研究肿瘤微环境的变化和影响因素。
动物模型的建立需要考虑动物品种、肿瘤类型、移植方式等因素。
3. 组织切片
组织切片是肿瘤微环境研究的重要手段之一。
通过组织切片，可以观察肿瘤细胞和非肿瘤细胞的形态、分布和相互作用，研究肿瘤微环境的组成和变化。
组织切片的制备需要注意组织的固定、切片的厚度和染色等因素。
4. 分子生物学技术
分子生物学技术是肿瘤微环境研究的重要手段之一。
通过PCR、Western blot、ELISA等技术，可以检测肿瘤微环境中的分子表达和变化，研究肿瘤微环境的调控机制和影响因素。
分子生物学技术的应用需要注意样本的采集、RNA/DNA的提取和实验条件的控制等因素。
肿瘤微环境研究需要综合运用多种方法，包括细胞培养、动物模型、组织切片和分子生物学技术等。
这些方法的应用可以揭示肿瘤微环境的组成、变化和影响因素，为肿瘤的预防、诊断和治疗提供重要的理论和实践基础。
干细胞制剂制备质量管理自律规范-中国医药生物技术协会
《干细胞制剂制备质量管理自律规范》10月25日，中国医药生物技术协会发布了《干细胞制剂制备质量管理自律规范》的公告，公告显示，《规范》是参照《药品生产质量管理规范》（GMP）、《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）》和《干细胞临床研究管理办法（试行）》等规定，经业内骨干企业及专家的研讨，为规范我国干细胞制剂制备，加强质量管理，促进行业自律而制定，《规范》自发布之日起施行。
第一章总则第一条为加强干细胞制剂制备质量管理的行业自律，避免干细胞制剂制备过程中污染、交叉污染以及混淆、差错等风险，确保持续稳定地制备出符合质量标准和预定用途的干细胞制剂，参照国内外相关规定和指南，制定本规范。
第二条干细胞制剂是指用于治疗疾病或改善健康状况的、以不同类型干细胞为主要成分、符合相应质量及安全标准，且具有明确生物学效应的细胞制剂。
第三条本规范适用于干细胞制剂制备的所有阶段。
第二章一般要求第四条干细胞制剂的制备应遵循《药品生产质量管理规范》（GMP）的基本原则及其相关规定以及其他适用的规范性文件。
第五条干细胞制剂制备机构（以下简称制备机构）应建立符合GMP 要求、完整的干细胞制剂制备质量管理体系，并设立独立的质量管理部门，履行质量保证和质量控制的职责。
第六条制备机构应根据每种干细胞制剂的特性及其制备工艺进行风险评估，并建立合理的质量管理策略。
第七条制备机构的工作区域应合理设计及布局。
各功能区域应相对独立，应有满足其功能需要的空间、设施、设备和洁净度要求。
质量控制区应与制备区实施物理隔离，行政区、生活区及辅助区等应不防碍干细胞制剂的制备。
第八条干细胞制剂制备的内、外环境应满足其质量保证和预定用途的要求，应严格控制微生物、各种微粒和热原的污染风险。
第九条干细胞制剂制备管理负责人、质量管理负责人和质量受权人应具有与职责相关的专业知识（细胞生物学、微生物学、生物化学或医药等），同时应具有5 年以上的相关工作经验或接受过相应的专业培训，应能够履行干细胞制剂制备或质量管理的职责。
肿瘤的诱导分化疗法
中国肿瘤 2002 年第 11 卷第 2 期
很快 , 需要依赖新增产核糖体的增产在某一特定时间合成出 来 , 任务完成后立即分解掉 , 所以核糖体可以说是细胞分裂 的总关卡 。其实 ,核糖体的增产是细胞进入 DNA 合成前的必 备条件 , 不只是周期素 , 用以复制 DNA 和细胞分裂所必需的 蛋白质也都要靠核糖体的增产 。而调节核糖体的生产最重要 的因素是甲基转移酶 。rRNA 的甲基绝大部分发生在核糖这 个单位的 2′- 氧位置 , 细胞在制造核糖体的过程是先合成分 子量大于最后产物大约两倍的先驱 rRNA , 这先驱 rRNA 经过 修剪把有用的一半保留下来制造核糖体 。甲基的分布全部着 落在有用的一半顺序 , 如果这部分缺乏甲基 , 那么这部分有 用的顺序也会像没有用的顺序被分解掉 。所以甲基化如果进 行不完整 ,就不能产生核糖体 。
2 异常甲基转移复合酶是癌症的关键问题
如上所述 , 甲基转移复合酶在细胞的分裂与分化中扮演 着很关键的角色 , 如果这些酶发生异常 , 则会对细胞的分裂 与分化产生决定性的影响 , 癌症就是这些酶发生异常的结 果 。癌细胞的甲基转移复合酶有特异性改变 , 异常发生在 MAT和 SAHH 各与一特异癌蛋白质结合 , 因而改变了甲基转 移复合酶的活性与调节机制 , 显然 , 酶的动力性质也受到影 响 。正常和异常 MAT的 Km (甲硫丁氨酸) 值有显著的差异 , 前者为 3μM , 而后者则是 20μM。为区别差异 , 前者定名为 MATL ,后者为 MATLT。SAHH 也有类似的差异 ,正常 SAHHL 的 Km (腺苷) 值为 0. 3μM ,而异常 SAHHLT 的 Km 值为 2μM ,所以 检测 Km 值可以很容易地识别酶的异常 。癌细胞不管是动物 的或者是人类的都有这种异常的甲基转移复合酶 ; 正常细胞 即使分裂能力很强的再生肝 、骨髓细胞 、肠粘膜和胚胎组织 也检测不出复合酶的异常 ; 所以复合酶的异常是癌细胞特殊 的异常 。异常复合酶的癌蛋白质正如固醇激素对正常复合酶 的作用一样 , 将三个成员酶结合成非常稳定活性很好的复合 酶 。这特异癌蛋白质对复合酶的影响远胜于固醇激素 ,如图 1 所示 MAT的合成产物 S- 腺苷甲硫丁氨酸对复合酶的稳定性 有正面的影响 , 也许是其所带阳离子造成 , 特异癌蛋白质与 MAT结合的结果使异常 MAT的 Km 值提高 7 倍 , 也就是说异 常癌复合酶容纳更多的稳定因素 , 这是为什么异常癌复合酶 的稳定性和活性远远超过正常复合酶 。因为癌细胞能自行产 生甲基转移复合酶的促进因素 , 癌细胞这种酶的活性就不需 依赖外来的促进因素而能自行维持高的活性 , 这高活性促成 癌细胞在分裂周期运转不息 , 也因此阻断了终末分化 , 所以 异常的甲基转移复合酶是癌症一个很关键的问题 。
热疗法治疗肿瘤的研究进展
热疗法治疗肿瘤的研究进展前言癌症是人类面临的严重健康问题之一，治疗方法也不断地在进化和更新。
热疗法作为辅助治疗手段，已经被广泛应用于肿瘤治疗中，取得了一定的疗效。
本文将对热疗法治疗肿瘤的研究进展作一综述。
理论基础热疗法是指使用高温来治疗疾病的一种治疗方式。
肿瘤热疗是一种特殊的高温疗法，主要基于肿瘤细胞对热的敏感性比健康细胞更高这一原理。
热可使肿瘤细胞的蛋白质变性、细胞膜通透性提高、代谢加速以及DNA链断裂等，从而导致肿瘤细胞的死亡。
热疗法分类根据热源不同，热疗法可以分为高温疗法和低温疗法。
1.高温疗法高温疗法一般是指体内温度或热损伤部位温度达到42℃以上的治疗方式。
高温疗法可以进一步分为：•局部高温疗法局部高温疗法是指使用电磁波、微波、激光等高频电磁波作为热源，将其作用于肿瘤局部，使局部组织升温到杀死肿瘤细胞的温度范围。
•全身性高温疗法全身性高温疗法是指将患者的体温升高到杀死肿瘤细胞的杀伤温度范围，如磁热疗法、微波热疗法等。
2.低温疗法低温疗法是指体内温度或热损伤部位温度低于37℃的治疗方式。
低温疗法可以分为：•冷冻疗法冷冻疗法是利用液氮或制冷剂注射到病灶内部，使局部组织温度降至-20℃到-70℃，杀死肿瘤细胞。
•微波冷疗法微波冷疗法是利用微波作为能量源，通过热效应和非热效应对人体组织进行治疗，通过对肿瘤细胞的杀伤作用，实现治疗效果。
病症应用热疗法在肿瘤治疗中的应用主要是为了提高其他治疗手段的疗效并减少副作用。
目前主要应用在肿瘤手术前、化疗后和放疗后的综合治疗中。
1.放疗后热疗放疗后常见并发症包括疲劳、恶心、呕吐等，热疗可以缓解这些症状。
同时，放疗对病理组织产生热效应，如放疗前的瘤体体积大，放疗后收缩趋势明显，容易导致瘤体气化、坏死或裂解等。
2.化疗后热疗化疗后常有恶心、呕吐、腹泻等不良反应。
热疗可以通过激活机体代谢、促进病灶血液循环，增强化疗药物在病灶的渗透性，提高化疗效果。
3.手术前热疗手术前热疗可以降低手术创伤，减轻术后疼痛和切口肿胀等不良反应。
肿瘤诱导分化治疗原理和临床应用
双向调节转录功能
配体缺乏时抑制转录
共抑制因子
N-CoR SMRT
组蛋白去乙酰化酶
配体存在时激活转录
生理浓度（10-8 mol/L) 维甲酸 共激活因子（CBP/P300，P/CAF，NcoA-1/SRC-1，
P/CIP）具有强烈的组蛋白乙酰化酶活性
PML-RARα的结构和功能
2，之后，所有患者都给予2个疗程的巩固化疗。 3，随后再次随机分组：一组单用ATRA维持治疗，
另一组行临床观察。
结果
1,结果全反式维A酸(ATRA)或常规阿糖胞苷-柔红霉素化疗两 组疗效类似，完全缓解率均在70%左右，诱导治疗中死亡 率均为12%～14%。
2,但是，无论将ATRA用于诱导治疗还是维持治疗，无病生存 率都高于相应的对照组。
人胃癌分化诱导模型 国内外有人用DMSO、HMBA、 suramin、维甲酸、大蒜油及大蒜与其烯丙基硫化合物等处 理胃癌细胞株时，癌细胞在形态结构、功能代谢和生物学 等方面均出现分化特征。
人神经母细胞瘤分化诱导实验 在正丁酸、苯丁酸及其盐 类作用后，瘤细胞可形成树突状结构，功能上能产生神经 递质合成酶，生物学上其致瘤性明显降低，表现出分化的 特点。
（2）巩固治疗： ① As2O3 0.15mg/kg/d D1-5,连续5周,共2周期
后续 ATRA 45mg/m2 D1-7 + DNR 50mg/m2 D1-3,共2周期 ② DNR 60mg/m2 D1-3 + Ara-c 200mg/m2 D1-7，共1周期
后续 Ara-c 1.5-2g/m2/q12h，D1-5，+ DNR45mg/m2 D1-3 ， 共1周期+IT 共5次 ③ ATRA 45mg/m2 D1-15，+Ara-c 200mg/m2 D1-4，共1周期， 后续 ATRA 15天，+MIT 10mg/m2/d，共5天，共1周期， 后续 ATRA 15天，+IDA 12mg/m2/d，共1周期， +Ara-c 150mg/m2/8h D1-4，共1周期
肿瘤诱导分化治疗原理及临床应用
机制：
RXR扣押 PML-RARα与N-CoR/SMRT/Sin3A紧密结合（10-6 ATRA） PML-RARα/PML，PML-RARα/PML-RARα
竞争性阻断野生型RARα与RARE结合 以配体非依赖的方式激活或抑制粒细胞分化有关基因
POD结构解体，PML正常定位变化
阻止分化，抑制凋亡
中未见复发，而从未接受过ATRA治疗的患者2年半中80％ 复发；在诱导治疗和维持治疗中都使用ATRA的患者，预后 最好。
全反式维A酸(ATRA)和常规阿糖胞苷-柔 红霉素化疗两组无病生存率比较
缓解后接受ATRA治疗和临床 观察的两组无病生存率比较
1,常规化疗+维甲酸 2,常规化疗+临床观察 3,维甲酸 +维甲酸 4,维甲酸+临床观察 无病生存率比较
As2O3 ATRA —APL—CR (靶组织PML—RAR机制不一)
As2O3 ATRA 单一治疗仅使PML-RAR等基因鼠延长生存2-3倍
As2O3 ATRA 合用, 经9mDFS, 使肿瘤清除
急性早幼粒白血病治疗研究（一）
1，在美国进行的有关APL治疗研究中，患者随 机接受全反式维A酸(ATRA)或常规阿糖胞苷柔红霉素初始治疗。 2，之后，所有患者都给予2个疗程的巩固化疗。
⑹抗癌药：6-巯基嘌呤、5-氮胞嘧啶等。
三、诱导肿瘤分化的研究
1.体外分化诱导模型 (1)白血病细胞分化诱导模型
急性髓性白血病细胞株HL-60：
形态:分化为中、晚幼粒、杆状核细胞和分叶核细胞；
生化:出现硝基蓝四氮唑还原性（NBT）；
功能:出现吞噬活性及趋化性；
生物学:丧失了在软琼脂培养基上形成集落及裸鼠体内移植成
抗肿瘤药物药效学指导原则规范
抗肿瘤药物药效学指导原则一、基本原则1.抗肿瘤药物分类⑴细胞毒类药物(cytotoxic agent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑异构酶及作用于微管系统的药物等；(2)生物反应调节剂(biological response modifier)；(3)肿瘤耐药逆转剂(resistance reersal agent)；(4)肿瘤治疗增敏剂(oncotherapy sensitizer)；(5)肿瘤血管生成抑制剂(tumor angiogenesis inhibitor)；分化诱导剂(differentiation inducing agent)；⑺ 生长因子抑制剂(growth factor inhibitor)；反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide)。
2.抗肿瘤药物药效学需研究内容2.1包括体外抗肿瘤试验，体内抗肿瘤试验。
2.2评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以做出正确的结论。
2.3I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。
二、体外抗肿瘤活性试验1.试验目的1.1对候选化合物进行初步筛选；1.2了解候选化合物的抗瘤谱；1.3为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。
2.试验方法选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT还原法、磺酰罗丹明B(SR染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。
药物与细胞共培养时间一般为48-72小时，贴壁细胞需先贴壁24 小时后再给药。
试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对照为溶媒对照。
3.评价标准以同一样品不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。
体外试验至少重复一次。
附注：评价药物抗癌活性的方法：1. MTT还原法1.1基本原理：四氮唑［MTT,3-(4,5-dimethylibiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium 酎。
微量热泳动（microscalethermophoresis,MST），一种最新的生物大分。。。
微量热泳动（microscalethermophoresis,MST），⼀种最新的⽣物⼤分。
微量热泳动仪-microscale thermophoresis (MST)是由总部设在慕尼⿊的德国⾼科技公司NanoTemper技术有限公司发明的设备。
2010年底的⼀篇Nautre的⽂章《Protein-binding assays in biological liquids using microscale thermophoresis》最先报道了NanoTemper公司创始⼈Dr. Stefan和 Dr. Philipp使⽤MST测量⽣物溶液中蛋⽩-蛋⽩之间的相互作⽤，引起了很多科研⼈员的极⼤兴趣。
微量热泳动（microscale thermophoresis,MST）是⼀种分析⽣物分⼦相互作⽤的技术。
这项技术基于⽣物分⼦的热泳动， nanotemper微量热泳动仪使⽤红外激光进⾏局部加热导致分⼦定向移动，继⽽通过荧光分析温度梯度场中的分⼦分布⽐。
MST技术能够检测到由于结合⽽引起的⽣物分⼦的⼤⼩、电荷和⽔化层的变化。
相互作⽤的过程可以在天然条件下，⽆需固定、任何⽣物溶液中完成测量。
MST在分析对象的⼤⼩范围和检测动⼒学范围等参数上是⽬前最优的技术。
此外，MST的适应性很强，适合不同的环境要求、不同的⽣物分⼦、不同的溶液环境（如膜蛋⽩等需要某些特殊溶液环境的样品）、缓冲和添加剂的类型可以⾃由选择（例如可以使⽤任何浓度DMSO等有机溶剂）、可以在复杂的⽣物溶液甚⾄细胞溶解液中完成⽽⽆需样品纯化。
通过MST可以测量不同的结合模式，包括⼆聚化、协同作⽤和竞争作⽤。
MST使⽤便宜的⽑细吸管作为耗材，样品⽤量少，避免了昂贵的样品消耗和繁琐的制备过程。
相对于其他的已有的测量分⼦间相互作⽤的技术，MST⼤⼤降低所需的实验成本。
热泳动实验 (左图) 通过聚焦的红外激光加热⽑细管之中的溶液，同时通过hotmirror来检测荧光。
肿瘤诱导分化治疗原理及临床应用
三、诱导肿瘤分化的研究
1.体外分化诱导模型 (1)白血病细胞分化诱导模型
急性髓性白血病细胞株HL-60： 形态:分化为中、晚幼粒、杆状核细胞和分叶核细胞；
生化:出现硝基蓝四氮唑还原性（NBT）；
功能:出现吞噬活性及趋化性；
生物学:丧失了在软琼脂培养基上形成集落及裸鼠体内移植成 活的能力。
(2)实体瘤分化诱导模型
1，发热，呼吸窘迫，心包与胸腔积液， 低血压和肾功能衰竭。
2，发生率：23-50% 3，死亡率：30%以上 4，治疗方法：1）立即停药
2）地塞米松 10mg iv，bid。 应用5天以上。
3、ATRA的副作用
1、高颅压综合症：1）停药 2）对症治疗
2、高组织胺综合症：1）停药 2）组织胺拮抗剂
4、砷剂及ATRA协同作用(体外)
人白血病细胞一般采用小鼠腹腔扩散法及裸鼠皮下移植 法;
人实体瘤采用小鼠肾包膜下移植和裸鼠移植建立分化诱 导模型。
疗效评价：根据肿瘤生长抑制和荷瘤鼠生命延长，细胞标记 酶、抗原以及形态的变化来判断。
四、诱导肿瘤细胞分化的调控机制
维甲酸包括多种同分异构体，其中最重 1.核内受体途径要的是13-顺式维甲酸（13-cis-RA）、
（2）巩固治疗： ① As2O3 0.15mg/kg/d D1-5,连续5周,共2周期
后续 ATRA 45mg/m2 D1-7 + DNR 50mg/m2 D1-3,共2周期 ② DNR 60mg/m2 D1-3 + Ara-c 200mg/m2 D1-7，共1周期
后续 Ara-c 1.5-2g/m2/q12h，D1-5，+ DNR45mg/m2 D1-3 ， 共1周期+IT 共5次 ③ ATRA 45mg/m2 D1-15，+Ara-c 200mg/m2 D1-4，共1周期， 后续 ATRA 15天，+MIT 10mg/m2/d，共5天，共1周期， 后续 ATRA 15天，+IDA 12mg/m2/d，共1周期， +Ara-c 150mg/m2/8h D1-4，共1周期
抗肿瘤药物的药效评价方法
抗肿瘤药物的药效评价方法肿瘤是世界上常见的疾病，给人类生命的健康和幸福造成极大的威胁。
一些抗肿瘤药物的出现为肿瘤治疗开辟了新的方式，而这些药物的药效评价方法也显得尤为重要。
因为药效评价不仅关乎药物的疗效，同时也关系到肿瘤患者的生存质量和生命安全。
1. 细胞毒性实验细胞毒性实验是慢性毒性检测的方法之一，其原理是在体外培养的细胞系中检测药物的毒性和抗肿瘤效果。
通过这种方法，可以评估药物对不同细胞系的杀伤能力，筛选出在不同肿瘤细胞系中具有较高活性的化合物，寻找到能够选择性杀伤肿瘤细胞的药物。
2. 体外溶瘤实验体外溶瘤实验是评估药物在体外可溶性肿瘤抗原反应能力的实验。
其主要原理是，将一定浓度的药物加入到溶瘤液中，再将溶瘤液加入到肿瘤细胞中，观察减少的溶瘤液溶解率并计算药物的溶化指数，从而评估药物的溶瘤能力。
3. 细胞增殖抑制法通过细胞增殖抑制法，可以评价药物对不同类型肿瘤细胞的增殖能力。
这种方法基于细胞增殖动力学，利用细胞数量来评估药物的抑癌活性。
4. 动物实验动物实验作为临床前药效评估的一种标准方法，可以评价药物的抗肿瘤效果及其毒副作用。
通过对动物实验的设计，结合肿瘤模型的种类和药物治疗的方案，进行对药物筛选和疗效评价。
5. 临床前药效评价临床前药效评价类似于动物实验，但其更注重药物在人体内的生物活性评估，可包括药物体内代谢规律、药物与配体结合与作用、药物毒效关系等。
其中分子靶点技术、蛋白色谱技术、DNA微阵列技术和基因组学和蛋白质组学等技术被广泛应用于临床前药效评价。
总而言之，药效评价方法是多样的，它们可以互补，并在不同的研究阶段中使用。
不同的实验方法需要具备不同的技术和实验条件，因而评价细致、准确、可重复性和可比性高的抗肿瘤药物是一个复杂且具有挑战性的过程。
需要依据实验的目的和要求，结合不同类型肿瘤的特点，综合运用各种评价方法，才能更好的评价抗肿瘤药物的药效，为临床上有效治疗提供支持和保障。
小分子药物在癌症治疗中的应用
小分子药物在癌症治疗中的应用癌症，这个令人闻之色变的疾病，一直以来都是医学领域的重大挑战。
随着科学技术的不断发展，小分子药物在癌症治疗中的应用逐渐崭露头角，为癌症患者带来了新的希望。
小分子药物，顾名思义，是指相对分子质量较小的化合物。
它们具有能够穿过细胞膜、容易合成和修饰、药代动力学特性较好等优点。
在癌症治疗中，小分子药物主要通过以下几种机制发挥作用。
其一，抑制肿瘤细胞的增殖。
肿瘤细胞具有不受控制地快速分裂和生长的特点。
小分子药物可以通过干扰细胞周期进程，阻止肿瘤细胞从一个阶段顺利过渡到下一个阶段，从而抑制其增殖。
例如，某些小分子药物能够抑制细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）的活性，使得细胞无法正常进行分裂。
其二，诱导肿瘤细胞凋亡。
细胞凋亡是一种程序性细胞死亡的过程，对于维持细胞的正常生理功能和机体的平衡至关重要。
癌细胞常常逃避了正常的凋亡机制，导致其持续存活和增殖。
小分子药物可以通过调节细胞内的信号通路，如线粒体途径、死亡受体途径等，诱导肿瘤细胞凋亡。
比如，一些小分子药物能够激活线粒体中的凋亡相关蛋白，导致细胞色素 C 释放，进而引发一系列凋亡反应。
其三，抑制肿瘤血管生成。
肿瘤的生长和转移离不开新生血管的形成，这些血管为肿瘤细胞提供了营养和氧气。
小分子药物可以通过抑制血管内皮生长因子（VEGF）及其受体的信号传导，阻止血管生成，从而“饿死”肿瘤细胞。
其四，调节肿瘤细胞的免疫反应。
免疫系统在肿瘤的发生和发展中起着重要的作用。
小分子药物可以通过调节免疫细胞的活性，增强免疫系统对肿瘤细胞的识别和攻击能力。
在实际的临床应用中，小分子药物已经取得了显著的成效。
以慢性粒细胞白血病为例，伊马替尼的出现彻底改变了患者的治疗前景。
伊马替尼是一种针对 BCRABL 融合蛋白的小分子酪氨酸激酶抑制剂，它能够特异性地抑制白血病细胞的增殖，使患者的生存率得到了显著提高。
再比如，在肺癌治疗中，表皮生长因子受体（EGFR）突变的患者可以使用吉非替尼、厄洛替尼等小分子靶向药物。
基于微流控技术的肿瘤细胞移动性研究
基于微流控技术的肿瘤细胞移动性研究随着现代医学技术的不断发展和进步，肿瘤的治疗方案也逐渐丰富和多样化。
然而，在治疗肿瘤之前，对于肿瘤细胞的研究至关重要。
肿瘤细胞移动性是肿瘤转移和侵袭的重要指标，因此，研究肿瘤细胞移动性具有重要的现实意义。
本文将介绍基于微流控技术的肿瘤细胞移动性研究。
一、微流控技术的概念及发展微流控技术是指将微流体尺度和细胞培养技术相结合，制造出微小的生物芯片，从而在微小空间内实现生物分离、样本处理、药物筛选以及细胞培养等操作的技术。
微流控技术的发展可以追溯至1990年代初期，随着微纳技术的发展，微流控技术也得以迅速发展壮大，并被应用于各个领域，如生物医学、环境科学、化学分析等。
二、微流控技术在肿瘤细胞移动性研究中的应用微流控技术可以通过精细调控微通道的流速和流体力学环境，实现对于细胞移动性的定量研究。
在肿瘤转移过程中，细胞移动是一个复杂、多因素作用的过程，需要考虑到细胞特性、生理状态等多个因素。
微流控技术可以通过模拟肿瘤细胞在体内的微环境，依据不同的实验要求，调整细胞培养环境和流速参数，从而实现对肿瘤细胞移动性的探究。
具体应用包括以下几个方面：1. 肿瘤细胞侵袭和转移研究肿瘤细胞转移是肿瘤威胁生命的关键因素之一。
微流控技术可以通过模拟肿瘤细胞在基底膜和细胞间基质之间移动的过程，重建肿瘤细胞的三维结构，有效地模拟肿瘤细胞侵袭和转移的过程，并通过对肿瘤细胞的迁移距离、速度和轨迹进行分析，揭示肿瘤细胞逃逸机制和侵袭性因子，为深入研究肿瘤转移的机制提供数据支持。
2. 肿瘤细胞迁移模型的构建微流控技术可以通过应用不同的细胞培养基和细胞培养参数，构建不同类型的细胞迁移模型，优化种子细胞的种植密度、培养时间，有效地模拟肿瘤细胞在不同组织部位中的迁移过程，为研究肿瘤细胞的生命周期和迁移规律提供理论基础和实验数据。
3. 肿瘤细胞化疗药物敏感性及耐药性研究肿瘤细胞化疗药物敏感性及耐药性是肿瘤治疗的重要指标之一。
2022年海南大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年海南大学食品科学与工程专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、蓝细菌是一类______、______、______和______的大型原核生物。
2、测定效价的方法有很多，较常用且精确的方法称为______。
3、新陈代谢是生物体内发生的一切有序化学变化的总称，它包括______和______两部分。
4、碳源对微生物的功能是______和______，微生物可用的碳源物质主要有______、______、______、______、______和______等。
5、细胞骨架是由______、______和______三种蛋白质纤维构成的细胞支架，具有支持、运输和运动等功能。
6、微生物学的发展简史可分为______、______、______，现处于______。
7、对玻璃器皿、金属用具等物品可用______或______进行灭菌；而对牛奶或其他液态食品一般采用______灭菌，其温度为______，时间为______。
8、微生物寄生于其他微生物的例子如______、______；微生物寄生于植物的例子如______；微生物寄生于动物的例子如______。
9、吖啶类染料常可引起DNA的______。
10、中枢免疫器官包括______、______和______。
二、判断题11、细菌的芽孢只能由杆菌产生，细菌一旦形成芽孢后，不具有运动和繁殖的能力。
（）12、大多数真菌需要高碳氮比的营养物，而动物致病细菌需要低碳氮比的营养物。
（）13、呼吸链中的细胞色素系统只能传递电子而不能传递质子。
（）14、植物病毒的核酸主要是DNA，而细菌病毒的核酸主要是RNA。
（）15、糙面内质网因膜上附着大量核糖体颗粒，故具有合成和分泌胞外蛋白质的功能。
（）16、（G＋C）mol%值的差别，可作为微生物系统分类工作中正确设置分类单元的可靠依据。
（）17、鉴别不同类型细菌的培养基称为选择培养基。
在这类培养基上，不同的细菌表现出不同的特征。
微量热泳动技术原理及其在研究生物分子互作方面的应用
微量热泳动技术原理及其在研究生物分子互作方面的应用艾秋实;曹向宇;赵芊;牛亚利;宋水山【摘要】微量热泳动（MST）技术是近年来兴起的一项用于研究生物分子间互作的新技术。
其检测是基于热泳动现象，即分子在温度梯度中的定向运动及由此引起分子性质的变化，如分子大小、电荷和水化层及构象等。
该方法把精确的荧光检测与灵敏的热泳动相结合，从而提供了一个灵敏的、快速的精确分析生物分子间互作的检测方法。
就MST的工作原理和检测过程及其在生物学研究中的应用作以综述。
%Microscale Thermophoresis(MST)is a new technique to study biomolecular interactions in recent years. It is based on thermophoresis, i.e., the directional movements of molecules in a temperature gradient, which results in subsequent changes of molecular properties such as sizes, charges, hydration shell and conformation. MST combines the precise fluorescence detection and sensitive thermophoresis and provides a sensitive, fast and precise detection technique to analyze biomolecular interactions. Wor king principle, detection process and application of MST in biology researches are reviewed here.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】7页(P67-73)【关键词】微量热泳动;互作分析;结合性研究;生物分子间互作【作者】艾秋实;曹向宇;赵芊;牛亚利;宋水山【作者单位】河北省科学院生物研究所，石家庄 050081; 河北农业大学生命科学学院，保定 071001; 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心，石家庄 050081;河北省科学院生物研究所，石家庄 050081; 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心，石家庄 050081;河北省科学院生物研究所，石家庄050081; 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心，石家庄 050081;河北省科学院生物研究所，石家庄 050081; 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心，石家庄 050081; 河北工业大学化工学院，天津 300130;河北省科学院生物研究所，石家庄 050081; 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心，石家庄 050081【正文语种】中文研究生物分子的相互作用，对于探明生物体信号转导通路及调控机制、生理生化代谢途径具有重要意义。
【doc】DMSO对人胃腺癌MGC80—3细胞的诱导分化作用
DMSO对人胃腺癌MGC80—3细胞的诱导分化作用282榜善民田1不同浓度DMSO处理后MGC80—5细臆的生长曲线……一-示外理后细胞恢复常瓶细胞培养的生长曲线Fig1.ThegrowthcurveofMGC80—3cellstreatedwithvariousdosesDMSO一…一?Thec皿veofthetreatedcellsrestoredtonormalculturefluid.27卷堵井蠡Cttltt~d-圈21.5DMSO处理前后MGC80—5细臆的分裂指教Fig2.DiagramofmitoticindexofMGC80-3cellswith(一{一)orwithOUt1.5DMSO(一O一)treatment.寰1不同蕺度DMsO对MGC80—5细臆的作用Table1TheeffectsofvariousdosesDMSOonMGC80—5ceils..'/细胞群体倍增细胞生长抑制率最高分裂指数c.n-A(100岭软琼脂克隆经别细胞接种7天后/m1)的凝集细胞率形成翠的细胞数(/m1)时间(h)()(‰)()()二,DMSO对MGC80-8细胞形成克隆的影响半固体琼脂一甲基纤维素克隆实验结果如表1所示.1.5DMSO培养液培养(7天)后的MGC80—3细胞在0.8甲基纤维索上生长形成克隆的能力很差(0.02‰),MGC80—3细胞克隆形成率高达O.2‰(图版,图1),经T值检验,处理前后MGC80-3细胞形成克隆数量的差别有显着意义(P<0.001).三,DMSO对MGC80-3细胞在裸■内戚瘤率的影响常规培养和1.5DMSO培养液培养7天后的MGC80—3细胞在BALB/C裸小鼠(sPF级)异种移植的成癌率分别是100%和25f在配对实验组中,DMSO处理组多数在四周后仍未见肿块生长(图版,图2),即便长有肿块亦t鬈蹲登3期DMSO对人胃腺癌MGC80-3细胞的诱导分化作用283 裹21.5DMSO处理前后MGC80—5细臆异种移擅瘤(4周)的重量Table2.Theweht0txvnogratted tumorsinoculatedbyMGC80—5eellswithorwithout1.5DMSOfreaimentintonudemicefor4weeks.10%cs培养7天的1.5DMSO培养7天编号MGC83异种移植的MGC80-3异种移桩瘤(rag)瘤(rag)小于对照组(表2).四,Con-A凝集性实骏结果如表1所示,1.5%DMSO培养液处理7天后的MGC80-3细胞对Con—A的凝集性有所下降,与未处理者相比,细胞凝集率下降了55.8.五,DMSO处理后MGC80-0细胞光学和超搬结构变化MGC80-3细胞的光学和超微结构已有较详细研究r",癌细胞核大,不规则,高尔基体不发达(图版,图3).1.%DMSO处理后的细胞呈铺展状,细胞体积变大,核浆比例小(图版,图4),在超微结构上的主要变化是:细胞核变圆,较规则,桉膜皱折少胞质细胞器丰富,粗面内质网和线粒体增多,高尔基体较发达(图版,图5,6),有时见致密,圆形粘液颗粒.细胞表面细长微绒毛多变成短而小的突起(图版,图7).六,DMSO对MGC80-0细胞碱性磷酸酶活力影响常规培养的MGC80—3细胞ALP的比活力是0.172U/mg,1.5%DMSO培养液培养7天后的MGC80-3细胞ALP的比活力是0.017 O/mg,处理后MGC80-3细胞ALP比活力比来处理者降低了90.处理后MGC80—3细胞在不同时间ALP的比活力研究表明t处理6h后,MGC80-3细胞ALP比活力下降了8O.讨论DMSO是一种双极性有机溶剂,巳证实DMSO除引起一些体外培养的肿瘤细胞分化外,还使一些正常细胞分化".在体外,DMSO诱导分化后的恶性肿瘤细胞的恶性表型发生改变,如Con-A凝集细胞率降低r",纤粘蛋白分泌增多【J",失去在半固体琼脂的生长能力j癌细胞的胚胎性和分化产物发生改变,如人肝细胞瘤的细胞分泌甲胎蛋白减少,而鼠肝细胞瘤的细胞则甲胎蛋白和白蛋白分泌增多【"j结肠癌细胞分泌癌胚抗原减少,而ALP则上升14]这是因为分化成熟的肠遭细胞富台ALP,而肠癌细胞ALP活性很低或几乎不表达.本研究结果表明人胃腺癌MGC80-3细胞在1.5%DMSO培养液处理7天后,生长率下降35.15%,最高分裂指数下降18%o半固体琼脂克隆形成率下降9O, Con—A细胞凝集性降低55.8%,裸鼠异种移植瘤成瘤率下降75,提示1.5%DMSO培养液处理后的MGC80—3细胞的恶性表型发生改变.DMSO对MGC80-3细胞的诱导分化作用还反映在细胞超擞结构的变化上,主要是诱导后细胞的细胞器较发达,特别是粗面内质网和高尔基复合体.有时见致密,圆形粘液颚粒.正常人胃粘膜细胞不含碱性磷酸酶,而胃粘膜细胞癌变后出现了碱性磷酸酶随着1.5DMSO培养液培养7天后,MGC80-3细胞的ALP比活性下降了gO%,提示处理后的细胞朝着正常胃粘膜细胞方向分化.DMSO 抑制MGC80-3细胞生长和诱导细胞分化的机理未明.近来的研究表明,胃腺癌常有表皮生长因子受体的过度表达[1,低浓度的DMSO垮善置ducersofdifferenthationdimemylsulfo- xidebutyricacidanddimethylthJourea induceselectiveultrastr~ctural∞ttetnsinB16melanomacellsBiolCeil.6033—40.[3]TakermgaK..1984,Enhancementoflung colonisingabalityofclonedlow-matasta- ticLewislungcarcinomacellbytreat- meritwithhighlypolarsolvents.Int.J.Cancer34:83--89.[4]FilmusJ.,RN.Buick,1985,Relation? shipofC=4~yCexpressiontodifferentha- tionandproliferationofHL-60cells.Cfl~eerR,45:829--825.[5]RudlandP.S,A.T.DavisandM.J Warburton,1982,Prostoglandininduced differentiatjonorDMSOindueeddiffaren tiation:reducttoninneoplastic口otent乩ofaratmammarytumorstemceilline.J.NanCclust..69t1083一l093.[6]王凯华,1983,人体胃低分化粘液腺癌细胞系MGC80—3的建立及其生物学特性的初步观察.实验生物学擒,1625一262.[7]BuickR.N..T.H.StanisicS.E.Ery,S.E.Salmon.J.M.Trent.andP.Kra. soviek.1979,Developmentofanagar- methylcelluloseelonogenieassayforeel? lsintransitionaleel】carcinomaofthe humanbladder.Cancerices..58:5O81-- 6086.8]sp~aA.SoJefer.C.J.Maslansky,J.M.Rice.o.M. 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Dimethylsolfoxideaffc~tscolonymot-影响表皮生长因子,渍岛素与其相应受体的结合,这可能是它在体外抑制癌细胞生长的原因之一.DMSO影响胰岛素与胰岛素受体结合是可过的,不减少质膜上胰岛素受体的数量fl,这也是去除DMSO,恢复常规培养, MGC80-3细胞生长速度略有加快的原因之一.DMSO诱导HL-60细胞…和忏细胞癯细胞分化与癌基因c—mye表达减少有关,它对MGC80-3细胞的诱导分化作用是否与癌基因表达有关,有待进一步研究.DMSO曾广泛地用做药物溶剂,它低浓度地从皮肤,经口或静脉给药均无毒性,且对肿瘤细胞有一定抑制和诱导分化作用,与其他抗癌药配合,有望提高抗癌药的作用.4摘要用光镜,电镜和生化分析方法研究DMSO在体外对MGC80-3细胞的作用,不同浓度DMSO对MGC80-3细胞有不同的生长抑制作用.1.5DMSO是本研究较适合的浓度.1.5DMSO处理7天后细胞生眭率,分裂指数,克隆形成率和Con-A凝集辜分别下降3.15,18‰,9O%和55.8.处理后,癌细胞膜的碱性磷酸酶(不存在于正常人胃粘膜) 比活性下降了9O,接种裸鼠致瘤率亦下降75.处理后细胞主要形态变化是细胞变大,铺展,长直的徽绒毛变成短突状,胞质内有发育特别好的高尔基体和丰富的粗面内质网,这些资料提示DMSO能改变MGC80-3的恶性表型,对MGC80-3细胞是一神诱导分他荆.美t调t一;蛋_且人膏腺癌.竖,葱参考文献l'[I]FriendC.,W.ScherJ.G.HollandandT-Sato,1971Haemoglobulinsynthesisinmurinevirus-indueedleukemiaeells invitroEstimulationoferythroiddiffe- rentiationbydimethylsulfoxide.Proc.砌A..68:378--382.[9]MalikH.,J.Notdenberg—A-Novogrodsky,A.FIhs.I.Malik.1987.Chemiealin-箍3期DMSO对^胃腺癌MGC83细胞的诱导分化作用phologyonagarandaltersdistributionof glycosaminoglycansandfJbronectin?Proc?Nat1.Acad.SciUS^..79l6927--6931.r12]SaitoH..T.Kagawa,S.Tada.S.nematsu.F.M.Guex.ara.T.Watanabe.T.MorizaneandM.Tsuchiya.1992, Effectofdexamethsone.dlmethylsulfo- xideandsodiumbutyrateonahuman hepatomacelllinePLC/PRF/5.Ca~eerBiochem.Biophys..15:75--84.[133HigginsP.J,1981.Modificationofa】一pha-fetoproteinandalbuminsynthesisby dimethylsulfoxideinanestablishedcell llneofmousehepatomaeelIs.CellStrttctFunct.,6l29一300.[14]KimY.S..RB.Siddigul?1984,Effects ofsodiumbutyrate.dimethylsulfoxide285andretinoicacid0nglyeolipidsOFthu_ manretatadeFtocarcmomaeelIs.CancerRes.r44l1648--1652.[15]WriglltP.AandGTwilliams,1993,Molecu】arbio】Ogyandgastriccarcinoma.G.84i145—147.16]EarpH.S.,Q.LinandJ.BIaisdell1984, Dimetbylsulfoxidedecreasespec~icEGF bindingJ.CefIBiochem..26z221--230.[17jObberghsnE.V.,P.D..MeytsandJ.Roth.1979,Inhibitionofinsuljnrecep—torbindingbydimethylsulfoxide.Bio-chem.Biophys.Aeta.582;486--495.[183温玉蘑绽,1989,药物与化学物质毒性数据.天津,天津科学技术出版社出版.天津新华印j一厂印刷,PP172.DMS0INDUCEDDIFFERENTIAT10N0FHUMAN GASTRICADENOCARCIN0MACELL LINEMGC80-3Y an8Slmn-min (CancerResearchCenter?XiamenUniversity.China) Theinvitroeffectsofdimethylsul—foxide(DMSO)oftMGC80-3cellswere studiedbylightmicroscopytraFtsmlsslon electonmicroscopyandbiochemica1me—thods.Theresultsindicatedthattheinhi- bitoryeffsetsofDMSOOFtthegrowthofMGC80-3cellswascoFtceFttratloFtdepen' dentand1.5%DMSOwassuitableinthepresentstudy.Thegrowthrate.mitoticindex,colonyformingefficiencyandConA-aggregationofthecellstreatedwith1.5DMSOinvitrofor7dayswasre-ducedrespectivelyby35.15,18‰,90and55.8%.Itwasremarkablethattheactivityofmembranee-associatedalka1insphosphamse.whichisnotpresentedin normalhumangastrlcmucosa.wasdecreasedby90inthetreatedcells.Therewasa75decreaseoftherateoftumo—rlgenes1sIFtthetreatedcellsascompared withthetumorigenicrateoftheuntreatedMGC80—3cellsinoculatedintonudemice. GrossmOrphOlOgicalchangesofMGC80—3 cellstreatedwith1.5%DMSOwereevi—dentiFtcludingenlargementandflatnessof thecdIsstumpymicrovilliesinsteadoflongandrigidones,andextremelywell—developedGolgiapparatusandrougheft—dophasmicreticulum.Thisdataindicated thatDMsowasabletoinducedifferentiationofMGC80—3cellsandchangetheir malignantphenotypes.Keyword.*:Humangastrleadenocareinoma.Dlfferenttation.DMSO286杨瞢民27卷图l图2图3图d图5图0图7图版说明圈版MGC80—3细胞在戟琼脂一甲基纤维素上形成巨大克隆.接种5×3-0MGC80—3细胞4周后形成的荷瘤裸鼠(十),对侧接种等量DMSO处理过的细胞(1.5,6DMSO处理天)无肿块形成.MGC80—3细胞发育差的高尔基体.×19000(A)MGC80—8细胞异质性一多核巨铂胞(十),HE.×950(B)1.5%DMSO处理7天后的MGC80-3细胞呈铺展状HE×9501.0%DMSO处理7天后的MGC80—3细胞发育好的高尔基体.×400001.5DMSO处理7天后的MGC80-3细胞发达的粗面内质厨.×880001.5DMSO处理7天后的细胞出现短突状的微绒毛(价).×29000 EXPLANATION0FFIGURESPLATEFig1.HugecolonyofMGC80-3cellsinthesoftagar-methylcellulose?Fig2.Xenograftcdtumor()onnudemouseinoculatedwith5×10MGC80-8cellsafter weeks.AbsentofxenograftedtumorontheoppositeofnudemolLseinoculatedwith5×106MGC80-3cellstreatedwith1.5DMSOfor7daysby恤esametime.Fig3.Thepoor-developedGolgiapparatusinMGC80—3cells一×19000Fig4.(A).HeterogeneityofMGC80—3cells—Multinucleargiantcell(').HE—x950. (B).SpreadingMGC80-3cellstreatedwith1.5DMSOfor7days.HE.×950.Fig5.Thewell-developedGolgiapparatusinMGC80—3cellstreatedwith1.5DMSOfor7days.×40000Fig6.TheproliferationofroughendoplasmicreticuluminMGC80-3ceilstreatedwith1.5DMSOfor7days.×28000Fig7.Thestumpymicrovillies()inthetreatedcellsfor7days.×290003期DMSO~,I-人J腺瘟MGCS0—3细胞的诱导分化作用287 图版。