(2021年整理)8《药物分析》第四章(2课时)

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第四章药物的杂质检查授课
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目的1、明确药物的杂质“特殊物质的检查”的测定意义、原理及注意事项；2、学会测定药物中特殊杂质的操作技术。

教学
重点学会测定药物中特殊杂质的操作技术；
教学
难点学会测定药物中特殊杂质原理及注意事项；
项目6几种药物特殊杂质的检查
一、利用药物与杂质在物理性质方面的差异（一）臭味及挥发性质的差异例如：黄凡士林中异性有机物检查：本品2.0g ，直火加热无辛味。

浓过氧化氢
中不挥发性杂质检查：10ml 水浴蒸干残渣＜15mg 。

（二）颜色差异例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的检查：取本品2.0g ，加NaOH 试液10ml ，加水25ml ，与黄色3号比色液比，不得更深。

（三）溶解行为的差异：例如：吡哌酸中碱中不溶物吡哌酸甲酯（I ）和（II ）
（四）旋光性质的差异：例如：硫酸阿托品中莨菪碱检查：本品溶液(50mg/ml)α＜-0.4
（五）对光吸收性质的差异
（1）紫外分光光度法：①在一定的波长杂质有吸收，而药物无吸收；②杂质杂质紫外吸收光谱与药物紫外吸收光谱重叠；③药物在紫外区有明显吸收，而杂质吸收很弱货物吸收。

（2）原子吸收分光光度法：主要用于药物中金属盐等杂质的检查，如曾用于维生素C 、硫酸庆大霉素和安痛定注射液中Na 、K 、Ca 、Mg 含量测定。

（3）红外分光光度法：主要用于药物中无效和低效晶型的检查，如甲苯米唑
装
订
线
中A晶型的检查。

（4）荧光分析法：例如利血平中氧化产物的检查，是根据利血平纯品无荧光，其氧化产物有荧光。

1.紫外分光光度法：
例如：地蒽酚中二羟基蒽醌的检查。

再如：苯丙醇中苯丙酮的检查：可利用供试液的吸收度比来控制杂质；纯品苯丙醇A247nm/A258nm=0.59，99.5%时A247nm/A258nm=0.79；因此规定供试品A247nm/A258nm＜0.79；即所含苯丙酮＜0.5%。

2.原子吸收分光光度法：是通过测定药物中所含待测元素原子蒸气，吸收发自光源的该元素特定波长的程度，以求出药物中待测元素的含量。

限量检查时：对照品液=供试品+限量a供试品液=b符合规定时b＜(a-b)，b＞(a-b)不合格。

3.红外分光光度法：主要用于药物中无效或低效晶型检查，如甲苯咪唑中A晶型检查。

4.荧光分析法。

(六)吸附或分配性的差异
（1）TLC法：①杂质对照法；②高低浓度对照法。

（2）PC法：主要用于极性大的药物的杂质检查，如地高辛、盐酸苯乙双胍中有关杂质的检查。

（3）HPLC法：①分面积归一化法；②不加校正因子的主成分自身对照法；③加校正因子的主成分自身对照法；④内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量；⑤外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量。

（4）GC法：同HPLC法。

例如：
1.薄层色谱法(TLC)
2.纸层析法(PC)常用于极性大的药物的分离、分析，如地高辛中的有关杂质的检查。

3.高效液相色谱法(HPLC)
（1）峰面积归一化法：L%=∑Ai/(∑Ai+A主）×100%
例如：利巴韦林中有关杂质的检查：对照品液(5μg/ml)进样10μl，调灵敏度，
使主峰达满量程的20%～25%，样品液(0.4mg/ml)进样10μl，杂质∑Ai＜(∑Ai+A 主）的1.0%。

（2）不加校正因子主成分对照法：对照品液为供试品的稀释液进样测得A主,供试品液进样测得∑Ai其∑Ai＜A主，即为合格。

例如：甲硝唑中2-甲基-5-硝基咪唑：对照品液(0.01mg/ml)进样20μl，调灵敏度，使主峰达10%～30%，样品液(0.14mg/ml)进样20μl，杂质∑Ai＜A主的1.0%。

（3）内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量：对照品+内标，进样求校正因子（f)=(As/Cs)/(AR/CR)
供试品+内标，进样求AX，AS，则杂质浓度CX=f×AX/(AS/CS)。

4.气相色谱法(GC)主要用于药物中挥发性的杂质检查，其检查方法与HPLC法相同。

二、利用药物和杂质在化学性上的差异
1．酸碱性的差异：①规定消耗滴定液的体积；②pH值测定法；③指示剂法。

2．氧化还原性质的差异：利用药物与杂质氧化还原电位的差异进行检查，如氯化物中碘化物或溴化物的检查。

3．杂质与一定的试剂反应产生沉淀：如生物碱中其他生物碱的检查，多采用此法。

4．杂质与一定的试剂反应产生颜色：利用药物重的杂质与某些试剂发生氧化化、络合、偶合等显色反应，进行药物中杂质的鉴别。

5．杂质与一定的试剂反应产生气体：利用此法可检查药物中的砷、硫、碳酸盐、氨盐、氰化物等。

例如氰化物的检查中国药典采用：①改进普鲁士蓝法；②气体扩散-三硝基苯酚法。

6．药物经有机破坏后检查杂质：①硒的检查；②氟的检查。

例如：
（一）酸碱性的差异：
1.规定消耗滴定液体积：例如己酸羟孕酮中正己酐、对甲苯磺酸检查：(NaOH 0.02mol/L)取本品0.20g+中性乙醇+溴麝香草酚蓝微蓝色＜0.50ml
2.pH法：例如乙琥胺中2-甲基-2-乙基丁二酸检查：0.01g/ml pH
3.0～
4.
5.
3.指示剂法：例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查：其水溶液不得使甲基橙显红
色。

（二）氧化还原性的差异：例如：NaCl中I-和Br-检查EOCl/2Cl-=+1.3595V＞EOBr/2Br-=+1.065V＞EOI/2I-=+0.5345V,因此+NaNO2+H2SO4+淀粉显蓝色.
再例如：盐酸吗啡中阿朴吗啡的检查：后者可被碘氧化生成水溶性绿色化合物。

因此ChP规定：本品50mg+4mlH2O+1dI2+5ml乙醚乙醚层不得显红色；水层不得显绿色。

（三）杂质与一定试剂反应产生沉淀：例一、间苯二酚中邻苯二酚检查：后者+Pb(Ac)2白色，ChP规定：本品0.5g+10mlH2O+2滴稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2不得发生混,即为合格。

例二、硝酸毛果芸香碱中其他生物的检查：后者+氨水+K2Cr2O7，ChP规定：本品0.2g+20mlH2O两份；I份+数滴氨试液；另1份+数滴K2Cr2O7试液，均不得发生混浊。

（四）杂质与一定试剂反应产生颜色：例一、盐酸普萘洛尔中游离α-萘酚检查：利用后者可与重氮盐发生重氮化偶合反应，生成偶氮染料。

ChP规定：供试品20mg+乙醇与10%NaOH液各2ml+重氮苯磺酸试液1ml,放置3min；如显色，与0.3mlα-萘酚对照液（20μg/ml)比较不得更深。

例二、碘他拉酸中氨基化合物的检查：利用重氮化-偶合反应，ChP规定：供试品2.5mg/ml经重氮化-偶合反应后,在波长485nm测得A＜0.25
（五）杂质与一定试剂反应产生气体
ChP附录中收载氰化物的两种检查方法：
第一法：改进普鲁士蓝法
第二法：气体扩散-三硝基苯酚锂法
原理：HCN扩散进入三硝基苯酚锂试液，生成异红紫酸盐，在500nm波长处测定吸收度。

（六）药物经有机破坏后检查杂质：某些环状有机药物在生产中可能引入磷、硫、卤素及硒等杂质，这些杂质与有机分子中的碳原子以共价键结合，需进行有机破坏后检查，各国药典所采用的方法为氧瓶燃烧法。