光合细菌HZPSB对水产养殖水质的改良和对鱼类促生长作用
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culture fields in Huzhou, Shiaoxing, Huangzhou, Jiax ing , Shanghai etc. The incidences of disease in applied field were decreased
by 25% compared with control.
第 20 卷第 6 期 2 004年11月
科技通报 BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY
Vol. 20 No. 6 Nov. 2004
光合细菌 HZPSB 对水产养殖水质的改良和 对鱼类促生长作用
沈锦玉1, 尹文林, 刘 问, 沈智华, 钱 冬, 曹 铮, 吴颖蕾
( 浙江省淡水水产研究所, 浙江 湖州 313001)
本文对光合细菌对池塘水质的影响、饲料中添 加光合细菌对血清中溶菌酶活力、对鱼生长的影响 及大田应用试验进行了研究. 现将结果报道如下:
1 材料与方法
1. 1 光合细菌规模培养 1. 1. 1 菌种来源: 类球红光合细菌 HZPSB 由本实 验室分离. 1. 1. 2 培养基及培养条件: 成分参照文献[ 13] , 其 中, 乙酸钠为 5 g/ L, 氯化铵为 1 g/ L, 七水合硫酸镁 为 0. 2 g/ L , KH2PO4 为 0. 6 g/ L, K2HPO4 为 0. 4 g/ L, 酵母膏为 0. 1 g/ L, pH 为 7. 0. 培养过程中测定 pH 的变化, 并用醋酸调节 pH. 使用 PGX 智能光照培养 箱, 光照强度为 3000 lux, 温度为 28 . 1. 1. 3 培养方法: 采用三级培养法. 一级培养采用 螺口试管或小瓶, 培养基高压灭菌, 无菌条件下接 种, 接种量为 20% . 二级培养采用 2~ 5 L 玻璃或透 明塑料瓶, 培养基需煮沸消毒, 接种量为 20% . 三级 培养采用 25~ 50 L 塑料桶或玻璃缸, 培养液用次氯 酸钠消毒 12~ 24 h, 再用硫代硫酸钠还原后接种培 养. 接种量为 20% ~ 30% . 1. 2 光合细菌对水质影响试验
growth of fish including Crucian carp and Nile tilapia were described in this paper. The results showed that HZPSB had no effect on DO and pH, could lower the NH4+ - N, NO2- - N, COD contents in pond water, raised the transparency of water, lowered
摘 要: 利用光合细菌改善池塘水质及对鱼类非特异性 免疫和 促生长 作用. 测定了 光合细 菌对池 塘水质( 溶 氧、氨 氮、亚硝态氮、COD) 、透明度、pH 及异氧细菌总数的影响; 光合 细菌添加于 饲料后对 鱼血清中 溶菌酶 活力及 鱼生长 的影 响; 同时进行了光合细菌的大田应用试验. 结 果表明: 光合 细菌对 池塘水 的溶解 氧、pH 没 有影响; 降低 水中氨 氮、亚硝态氮、有机物( COD) ; 水的透明度明显升高; 异氧细菌的总数比原来下 降 50% . 饲料中 添加光合细 菌饲喂鲫 鱼、罗非鱼, 鱼 血清中溶菌酶的活性明显高于对照组, 鱼的生长速度 高于对照组. 光合 细菌分别 在湖州、绍兴、杭州、 嘉兴、上海等进行大田应用试验, 取得了较好的应用效果. 养殖 虾蟹的发 病率有 明显的 减少, 与不使 用光合 菌的池 塘相比, 发病率降低了 25% 以上, 提高了虾蟹产量.
选择湖州市青山乡新江养殖场进行光合细菌 实验的试验点, 试验时水温 24~ 26 , 1 号成蟹池 面积 4340 m2, 深 50 cm; 2 号成蟹池面积 5340 m2, 深 60 cm. 以 2 kg/ 亩一次洒入光合细菌菌悬液, 其 活菌数为 3 109/ mL . 光合细菌施用后的一个星期 内每天分别从 1 号、2 号及对照池中用采水瓶取离 水面 30 cm 的水样 各一次, 以后隔一星期取一 次,
以溶壁微球菌( Micrococcus lysoleiticus ) ( 购自 中科 院微生物 所菌种室) 冻干粉为 底物, 按 Hult mark[ 15] 及丁 [ 16] 的方法进行. 将底物用 0. 1 mol/ L, pH 为 6. 4 的 磷 酸钾 盐 缓 冲 液 配成 底 物 悬 液 ( OD570 ! 0. 3) . 取 3m1 该悬液 50 L 待测血清于试 管中混匀, 测其 Ao 值. 然后将试液移入 37 水浴中 保温 30 min, 取出后立刻置于冰浴中 10 min 以终止 反应, 测其 A 值. 溶菌活力 U 按下式计算:
the bacteria total number by 50% . The lysozyme activities in serum of two fish fed with HZPSB supplemented groups were higher
than controls, the growth of two fish fed with HZPSB supplemented groups were faster than controls. HZPSB were applied in aqua
SHEN Jin yu, YIN Wen lin, LI U Wen, SHEN Zhi hua, QIAN Dong, CAO Zhen, WU Ying lei
( Zhejiang Institute of Freshwat er Fisheries, Huzhou 313001, China)
2 结果与分析
2. 1 光合细菌对池塘水质的影响 测定了池水的透明度、pH 及异氧细菌总数, 池
水的 pH 不受光合细菌的影响; 透明度从原来的 30 cm, 升高 到 42 cm; 异 氧 细菌 的总 数 比 原来 下 降 50% .
从上述表 1 中可看出, 光合细菌对池塘水的溶 解氧 没 有影 响, 对水 中 氨 氮、亚 硝 态 氮、有 机 物
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科技通报
第 20 卷
行光合作用的微生物. 近年来, 光合细菌在理论和 应用上都受到了广泛的重视, 一方面由于它是研究 光合作用的理想材料, 另一方面, 它又有广泛的应 用价值. 日本是最早将光合细菌应用于水产养殖的 国家, 我国的研究相对稍晚[ 1] . 光合细菌的营养非 常丰富, 不仅粗蛋白、必需氨基酸含量高, 且富含各 种 B 族维生素、辅酶 Q、叶酸、生物素及其它未知的 多种生理活性 物质, 此外 还含有丰 富的类胡 萝卜 素, 是一种营养价值高且营养成分较全的细菌, 可 作为鱼、虾、贝类及轮虫、枝角类的优质饵料, 具有 明显的增产效果[ 2~ 7] . 而且在净化水体、改善和稳 定养殖环境、提高鱼产量及防治鱼虾疾病方面起着 重要作用[ 7~ 12] .
0. 82
0. 78
0. 72
0. 67
0. 61
氨氮
0. 84
0. 81
0. 50
0. 39
0. 37
0. 32
0. 32
0. 48
0. 98
Key words: Fisheries conservation; Rhodobacter sp haer oides ;water quality improvement; growth
随着水产养殖业的发展, 养殖池底质和水质的 污染也越来越重. 过剩的投喂饵料、养殖动物本身 的排泄物等, 经微生物分解, 不仅消耗了水中大量 的氧气, 同时 产生很多 的有害物 质, 如 氨、亚 硝酸 盐、硫化氢等, 给水 产养殖业 带来巨大 的威胁. 因
Abstract: The effects of HZPSB on pond water quality including dissolved oxygen ( DO) ,
NH
+ 4
-
N,
NO2- - N,
COD,
trans
parency, pH and total bacteria number and the effects of HZPSB supplemented in feed on lysozyme activity in serum and the
0
4
24
48
72
96
6天
8天
9. 26
9. 12
9. 22
9. 04
9. 40
9. 14
9. 20
8. 97
溶氧
8. 90
9. 05
9. 26
9. 16
9. 22
9. 23
8. 47
9. 36
9. 12
9. 53
8. 97
10. 20
9. 85
9. 78
8. 86
9. 14
1. 42
1. 44
1. 40
收稿日期: 2003- 08- 01 基金项目: 中国水产科学院科研基金资助项目( 2001- 2- 8) 作者简介: 沈锦玉, 女, 1963 年生, 浙江德清人, 硕士.
此, 如何有效地调节养殖水质成为水产养殖业中一 个关键的问题.
光合细 菌( Photosynthetic Bacteria, PSB) 是一 种 不放氧光合作用的细菌总称, 能以光作为能源, 利 用自然界中有机物、硫化氢、氨等作为供氢体而进
关键词: 水产保护学; 类球红细菌; 水质改良; 生长 中图分类号: S 963. 21+ 1 文献标识码: A 文章编号: 1001- 7119( 2004) 06- 0481- 04
Improvement of Fisheries Water Quality and Fish Growth of Photosynthetic Bacteria HZPSB
时间 t/ h 1 号池 2 号池 对照池 1 号池 2 号池 对照池 1 号池 2 号池 对照池 1 号池 2 号池 对照池
表 1 使用光合细菌后池塘中溶氧、氨氮、亚硝态氮和 COD 的 变化情况
Table 1
The
change
of
DO,
NH
+ 4
-
N,
NO2-
-
N
and COD
in pond water after using HZPSB ( mg/ L)
测定水质因子. 1. 3 水质因子测定
水质因子按文献测定[ 14] . 溶氧( DO) ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ碘量法, 氨氮用纳氏试剂光度法, 亚硝酸 盐用 N ( 1 萘基) 乙二胺光度法, 化学耗氧量( COD) 用酸性高锰酸钾 法, pH 用 PHS 3C 酸度计测定, 透明度用黑白平板 法. 1. 4 溶菌酶活力测定
第 6期
沈锦玉等. 光合细菌 HZPSB 对水产养殖水质 的改良和对鱼类促生长作用
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( COD) 有降低作用, 水的透明度明显升高, 从而改 善了水质, 并且能降低异氧细菌的总数, 这对预防 病害的发生具有重要意义. 由于水体中氨氮、亚硝 态氮、COD 等含量超过一定量时对养殖动物产生毒
害作用, 并使其易受病原微生物的感染, 而光合细 菌对改善水质 起到一定的作 用, 维 持水体生 态平 衡, 使鱼类能在优良的环境中生长, 提高了成活率.
U = ( A 。- A ) / A 式中: U 为溶菌活力; A 。为反应前光密度值; A 为反 应后光密度值 1. 5 光合细菌应用试验
1. 5. 1 口服试验: 以光合细 菌浓度为 3 109/ mL, 按饲料量的 1% 和 5% 添加于鲫鱼和罗非鱼饲 料中, 每只网箱大小 2. 5 m 1. 2 m 1. 0 m, 放养 45 至 50 尾, 两个平行组, 同时设对照组. 分别在投喂 后 15、25、48 天测 定溶菌酶 活力及鱼 的平均尾 重 量. 1. 5. 2 大田泼洒试验: 我所提供光合细菌 1375 kg, 其中绍兴水技站 220 kg, 并以此为种子, 进行扩大 培养, 生产 21 t, 应用面积达 155 hm2. 使用时, 光合 细菌的活菌数为 3 109/ mL, 每次以 2 kg/ 亩洒入池 塘或隔一定时间再泼洒. 分别在湖州、绍兴、杭州、 嘉兴、上海等进行大田应用试验, 观察与记录使用 光合细菌池塘与未用池塘的发病情况及产量.