油莱中叶绿素的提取及稳定性
油菜色素的提取和分离
油菜中主要色素的提取和分离【实验目的】①通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法；②通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理；③从油菜中提取出叶绿素、胡萝卜素、叶黄素等色素并加以分离。
【实验原理】油菜中含有叶绿素、胡萝卜素、叶黄素等多种天然色素，薄层色谱常用TLC 表示，又称薄层层析，属于固-液吸附色谱。
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。
是采用硅胶、氧化铝等吸附剂铺成薄层, 利用吸附剂表面对不同组分吸附能力的差别达到分离的一种方法。
也是一种微量、简便、快速分离效果好的方法，一般用于柱色谱分离条件的探索和洗脱剂的选择；用于化合物的定性检验及用于化合物的纯度检验。
索式提取器由接收部分（圆底烧瓶）、提取部分（提取筒）、冷凝部分（冷凝管）三部分组成。
蒸馏时接收烧瓶中溶剂受热汽化后，沿蒸汽导管上升，在冷凝管内凝聚回流至提取筒内。
随溶剂不断进入提取筒并在此与物料充分接触，经过渗透、溶解、扩散的过程，溶出其中被提取成分而成为溶液。
同时溶液通过提取筒的活塞逐渐流入下面的接收烧瓶（此过程为渗漉），溶液在接收瓶中继续受热，溶剂蒸发、回流、渗漉，而溶液中的溶质（被提取部分）则留在接收瓶内。
随着提取的进行，接收瓶内溶液越来越浓，从而逐渐的将提取部分转移到接收瓶内。
本实验通过将采用索式提取器对油菜中的色素进行提取和薄层色谱法对色素进行分离，从而达到从油菜中提取出叶绿素、胡萝卜素、叶黄素等色素并加以分离的目的。
吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。
当待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。
当洗脱剂流下时由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成了不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时，已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集；或将柱吸干，挤出后按色带分离开，再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。
叶绿素的提取方法及药理作用进展
叶绿素的提取方法及药理作用进展文章阐述了叶绿素的多种提取方法，并对近年来叶绿素及其衍生物的药理作用进行了概述，为叶绿素提取以及药理作用的进一步研究提供理论基础。
标签：叶绿素；提取；药理作用叶绿素是植物进行光合作用的重要物质。
叶绿素有很多种，是以镁原子为核心的卟啉类络合物。
文章对叶绿素的提取方法、叶绿素及叶绿素衍生物的药理作用进行了概述。
1 叶绿素的提取方法1.1 有机溶剂萃取法根据对植物的处理方式，将有机溶剂萃取法分为研磨法和浸提法。
杨一思[1]等通过研磨法提取菠菜叶绿素，加入碳酸钙和石英砂充分研磨，用工业乙醇作提取剂在室温下浸泡，得到叶绿素含量为0.682mg/g。
李淤慧等[2]以苦瓜为研究对象，采用乙醇-石油醚浸提，在单因素和正交试验下，得出苦瓜叶绿素的最佳提取率为0.0215mg/g。
1.2 微波萃取法微波萃取法热效率高、易于控制、选择性好、回收率高。
邓祥元[3]等以蚕沙为研究对象，用微波萃取法提取叶绿素，得出最优条件为：微波压力0.4MPa、微波功率300W、微波时间50s时，蚕沙叶绿素的提取率为14.325mg/L。
1.3 超临界CO2萃取法超临界CO2萃取法具有萃取速度高、常温操作、传热速率快、易控制等特点。
Macias-sanchez[4]等用该方法从海藻中提取叶绿素和类胡萝卜素，得出最优条件下的萃取温度为60℃，压力是40MPa。
1.4 超声波法超声波萃取法安全性好、操作简单、萃取效率高、成本低。
刘辉[5]等以海带为研究对象，用超声波提取法提取海带叶绿素，优化工艺后叶绿素含量可达5.486mg/g。
2 叶绿素的药理作用2.1 抗癌作用叶绿素及其衍生物可以与肿瘤细胞特异性结合，具有一定的抗肿瘤作用。
施浩等[6]在接种了人胆管癌细胞的小鼠体内应用一种叶绿素衍生物（CHDM）作为光动力抗癌药物进行观察研究，应用该叶绿素衍生物光动力治疗的肿瘤坏死，肿瘤体积也相比减小。
2.2 抑菌作用有许多的临床及试管实验中都已证实叶绿素具有抗菌作用。
叶绿素的提取与稳定性研究
叶绿素的提取与稳定性研究叶绿素是植物中一种重要的色素，它拥有丰富的生物活性和营养价值。
叶绿素的提取与稳定性研究是目前生物科学和食品科学领域的热门话题之一。
在本文中，我们将探讨叶绿素的提取方法和稳定性机制。
叶绿素的提取方法有很多种，其中最常用的是有机溶剂法和超临界流体法。
有机溶剂法利用有机溶剂如乙醇、丙酮等溶解叶绿素，然后通过过滤和离心等步骤将其从植物组织中提取出来。
这种方法简单易行，但存在着有机溶剂残留的问题，对环境和人体健康有一定影响。
超临界流体法利用二氧化碳等超临界流体作为溶剂，具有绿色环保的优势，但操作条件较为苛刻，设备成本较高。
叶绿素的稳定性主要受光照、温度、pH值和氧气等环境因素的影响。
光照会导致叶绿素的光解和氧化，从而降低其稳定性。
因此，在叶绿素的提取和储存过程中需要避免暴露在强烈光线下，可以采用遮光瓶或保护色素的添加剂来保护其稳定性。
温度的升高也会加速叶绿素的降解，所以储存过程中需要保持低温。
此外，酸碱度的变化和氧气的存在也会对叶绿素的稳定性造成影响，因此，在提取和使用过程中要注意pH值的控制和使用抗氧化剂。
除了环境因素的影响外，叶绿素的结构和组成也与其稳定性密切相关。
叶绿素分子中含有镁离子，这种离子对叶绿素的稳定性有着重要的作用。
当镁离子被其他离子如钙离子取代时，会导致叶绿素的稳定性下降。
此外，叶绿素分子中的叶酸和硬脂酸等辅助物质也能影响叶绿素的稳定性，它们可以通过与叶绿素分子形成络合物来增强叶绿素的稳定性。
近年来，人们对叶绿素的提取和稳定性研究不仅仅局限于植物领域，还开始将其应用于食品和医药领域。
叶绿素作为一种天然的色素和抗氧化剂，被广泛应用于食品添加剂和保健品中。
而且，一些研究表明叶绿素具有抗菌、抗肿瘤和抗炎等多种生物活性，有望成为新一代抗菌药物和抗肿瘤药物的候选物质。
总之，叶绿素的提取与稳定性研究是目前科学界重视的课题之一。
通过改进提取方法和探究稳定性机制，可以更好地保护叶绿素的结构和功能，为其广泛应用于食品、医药等领域提供了理论和技术基础。
不同材料叶绿素提取条件探究
不同材料叶绿素提取条件探究徐澜;许冰霞;张珺;王创云【摘要】以菠菜、油菜、小麦、冬青叶为实验材料,应用分光光度法测定叶绿素提取量,并采用正交法进行条件优化.结果表明:不同因素对不同植物材料叶绿素提取量的影响不同.小麦、冬青叶绿素的提取量最高时,其处理温度均为40 ℃,提取液均为丙酮:乙醇=1:1,处理时间分别为36 h、12 h;叶绿素的提取量最高时,菠菜的处理温度为60 ℃,处理时间为1.5 h,提取液为乙醇;而油菜处理温度为50 ℃,处理时间为4.5 h,提取液为丙酮:乙醇=1:2.波菜可作为此实验项目中较适合的教学材料.%The extraction of chlorophyll was guided by spectrophotography, and the extraction conditions were optimized by orthogonal experiment with spinach, rape, wheat and holly leaves as experimental materials.The results showed that the influence of different factors on the chlorophyll extraction of different plant materials was different.The highest extraction of chlorophyll in wheat and holly leaves was as follows: the extraction temperature was 40 ℃, the extract was acetone:ethanol=1:1, the extraction time was 36 h and 12 h, respectively.The highest extraction of chlorophyll in spinach leaves was as follows: the extraction temperature was 60 ℃, the extraction time was 1.5 h, the extract was ethanol.The highest extraction of chlorophyll in rape leaves was as follows: the extraction temperature was 50 ℃, the extraction time was 4.5 h, the extract wasacetone:ethanol=1:2.As the result, spinach was the suitable material in the experimental item.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)009【总页数】4页(P102-105)【关键词】叶绿素;正交优化;提取条件;实验教学【作者】徐澜;许冰霞;张珺;王创云【作者单位】忻州师范学院生物系,山西忻州 034000;忻州师范学院生物系,山西忻州 034000;忻州师范学院生物系,山西忻州 034000;山西省农业科学院作物研究所,山西太原 030031【正文语种】中文【中图分类】S311“叶绿素提取及其含量测定”是生物科学专业本科生的专业必修课《植物生理学实验》中开设的一项重要实验项目，也是从事植物生理学的研究者经常遇到的科研内容之一。
超声波辅助提取油菜花色素稳定性研究
油菜 花属 于花 卉类 蔬 菜 ，为 一 年 生 或越 年 生 草本 植 物 ，它 含 有 丰 富 的 蛋 白 质 、脂 肪 、维 生
理 作用 和保健 功能
。
天然 色 素存在 于 植 物组 织 细 胞 内 ，细胞 壁 和
细 胞膜 的破 碎 程度 直 接 影 响着 色 素提 取 效 率 。
油菜花色素稳 定性 的影 响 ，结果表 明 ：油菜花色素对 ｐ Ｈ、氧化剂 、还原剂 和金属离子稳定性较好 ，且表现 出 不同的增色效果 ；对热处理 和光 照反应 比较敏感 。 关键词 ：油菜花 ；超声波辅助提取 ；色素 ；稳定性 中图分类号 ：Ｔ ２ ２ ３ Ｓ ０ ． 文献标 识码 ：Ａ 文章编号 ：１０ ２ １ （０ １ ０ ０ ３ ０ ０６— ５ ３ ２ １ ）５— １０— ４
般 的机械破 碎法 易 造成 提 取物 结 构 和性 质 的改
变 ，而 常规 的色 素提 取 法存 在 着 流 程 复杂 、时 间 长 、能 耗大 等缺 点 ，不 利 于提 高 生产 效 率 。超 声 波技 术在 固液 萃取 过 程 中，提 高 了细 胞 内 细胞 膜 的通 透 性 Ｊ ，有 利 于 细胞 内 有 效 成 分 的 提 取 ， 提取 率高 于常规 提取 法 。本 文 运 用超 声 波 辅 助技 术提 取油菜 花色 素 ，研 究 了 ｐ Ｈ、光 照 、温度 、氧 化剂 、还原 剂 、金属 离子对 油菜 花色素 稳定性 的
一
素 、碳水 化合 物 、氨基 酸 和 钙 、铁 、锌 、硒 等 微 量元 素 ｌ 。油菜 花 中还 含有 大 量 的 色 素 。从广 泛 应 用 于 食 品 、日化 、医药等行 业 。 随着 医 学 毒 理学 和生 物 学 试验 工作 的进展 ，陆续 发 现 化学 合 成 色 素 中不
紫红叶油菜叶片花青素的含量变化及其稳定性
紫红叶油菜叶片花青素的含量变化及其稳定性唐容;黄泽素;代文东;李德珍;王少铭【摘要】为紫红叶甘蓝型油菜花青素在食品与保健品生产应用上提供参考,在不同温度、遮光条件下研究紫红叶甘蓝型油菜叶片的花青素含量变化.结果表明:田间的紫红叶油菜花青素含量依次为苗期＞抽苔期＞花期,苗期花青素含量达4.90[(A530-0.25×A657)/g];在低温处理和遮光处理的条件下花青素的含量增加,在2℃处理12 d花青素含量最高,达7.49[(A530-0.25×A657)/g].说明,紫红叶甘蓝型油菜花青素可增加油菜的抗逆性;同时低温处理可提高紫红叶甘蓝型油菜的花青素含量.紫红叶油菜的花青素提取物在60、80、90℃煮1h,花青素降解程度较小,说明,紫红叶甘蓝型油菜的花青素的稳定性较好;当在沸水煮1h后,紫红叶甘蓝型油菜的花青素逐渐降解.紫红叶油菜花青素在pH 2.0、pH 3.6和pH 7.4的环境中较稳定.说明,紫红叶油菜的花青素有在食品生产中应用的特质.%The variation of leaf anthocyanin content in rapeseed with purple-red leaves was analyzed under different temperature and shading condition to provide a reference for application of anthocyanin extracted from rapeseed with purple-red leaves in production of food and health products.Results:The anthocyanin content in rapeseed with purple-red leaves in field at seedling stage is the highest,followed by at bolting stage and at flowering stage and the anthocyanin content in rapeseed with purple-red leaves reaches 4.90 [(A530-0.25 × A657)/g] at seedling stage.Low temperature and shading treatment can increase anthocyanin content in rapeseed with purple-red leaves and the anthocyanin content in rapeseed with purple-red leaves at 2 ℃ for 12 days is the maximum 7.49 [(A530-0.25 × A657)/g].Th eanthocyanin in rapeseed with purple-red leaves can increase its stress resistance and low temperature can improve anthocyanin content in rapeseed with purple-red leaves at the same time.The degradation degree of anthocyanin is less after anthocyanin extract from rapeseed with purple-red leaves stew at 60,80 and 90 ℃ for 1 hour,respectively,which indicates the anthocyanin in rapeseed with purple-red leaves has a good stability.The anthocyanin in rapeseed with purple-red leaves degrades gradually after anthocyanin extract from rapeseed with purple-red leaves boils at 100 ℃ for 1 hour.The anthocyanin in rapeseed with purple-red leaves is stable at pH 2.0,pH 3.6 and pH 7.4,which indicates the anthocyanin in rapeseed with purple-red leaves has the applied characteristics in food production.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2017(030)002【总页数】6页(P285-290)【关键词】油菜;紫红叶;花青素;pH;温度;稳定性【作者】唐容;黄泽素;代文东;李德珍;王少铭【作者单位】贵州省油料研究所,贵州贵阳550006;贵州省油料研究所,贵州贵阳550006;贵州省油料研究所,贵州贵阳550006;贵州省油料研究所,贵州贵阳550006;贵州省油料研究所,贵州贵阳550006【正文语种】中文【中图分类】S565.4紫红叶甘蓝型油菜是甘蓝型油菜(Brassica napus L.)与红菜薹(B.campestrisL.ssp.Chinensis L.var.utilis Tsen et Lee.2n=2 X=20)种间远缘杂交，从而将红菜薹紫红叶色基因导入油菜品种中，通过连续定向培育而成的甘蓝型油菜特殊标记基因材料［1］。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较1. 引言1.1 背景介绍叶绿素不仅可以提高人体的免疫力，促进新陈代谢，还具有抗氧化、抗衰老等功效。
对于叶绿素的提取方法进行研究和优化具有重要意义。
不同的叶绿素提取方法会对提取效率、纯度、成本等方面产生影响，因此如何选择最适合的方法来提取叶绿素成为一个关键问题。
通过比较不同的叶绿素提取方法，可以为提高叶绿素的提取效率和质量提供科学依据，促进叶绿素在食品、医药等领域的应用。
1.2 研究意义叶绿素是植物中极为重要的生物色素，它参与光合作用过程中的光能吸收和转化，是维持植物生长发育的关键因素。
叶绿素不仅对植物的光合作用起着至关重要的作用，而且还具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生理功能。
对叶绿素的提取方法进行比较和研究具有重要的理论和实际意义。
通过比较不同的叶绿素提取方法，可以找到最适合不同植物种类和不同目的的提取方法，提高叶绿素的提取效率和纯度，为叶绿素的研究和应用打下基础。
了解各种叶绿素提取方法的优缺点，可以为优化提取方法提供参考，并且在实际生产中选择最适合的叶绿素提取方法，提高生产效率和经济效益。
研究叶绿素提取方法的影响因素和优化探讨，有助于深入理解叶绿素的结构与功能，推动叶绿素在医药、食品和农业等领域的应用，对促进人类健康和农业生产具有重要意义。
本研究旨在比较不同叶绿素提取方法的优缺点，探讨最佳叶绿素提取方法，为叶绿素的研究和应用提供理论和实践指导。
1.3 研究目的本研究旨在探讨不同的蔬菜叶绿素提取方法，并比较它们的优缺点，从而为寻找最佳叶绿素提取方法提供参考。
叶绿素是一种重要的植物色素，具有丰富的营养价值和药用价值。
通过比较不同的叶绿素提取方法，可以为我们选择最适合的提取方法提供科学依据，并进一步优化提取过程，提高叶绿素的提取率和纯度。
研究叶绿素提取方法的影响因素，可以帮助我们更好地理解提取过程中的关键因素，为优化提取方法提供理论基础。
通过本研究的开展，我们希望能够为叶绿素的提取及应用提供更多的实践经验和科学依据，推动叶绿素在食品、医药等领域的应用和发展。
叶绿素稳定性实验实训报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的提取方法及原理。
2. 掌握叶绿素稳定性的影响因素，如光、温度、pH值等。
3. 分析不同处理条件下叶绿素的稳定性变化，为果蔬加工、食品添加剂等领域提供理论依据。
二、实验原理叶绿素是植物体内重要的光合色素，广泛存在于植物叶片、果实等部位。
叶绿素具有多种稳定性影响因素，如光、温度、pH值等。
本实验通过提取叶绿素，研究不同处理条件下叶绿素的稳定性变化，为实际应用提供参考。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜叶、碳酸钙、乙醇、乙醚、中性氧化铝、pH试纸等。
2. 实验仪器：研钵、漏斗、三角瓶、烧杯、玻璃棒、滤纸、剪刀、脱脂棉、纱布、电热恒温水浴锅、pH计等。
四、实验步骤1. 叶绿素提取（1）称取新鲜菠菜叶30g，用剪刀剪碎，放入研钵中。
（2）加入少量碳酸钙，防止研磨过程中叶绿素破坏。
（3）研磨至烂，将研磨液转入三角瓶中。
（4）加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
（5）浸泡10分钟，过滤，得到叶绿素粗提液。
2. 叶绿素稳定性实验（1）将叶绿素粗提液分为若干份，分别加入不同pH值的缓冲溶液，调节pH值。
（2）将处理后的叶绿素溶液放入电热恒温水浴锅中，分别在不同温度下处理一定时间。
（3）观察并记录不同处理条件下叶绿素溶液的颜色变化，以及pH值、温度对叶绿素稳定性的影响。
五、实验结果与分析1. pH值对叶绿素稳定性的影响实验结果表明，当pH值小于6.0时，叶绿素会由于酸性pH值而被破坏，颜色逐渐变浅；当pH值大于6.0时，叶绿素相对稳定，颜色变化不大。
2. 温度对叶绿素稳定性的影响实验结果表明，当温度升高时，叶绿素稳定性下降，颜色逐渐变浅；当温度降低时，叶绿素稳定性相对较好，颜色变化不大。
3. 光照对叶绿素稳定性的影响实验结果表明，在光照条件下，叶绿素稳定性较差，颜色逐渐变浅；在黑暗条件下，叶绿素相对稳定，颜色变化不大。
六、实验结论1. pH值、温度、光照是影响叶绿素稳定性的主要因素。
油菜素提取与分离技术的研究
油菜素提取与分离技术的研究油菜素是一种天然的二苯并呋喃化合物，其拥有多种生物活性，如抑制癌细胞生长、抗氧化、抗炎、降低血脂等功效，因此备受关注。
而油菜素在油菜籽中的含量相对较低，需要经过提取和分离纯化才能发挥其药用价值。
因此，油菜素提取与分离技术的研究具有重要的意义。
1. 油菜素的提取方法目前，油菜素的提取方法主要包括常规溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法和超临界流体萃取法等。
常规溶剂提取法是一种传统的提取方法，可采用各种有机溶剂如乙醇、丙酮、甲醇等。
虽然该方法操作简单，但存在一定的局限性，如溶剂对环境的影响和提取率较低等。
超声波提取法则是利用超声波的机械作用和热作用促进物质的溶出，提高提取效率。
其特点是高效、快速、节能，但该方法的操作条件和设备要求较高。
而微波提取法是利用微波的热效应、介电效应和机械效应把固体中的活性成分转移至溶液中。
该方法具有速度快、效率高和操作简便的优点，但可能会破坏物质的结构和活性。
超临界流体萃取法则是将提取剂作为超临界流体使用，在黏度较小、扩散快、具有较高渗透性的条件下进行提取，具有不使用有机溶剂、绿色环保等特点。
2. 油菜素的分离纯化方法油菜素的分离纯化方法主要包括硅胶柱层析、逆流色谱、凝胶过滤层析、高效液相色谱(HPLC)等。
硅胶柱层析法是一种常用的分离纯化方法，其原理是根据物质在不同性质的吸附剂上吸附和洗脱的性质差异所分离。
由于硅胶具有广泛的可选性和十分精细的分离效果，因此硅胶柱层析法在生物活性物质的需求中占有重要地位。
逆流色谱则是利用别相液相色谱的分离流程，把需要分离的物质通过相质反向的色谱柱，和动相向相反地流动，从而达到有效分离的目的。
凝胶过滤层析法是利用分子的大小和构形的特异性质，基于分子在凝胶中的渗透特性而进行分离的一种方法，适用于非常具有选择性的分离和纯化。
HPLC是指在高压下经过填料的液相分离技术，其在分离和纯化天然产物时的分辨率和重复性均具有优势，同样适用于对油菜素的分离纯化。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是一种绿色植物色素，是植物中进行光合作用的关键物质。
叶绿素具有很高的营养价值和医疗价值，被广泛用于食品添加剂、医药、保健品等领域。
提取蔬菜叶绿素的方法及其效果对于相关领域的研究和应用具有重要意义。
本文将比较不同的蔬菜叶绿素提取方法，分析其优缺点，探讨其适用范围及应用前景。
一、酒精提取法酒精提取是一种常见的蔬菜叶绿素提取方法。
其步骤主要包括采集新鲜蔬菜，去除杂质，切碎成细碎颗粒，加入适量的95%酒精，浸泡一段时间，然后过滤、蒸发、干燥即可得到叶绿素。
酒精提取法的优点在于操作简单、成本低廉、回收率高。
其适用范围广，适用于各类蔬菜叶绿素的提取。
酒精提取得到的叶绿素纯度较高，有较好的稳定性和溶解性。
酒精提取法也存在一些缺点，比如易受氧化、不易保存，对原料的选择有一定要求，不适用于所有类型的蔬菜叶绿素提取。
二、超声波提取法超声波提取法是一种新兴的蔬菜叶绿素提取方法。
其原理是利用超声波的机械作用、热效应、化学效应等多种效应对蔬菜细胞壁进行破碎，加速溶剂对蔬菜叶绿素的渗透和提取。
超声波提取法的优点在于提取效率高、时间短、操作简便、无需添加任何化学药剂，可以避免破坏蔬菜叶绿素的天然结构和性质。
超声波提取还可以避免对环境的污染，对于一些对环境友好的产品具有一定的竞争优势。
超声波提取法也存在一些局限性，比如设备成本相对较高，因此适用范围受到一定限制。
超声波提取也可能对植物细胞造成一定的损伤，进而影响提取得到的叶绿素的纯度和品质。
三、超临界流体提取法超临界流体提取法利用超临界流体对蔬菜叶绿素进行提取。
超临界流体具有高扩散性、低粘度、可调密度等优点，对于蔬菜叶绿素有较好的溶解能力和选择性，因此被广泛应用于蔬菜叶绿素的提取。
超临界流体提取法的优点在于提取效率高、溶剂用量小、温和条件下提取、对提取物几乎没有残留，避免了传统有机溶剂法中对蔬菜叶绿素的破坏。
超临界流体提取法也有利于对蔬菜叶绿素的纯化和分离。
提取叶绿体色素的方法
提取叶绿体色素的方法解析：提取叶绿体色素的方法一、准备工具大试管、台秤、研钵、剪刀、量筒、漏斗、分液漏斗、软术寒、烧杯、滤纸、小试管、分兆计、酒精灯、吸耳球、移液管、电吹风、毛细管95%乙醇、CaCO3、石英砂、汽油、苯、KOH、甲醇、乙酸铜、盐酸二、步骤1. 称取新鲜去大叶脉的菠菜叶片，或芹菜、油菜等其他植物的新鲜绿叶5 g，剪碎放人研钵中，加入乙醇5 ml、少许CaCO3，中和细胞中的酸防止Mg，从叶绿素中心释放，和石英砂,研磨成勻浆,再加入适量的乙醇20~25 ml，然后用漏斗过滤，即得叶绿体色素液。
2. 若用千拒肥排粉时，则称取1g 干粉放人小烧杯中，加95%乙醇20~30 ml 提取,并随时搅动。
待乙醇呈深绿英露色时,滤出浸提液备用。
取准备好的滤纸条(2cmX20cm)，将其一端剪去两侧，中间留一个长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条。
3. 用毛细管吸取叶绿体色素提取液点于滤纸的下端窄条的上方中央，注意一次所点溶液不可过多，如色素过淡,用电吹风吹千后再重复1~2次。
4. 在大试管中加入汽油5~10ml，或其他层析液，如石油醚:丙酮苯体积比为20 :2 :1的混合溶液，然后将滤纸条上端固定在软术塞上，插人试管内，使窄条进入溶液中，色素点要略高于液面，滤纸条边缘不可碰到试管壁，盖紧软木塞,直立于阴暗处，或试管外套一黑纸套。
5. 经0.5~1h后，观察分离后色素带的分布。
最上端橙黄色的是胡萝卜素,其次为叶黄素，再下面蓝绿色为Chl a,最后的黄绿色为Chl b。
6. 取叶绿体色素提取液少许于1支试管中，用反射光和透射光观察提取液的颜色有何不同，反射光下观察到的提取液颜色即为叶绿素产生的荧光颜色。
取叶绿体色素提取液少许，分装于两支试管，光对叶绿素的破坏作用中，一支放在黑暗处(或用黑纸套包裹)，另一支放在强光下(阳光下)，经过2~3h后，观察两支试管中溶液的颜狠敏色有何不同。
油菜中主要色素的提取和分离1
油菜中主要色素的提取和分离1、实验目的1）通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法；2）通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理；3）从油菜中提取出叶绿素、胡萝卜素、叶黄素等色素并加以分离。
2、实验原理油菜，又叫油白菜，苦菜，是十字花科植物油菜的嫩茎叶，原产我国，颜色深绿，属十字花科白菜变种。
油菜中含有蛋白质、脂肪、维生素、尼克酸等营养成分，还含有胡萝卜素、叶绿素、叶黄素等色素。
叶绿素a和叶绿素b为吡咯衍生物与金属镁的配合物；胡萝卜素是一种橙色天然色素，属于四萜类，为一长链共轭多烯，有α、β、γ三种异构体，其中，β异构体含量最多。
叶黄素为一种黄色色素，与叶绿素同存在于植物体中，是胡萝卜素的羟基衍生物，较易溶于乙醇，在乙醚中溶解度较小。
根据它们的化学特性，可将它们从油菜叶片中通过连续回流提取出来，并通过薄层色谱方法将它们分离开来。
胡萝卜素、叶绿素、叶黄素的结构式如图1：索氏提取器如图2，其工作原理是：完成一次溶剂提取后，溶液被加热，挥发的溶剂经过冷凝管冷凝，重新进入提取的环境，开始新的一次提取过程；如此循环下去，直至停止提取。
这比直接用溶剂回流提取省溶剂，也剩下了很多后期图2氏提取器样品袋去除溶剂的时间；但是要求提取物有比较好的稳定性。
薄层层析是快速分离和定性分析微量物质的一种极为重要的实验技术，具有设备简单、操作方便而快速的特点。
它是将固定相支持物均匀地铺在玻片上制成薄层板，将样品溶液点加在起点处，置于层析容器中用合适的溶剂展开而达到分离的目的。
用此法分离时几乎不受温度的影响，可采用腐蚀性显色剂，而且可在高温下显色，特别适用于挥发性小或在较高温度下易发生反应的物质，同时也常用来跟踪有机反应或监测有机反应完成的程度。
柱色谱（柱上层析）常用的有吸附色谱和分配色谱两类。
吸附色谱常用氧化铝和硅胶作固定相；而分配色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收较大量的液体作固定相，而支持剂本身不起分离作用。
油菜叶绿素提取方法的研究
油菜叶绿素提取方法的研究
刘绚霞;董振生;刘创社;董军刚;李红兵
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2004(20)4
【摘要】采用丙酮研磨法和8种提取液直接浸泡提取油菜叶绿素。
结果表明,以丙酮和乙醇的2:1混合液提取效果较好,操作简单、提取完全、误差小、效率高。
尤其适合批量样品分析。
【总页数】2页(P62-63)
【关键词】油菜;叶绿素;提取方法;丙酮研磨法
【作者】刘绚霞;董振生;刘创社;董军刚;李红兵
【作者单位】西北农林科技大学农学院
【正文语种】中文
【中图分类】S565.4
【相关文献】
1.油茶叶绿素提取方法的比较研究 [J], 程贵文;龚洪恩;颜送宝;陈传松;罗嘉东;袁小平;吴建国
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承杭;唐延林
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蔬菜叶绿素不同提取方法的比较
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是一种重要的植物色素，具有很高的营养价值和保健功能。
提取蔬菜叶绿素可以通过多种方法进行，以下是对不同提取方法进行比较的详细介绍。
最常用的提取方法是溶剂萃取法。
该方法使用有机溶剂（如乙醇、二氯甲烷等）将蔬菜中的叶绿素溶解在溶剂中，再通过蒸发和冷冻等步骤将叶绿素制成粉末。
这种方法提取效果较好，可以获得较高纯度的叶绿素，并且提取过程简单易行。
溶剂萃取法的缺点是需要使用有毒有害的有机溶剂，有一定的安全风险，并且提取过程中易发生溶剂挥发和物质氧化等问题。
超声波辅助提取法也是一种常用的提取方法。
该方法利用超声波的机械振动作用，加快叶绿素与溶剂之间的物质传递速度，促进提取过程。
与传统的溶剂萃取法相比，超声波辅助提取法能够更快更高效地提取叶绿素，并且在操作过程中不需要加热，不易导致溶剂挥发和物质氧化。
超声波辅助提取法的设备成本较高，操作较为复杂，需要对超声波参数进行调节，以及对时间和温度等因素进行控制。
超临界流体萃取法是一种新兴的提取方法。
该方法利用超临界流体（如二氧化碳）的高溶解度和低粘度特性，将叶绿素溶解在超临界流体中。
与传统的溶剂萃取法相比，超临界流体萃取法具有溶剂无毒无害、可重复使用、绿色环保等优点，并且提取效果较好。
超临界流体萃取法的设备成本较高，操作较为复杂，需要对压力和温度等因素进行控制。
不同的提取方法各有优缺点，可根据实际需求选择适合的方法。
溶剂萃取法操作简单，但有安全风险；超声波辅助提取法和微波辅助提取法提取效率较高，但设备成本较高；超临界流体萃取法环保安全，但设备复杂。
未来的研究可以进一步探索提取方法的改进，以提高叶绿素的提取效果和经济效益。
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较
蔬菜叶绿素不同提取方法的比较蔬菜叶绿素是一种重要的天然色素，具有保健和治疗作用。
提取蔬菜叶绿素可以采用不同的方法，每种方法都有其优缺点。
本文将对几种常见的蔬菜叶绿素提取方法进行比较分析。
1. 传统提取方法：传统提取方法是最常用的蔬菜叶绿素提取方法之一。
该方法主要通过机械破碎、浸泡和过滤等步骤来提取叶绿素。
优点是操作简单，成本较低，适用范围广。
传统提取方法提取效率低，不易控制提取过程，有些蔬菜中的叶绿素含量较低，提取量较少。
2. 超声波辅助提取方法：超声波辅助提取方法是利用超声波的作用对蔬菜进行辅助提取。
超声波能够破坏细胞壁，促进叶绿素的释放。
这种方法操作简便，提取效率较高，提取时间较短。
超声波辅助提取方法需要使用专用设备，成本较高，对仪器的要求较高。
3. 超临界流体提取方法：超临界流体提取方法是利用超临界流体的特殊性质对蔬菜进行提取。
超临界流体是介于气体和液体之间的一种状态，在此状态下，其密度和溶解能力都较大。
通过调整超临界流体的温度和压力等参数，可以实现对叶绿素的选择性提取。
这种方法提取效率高，提取速度快，提取物中有害物质较少。
超临界流体设备成本高，操作过程对设备的稳定性要求高。
4. 液液萃取法：液液萃取法是将蔬菜样品与有机溶剂相混合，并通过搅拌或振荡等方式，使叶绿素从水相转移到有机相的一种提取方法。
这种方法操作简单，不需要特殊设备，提取效率较高。
有机溶剂对环境污染较大，需要注意处理废液的问题。
通过对不同提取方法的比较，可以看出每种方法都有其优点和局限性。
综合考虑提取效率、成本、操作简易度、对设备的要求以及环境影响等因素，选择适合自己实验条件和目的的提取方法是非常重要的。
可以根据具体的实验需求，结合不同的方法进行优化和改进，以提高叶绿素的提取效率和纯度。
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溶液 。 取 １ 吸 ｍＬ浓 缩液 于 ５ ０ｍＬ的容量 瓶 中 ， 上述 配制 的 Ｈ Ｏ 溶液 分别 定 容 。 置 ３ ｎ 用 ２２ 放 ０ｍｉ 后 ，在 最佳波 长 处 分别测 定 吸光度 。
０８ ．
０６ ．
０４ ．
０２ ．
０
无水 乙醇 ９ ％Ｚ 醇 ９ ％２ 醇 ８ ％乙醇 ８ ％乙醇 ８ ％Ｚ 醇 无水 丙酮 ５ ， ０ － ， ８ ５ ０ ￣
提取 剂
图２ 不 同提 取 剂对 叶绿 素 的 提 取 效果 的 影 响
２２２ 提 取 温度 ．．
选 择料 液 比为 １：１ （／ ，无 水 乙醇溶 液 为提取 剂 ，提取 ２ｈ ０ ｇｍＬ） ，分 别选 择温 度 为 ４ ０ ℃、５ ￣ ０Ｃ、６ ￣ ０Ｃ、７ ＂ ０Ｃ、８ ￣ ０Ｃ，测 定溶 液 的吸光 度 ，实 验结 果如 图 ３所 示 。 由图 ３可 知 ，当 温度 为 ４ ￣７ ￣ － ０ ０Ｃｆ ，吸光 度值 随温 度 升 高呈上 升趋 势 ，其它 条件 相 同，在 ７ ℃时有 最大 吸 ｉ ｖ ｊ ０
Ｏ５ ．
０４ ．５
Ｏ４ ．
Ｏ－５ ３
２
３
４
５
６
７
３
５
７
９
１ １
ｔ／ ’ｈ
ｐＨ
图５ 提 取时间对叶绿素提取效果 的影响
图６ Ｈ￣ 叶绿素提取效果的影响 ｐ ， － ｉ
２ ． ｐ ． ５ Ｈ值 ２
图 ４ 料 液 比对 叶 绿 素 提 取 效 果 的影 响
２２ ３ 料 液 比 ．＿
改变 料液 比，７ ￣ 振荡 提取 ２ ｈ ０Ｃ下 ，过滤 、静 置 ，取 １ｍ Ｌ上 清 液 ，用无 水 乙醇 定容 至
５ Ｌ，测 定其 在 ６０ｎ 处 的吸光度 ，实验 结 果如 图 ４所示 。由图 ４可 知 ，当物 料 比为 １： ０ｍ ６ ｍ ｍ
５ ４
５
１ （／ ０ ｇｍＬ）时 ，对 应 于吸 收波 峰 的 吸光度 最 大 值 ，吸 光度 最 大 ， 即提取 效 果相 比于其 它 物 料 比条件 下 更好 。
２２ ．． 浸提 时 间 ４
选择 料 液 比为 １：１ ｇｍＬ） ０（ ／ ，无水 乙醇 为提取 剂 ，在 ７ ￣ 振荡 ，分 别选择 浸 提 时间 ０Ｃ下
１ ． 叶绿 素稳 定 性研 究 ．５ ２
１２５１ 耐酸 、碱 性试 验 ．．．
吸取 一定 量 的 ＨＣ 和 Ｎａ Ｉ ＯＨ用 蒸馏 水稀 释 ，用酸 度计 监控 ｐ Ｈ值 ，并从 １ １ ～ ４分别 调节
溶 液 的酸 碱度 ，配制 ７份 。按最 佳提 取条 件 提取 色素 ，吸取 １ ｍＬ浓缩 液 于 ５ ０ ｍＬ的 容量瓶 中 ，一 式 ８ ，其 中 ７份用 酸 或碱 溶液 配制 的溶 液 分别 定容 。一份 用 蒸馏水 定 容作 为参 比溶 份
８％乙醇 、无水 丙酮 等 为提 取液 ，４ ￣ ０ ０Ｃ下振 荡提 取 ２ｈ ，过滤 、静 置 ，取 １ ｍＬ上 清液 ，定容 至 ５ ０ｍＬ，测 定其 在 ６０ｎ 下 的吸 光度 。实 验 结果如 图 ２所示 。 由图 ２可知 ，在 各种 提取 ６ ｍ 液 中，无 水 乙醇在 相 同条件 下 的吸 光度 值最 大 ，故无 水 乙醇对 叶绿 素 的提取 效果 最优 。
５ ０
广 州 化 学
第３ ６卷
光 度值 ，即 ７ ￣ ０Ｃ提取 效 果较前 面 温度 更好 。温 度 高于 ８ ￣ 乙醇挥 发较 多 。 ０Ｃ时
Ｏ
８
Ｏ
６
Ｏ
Ｏ
２
４
４ ０
５ Ｏ
６ ０
７ ０
ｔ ℃ ／
料液 比／ ｇ Ｅ （・ ） ｍ
图 ３ 温 度 对 叶 绿 素 提 取 效 果 的影 响
料 液 比 １： ０的条 件 下进行 萃 取对 比实验 ，２ １ ｈ后检 测其 吸 光度 ，记 录数 据 并做 图 。 １ ． 最佳 提取 条 件 的确 定 ．４ ２
准 确称 取适 量 样 品，对 最佳 提取 剂分 别进 行提 取 剂浓 度 ，提取 料液 比，浸提 时间 ，提 取 液ｐ Ｈ，提取温 度 等单 因子 试验 ，在 此 基础 上进 行 正交 试验 ，以确 定最佳 提取 条件 。
有 限公 司 ）；Ｐ 一Ｃ 型精 密酸 度 计 （ ＨＳ３ 上海 虹益 仪器 仪表 有 限公 司 ）；ＪＴ２型天 平 （ 熟 Ｐ一 常
市衡 器厂 ）。 １ ． 实验方 法 ２
ｉ ． 提取 工艺 流程 ．１ ２
清 洗 一 量取 一 研磨 一 浸提 一【 。 ２ 。但是 ，绿色蔬菜在加工和储藏过程中，由于叶绿素极易降解，因而导致 ４
蔬 菜 品质 迅 速下 降 。在 蔬菜 制汁 的加 工 、包 装 、贮藏 过程 中，最 常接触 的是光 、温 度 、氧 化
剂 、ｐ 值等 因素ｐ … Ｈ 。
传 统制 备 天然食 用 色素 叶绿 素 的主要 原料 是蚕 砂 ，但 蚕砂 生成 期长 、资源 有 限 ，不 能满 足 人们 对 叶绿 素 日益 增 长 的需求 ；因此从 绿色 植物 中提 取天然 叶 绿素 是 目前开 发 的热 点 。大
故最 佳 波长 为 ６０ｎ 时 ，吸光度 值 最大 。 ６ ｍ
２２ 最佳 提 取工 艺条 件 ．
２２１ 提 取 剂 ．．
／ｎｎ ｌ
图 １ 不 同 波 长下 叶 绿 素 的吸 光度
准 确 称取 样 品 １ ，以 ｌ ． ｇ Ｏｏ ｍＬ无水 乙醇、９ ％乙醇 、９ ％乙醇、８ ％乙醇 、８ ％７， 、 ｏ ５ ０ ８ ５ 醇
自然 的绿色 植物 极其 丰 富 ， 目前 已经 研 究 的原料 有 ：菠菜 、空心 菜 、姜 叶、葛笋 叶 、仙人 掌
叶 、毛竹 叶 、香蕉 叶 、大 叶黄 杨 、桃 叶 、海 篷 子 、银 杏 叶、牡 丹 叶 、答 竹 叶、茶 叶等 ，其 品 种达 ４ ０种 以上 …Ｊ 。油菜 ，又 叫油 白菜 ，苦 菜 ，颜色 深绿 ，属 十字 花科 白菜 变种 。南 北广 为
２ 、４ 、６ 、３ 、５ 、７ｈ ，测 定溶 液 的吸 光度 ，实 验 结果如 图 ５所 示 。 由图 ５可 知 ，在一 定范 围
内吸光度 随时 间增加 呈下 降趋 势 ，时 间为 ３ ｈ时 吸光 度最 大 ，即提 取效 果 最佳 。７ｈ时 间点
波动 较 大 ，故舍 弃不 考虑 。
液 。放置 ３ ｉ ０ ｎ后，在最佳波长处测其溶液的吸光度。 ｍ
１ ．． 氧 化剂 的影 响试 验 ．５２ ２ 量 取质 量 分数 为 ３％的过氧 化氢 （ Ｏ ）１ ，用 蒸馏 水 稀释 至 １０ｇ ０ Ｈ２ ２ ｇ ，即可得 到质 量分 ５ 数 为 ０２ ． ％的 Ｈ２ 溶 液 ；量 取质 量分 数 为 ３ ％的 Ｈ ０２ ，用蒸 馏水 稀释 至 １０ｇ Ｏ２ ０ ２ ｇ ２ ５ ，即可得
的 增 加 其 分 解 程 度 不 断 加 大 ，且 其 光 稳 定 性 降低 。 关 键 词 ：叶 绿 素 ；油 菜 ；吸 光 度 ：提 取 中图分类号：￥６ ； ６ ５５０ ９ 文 献 标 识 码 ：Ａ
叶绿素 普遍 存在 于 自然 界 的植物 体 中 ，在食 品工业 、化 妆 品工业 、医 药工业 等有 广泛 应
栽 培 ，四季 均 有供产 ，无季 节 、区域 限制 ，来 源丰 富 ，价格 低廉 ，相关 油菜 色素 提取 及稳 定
性 的研 究报 道 甚少 。
本 文初 步研 究 了油 菜 中天然 色素 的提 取 工艺 ，并对 叶绿 素稳 定性 的影 响 因素进 行探 讨 。
收 稿 日期 ：２ １－１１ ０ １１－５ 作 者 简 介 ： 陈 玉 （ ９ ９ ） 女 ，福 建 三 明 人 ， 讲师 ，硕 士 ； 主 要 从 事 天然 高 分 子研 究 。 １７ － ，
定 吸光 度 （ ，结 果如 图 １所示 。由图 １ ） 可知 ，
０ ． ２
、 …
０５ ． ０
６０ ０ ６ ０ ２ ６０ ４ ６０ ６ ６ ０ ８ ７ ０ ０
在波 长 ６ ０ ８ ｌ 间有 最大 的吸 光度 吸 收 ４ ￣６ ０ ｎｎ之 波 峰 ， 波 峰最 高 点对应 的吸收波 长 为 ６ ０ｎ 在 ６ ｍ，
波 长 下测 定吸光 度 。
２ 结果 与讨论
２１ 最 大吸 收波 长 ．
称取 １ ． ｇ油菜 叶 ，量取 １ ｍＬ无水 乙醇 ， ０ ０ 倒 入锥 形瓶 中，然后放 入 恒温 槽 ， 度 为 ４ ￣ 温 ０Ｃ， 提 取 ２ｈ 。过 滤 ，移取 １ ｍＬ滤液 定容 至 ５ ０ｍＬ ， 静 置 。在波 长 ６ ０－７ ０ ｎ 下用 分光 光度 计测 ０ － ０ ｍ ￣
吸取 １ ｍＬ浓 缩液 于 ５ ０ｍＬ的容 量瓶 中用 蒸馏 水 定容 ，用 蒸馏 水作 为参 比溶 液 。用 可见 分光 光度 计 在波 长 ６０－７ ０ ｍ 的范 围 内测其 吸 光度 。并 做波 长 一吸 光度 曲线 ，从 曲线 中 ０ ＂ ０ － － ｎ － ＇
得 出最佳 波 长 。 １ ． 提 取 液 的选择 ．３ ２ 分别 以无 水 乙醇 、不 同浓 度 的 乙醇 、无水 丙 酮为提 取 液 ，在相 同原料量 ，温 度 ４ ￣ ０Ｃ，
第 ４期
陈 玉 等 ：油 菜 中叶绿 素 的提取 及稳 定性
４ ９
１ ．＿ 光 照 强度 的影 响试 验 ． ５３ ２ 吸取 １ ｍＬ浓 缩 液于 ５ ０ｍＬ的容 量瓶 中，并用 蒸馏 水定 容 ，将所 配制 的溶 液分 别放 置于
室 内避 光 、室 内 自然 光 、室外 自然 光三 种条 件 下 ，用 蒸馏水 作 为参 比溶液 ，每 隔 １ 最佳 ｈ在