1 试剂灵敏度的复核

细菌内毒素检查法至药典收载以来，每版都有明确规定：每使用新批量的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果改变时，应进行鲎试剂灵敏度的复核试验。在例行的药品制剂检查验收中发现，有些单位的检验人员在常规进行的细菌内毒素检查时，对所使用的鲎试剂从未进行过灵敏度复核，部分检验人员对此项工作不甚明了，完全忽视了复核鲎试剂灵敏度的重要性。

鲎试剂的灵敏度，即鲎试剂在本试验法规定的条件下能检测出的细菌内毒素标准液或供试品溶液中的最低内毒素浓度（用Eu/ml 表示），而灵敏度的测定即为鲎试剂在制备过程中受到各种因素影响，各批鲎试剂与内毒素形成凝胶反应的活力不一样，必须规定一种标准的内毒素按规定的方法测定。鲎试剂灵敏度复核的意义在于：(1)考查操作技能；(2)考查实验条件；(3)验证鲎试剂灵敏度是否准确，鲎试剂在生产、销售、运输、储存过程中易受诸如温度、光线、时间等外界因素的影响，使促凝活力降低；(4)验证细菌内毒素标准品的效价是否准确。因此为了保证细菌内毒素检查法的准确可靠性，检验者应对每批新购入的鲎试剂进行灵敏度的复核。

2 干扰试验

干扰试验目的是要确定出供试品在什么样的有效浓度内进行细菌内毒素检查时即可以克服的干扰因素，又能客观反映其所含内毒素是否符合根值。如氧氟沙星氯化钠注射液的细菌内毒素检查（2005版新收载，其限值为1ml 中含内毒素量应小于0.5Eu ）初次接触，笔者用不同灵敏度鲎试剂对该样品进行了干扰抑制试验，见表1。表1 氧氟沙星氯化钠注射液的浓度干扰试验结果说明，干扰抑制作用与药物浓度有关。药物原液或药物稀释两倍均存在干扰，PPC 不产生凝集，需再换高灵敏度鲎试剂，对供试品进行4 倍稀释，

样才能有效地排除氧氟沙星的干扰作用。所以当初次接触到一个样品时，必须对其做干扰试验，制定其检测方法。

3 检查法中的供试品阳性对照

在进行常规细菌内毒素检查时，规定了阳性对照（PC）、阴性对照（NC）及样品阳性对照（PPC ）等必备项目，阳性对照的目的是证明在实验条件下所用鲎试剂灵敏度符合规定，阴性对照的目的是证明所用的超纯水（BET ）中不存在可被检验到的内毒素，供试

品阳性对照的目的是证明在试验条件下被检验的供试品溶液不存在抑制因素。这就是通常所说的干扰试验。进行干扰试验所用鲎试剂的批次及供试品的批量必定是有限的，在进行该药品常规细菌内毒素检验时鲎试剂的批量及供试品的批量和进行干扰试验时的情况不可能完全相同，这就不能保证此时的供试品对检查结果不出现异常。为此，我国药典从2000版起增定了供试品阳性对照是非常必要的。

4 其他事项

还应注意：(1)检查法整个过程应防止用移液管吸取溶液时禁用口吸。(2)保温防止震动，观察结果应该缓慢倒转。(3)在进行鲎试剂灵敏度的复核、供试品的干扰试验和细菌内毒素检查时，各试验所要求的对照管应同时进行，在认可试验有效的条件下才能进行计算和制定检验方法。(4)不同批号不同厂家生产的鲎试剂，灵敏度标示值一样，但有时同一批号的供试品得出不同的试验结果，不能只选用让供试品符合规定的鲎试剂，需进一步考察这种现象的原因，一切以用药安全来从严要求。

作者单位：433100 湖北潜江，潜江市药品检验所

(编辑：汪洋)

1 试剂灵敏度的复核

1 试剂灵敏度的复核细菌内毒素检查法至药典收载以来，每版都有明确规定：每使用新批量的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果改变时，应进行鲎试剂灵敏度的复核试验。在例行的药品制剂检查验收中发现，有些单位的检验人员在常规进行的细菌内毒素检查时，对所使用的鲎试剂从未进行过灵敏度复核，部分检验人员对此项工作不甚明了，完全忽视了复核鲎试剂灵敏度的重要性。鲎试剂的灵敏度，即鲎试剂在本试验法规定的条件下能检测出的细菌内毒素标准液或供试品溶液中的最低内毒素浓度（用Eu/ml 表示），而灵敏度的测定即为鲎试剂在制备过程中受到各种因素影响，各批鲎试剂与内毒素形成凝胶反应的活力不一样，必须规定一种标准的内毒素按规定的方法测定。鲎试剂灵敏度复核的意义在于：(1)考查操作技能；(2)考查实验条件；(3)验证鲎试剂灵敏度是否准确，鲎试剂在生产、销售、运输、储存过程中易受诸如温度、光线、时间等外界因素的影响，使促凝活力降低；(4)验证细菌内毒素标准品的效价是否准确。因此为了保证细菌内毒素检查法的准确可靠性，检验者应对每批新购入的鲎试剂进行灵敏度的复核。 2 干扰试验干扰试验目的是要确定出供试品在什么样的有效浓度内进行细菌内毒素检查时即可以克服的干扰因素，又能客观反映其所含内毒素是否符合根值。如氧氟沙星氯化钠注射液的细菌内毒素检查（2005版新收载，其限值为1ml 中含内毒素量应小于0.5Eu ）初次接触，笔者用不同灵敏度鲎试剂对该样品进行了干扰抑制试验，见表1。表1 氧氟沙星氯化钠注射液的浓度干扰试验结果说明，干扰抑制作用与药物浓度有关。药物原液或药物稀释两倍均存在干扰，PPC 不产生凝集，需再换高灵敏度鲎试剂，对供试品进行4 倍稀释，样才能有效地排除氧氟沙星的干扰作用。所以当初次接触到一个样品时，必须对其做干扰试验，制定其检测方法。 3 检查法中的供试品阳性对照在进行常规细菌内毒素检查时，规定了阳性对照（PC）、阴性对照（NC）及样品阳性对照（PPC ）等必备项目，阳性对照的目的是证明在实验条件下所用鲎试剂灵敏度符合规定，阴性对照的目的是证明所用的超纯水（BET ）中不存在可被检验到的内毒素，供试

QC-7129B鲎试剂灵敏度复核操作规程

正文规范鲎试剂灵敏度复核的操作过程和要求，确保鲎试剂灵敏度复核结果的可靠性。适用于质监处药理室对鲎试剂灵敏度的复核。质监处药理室分析人员负责本规程的实施和完成相关记录。 USP版附录85； CP版附录Ⅺ E 。细菌内毒素检查法：本法系利用从鲎的变形细胞中提取的试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的含量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。鲎试剂：是鲎变形细胞的溶出物经提取而成。鲎试剂灵敏度：在本检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度，用EU/ml表示。细菌内毒素检查用水(BET水)：系指与灵敏度为0.03EU/ml 或更高灵敏度的鲎试剂在37 1 C 条件下24小时不产生凝集反应的灭菌注射用水。细菌内毒素标准品：USP细菌内毒素参考标准品(RSE)或已标定的细菌内毒素工作标准品(CSE)。反应终点浓度：是指系列递减的内毒素浓度中最后一个呈现阳性结果的浓度。一、试剂、材料与仪器设备试剂：鲎试剂批号、灵敏度、规格、生产商。细菌内毒素检查用水(BET水) 批号、规格、生产商。细菌内毒素标准品批号、效价、生产商。材料及仪器设备：电热恒温水箱型号、设备编号。电热鼓风干燥箱型号、设备编号。漩涡混合器型号。无热原试管规格：1075mm。正文无热原玻璃瓶规格：25ml。无热原玻璃吸管规格：1ml、2ml、5ml、10ml。试管架、无热原封口膜、洗耳球、酒精棉球、砂轮片。

二、试验准备试验所用的容器、用具都必须经过处理，250C以上干烤至少1小时，以去除外源性内毒素。试验操作过程应避免微生物的污染。三、内毒素溶液配制细菌内毒素标准品系列溶液配制取RSE或CSE 1瓶，按照使用说明书加入规定量的细菌内毒素检查用水使溶，并用漩涡混合器间歇混匀30分钟，然后用细菌内毒素检查用水进一步稀释至2.0、、 0.5、 0.25四个浓度的内毒素标准溶液，每一步稀释应混匀至少30秒钟。四、试验过程取被复核的鲎试剂原安瓿18支，分别用0.1ml细菌内毒素检查用水复溶。其中16支加入0.1ml细菌内毒素系列标准溶液，每浓度溶液平行做4支；另外2支加入0.1ml 细菌内毒素检查用水作为阴性对照。将安瓿中的溶液轻轻混匀后，用封口膜封闭管口，垂直放入371℃电热恒温水箱中，保温602分钟。反应结果记录在鲎试剂灵敏度复核记录中。五、试验结果观察和有效性结果观察将安瓿从电热恒温水箱中轻轻取出，缓缓倒转180°时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为(+)；凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记录为(–)。保温和拿取安瓿过程应避免受到振动造成假阴性结果。有效性对于细菌内毒素标准品系列溶液，如果最大浓度2.0管均为阳性，最低浓度0.25管均为阴性，阴性对照管均为阴性，试验方为有效。六、灵敏度复核结果的计算计算公式为： c=lg-1(Σe/4) 正文式中e为细菌内毒素标准品反应终点浓度的对数值。合格标准当0.5≤c<1.3时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度为该批鲎试剂的灵敏度。鲎试剂有效期按厂家规定执行。鲎试剂应在2～10℃条件下保存。当鲎试剂的批号改变时需进行鲎试剂灵敏度的复核。

实验室常见危险化学试剂及防护

实验室常见危险化学试剂及防护来源新材料在线实验室里的危险化学试剂太多了，为了科研我们却不得不常常接触他们。今天，我们就来盘点一下实验室里常见的危险化学试剂，并告诉大家简单的防护方法。为了自己的健康，材粉们一定要认真对待哦！一、易爆物质硝酸银：强氧化剂，与其他物质接触会发生爆炸，皮肤吸收可造成损伤。操作应戴好手套和护目镜，在通风橱内进行。金属钠、钾：遇水发生反应，着火，易爆炸。应单独存放在安全处，室内温度不要太高。三硝基甲苯（TNT）：受热能引起爆炸，中等毒性。工作时穿紧袖工作服，工后彻底洗手并淋浴。可用含10%亚硫酸钾肥皂清洗。亚硫酸钾遇三硝基甲苯成红色，如能将红色洗净，表示皮肤污染已清除。也可用浸于9∶1的酒精氢氧化钠溶液的棉球擦手，洗净者不出现黄色。硝化甘油：一种黄色的油状透明液体，可因震动而爆炸，属化学危险品。储存注意事项：储存于阴凉、干燥、通风的专用爆炸品库房。远离火种、热源。库温不宜超过30℃。保持容器密封。应与氧化剂、活性金属粉末、酸类、食用化学品分开存放，切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。禁止震动、撞击和摩擦。硝化纤维：遇到火星、高温、氧化剂以及大多数有机胺(对苯二甲胺等)会发生燃烧和爆炸。如温度超过40℃时它能分解自燃。用玻璃瓶包装，储存于阴凉、通风库房内，仓间温度不宜过30℃，远离火种及热源。与有机胺，氧化剂隔离储运。苦味酸：受热，接触明火、高热或受到摩擦震动、撞击时可发生爆炸。操作时戴好合适的手套和护目镜。硝基铵：受热、接触明火、或受到摩擦、震动、撞击时可发生爆炸。着火后会转

鲎试剂灵敏度复核试验

鲎试剂灵敏度复核试验一.试验目的当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。二.试验步骤 1.根据鲎试剂灵敏度的标示值（λ）,将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟, 然后制成2λ、1λ、0.5λ和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟。 2.取复溶后的0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿18支，其中16管分别加入0.1ml不同浓度的内毒素标准溶液，每一个内毒素浓度平行做4管；另外2管各加入0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。 3.将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃±1℃的适宜恒温器中，保温60分钟±2分钟。三.结果分析 1.将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°时，若管内形成凝胶，且不从管壁滑脱者为阳性；若不形成凝胶，或形成凝胶但倒转180°后从管壁滑脱者为阴性。 2.若最大浓度2.0λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管为阴性，试验方为有效。计算反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测定值（λc），计算方法见中国药典。 3.反应终点浓度是指系列递减的内毒素浓度中最后一个呈阳性

结果的浓度。 4.当λc在0.5λ～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度。四.注意事项 1.保温和拿取试管过程应避免受到振动造成假阴性结果。 2.安瓿开启前应先用砂石划痕(不管是色点或包环易折安瓿)，用手半拉半掰将颈部折断，千万不能用镊子敲击，防止碎玻屑掉入安瓿。

鲎试剂实验方法

鲎试剂实验方法鲎试剂按实验方法可分为：凝胶法、动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、终点显色法鲎试剂。凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法是通过观察有无凝胶形成作为反应的终点。此法操作比较简单，经济，不需要专用测定设备，可以进行定性或半定量测定。凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.2ml/支的单个测试或0.5ml/支至5.2ml/瓶的真空封口西林瓶装的多个测试。使用时一般应加细菌内毒素检查用水复溶后使用。厦门市鲎试剂实验厂有限公司的真空封口试管凝胶法鲎试剂是把鲎试剂直接灌装在试管中，在真空中压盖封口的新产品。使用时直接用样品溶解鲎试剂，不会割伤手，更加简单方便安全。特异性鲎试剂，即弃G因子鲎试剂，是厦门市鲎试剂实验厂有限公司国内首创的产品，它专一对内毒素起反应，避免了G因子旁路的干扰，使检测结果更加可靠，在药检和临床检验方面是不可或缺的理想检测试剂。目前厦门市鲎试剂实验厂有限公司提供的各种内毒素检测鲎试剂均为特异性鲎试剂，都能对抗葡聚糖的干扰，只对内毒素起反应。因此不列为独立品种。动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、终点显色法鲎试剂，这四种方法都是定量检测内毒素的。这几种定量法鲎试剂统称光度法鲎试剂。根据检测原理，终点浊度法和动态浊度法都属于浊度法。浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。终点浊度法未见商品化产品。动态浊度法（又称动态比浊法）是检测反应混合物的浊度上升某一预先设定的吸光度所需要的反应时间，或是检测浊度增加速度的方法。动态浊度法的特点为：1. 能准确定量。2.检测范围宽，可达4个数量级。3.灵敏度高达0.005EU/ml。4. 操作简便，系统自动检测分析，一步即成。5. 经济实用，试剂样品需要量少，可降至50μL。6. 和微生物检测系统Elx808（配套IU）及专用软件TALgent使用，一次可同时检测多达96个样品。终点显色法和动态显色法都是属于显色基质法。显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈色团的多少而测定内毒素含量的方法，根据产物颜色判断内毒素浓度，又称为比色法。显色基质法由于不依赖凝固蛋白形成凝胶，抗干扰能力强，特别适用于生物制品（蛋白、疫苗等）和临床样品（黄疸、血液、尿液）的细菌内毒素检测。终点显色法是目前反应时间最短的鲎试验法，只需要16分钟就能得出结果。而且可以偶氮化染色剂，避开某些有色检品自身颜色对鲎试验的干扰。终点显色法不需要特殊的检测仪器就能准确定量。动态显色法鲎试剂兼有动态浊度法和终点显色法鲎试剂的优点，抗干扰能力强，使用简单方便，检测范围宽，灵敏度高达0.005EU/ml, 是目前世界上最好的鲎试剂。但是价格较高。如果您仅需要检测样品的内毒素限量，可以选择凝胶法鲎试剂，通过确定内毒素限值及最大有效稀释倍数，做样品的干扰试验从而确定使用的鲎试剂的灵敏度。如果您需要定量测定样品中内毒素含量则应选择显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂。日常检测量不大时，可以选择终点显色法鲎试剂，用普通的分光光

实验室常用化学溶液试剂药品有效期一览表

实验室常用化学药品、试剂，由于性质的不同，有效期也有所不同，比如我们常用的有缓冲液，有机试剂，标准溶液，流动相，标准品，配制溶液，留样等等，都有一定的有效期，如何正确把握使用期限常用的标准溶液、缓冲液的有效期，你记住了吗本文列出了有效期一览表，供大家参考。滴定用标准溶液的有效期为多长其实跟贮存的条件有关，正常室温下贮存时间见下表。表1.常见滴定用标准溶液的有效期相比标准溶液的有效期，各种缓冲液、试液、指示液也有其有效期限制，多数实验室都是根据前辈的经验来规定期限，也有的实验室为了防止过期现象导致的样品分析结果误差的产生，尽量都是现配先用，或者最多使用一个月。对于某些较稳定的溶液来说，不必矫枉过正，一方面会造成浪费，一方面也增加了分析人员的工作量，那么，到底如何规定各种缓冲液、试液、指示液的使用期限呢，请参考下表！表2：各种缓冲液、试液、指示液使用期限表表3.一般溶液有效期一览表淀粉指示剂5g/L5天硝酸盐氮标准溶液 / 1个月

淀粉指示剂10g/L5天硫酸锌535g/L1个月盐酸氨水缓冲溶液PH= 天硫酸锰380g/L 1个月乙醇溶液78%7天硫酸铜溶液20g/L1个月乙醇溶液75%7天六水氯化铁L1个月乙醇溶液72%7天碱性试剂/1个月乙醇溶液70%7天重铬酸锌L1个月碘指示剂/7天重铬酸钾l1个月氧化镁2%7天磺胺5g/L1个月间苯二酚盐酸溶液/7天七水硫酸镁L1个月氨水溶液1:47天三乙醇胺溶液1:31个月溴甲酚紫水溶液%7天韦氏液13g/L1个月酚酞指示剂5g/l7天硼酸溶液20g/L1个月酚酞指示剂10g/l7天喹钼柠铜溶液/1个月除蛋白试剂/7天柠檬酸溶液L1个月饱和苦味酸溶液/7天氯化铵-EDTA溶液/1个月硝酸银溶液L7天硫酸镉溶液/1个月硝酸银溶液50g/L7天氢氧化铵-氢化氨缓冲液/1个月淀粉溶液1%7天碘贮备液/1个月

常用化学试剂

常用化学试剂培训内容：常用化学试剂。培训目标：认识化验室常用的化学试剂，了解化验室常用试剂的用途。培训难点:记住化验室常用的化学试剂。培训课时：1个课时培训方案：（1）甲酸，称作蚁酸，化学式为HCOOH。甲酸无色而有刺激气味，且有腐蚀性，人类皮肤接触后会起泡红肿。熔点8.4℃，沸点100.8℃。由于甲酸的结构特殊，也可看做是一个羟基甲醛。因此甲酸同时具有酸和醛的性质。我们公司检验室常用质量分数为90%和85%的甲酸。用于原丝溶解测粘度。（2）硫酸，化学式为H2SO4。相对分子质量98.08是一种无色无味油状液体，是一种高沸点难挥发的强酸，易溶于水，能以任意比与水混溶。高浓度的硫酸具有强腐蚀性和脱水性。硫酸是基本化学工业中重要产品之一。它不仅作为许多化工产品的原料，而且还广泛地应用于其他的国民经济部门。（3）盐酸，学名氢氯酸，是氯化氢（化学式：HCl相对分子量为36.5）的水溶液，是一元酸。盐酸是一种强酸，浓盐酸具有极强的挥发性，因此盛有浓盐酸的容器打开后能在上方看见酸雾，那是氯化氢挥发后与空气中的水蒸气结合产生的盐酸小液滴。盐酸是一种常见的化学品，在一般情况下，浓盐酸中氯化氢的质量分数在38%左右。（4）硝酸，分子式HNO3相对分子质量63，是一种有强氧化性、强腐蚀性的无机酸，酸酐为五氧化二氮。硝酸的酸性较硫酸和盐酸小（PKa=-1.3），

易溶于水，在水中完全电离，常温下其稀溶液无色透明，浓溶液显棕色。硝酸不稳定，易见光分解，应在棕色瓶中于阴暗处避光保存，严禁与还原剂接触。（5）氢氧化钠(NaOH)，俗称烧碱、火碱、苛性钠，常温下是一种白色晶体，具有强腐蚀性。易溶于水，其水溶液呈强碱性，能使酚酞变红。氢氧化钠是一种极常用的碱，是化学实验室的必备药品之一。氢氧化钠在空气中易吸收水蒸气，对其必须密封保存，且要用橡胶瓶塞。（6）碳酸钠，俗名苏打、纯碱、洗涤碱，化学式：Na2CO3相对分子质量为106，普通情况下为白色粉末，为强电解质。易溶于水，具有盐的通性。（7）重铬酸钾为橙红色三斜晶体或针状晶体。化学式为K2Cr2O7相对分子质量294.18可由重铬酸钠与氯化钾或硫酸钾进行复分解反应而制得。溶于水，不溶于乙醇。有剧毒是强氧化剂，在实验室和工业中都有很广泛的应用。（8）硫代硫酸钠化学式: Na2S2O3相对分子质量为248.18单斜晶系白色结晶粉末，比重1.667，易溶于水，不溶于醇，在空气中加热被氧化分解成硫酸钠和二氧化硫。避免与皮肤和眼睛接触。（9）高锰酸钾化学式：KMnO4，相对分子质量为158.03395，高锰酸钾常温下即可与甘油(丙三醇)等有机物反应甚至燃烧；在酸性环境下氧化性更强，能氧化负价态的氯、溴、碘、硫等离子及二氧化硫等。与皮肤接触可腐蚀皮肤产生棕色染色；粉末散布于空气中有强烈刺激性。尿液、二氧化硫等可使其褪色。与较活泼金属粉末混合后有强烈燃烧性，危险。（10）EDTA是一种重要的络合剂中文名称：乙二胺四乙酸线性分子式(HOOCCH2)2NCH2CH2N(CH2COOH)2分子式C10H16N2O8分子量292.248。

实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)

实验室常用溶液及试剂配制一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制表二常用酸碱指示剂配制表三混合酸碱指示剂配制表四容量分析基准物质的干燥表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4）四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱

实验室常用化学试剂的贮存和使用讲义

实验室常用化学试剂的贮存和使用规范化学试剂又叫化学药品，简称试剂。化学试剂是指具有一定纯度标准的各种单质和化合物（也可以是混合物。要进行任何实验都离不了试剂，试剂不仅有各种状态，而且不同的试剂其性能差异很大。有的常温非常安定、有的通常就很活泼，有的受高温也不变质、有的却易燃易爆：有的香气浓烈，有的则剧毒……。只有对化学试剂的有关知识深入了解，才能安全、顺利进行各项实验。既可保证达到预期实验目的，又可消除对环境的污染。因此，首先要知道试剂的分类情况，然后掌握各类试剂的存放和使用。一、化学试剂的分类试剂分类的方法较多。如按状态可分为固体试剂、液体试剂。按用途可分为通用试剂、专用试剂。按类别可分为无机试剂、有机试剂。按性能可分为危险试剂、非危险试剂等。从试剂的贮存和使用角度常按类别和性能2种方法对试剂进行分类。（一）无机试剂和有机试剂这种分类方法与化学的物质分类一致，既便于识别、记忆，又便于贮存、取用。无机试剂按单质、氧化物、碱、酸、盐分出大类后，再考虑性质进行分类。有机试剂则按烃类、烃的衍生物、糖类蛋白质、高分子化合物、指示剂等进行分类。（二）危险试剂和非危险试剂这种分类既注意到实用性，更考虑到试剂的特征性质。因此，既便于安全存放，也便于实验工作者在使用时遵守安全操作规则。 1．危险试剂的分类根据危险试剂的性质和贮存要求又分为：（1）易燃试剂这类试剂指在空气中能够自燃或遇其它物质容易引起燃烧的化学物质。由于存在状态或引起燃烧的原因不同常可分为： ①易自燃试剂：如黄磷等。 ②遇水燃烧试剂：如钾、钠、碳化钙等。 ③易燃液体试剂：如苯、汽油、乙醚等。 ④易燃固体试剂，如硫、红磷、铝粉等。（2）易爆试剂指受外力作用发生剧烈化学反应而引起燃烧爆炸同时能放出大量有害气体的化学物质。

常用化学试剂的分类存放和使用资料

常用化学试剂的分类、存放和使用化学试剂又叫化学药品，简称试剂，它是工农业生产、文教卫生、科学研究以及国防建设等多方面进行化验分析的重要药剂。化学试剂是指具有一定纯度标准的各种单质和化合物（也可以是混合物)。要进行任何实验都离不了试剂，试剂不仅有各种状态，而且不同的试剂其性能差异很大。有的常温非常安定、有的通常十分活泼，有的受高温也不变质、有的却易燃易爆：有的香气浓烈，有的则剧毒。只有对化学试剂的相关知识深入了解，才能安全、顺利进行各项实验。既可保证达到预期实验目的，又可消除对环境污染。因此，首先要知道试剂分类情况，然后才能掌握各类试剂的存放和使用。一.化学试剂的分类试剂分类的方法较多，如，按状态可分为固体试剂、液体试剂。按用途可分为通用试剂、专用试剂。按类别可分为无机试剂、有机试剂。按性能可分为危险试剂、非危险试剂等。从试剂的贮存和使用角度常按类别和性能2种方法对试剂进行分类：（一）无机试剂和有机试剂这种分类方法与化学的物质分类一致，既便于识别、记忆，又便于贮存、取用；无机试剂按单质、氧化物、碱、酸、盐分出大类后，再考虑性质进行分类；有机试剂则按烃类、烃的衍生物、糖类蛋白质、高分子化合物、指示剂等进行分类。

（二）危险试剂和非危险试剂这种分类既注意到实用性，更考虑到试剂的特征性质。因此，既便于安全存放，也便于实验工作者在使用时遵守安全操作规则： 1.危险试剂的分类根据危险试剂的性质和贮存要求又分为：（1）易燃试剂这类试剂指在空气中能够自燃或遇其它物质容易引起燃烧的化学物质，由于存在状态或引起燃烧的原因不同常可分为： ①易自燃试剂：如，黄磷等。 ②遇水燃烧试剂：如，钾、钠、碳化钙等。 ③易燃液体试剂：如，苯、汽油、乙醚等。 ④易燃固体试剂，如：硫、红磷、铝粉等。（2）易爆试剂指受外力作用发生剧烈化学反应而引起燃烧爆炸同时能放出大量有害气体的化学物质，如，氯酸钾等。

09T-I660-01细菌内毒素检查法(一部)检验标准操作规程

—————————— 文件类别：技术标准 1/10 1.目的：建立细菌内毒素检查法(一部)检验标准操作规程，并按规程进行检验，保证检验操作规范化。 2.依据： 2.1.《中华人民共和国药典》2010年版一部。 3.范围：适用于所有用细菌内毒素检查法(一部)测定的供试品。 4.责任：检验员、质量控制科主任、质量管理部经理对本规程负责。 5.正文： 5.1. 本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。 5.1.1. 细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。本试验操作过程应防止微生物和内毒素的污染。 5.1.2. 细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示，1EU与1个内毒素国际单位（IU）相当。 5.1.3. 细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成。用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。 5.1.4. 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。 5.1.5. 凝胶法细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005EU/ml（用于光度测定法）且对内毒素试验无干扰作用的灭菌注射用水。

5.1. 6. 试验所用器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃、30分钟以上）去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。若使用塑料器械，如微孔板和微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。 5.2. 供试品溶液的制备：某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。一般要求供试品溶液的PH值在 6.0～8.0的范围内。对于过酸、过碱或本身有缓冲能力的供试品，需调节被测溶液（或其稀释液）的PH值，可使用酸、碱溶液或适宜的缓冲液调节PH值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。 5.3. 内毒素限值的确定：药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定：L=K/M。 5.3.1. 式中：L为供试品的细菌内毒素限值，以EU/ml、EU/mg 或EU/U（活性单位）表示； 5.3.2. K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/(kg.h)表示，注射剂K=5EU/(kg.h)，放射性药品注射剂K=2.5EU/(kg.h)，鞘内用注射剂 K=0.2EU/(kg.h)； 5.3.3. M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml/(kg.h)、mg/(kg.h)或U/(kg.h)表示，人均体重按60kg计算，人体表面积按1.62m2计算。注射时间若不足1小时，按1小时计算。供试品每平方米体表面积剂量乘以0.027即可转换为每千克体重剂量（M）。 5.3.4. 按人用剂量计算限值时，如遇特殊情况，可根据生产和临床用药实际情况做必要调整，但需说明理由。 5.4. 确定最大有效稀释倍数（MVD）：最大有效稀释倍数是指在试验中供试品溶液被允许稀释的最大倍数（1→MVD），在不超过此稀释倍数的浓度下进行内毒素限值的检测。用以下公式来确定MVD：MVD=CL/λ。

细菌内毒素检测标准操作

细菌内毒素检测（凝胶法）标准操作目的：规范细菌内毒素的检测操作，保证细胞质量。范围：适用于所有从治疗中心发放的细胞（包括CIK、DC、干细胞等）内毒素限量检测。责任人：质量检测人员材料：一、电热干燥箱除外源性内毒素用，温度应能达到180℃。二、恒温水浴箱或适宜的恒温器（37℃±1℃）。三、水银温度计，精度在1℃以下，量程不小于50℃。四、旋涡混合器。五、可调式移液器六、0.25EU/ml鲎试剂。七、细菌内毒素工作品。八、凝胶法细菌内毒素检查用水。九、实验用具无热原吸头（1000μl、200μl）、带铝盖的凝集管（10mm×75mm）、试管架、计时器、75%酒精棉球、封口膜、剪刀、镊子、砂轮。所用玻璃器皿使用前须经250℃干烤至少1小时或180℃干烤至少4小时。操作方法一、取样 1、细胞发放前3天，取细胞培养液约2ml，分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右，如不立即试验4℃存放（可存放多长时间）。 2、细胞发放当天，取细胞生理盐水混悬液约2ml，分装于2个带铝盖的凝集管中各约1ml左右，如不立即试验4℃存放。（可存放多长时间）。 3、取样应以无菌操作技术取样，所用器材在使用前应无热原或已去除热原。二、鲎试剂灵敏度复核鲎试剂灵敏度复核的目的是考察鲎试剂的灵敏度是否正确、考察检验人员操作方法是否正确及实验条件是否符合规定。在使用一批新的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进

行鲎试剂灵敏度复核实验。（一）实验操作 1、细菌内毒素工作品溶液的制备取细菌内毒素工作品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，开启过程中应防止玻璃屑落入瓶内。按照工作品说明书，加入规定量的细菌内毒素检查用水溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严，置旋涡混合器上混合15分钟。然后用倍倍稀释方式进行稀释，即0.5ml各浓度工作品溶液+0.5ml检查用水（以下稀释方式同此法），制备成4个浓度的细菌内毒素标准溶液，即2.0λ、0.5λ、0.25λ（λ为所复核的鲎试剂的标示灵敏度），每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟。 2、待复核鲎试剂的准备取0.1ml/支的鲎试剂18支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂轮在瓶颈轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入瓶内。每支加入0.1ml检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解，避免产生气泡。若待复核鲎试剂的规格不是0.1ml/支时，取若干支按其标示量加入检查用水复溶，充分溶解后将鲎试剂溶液混合在一起，然后每0.1 ml分装到10mm×75mm凝集管中，要求至少分装18管备用。 3、加样将已充分溶解的待复核鲎试剂18支（管）放在试管架上，排成5列，其中4列4支（管），1列2支（管）。4支（管）4列每列每支分别加入0.1ml的2λ、λ、0.5λ和0.25λ的内毒素标准溶液；另2支（管）加入0.1ml检查用水。 4、加样结束后，将鲎试剂用封口膜封口，轻轻振动混匀，避免产生气泡，连同试管架放入37℃±1℃水浴或适宜恒温器中，试管架保持水平状态，保温60±2分钟。 5、观察并记录结果。将试管架从水浴或适宜恒温器中轻轻取出，避免振动，将每管拿出缓缓倒转180°观察，管内形成凝胶，并且凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为（＋）；未形成凝胶或凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记录为（－）。（二）实验结果计算

鲎试剂使用说明书

凝胶法鲎试剂使用说明书一、检测步骤 1、标准品稀释：开启后加入检查用水（W）1.2ml，置漩涡混合器上混合5min，得到浓度为10EU/ml的内毒素溶液，标记为（E10），其余各梯度稀释方法如下： 0.3ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml E10 －－－→E1－－－→E0.5－－－→E0.25－－－→E0.125－－－→E0.06－－－→E0.03 2.7mlW 1.5mlW 1.5mlW 1.5mlW 1.5mlW 1.5mlW 此步骤为新开启标准品者操作，各梯度做好标记，其余操作人员可直接使用。 2、取鲎试剂8支，折断安瓿瓶颈，其中2支作供试品检查管，2支作阴性对照管，2 支作阳性对照管，2支作供试品阳性对照管，做好标记。 3、阴性对照管加入0.2ml检查用水，其余各管加入0.1ml检查用水，每支供试品检查管另加入0.1ml供试品；阳性对照管加入0.1ml浓度为2λ（即0.1ml 的E0.125）内毒素溶液，供试品阳性对照管加入0.1ml含2λ（即0.1ul 的E1）内毒素的供试品。 4、封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入37℃的恒温金属浴中60min，然后取出观察结果。在孵育期间避免任何震动！二、结果判断 1、将试管从恒温器中轻轻取出，缓慢倒转180°，若管内形成凝胶，不变形，不滑落者为阳性，记录为（+）；反之为阴性，记录为（—）。取出试管应尽量避免受到震动造成假阴性结果！ 2、阴性对照管必须为阴性，阳性对照管、供试品阳性对照管必须为阳性，否则实验结果无效。 3、若阴性对照管为阳性，表明鲎试剂或检查用水货实验器具受到污染；若阳性对照管为阴性，表明鲎试剂或标准内毒素已失效，或鲎试剂的灵敏度及标准内毒素的效价标示不准，或实验条件不满足；若供试品阳性对照管为阴性，表明反应体系内有抑制反应的干扰因素存在。

实验室常用化学试剂有效期探索(2015.02.04)

实验室常用化学试剂有效期探索 [导读]化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂还没一个保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关;但主要是因其性质和应用而变化的。化学试剂是进行化学研究、成分分析的相对标准物质，是化学实验课程重要的消耗性物资，广泛用于物质的合成、分离、定性和定量分析。试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中，人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性，其实大谬不然。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂还没一个保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关;但主要是因其性质和应用而变化的。因此化学试剂要在妥善保存之下，再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用或是否可以通过采取适当措施提纯使用。 1、化学试剂的分类化学试剂品种繁多，目前还没有统一的分类方法，一般按试剂的化学组成或用途进行分类。表1列出了常用化学试剂的分类。 2、化学试剂的性质对有效期的影响化学试剂都没有注明保质期，确定试剂是否变质主要是凭经验和做新旧试剂对比试验。要了解化学试剂的理化性质，化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变，有着很大的区别。一般情况下，化学性质稳定的物质，保存有效期就越长，保存条件也简单。初步判断一个物质的稳定性，可遵循以下几个原则。无机化合物，只要妥善保管，包装完好无损，理论上可以无限期使用。但是，那些容易氧化(如亚硫酸盐、苯酚、亚铁盐、碘化物、硫化物等应将其固体或晶

体密封保存，不宜长期存放;其水溶液亚硫酸、氢硫酸溶液要密封存放;钾、钠、白磷更要采用液封形式)、容易潮解的物质，在避光、阴凉、干燥的条件下，只能短时间(1～5 年)内保存，具体要看包装和储存条件是否符合规定。有机小分子量化合物一般挥发性较强，包装的密闭性要好，可以长时间保存(3～5 年)。但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等，在避光、阴凉、干燥的条件下，只能短时间(1～5 年)内保存，具体要看包装和储存条件是否符合规定。有机高分子，尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料，极易受到微生物、温度、光照的影响，而失去活性，或变质腐败，故此，要冷藏(冻)保存，而且时间也较短。基准物质、标准物质和高纯物质，原则上要严格按照保存规定来保存，确保包装完好无损，避免受到化学环境的影响，而且保存时间不宜过长。一般情况下，基准物质必须在有效期内使用。GB/T 601-2002 中对标准溶液的有效期有明确的规定：在常温(15oC~25oC)下保存时间一般不超过2个月。超过两个月要重新标定或检查之后再用。培养基：按规定配制并消毒好培养基，冷至室温，保存在阴暗处(尽可能贮藏在冰箱内)，配制好的培养基应在一个月内用完，具体见培养基制备操作规程。除另有规定外、试液、缓冲液、指示剂(液)的有效期均为半年。HPLC 用的流动相、纯化水有效期为15 天。检验用的试剂、配制的试液必须贴好标签，配制的试液必须做好配制记录，其中培养基还必须做使用记录，标准滴定液领用后应做使用记录。检验用试剂的有效期必须在贮存期内。除另有规定外，液体试剂开启后一年内有效，固体试剂开启后三年内有效。 3、化学试剂的妥善保存化学试剂还没一个保质期的具体要求和界限。但化学试剂的管理通常要求“妥善”保存，做到“八防”(防挥发、防潮、防变质、防毒害、防光、防震、防鼠害、防火)。变质试剂是导致分析误差的主要原因之一，遇到下列情况易出现试剂的变质： (1)空气的影响。空气中的氧易使还原性试剂氧化而破坏。强碱性试剂易吸收二氧化碳而变成碳酸盐，水分可以使某些试剂潮解、结块;纤维、灰尘能使某些试剂还原、变色等。

常用化学试剂手册

化学试剂手册 ?化学试剂安全操作指南 ?紧急事件处理方式 ?常见化学试剂性质简介 ?元素周期表(注音) 1 / 32

一.化学试剂安全操作指南化学实验室是一个危险的工作环境，因为大家常常要使用一些危险的药品，这些潜在的危险通常是不可避免的。所以，在进入实验室之前，每个人都有必要学习化学实验室的重要安全守则和规章制度。化学实验简单地用两个词来描述：一定、禁止。一定一定要熟悉实验室的安全程序一定要穿实验服离开实验室之前一定要洗手在实验开始之前一定要认真阅读实验内容一定要检查仪器是否安装正确对待所有的药品一定要小心、仔细一定要保持自己的工作环境清洁一定要注意观察实验现象遇到疑问一定要问指导老师禁止实验室里禁止吃东西或喝水，抽烟禁止穿露脚趾的鞋进入实验室禁止吸入、品尝药品禁止妨碍或分散别人注意力，或在实验室里奔跑和大声喧哗禁止独自一个人在实验室做实验禁止做一些未经批准的实验二.紧急事件处理方式 1.化学药品危害的级别及名称一级（极度危害）：汞及其化合物、苯、砷及其无机化合物（非致癌的除外）、氯乙烯、铬酸盐与重铬酸钾、黄磷、铍及其化合物、对硫磷、羟基镍、八氟异丁烯、氯甲醚、锰及其无机化合物、氰化物。二级（高度危害）：三硝基甲苯、铅及其化合物、二硫化碳、氯、丙烯腈、四氯化碳、硫化氢、甲醛、苯胺、氟化氢、五氯酚及其钠盐、铬及其化合物、敌百虫、氯丙烯、釩及其化合物、溴甲烷、硫酸二甲酯、金属镍、甲苯二异氰酸酯、环氧氯丙烷、砷化氢、敌敌畏、光气、氯丁二烯、一氧化碳、硝基苯。三级（中度危害）：苯乙烯、甲醇、硝酸、硫酸、盐酸、甲苯、二甲苯、三氯乙烯、二甲基甲酰胺、六氟丙烯、苯酚、氮氧化物。四级（轻度危害）：溶剂汽油、丙酮、氢氧化钠、四氟乙烯、氨。 2.常见化学毒物的急性致毒作用于救治方法 2.1硫酸、盐酸、硝酸主要致毒作用与症状接触：硫酸局部红肿痛，重者起水泡、呈烫伤症状；硝酸、盐酸腐蚀性小于硫酸。吞服：强烈腐蚀空腔、食道、胃粘膜。救治方法立即用大量流动清水冲洗，再用2%碳酸氢钠水溶液冲洗，然后清水冲洗。初服可洗胃，时间长忌洗胃以防穿孔；应立即服7.5%氢氧化镁悬 2 / 32

鲎试剂灵敏度复核记录

文件名称File Name Record of Review for Limulus Reagent Sensitivity File Number REC-SOP-C003059-01 -02 生效日期Effective Date 2018-10-18 有效期至 Expiry Date 2021-10-17 审批及颁发/APPROV AL & ISSUANCE 部门签名日期起草质量控制部审核质量控制部质量保证部批准质量负责人颁发质量保证部会审/COLLECTIVE REVIEW 部门签名日期部门签名日期/ / / 分发/DISTRIBUTION Copy-1 Copy-2/ 质量保证部质量控制部/

文件名称File Name Record of Review for Limulus Reagent Sensitivity File Number REC-SOP-C003059-01 -02 生效日期Effective Date 2018-10-18 有效期至 Expiry Date 2021-10-17 变更历史/CHANGES 版本号修改简述提出人生效日期 01 由原文件RE-C003060《鲎试剂灵敏度复核记录》变更而来；文件编码改变。魏永红2017-06-01 02 增加所使用仪器及试剂的信息汪华2018-10-18 附：记录样张

REC-SOP-C003059-01-02 鲎试剂灵敏度复核记录 Record of Review for Limulus Reagent Sensitivity 起草人/日期审核人/日期批准人/日期执行日期 2018-10-18 制订依据SOP-C003059 《细菌内毒素检查法标准操作规程》 1 试剂鲎试剂批号：；规格： ml×支；生产厂家：□湛江安度斯生物有限公司；□福州新北生化工业有限公司；细菌内毒素检查用水批号：；规格： ml×支；内毒素含量： EU/ml；生产厂家：□湛江安度斯生物有限公司；□福州新北生化工业有限公司；细菌内毒素标准品批号：；规格：支/盒；效价：______EU/支；生产厂家：□中国药品生物制品检定所；□； 2 仪器试管恒温仪型号：TAL-40D 编号：□QC-187 □QC-216 □QC-217 3 操作根据鲎试剂灵敏度标示值（λ）将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器混匀15分钟，然后制成2.0λ、1.0λ、0.5λ、和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液。每稀释一步均在旋涡混合器上混匀30秒钟，按检查法项试验，每一浓度平行做4支，同时用细菌内毒素检查用水做2支阴性对照管。保温时间： ~ 浓度 2.0λ 1.0λ0.5λ0.25λ阴性对照管别管 1 管 2 管 3 管 4 〈注：结果判断以＋、－表示阳性、阴性〉如最大浓度2.0λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管均为阴性，按下式计算反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测定值（λc）。计算公式：λc＝lgˉ1（∑X／4）＝＝ X为反应终点浓度的对数值（lg）当λc在0.5λ-2λ（包括0.5λ和2λ）时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度。 4 结论：该批鲎试剂的灵敏度为 EU/ml。检验人/日期：复核人/日期：

关于鲎试剂在细菌内毒素检查法中使用的探讨

关于鲎试剂在细菌内毒素检查法中使用的探讨鲎试验因其简单﹑快速﹑灵敏﹑准确的特点，被世界各国广泛采用，中国药典和欧美药典将其定为法定的细菌内毒素检查法，大范围地替代了热源检查法。为了确保其检查结果的准确性，本文对鲎试剂的使用进行了探讨，以规范鲎试剂的正确使用。【关键词】鲎试剂;细菌内毒素检查法【Abstract】TAL reagent test because of its simple, fast and accurate characteristics was widely adopted around the world. Chinese Pharmacopoeia, European and the United States Pharmacopoeia set it as the statutory bacterial endotoxins test, replaces the pyrogen test on a large scale. In order to ensure the accuracy of test results, the main discussion of this paper is the use of tachypleus tridentatus leach(TAL),to regulate the proper use of TAL. 【Key words】TAL;bacterial endotoxins test 1 鲎试剂的分类鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的蓝色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素检测。 1.1 按原料来源分一种是由美洲鲎血液提取的称美洲鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate)，缩写为LAL，由美国生产;另一种是由东方鲎血液中提取的称东方鲎鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate)，缩写为TAL。TAL与LAL有相同的功效。 1.2 按实验方法分细菌内毒素检查法包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者又包括浊度法和显色基质法[1]。则鲎试剂可分为：凝胶法鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂和终点显色法鲎试剂。凝胶法鲎试剂通过与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂和终点显色法鲎试剂则都是定量检测内毒素的。 1.3 按使用特点分 1.3.1 普通鲎试剂灵敏度0.5～0.125EU/ml，适用于仅需要检测内毒素限量的样品。 1.3.2 高灵敏度鲎试剂灵敏度0.06～0.015 EU/ml，适用于内毒素限量较低的样品细菌内毒素检查。 1.3.3 特异性鲎试剂灵敏度0.5～0.015EU/ml，适用于成分较为复杂，会对鲎试剂产生干扰的样品[2]。 1.3.4 定量法鲎试剂最低检测限0.03～0.005 EU/ml，适用于需要对内毒素进行定量测定的样品。 2 鲎试剂在细菌内毒素检查法中的正确使用内毒素检查法结果准确与否与所用鲎试剂的灵敏度相关性很大[3]，而鲎试剂的灵敏度与它的正确使用又密切相关。所以，一定要严格执行鲎试剂的质量标准，规范使用鲎试剂。 2.1 保证所使用鲎试剂的质量鲎试剂的质量主要表现在其灵敏度、自凝时间与成胶状态三个方面：灵敏度稳定;自凝时间不低于24h[4];具有一定的缓冲能力与合适的pH;反应后即形成坚实凝胶，将成胶安瓿翻转180°而不会被破坏。而质量稍差的鲎试剂存放一定时间后(如半年)其灵敏度可能发生变化，而灵敏度的改变会使测定结果所反映的供试品中内毒素的允许限值发生变化[5]。因此，需选择具有国家颁发的批准文号,质量稳定的鲎试剂。