马铃薯蛋白质、维生素C、还原糖含量测定与比较
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马铃薯蛋白质、维生素C、还原糖含量测定
与比较
马铃薯蛋白质、维生素C 、还原糖含量测定与比较
摘 要:
通过试验测得马铃薯蛋白质含量、维生素C 、还原糖的含量,并对实验误差进行了分析,试验方法进行讨论。对实验结果进行了简单比较,了解了马铃薯是营养丰富的食物。
关键词:马铃薯、蛋白质、还原糖、维生素C
1.前言:
马铃薯传入我国只有一百多年的历史。主要在我国的东北、内蒙、华北和云贵等气候较凉的地区种植,而现在我国马铃薯种植面积居世界第二位。马铃薯产量高,营养丰富,对环境的适应性较强,现已遍布世界各地,热带和亚热带国家甚至在冬季或凉爽季节也可栽培并获得较高产量。马铃薯品种多样,营养丰富含有大量碳水化合物,价格低廉,因此深受广大人民喜爱。马铃薯在国民经经济发展中也有重要意义。它既是粮食又是蔬菜,还是轻工业、食品工业和医药制造业不可缺少的重要原料之一。在农业生产中马铃薯还有重要的轮作意义。
马铃薯纯的可消化蛋白质率高。1 9 7 2 年加拿大的K a ld y 研究表明: 蛋白质含量以大豆最高, 其次为玉米及马铃薯。马铃薯含有维生素种类多, 含量较为丰富。马铃薯块茎内含糖量较高, 一般为13.9%—21.9% , 其中淀粉约占85%左右[1]。此试验测定了一种马铃薯蛋白质、维生素C 、还原糖的含量。初步了解了马铃薯的一些性状及含量特性。
2.马铃薯蛋白质含量测定---------G-250法
2.1.试验材料
马铃薯
2.2.试验方法
a .取新鲜马铃薯2g 放入研钵中,加入2ml 水匀浆,再用6ml 水分次洗涤研钵。
b .放置大约20min
c .用离心机(4000rpm )离心20min 。取上清液定容至10ml 。
d .吸取提取液0.1ml (重复一次)加入5ml G-250,放置2min ,在595nm 处比色,以H 2O 做空白对照。
2.3.试验结果与分析
2.3.1.公式:
样品蛋白含量=A ×离心后体积样品重
结果:
样品蛋白含量=804×102.00=4020ug g ⁄
2.3.2.结果比较与分析
不同马铃薯蛋白质试验测定方法,不同马铃薯品种,马铃薯生产地等条件不同都会对实验结果产生影响。可是同一品种在贮藏期间蛋白质含量变化差异不显著,而品种间蛋白质含量差异达极显著水平[4]。除了我应用的考马斯亮蓝G-250法,还有紫外吸收法、Folin —酚法等。试验表明, 利用直接提取法所获得的马铃薯块茎蛋白质, 不仅含量最高(蛋白质干重5.54mg), 而且电泳后得到的蛋白条带数量最多(达到15条), 蛋白条带清晰可见[2]。经对各试点的蛋白质含量进行统计,各试点的平均蛋白质含量均介于1.8% ~3% 间。其中甘肃定西试点的平均蛋白质含量最高为2. 68%, 青海海南州试点的平均蛋白质含量最低1.86%[3]。
我测定的马铃薯蛋白质含量仅为0.402% 。我分析试验结果过低的原因是我试验操作不熟练以及所选用的方法和试剂不够灵敏,以及分光光度计比色皿上有污渍使光透性变差。最主要的原因是在实验过程中没有将实验器皿清洗干净引入了干扰此法测定的物质,例如去污剂和NaOH 等。此外标准曲线也有轻微的非线性,而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。以上原因都会使试验结果下降,造成巨大偏差。
3.维生素C 含量测定
3.1.试验材料
马铃薯
3.2.试验方法
a .用天平称马铃薯样品4g ,加入2%草酸溶液少许,在研钵中研磨,移入50ml 容量瓶,用2%草酸定容至刻度线,摇匀后静置备用。
b .准确吸取样品提取液(上清液或滤液)两份,每份10.0ml,分别置于锥形瓶中,用2,6-D 滴定至溶液呈桃红色,记录所用2,6-D 溶液体积。
c .准确吸取2%草酸10ml 。用2,6-D 滴定至溶液呈桃红色,记录所用体积。
3.3.试验结果与分析
3.3.1.公式:
Vc 含量=
(V 平均值−V o )×A B ×b a ×100 结果:
Vc 含量=(1.17−0.53)×0.2210×504×100=17.6mg/100g
3.3.2.结果比较与分析
维生素C 又称抗坏血酸,是人体中不可缺少的水溶性维生素。维生素总量在100克鲜薯中的含量为1~54毫克, 大多数品种10~25毫克[5]。通过此实验得知,马铃薯中富含维生素C 。我的实验结果基本准确。影响马铃薯维生素C 含量的因素很多。试验表明试验点间、试验品种间都存在着极显著差异[6]。温度、试验时PH 值的高低、马铃薯的贮藏时间等对试验结果都有影响。随着贮藏时间的延长,维生素C 含量逐渐降低,但贮藏前期下降速度快,贮藏后期下降速度缓慢[7]。若我试验测定结果准确,由此可推得:我所用做试验的马铃薯可能是贮藏一个月左右的。
使用2,6一二氯靛酚法测定维生素C 含量主要误差产生原因是滴定终点不好
确定,市面销售2,6一二氯靛酚质量不一。在滴定前应先对所配滴定液进行浓度标定。样品的提取液制备和滴定过程,要尽量避免阳光照射和与铜、铁器具接触,以免维生素C被破坏。滴定过程要尽量快,以免抗坏血酸被空气氧化。
4.还原糖含量的测定----------3,5--二硝基水杨酸(DNS)比色法
4.1.试验材料
马铃薯
4.2.试验方法
a.制作葡萄糖标准曲线(已知)
b.样品还原糖含量的测定
(1)马铃薯还原糖样品制备
①称取马铃薯5.0g,加入2ml H2O研磨。
②加约6ml H2O洗涤,转移到小烧杯中。
③50C o水浴15min。
④冷却到室温后,用离心机5000 r/min 离心10 min,取上清液定容至50ml。
(2)还原糖含量的测定
将四支试管沸水浴5min 后冷却,用H2O 稀释至25ml,在分光光度计540 nm波长下比色,记录吸光值,查标准曲线记录还原糖毫克数。
4.3.1.吸光值平均值为=0.559+0.615+0.609
3
−0.101≈0.493
查标准曲线得还原糖毫克数为:0.37mg
还原糖(%)=查得还原糖毫克数
1000×提取液体积(50ml)
测定体积(2ml)
÷样品克数
还原糖(%)=0.37
1000×50
2
÷5=0.185%
4.4.2.结果比较与分析
不同品种间马铃薯还原糖含量存在着很大差别, 早在1969年前苏联的科学家就对马铃薯单个块茎化学组成进行过分析, 发现块茎中还原糖含量最小的为0.1%,最大8.0%[8]。而且马铃薯贮藏时间、栽培地点、贮藏温度等都对其还原糖含量有影响。马铃薯块茎中含有大量的淀粉和少量的还原糖, 分别占干物质重的60%~80%和0.25%~3.0%[9]。我测定的是新鲜马铃薯中还原糖的含量为0.185%。块茎还原糖含量在生育期的变化规律是随生育进程的推移而逐渐降低, 至成熟收获时达最低这主要是还原糖逐渐转换成淀粉和块茎其它干物质缘故收获贮藏后,随着低温贮藏时间的延长还原糖含量呈现升高的趋势但出窖回温后还原糖的含量又有较大幅度的降低[10]。由此可见,我所测得马铃薯是收获刚到一个月,未窖藏的新鲜土豆,我所测定的马铃薯还原糖含量基本准确。