第一章第三节蛋白质的理化性质及分类

蛋白质解离成阳离子
兼性离子
蛋白质解离成阴离子
蛋白质在丌同PH下的解离
蛋白质的等电点( isoelectric point, pΙ) 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解 离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离 子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质 的等电点。
不同蛋白质因其所含Aa 的不同而具有各自的pΙ
只含有氨基酸,没有其它成分. 1,清蛋白 血液中的血清清蛋白、鸡蛋中的卵清蛋白等。 2, 球蛋白 肌肉中的肌球蛋白以及免疫球蛋白. 3,组蛋白 染色体的结构蛋白, 碱性蛋白质。 4,硬蛋白 皮肤,毛収,指甲,起支持和保护作用, 如角蛋白,胶原蛋白等。
(二)结合蛋白质 由蛋白质部分和非蛋白质部分结合而成. 蛋白质部分 非蛋白质部分 1,核蛋白 核酸 2,糖蛋白 糖类 3,脂蛋白 蛋白质和脂类结合 4,色蛋白 蛋白质和某些色素物质结合 5,金属蛋白 金属 6,磷蛋白 磷酸基
化ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ因素：
强酸、强碱、尿素、胍、去污剂、重金 属盐、三氯乙酸、浓乙醇。
变性的本质：
破坏非共价键和二硫键，丌破坏主 键，故蛋白质分子一级结构无变化。
变性蛋白质的特征：
（1）溶解度显著减小，不溶于水。 （2）生物活性（免疫性、酶活性等）消失。 （3）粘度及分子不对称性增加，等电点有所提高。 （4）反应基团增加。由于构象改变使本来被遮蔽 的基团暴露出来，如—SH、—S—S—等。 （5）变性蛋白质容易被酶消化。
带负电荷的蛋白质 脱水作用 － 酸 － － － － －
－
－
带正电荷的蛋白质 （疏水胶体）
丌稳定的蛋白质颗粒 （沉淀）
带负电荷的蛋白质 （疏水胶体）
3、透析
将蛋白质溶液放在半透膜的袋内，置于流动的适 当的缓冲液（如纯水）中，小分子杂质（如硫酸铵、 氧化钠等）从袋中透出，而蛋白质保留于袋中从而将
蛋白质纯化，这种方法称为透析。
蛋白质的复性：
若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素 后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构 象和功能，称为复性(renaturation) 。
所有蛋白质变性后都能复性。
沉淀：有时变性，有时丌变性。 凝固：变性后的蛋白质分子互相凝集或缠绕在一起
四、蛋白质的紫外吸收
由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨 酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的 在280nm波长的吸光度不其浓度呈正比关系，因此可 作蛋白质定量测定。
巯基 、-CONH2 甲酰胺基等亲水性基 团，吸附水分子，在蛋白质分子表面形成 水化膜，分隔蛋白质颗粒，阻止其聚集而沉淀。
意义：
① 胶体系统有利于生命活动代谢反应 的进行； ② 是蛋白质分离纯化的基础。
（二）分离纯化蛋白质的常用方法
用物理或化学的方法破坏蛋白质分子表面的水化膜/或 中和其表面电荷就可使胶体中蛋白质収生沉淀、析出这 是分离纯化蛋白质的第一步。
谢谢 再见
常用方法：盐析、有机溶剂沉淀反应等
1、盐析
• 在蛋白质溶液中加入大量的硫酸钠、 硫酸铵、或氯化钠等，可使蛋白质表 面的水化膜破坏、部分电荷被中和， 蛋白质从溶液中析出，这称为盐析。
2、沉淀反应
水化膜 +
+
+ +
+ + +
酸 碱 在等电点的蛋白质 脱水作用
碱 酸
－
－
－ － －
－ － －
带正电荷的蛋白质 脱水作用 + + + + + + + + 碱
五、蛋白质的呈色反应
⒈茚三酮反应(ninhydrin reaction)
蛋白质经水解后产生的氨基酸可与茚三酮
反应生成紫色（与脯氨酸或羟脯氨酸反应生成 (亮）黄色）化合物的反应。
⒉双缩脲反应(biuret reaction)
蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与 硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双 缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解
不同蛋白质在同一pH溶液中 电荷性质和数量不同
蛋白质分子的 大小形状各不相同
电泳分离蛋白质
二、蛋白质的胶体性质
蛋白质属于生物大分子，分子量可自 1万至100万之巨，其分子的直径可达1～ 100nm，属于胶体物质。 其水溶液是一种 比较稳定的亲水胶体溶液。
(一）、维持蛋白质胶体溶液稳定的因素
1.颗粒表面电荷：带有相同电荷，相 互排斥，丌易聚集。 2.水化膜： -SH
第三节
蛋白质的理化性质
The Physical and Chemical Characters of Protein
一、蛋白质的两性解离
氨基酸：两性电解质
蛋白质由氨基酸组成。蛋白质分子除两端游离的氨 基和羧基可解离外，其侧链上的某些酸性基团或碱性基 团，在一定的溶液pH条件下，都可解离成带负电荷或带 正电荷的基团。 因此，蛋白质也是两性电解质。
程度和对蛋白质进行定量分析。
临床最常用
应用：
1、临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。 2、此外, 防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制 剂（如疫苗等）的必要条件。
第四节
蛋白质的分类
The classification of protein
一、根据化学组成分类
单纯蛋白质 结合蛋白质
(一)简单蛋白质
利用压力或离心力强行使水和小分子杂质 通过超滤膜(一种半透膜)除去，而蛋白质 留在膜上，称为超过滤(超滤)。
透析工作图
半透膜原理
4、 超速离心
三、蛋白质的变性
概念：
在某些物理和化学因素作用下，蛋白质特定的空 间构象被破坏，导致其理化性质改变和生物活性的丧
失。
物理因素：
高温、高压、超声波、剧烈振荡、搅拌、 X射线、紫外线；
二、根据形状分类
1,球状蛋白质 球状蛋白质分子比较对称,接近球形或椭球形.溶解度较好, 大多数蛋白质属于此类。 2,纤维蛋白质 分子对称性差,类似于细棒状或纤维状.溶解性质各不相同, 如胶原蛋白, 纤维蛋白原等
三、根据功能分类
小
结
等电点 蛋白质所带电荷不溶液pH之间的关系 维持蛋白质胶体溶液稳定的因素 变性 复性