基因工程复习课件
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复习基因工程ppt课件
具有异性
3、作用： 可用于目的基因和载体的切割
限制酶是一类酶，而不是一种酶。
4、结果： 形成两种末端
黏性末端 平末端
6
精选PPT课件
限制酶切割DNA分子示意图
EcoRⅠ 中轴线
GA ATTC
CT TAAG
G CT TAA
A ATTC G
黏性末端
7
精选PPT课件
限制酶切割DNA分子示意图
中轴线 SmaⅠ
双链
单链
在两个DNA片 段之间形成磷
酸二酯键
将DNA双链上 的两个缺口同 时连接起来
以一条DNA链为模板， 将单个核苷酸通过磷酸 二酯键形成一条与模板
链互补的DNA链 合成新的DNA分子
11
“分子运输车” —— 载体精选PPT课件
作用： 将外源基因送入受体细胞。 对受体细胞的生存没有决定性作用
具备的条件 能在宿主细胞内复制并稳定地保存 具有多个限制酶切点 具有某些标记基因
精选PPT课件
基因工程专题复习
1
精选PPT课件
1.1 DNA重组技术的基本工具
2
精选PPT课件
一、基因工程的概念
基因工程是指按照 人们的意愿 ，进行 严格的设计，并通过 体外 DNA重组和转 基因等技术，赋予生物新的遗传特性，从 而创造出更符合人们需要的新的生物类型 和生物产品。由于基因工程是在
20含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导 入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这 种生物的不同基因，称为基因.基因基因组
部分基因 （如:cDNA）21如何构建基因？
C C C G GG
GGGCCC
CCC GGG
G GG
平末端
CCC
3、作用： 可用于目的基因和载体的切割
限制酶是一类酶，而不是一种酶。
4、结果： 形成两种末端
黏性末端 平末端
6
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限制酶切割DNA分子示意图
EcoRⅠ 中轴线
GA ATTC
CT TAAG
G CT TAA
A ATTC G
黏性末端
7
精选PPT课件
限制酶切割DNA分子示意图
中轴线 SmaⅠ
双链
单链
在两个DNA片 段之间形成磷
酸二酯键
将DNA双链上 的两个缺口同 时连接起来
以一条DNA链为模板， 将单个核苷酸通过磷酸 二酯键形成一条与模板
链互补的DNA链 合成新的DNA分子
11
“分子运输车” —— 载体精选PPT课件
作用： 将外源基因送入受体细胞。 对受体细胞的生存没有决定性作用
具备的条件 能在宿主细胞内复制并稳定地保存 具有多个限制酶切点 具有某些标记基因
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基因工程专题复习
1
精选PPT课件
1.1 DNA重组技术的基本工具
2
精选PPT课件
一、基因工程的概念
基因工程是指按照 人们的意愿 ，进行 严格的设计，并通过 体外 DNA重组和转 基因等技术，赋予生物新的遗传特性，从 而创造出更符合人们需要的新的生物类型 和生物产品。由于基因工程是在
20含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导 入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这 种生物的不同基因，称为基因.基因基因组
部分基因 （如:cDNA）21如何构建基因？
C C C G GG
GGGCCC
CCC GGG
G GG
平末端
CCC
基因工程复习课件
转基因生物的 mRNA
转基因生物的 蛋白质
DNA与DNA之间 DNA与RNA之间杂交 抗原与抗体杂交 的杂交
2、个体生物学水平鉴定：如一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞 后，是否赋予了植物抗虫或抗病特性，需要做 抗虫或抗病的接种 ___________ 实验。
例2、 上图表示一项重要的生物技术，其中a、b、c、d均为物 质，下列描述中正确的是（ AD ） A．切割d的物质与物质b 可以是不同种类 B．b识别特定的核苷酸序列，并将A与T之间的氢键切开 C．c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对 D．该技术是在细胞外的环境中进行操作的
1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 黏性末端
黏性末端
磷酸二酯 １、限制酶作用于____________ 键 2、不同的限制酶切割ＤＮＡ时，可能切出相同的黏性末端吗？可能 例题3
2、 DNA连接酶——“分子缝合针”
磷酸二酯 键 作用部位：_________
返回
例1、下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，依次表示何种 酶的作用。 限制酶 DNA连接酶 解旋酶 DNA聚合酶 A____________,B______________,C__________,D__________
生长激素基因 → mRNA → 生长激素
转录 翻译
(5)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生 长的，说明已导入了 普通质粒或重组质粒 ______________ ，反之则没有导入。
概念图总结
操作的四个步骤
操作的三种工具
基因工程
所应用的四个领域
成功的两个理论基础
基因拼接的理论基础 外源基因在受体内表达的理论基础
已知序列
【公开课课件】选修3专题一 基因工程复习课(50张PPT)
一般目的基因应插在
启_动__子__与__终__止__子__之__间__
终止子
一个完整的重组质粒
复制原点
（2016国卷III节选）
(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含
有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在 宿主细胞中表达目的基因产物的有______甲__、__丙_________， 不能表达的原因是__目__的__基__因__没__有_插__入__在__启__动__子__与__终__止__子__之__间_
二、 基因工程的操作 3、表达载体的构建（核心）
载体（质粒）
含目的基因的DNA
重组质粒
（1）为两者得到相同的末端，则应__用__同__种__限__制__酶_________ （2）为避免两者反向连接，则应_用__相__同__两__种__限__制__酶________
二、 基因工程的操作 4、将目的基因导入受体细胞 （关键看受体细胞的类型）
思考：标记基因的作用？？（筛选） 鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细 胞筛选出来。（并不是用来检测目的基因的表达）
图中的质粒应用 Bcl I /HinDIII 酶 切割。 获得重组质粒导入细胞后，在筛选 培养基中应添加___四__环__素_____
启动子
目的基因
表达载体
标记基因
方法
a.植物细胞： 农杆菌转化法 、基因枪法、
_花__粉__管__通__道__法__
b.动物细胞： 显微注射
技术（常用受精卵）
c.微生物：___C_a_+_转__化__法_______
二 基因工程的操作
4、目的基因的检查与鉴定
a.利用 DNA分子杂交 技术检测__目__的__基__因__是__否__导__入___
基因工程复习详细版.ppt
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3
基因工程
——依据预先设计的蓝图，用人工方法将某种生物（供体）的 基因，接合到另一种生物（受体）的基因组DNA中并使其表达， 使后者获得新的遗传性状，产生出人类所需要的产物(产物通常 是蛋白质)，或创造出新的生物类型的现代生物技术。 核心技术为DNA重组技术。
研究水平：分子水平 实质（可遗传变异类型）：基因重组
某 限 制 酶 的 质粒 识 别 序 列 为
AATT
限制酶
碱基互 补配对
同种限制酶
目的基因
DNA连接酶
重组质粒
质粒自身环化
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16
试一试
下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青
霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
3550bp
Tcr
Apr
Tcr
Apr
850bp
段长度为___4__7_5__0___对碱基。
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18
限制酶——怎样选择使用
①使目的基因与质粒形成相同的粘性末端，便于二者重组。尽 量避免目的基因、质粒的自身环化；
BamHⅠ
BamHⅠ
目的基因
质粒
HindⅢ
HindⅢ
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19
限制酶——怎样选择使用
①使目的基因与质粒形成相同的粘性末端，便于二者 重组。尽量避免目的基因、质粒的自身环化。 用形成不同粘性末端的两种限制酶分别切割质粒、分 离目的基因，便于二者定向连接。 ②不能破坏目的基因和质粒中的所有标记基因。 ③便于筛选含目的基因的受体细胞。
能生长
不能生长 21
试一试
酶Ⅰ、酶Ⅱ、酶Ⅲ、酶Ⅳ4种限制性核酸内切酶切割的
碱 基 序 列 和 酶 切 位 点 分 别 为 C ↓ CGG 、 G ↓ GATCC 、
基因工程复习课件
(2)若0对,2图中质粒进行改造，插入的Sma Ⅰ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________________
。
(4)与只使用Eco RⅠ相比较，使用Bam HⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点
• (4)目的基因的检测与鉴定
类型
分 子 检 测
步骤
检测内容
方法
结果显示
导入 检测
目的基因是否插入受体细胞染色体 的DNA上
是否成功显示
DNA分子杂交技术(DNA和 DNA之间)
出杂交带
表达 检测
目的基因是否转录出mRNA 目的基因是否翻译出蛋白质
核酸分子杂交技术( DNA mRNA之间)
同上
蛋白质分子杂交(抗原和抗体
• (3)通常采用____________D__N_A_分__子技杂术交检(测核外酸源探基针因) 是否插入了小鼠的基因组。 • (4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的________细胞中特异表达。 • (5)为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的________转入________细
• 二、基因工程的应用成果及蛋白质工程 • 1．基因工程的应用成果 • (1)乳腺生物反应器与微生物生产的比较
类型 项目
乳腺生物反应器
微生物生产
基因结构
动物基因结构与人类基因结构相同
与人类基因结构不同
基因表达
与天然蛋白质活性没有区别
由于缺少内质网、高尔基体等细胞器， 产物可能不具有生物活性
产物提取
从乳汁中较易分离提取
生产设备
畜牧业生产，加工提取设备
专题1基因工程-专题复习课件
为——ACTAG和GATC——。少数限制酶却可识别不止一种 碱ers） 有些来源不同的限制 酶却识别和切割相同的序列，这类限制酶称为同 裂酶。同裂酶产生同样切割，形成同样的末端， 酶切后所得到的DNA片段经连接后所形成重组序列， 仍可能被原来的限制酶所切割。同裂酶之间的性 质有所不同（如对离子强度、反应温度以及对甲 基化碱基的敏感性等方面可能有所差别）。
正确的是 A．染色体和质粒的化学本质都是DNA
( C)
B．染色体和质粒都只存在于原核细胞中
C．染色体和质粒都与生物的遗传有关
D．染色体和质粒都可作为基因工程的常用载体
解析：染色体由DNA和蛋白质构成；原核 生物没有染色体；质粒可以做为基因工程的
载体，而染色体不行。
9、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特 定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI， HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特 定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端 可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？
黏性末端
G
A ATTC
CT TAA
G
黏性末端
什么叫平末端？
生物A基因片段
生物B基因片段
……GAATTC…… ……GAATTC…………GAATTC…… ……CTTAAG…… ……CTTAAG…………CTTAAG……
同一种 EcoRⅠ 酶切
……G AATTC…… ……G AATT…C………G AATTC… ……CTTAA G…… ……CTTAA …G………CTTAA G…
④注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用都不 相同。
⑤质粒能自我复制，既可在自身细胞、受体细胞内，也可在 体外。
正确的是 A．染色体和质粒的化学本质都是DNA
( C)
B．染色体和质粒都只存在于原核细胞中
C．染色体和质粒都与生物的遗传有关
D．染色体和质粒都可作为基因工程的常用载体
解析：染色体由DNA和蛋白质构成；原核 生物没有染色体；质粒可以做为基因工程的
载体，而染色体不行。
9、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特 定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI， HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特 定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端 可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？
黏性末端
G
A ATTC
CT TAA
G
黏性末端
什么叫平末端？
生物A基因片段
生物B基因片段
……GAATTC…… ……GAATTC…………GAATTC…… ……CTTAAG…… ……CTTAAG…………CTTAAG……
同一种 EcoRⅠ 酶切
……G AATTC…… ……G AATT…C………G AATTC… ……CTTAA G…… ……CTTAA …G………CTTAA G…
④注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用都不 相同。
⑤质粒能自我复制，既可在自身细胞、受体细胞内，也可在 体外。
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3
知识要点
乳腺生物反应器 基因治疗 蛋白质工程
考点1 基本工具——限制酶
3
知识要点
考点1 基本工具——DNA连接酶
3
知识要点
考点1 基本工具——载体
3
知识要点
3
知识要点
考点2 基因工程的基本操作程序
3
知识要点
考点2 基因工程的基本操作程序
3
知识要点
考点2 基因工程的基本操作程序
3
知识要点
考点2 基因工程的基本操作程序
1 基因工程
@这样油0
1
内容
考试大纲
要求
6-1 基因工程 （1）基因工程的诞生 （2）基因工程的原理及技术 （3）基因工程的应用 （4）蛋白质工程
I II II I
2
知识要点
比目鱼中有抗冻基因，番茄是双子叶植物，如 何利用比目鱼的mRNA获得抗冻番茄植株？（参
考《金版新学案》49页 1）
3
知识要点