动物医学论文
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猪高致病性蓝耳病的病因及防治措施
摘要:猪蓝耳病又称猪的繁殖与呼吸综合征(PRRS), 是由动脉炎病毒科中的猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种高度传染性疾病。本病以妊娠母猪的繁殖障碍(流产、死胎、木乃伊胎)及各种年龄猪,特别是仔猪的呼吸道疾病为特征。OIE将该病列为 B类传染病,我国也将其列为二类传染病。该病是当前困扰全世界养猪业的主要疫病之一。因其存在范围广、感染率高、传播迅速、危害严重,给养猪业造成巨大经济损失。因此加强对该病的防控与研究有重要的经济意义。
关键词:猪蓝耳病病因防治措施
猪蓝耳病又称猪的繁殖与呼吸综合征(PRRS), 是由动脉炎病毒科中的猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种高度传染性疾病。猪蓝耳病1987年首先在美国的北卡罗来纳州发现[ 1 ]。随后,加拿大、德国、荷兰、英国、西班牙、瑞士、法国、丹麦等很多国家相继报道发生本病。我国1996年首次报道存在该病,并于2006年6 月首先在我国的南方部分省、市出现流行,给我国养猪业造成了较大的损失[ 2,3 ]。后经查明疫情主要是由猪蓝耳病病毒的变异株引起的, 2007年4月农业部正式将其确定为“高致病性猪蓝耳病”[4]。
夏秋季是饲养管理条件差的散养户和小型猪场高致病性猪蓝耳病的高发季节,该病传播速度快、发病面广,往往能给养猪户造成严重的经济损失。为预防和控制高致病性猪蓝耳病的发生和流行,必须从提倡科学养殖入手,改善饲养环境,加强综合防治,采用合理的免疫程序,降低发病率和死亡率[5]。
1 病原
本病的病原是属技膜病毒科动脉炎病毒群的RNA病毒。病毒粒子呈球形,直径病毒45~65nm,病毒粒子表面有许多小突起。PRRS 病毒对温度变化比较敏感, -70℃保存3年仍有感染力, 4℃ 30d、20℃ 6d、37℃ 48h、56℃ 20min病毒将失去活性。在pH小于5或大于7的条件下,其感染力下降90%。
2 流行病学
本病是一种高度接触性传染病,主要传播途径是接触感染、空气传播和精液传播,也可通过胎盘垂直传播。易感猪可经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种等多种途径而感染病毒,猪感染病毒后2~14周均可通过接触将病毒传播给其他易感猪。病猪的鼻腔、粪便拭子及尿中均可检测到病毒。易感猪与带毒猪直接接触或与污染有猪繁殖与呼吸综合征病毒的运输工具、器械接触均可受到感染。感染猪的流动也是本病的重要传播方式。
该病主要表现为高热、高发病率、高死亡率、低治疗率。呈区域性流行,一年四季均可发生,高热、高湿季节发病明显增加。流行范围广,波及地区多,传播速度快,一般在一个猪场出现疫情后,3~5 d 波及整个猪群,1~2 周扩散到整个猪场,并向周边地区传播。在同一猪群中,猪蓝耳病病毒存在持续感染,病毒可在猪群中生存、循环及再次传播。不同日龄、不同品种的猪均可感染发病。妊娠母猪和 1 月龄以内的仔猪为最易感群。发病规律为多数猪场首先从母猪或生长育肥猪暴发,然后再传到保育猪、哺乳仔猪。发病猪体温升高到41℃~42℃,病程一般在5~15 d 左右,猪群发病后,一般5~7 d 开始出现死亡,死亡率高,3 周后开始平息。其仔猪发病率可达100%,死亡率可达50%以上。
3 临床症状
猪蓝耳病主要侵袭繁殖和呼吸系统,主要表现为母猪繁殖障碍、仔猪断奶前高死亡率、育成猪的呼吸道疾病三大症状。经产和初产母猪多表现为高热(40~41℃)、精神沉郁、厌食、呼吸困难,少数母猪(1%~5%)耳朵、乳头、外阴、腹部、尾部发绀,以耳尖最为常见。出现这些症状后,大量怀孕母猪流产或早产,产下木乃伊、死胎和病弱仔猪,死产率可达80~100%。早产母猪分娩不顺,少奶或无奶。仔猪特别是吃奶猪,死亡率很高,可达80%以上。临床症状与日龄有关,早产的仔猪出生时或数天内死亡。大多数新生仔猪出现呼吸困难(腹式呼吸)、肌肉震颤、后躯麻痹、共济失调、打喷嚏、嗜睡、精神沉郁、食欲不振。断奶仔猪感染后大多出现呼吸困难、咳嗽、肺炎症状,有些下痢、关节炎、皮肤有斑点。育肥猪体温可升高至41℃左右,食欲明显减少或废绝,多数全身发红,呼吸加快,咳嗽明显,个别病猪流少量黏鼻液。无继发感染的病猪死亡率较低。种公猪发病时症状轻微,持续时间短,但精液品质下降,死精增多。
4 诊断
4.1 临床诊断本病的临床症状在不同的感染猪群中有很大差异,潜伏期也可因地域、季节不同而长短不一。该病主要发生在妊娠母猪和哺乳仔猪,妊娠母猪主要表现为流产、早产、死胎和木乃伊胎,同时伴有发热、厌食等症状,哺乳仔猪感染PRRSV后死亡率明显上升,少数病猪的耳朵呈蓝紫色。有人提出过1种简单的临床诊断方法[ 6 ] ,共3项指标:(1)流产或早产超过80%; (2)死胎率超过20%; (3)仔猪出生后第1周死亡超过25%。这3项指标中有2项符合则诊断成立。
4.2 病理学检查病理变化主要表现在肺部,弥漫性间质性肺炎是最具特征的病变。病猪淋巴结往往出现肿大;病死仔猪胸腔积水,肾苍白、肿大,表面有凹凸不平的灰白色坏死灶,个别有针尖状出血点;结肠内容物稀薄,肠系膜淋巴结水肿;肝灶性充血,呈空泡样变性,巨噬
细胞核内有包涵体。
4.3 实验室检查由于PRRS的临床症状和病理变化有时不具特征性,所以有必要建立快速、敏感、特异的检测PRRSV的方法。
4.3.1 病毒的分离与鉴定PRRSV可以从血清、血浆、肺脏、肺脏深处积液、淋巴结、胸腺、脾脏等病料中分离,但最理想的病料是肺脏深处积液和血清。急性感染猪送检病料一般用血清、肺脏以及支气管肺泡灌洗液较为合适;持续感染猪用扁桃体、支气管肺泡灌洗液;晚期流产以及早产猪则用吸初乳前的弱仔样品。分离出的PRRSV可以在猪肺泡巨噬细胞( PAM)和特定的非洲猴肾细胞(Vero细胞)上复制。这种方法多用于急性病例的确诊和新疫区的确定。
4.3.2 酶联免疫吸附试验( ELISA)ELISA方法具有稳定性好、自动化程度高、特异性强等优点。与其他方法相比,ELISA试剂盒检测结果的一致性较高,且结果可在较短时间内得到,因此很多国家都将其列为法定或标准的操作方法[ 7 ] ,如法国已将ELISA 作为PRRS 监测和诊断的常规方法。另外,国外还相继建立了I-ELISA法、Dot-ELISA、竞争ELISA等方法。在我国,张鹤晓等首次建立了检测PRRSV抗体的ELISA法,为大型猪场进行大规模血清学普查提了一种快速、敏感、特异的方法。间接ELISA方法随后也被建立。近年来,由于PRRSV 的不断变异,人们又探索出了新的间接ELISA方法。如:希尼尼根等以差速离心法结合蔗糖密度梯度离心法提纯的PRRSV-SC2株作为包被抗原,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA法,试验结果表明该法可用于PRRS流行病学调查和PRRSV基因疫苗免疫后抗体水平检测。由于PRRSV美洲型毒株和欧洲型毒株的N 蛋白氨基酸序列同源性低于60% , 为了让ELISA 法更适合检测PRRSV,吴延功等以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择)建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。夏向荣等利用大肠杆菌表达的重组蛋白作为包被抗原,以其研制的高特异性兔抗重组N蛋白血清和PRRSV猪血清竞争该抗原,以pR-SET原核表达载体表达纯化出重组N蛋白,不需复性即可作为诊断抗原,并用高纯度的N蛋白制备的高特异性兔抗血清作为竞争抗体, 在国内首次建立竞争性ELISA 方法检测PRRSV抗体,通过同源标准猪血清交叉反应试验,证实该法具有良好的特异性。
4.3.3 聚合酶链式反应( PCR)目前, PCR已被广泛应用于PRRS临床样品的检测, 检测主要针对PRRSV 基因组ORF7或ORF6,检测方法主要有:常规RT-PCR、实时定量荧光RT-PCR 和TaqMan荧光定量RT-PCR等方法[ 8 ]。扩增病毒特异而保守的基因片段是建立RT-PCR检测方法的原则。周婷等利用这一原则建立了检测PRRSV的RT - PCR方法,试验结果表明该方法