层析柱使用说明书

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层析柱说明书

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锐意进取、和谐创新550层析柱说明书浙江中能轻工机械有限公司一产品介绍:层析过程是采用特殊的吸附剂,从植物提取液中选择性地吸附其中的有效部分,去除无效成分的一种分离纯化新工艺。

可以解决植提生产中所面临的剂量大、产品吸潮和重金属残留等实际问题。

经层析技术处理后所得到的精制物,可使有效成分高度富集,杂质少,提取得率仅为原生物的2~5%,而一般水煮法为30%左右,醇沉法为15%左右;可有效地去除吸潮成分,并增强产品的稳定性;可有效地去除重金属。

层析分离工艺所得提取物体积小,不吸潮,容易制成外型美观的各种剂型,尤其适用于颗粒剂、胶囊剂、片剂等的生产。

该技术将是对中药提取工艺影响最大、带动面最广的技术进步之一。

用于生物工程、制药工业、精细化工领域的分离纯化设计制造的工业制备,具有分辨高、选择性好、流动连续、效率高、处理稳定、样品可多可少、易于操作的特点,适用于含量少的复杂高分子物质的分离纯化,是中草药、化学合成药及生物活性物质有效成分分离提纯的核心设备。

二产品特点:①合理的高径比,精密的进出口流体分布装置,保证层析柱装填效果和填料再生效果,为高效分离提供了保障。

②产品采用不锈钢材料,并进行内外抛光,耐腐蚀、使用寿命长、硬度高、运输安全,质量有保障。

③本设备确保无污染、效率高、操作方便等。

三技术参数四操作说明层析操作流程一般为:预处理,逆流洗柱,水洗,吸附,解吸、再生等工艺。

1、预处理:在吸附树脂的生产过程中,一般均采用工业级原料,产品没有经过进一步纯化处理,因此树脂内部往往残留少量单体,致孔剂和其他有机杂质,所以在使用之前必须进行预处理。

吸附树脂预处理方法如下:(1)将准备装柱使用的新树脂,用2倍左右体积的甲醇或其他水溶性溶剂(如乙醇、丙酮)浸泡2小时,并不时搅动,使树脂充分溶胀。

(2)、将已充分溶胀的吸附树脂装柱,以每小时3至4倍床体积的流速,将5至8倍的甲醇或其他水溶性的溶剂(如乙醇、丙酮)通过树脂层,至流出液加水稀释不变混。

层析柱原理和使用方法

层析柱原理和使用方法

层析柱原理和使用方法
层析柱原理是一种常用的色谱技术,可以分离复杂混合物中的各个组分。

层析柱是一个长管状结构,内部填充有吸附剂或离子交换树脂等材料。

根据组分在填料中的亲和性差异,不同组分会以不同的速度通过填料,从而实现分离。

层析柱的使用方法如下:
1. 样品预处理:将混合物中的目标组分溶解或悬浮于合适的溶剂中,并进行必要的样品处理(如pH调整、过滤等)。

2. 建立实验条件:选择合适的填料材料、填料粒径和填充方法,并确定适当的溶剂体系和流动相条件。

3. 装填填料:将选择好的填料装入柱中。

填料的打包密度和均匀性对色谱分离效果有重要影响,因此要确保填料的均匀性和紧密度。

4. 平衡柱:用流动相预浸柱,使填料均匀吸附流动相,并达到平衡状态。

平衡时间根据填料种类和样品性质而定。

5. 注射样品:将样品以适当的体积注射到柱中,并控制注射速度和压力。

6. 运行分析:启动流动相,控制流动相速度和温度,使样品组分逐渐分离,并记录结果。

7. 数据分析:根据检测器的信号,对分离出的目标组分进行定性和定量分析。

层析柱的使用注意事项:
1. 填料选择:根据被分离组分的性质选择合适的填料。

2. 流动相选择:要确保流动相对目标组分具有足够的分离能力。

3. 注射量控制:注射量应根据柱容量和检测器灵敏度进行合理
控制。

4. 柱温控制:柱温对于某些温度敏感性样品的分离效果有重要影响,可以根据需要进行柱温控制。

5. 柱保养:正确使用和保养层析柱,避免杂质吸附和填料破碎等情况的发生。

6. 数据分析:及时记录和分析实验结果,确保实验数据的准确性和可靠性。

cytivagst亲和层析柱中文说明书

cytivagst亲和层析柱中文说明书

cytivagst亲和层析柱中文说明书CyTiva GST亲和层析柱是一种常用的色谱柱,用于蛋白质的纯化和分离。

亲和层析是一种基于蛋白质与特定配体之间的非共价相互作用而进行的纯化方法。

本文将详细介绍CyTiva GST亲和层析柱的原理、优点、使用方法和注意事项。

一、原理CyTiva GST亲和层析柱采用谷氨酸-S-转移酶(Glutathione-S-Transferase,GST)作为亲和配体。

GST是从谷胱甘肽(glutathione)中分离得到的一种蛋白质。

该配体与GST融合的蛋白质有很高的亲和力,可被其特异性地捕获。

在层析过程中,样品与柱填料表面的GST结合形成复合物。

通过洗脱缓冲液中pH、盐浓度或添加特定配体等的调节,使复合物分离并得到目标蛋白质。

二、优点1.高选择性:CyTiva GST亲和层析柱具有很高的选择性,可以高效地分离和纯化GST融合的目标蛋白质。

2.高纯度:层析过程中,非特异性结合蛋白质可被洗脱掉,从而得到高纯度的目标蛋白质。

三、使用方法1.准备工作:柱前洗脱,根据柱填料要求进行预处理。

2.样品处理:目标蛋白质表达并纯化后,与GST融合的载体进行融合。

此后,将样品溶液等体积注入已平衡的柱中。

3.洗脱条件的选择:根据样品的属性,选择适宜的洗脱缓冲液,进行洗脱。

可以按照pH、盐浓度、添加特定配体等来调节洗脱条件。

4.目标蛋白质洗脱:将目标蛋白质从柱中洗脱出来,收集洗脱液。

四、注意事项1.样品的处理:目标蛋白质应表达和纯化得到GST融合蛋白质。

2.柱前处理:根据柱填料的要求,进行柱前洗脱处理。

3.洗脱缓冲液的调节:根据样品的特性和所需的洗脱条件进行调节。

常用的洗脱条件包括调节pH、盐浓度、添加特定配体等。

4.洗脱收集:在洗脱过程中,及时收集洗脱液。

总结:CyTiva GST亲和层析柱是一种常用的蛋白质纯化和分离工具,基于GST与目标蛋白质的非共价相互作用。

它具有高选择性和高纯度的优点,可广泛应用于生物医药研究领域。

亲和层析柱使用说明

亲和层析柱使用说明

亲和层析柱使用说明货号名称规格说明DS0101亲和层析柱1ml 含1个空管柱,上下盖和2个筛板(亲水性,孔径50um)DS0103亲和层析柱3ml DS0106亲和层析柱6ml DS0110亲和层析柱10ml DS0130亲和层析柱30ml DS0150亲和层析柱50ml一、产品说明亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。

它是利用生物分子间存在很多特异性的相互作用(如抗原和抗体、酶和底物或抑制剂、激素和受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。

本公司提供的亲和层析柱工具可应用于如下方面:①纯化重组蛋白;②纯化抗原和抗体;③纯化多肽;④纯化DNA;⑤糖蛋白的纯化;⑥纯化磷酸化蛋白和肽;⑦DNA 结合蛋白的纯化;⑧去除内毒素,等。

亲和层析柱空柱管的材质为医疗级的聚丙烯,这种工程材料通过大量的应用证明具有清洁无毒,不与生物分子结合和低溶解度的优点。

亲和层析柱空柱所用的筛板是选用纯净的UHWM-PE (超高分子量聚乙烯)为原料,经独特的工艺加工而成,具有亲水性。

筛板在装填时安置在填料基质的上下端,以阻挡昂贵的基质渗出。

亲水性筛板采用了领先的亲水性UHWM-PE 生产技术,该筛板能保证使用重力法时的流速为1-2ml/分钟或1-2滴/秒。

同时,该筛板和其它同类产品相比,不会由于亲水性基团的引入而对蛋白质产生吸附。

另外,该亲水性筛板在使用过程中不易形成气泡,气泡会使流速降低,液体通过基质不均匀。

二、产品应用1,抗体纯化纯化抗体一般用Protein A作为纯化的配体,也可以用Protein G或Protein L或异源性抗体作为配体。

2,小分子物质提取(以提取黄曲霉毒素M1为例)试样通过免疫亲和柱时,黄曲霉毒素M1被提取。

亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当样品通过亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合,形成抗体一抗原复合体。

层析柱使用说明书

层析柱使用说明书
层析柱
DN400
使




制作单位:***************有限公司
生产基地:****************路7号
公司电话:**************
公司传真:************
邮编:1000000
编制日期:二○一一年十二月
目录
一产品介绍……………………………………………….2
二产品特点……………………………………………….2
再生
0.5-3BV/h
3-4BV
酸碱再生,用乙醇、丙酮等溶剂淋洗
水洗
2-3BV/h
3-4BV
用大量水淋洗干净
注:以上参数供参考
五操作注意事项:
1.运输及贮存过程中应保持5-40℃环境中,避免过热过冷。注意不使树脂变干,以免孔结构发生变化。
2.树脂装填在吸附柱中使用,装填前应对设备管道进行清洗,以防有害物对树脂产生污染(如铁污染)。
二产品特点:
①合理的高径比,精密的进出口流体分布装置,保证层析柱装填效果和填料再生效果,为高效分离提供了保障。
②产品采用不锈钢材料,并进行内外抛光,耐腐蚀、使用寿命长、硬度高、运输安全,质量有保障。
③本设备确保无污染、效率高、操作方便等。
三技术参数
容积
450L
材质
SUS316L
设计压力
-0.1
设计温度
步骤流速流量备注填充装柱逆流洗柱水洗除去小粒子及破碎树脂前处理15bvh3bv用乙醇等进行预处理吸附14bvh根据吸附量应在吸附容量以下ph58温度低于50水洗23bvh051bv将吸附在树脂上的杂质洗出解吸053bvh23bv乙醇丙酮等的含水溶液溶出有效成分温度高有利于解吸再生053bvh34bv酸碱再生用乙醇丙酮等溶剂淋洗水洗23bvh34bv用大量水淋洗干净注

层析柱 操作规程

层析柱 操作规程

层析柱操作规程
《层析柱操作规程》
层析柱是一种分离和纯化化合物的工具,它在实验室和工业生产中都得到广泛应用。

为了正确、高效地运用层析柱进行实验操作,必须严格按照规程进行操作。

1. 准备工作
在开始操作层析柱之前,首先需要检查仪器设备和试剂是否准备就绪。

确保层析柱、柱子和柱底都是干净的,没有杂质和残留物。

同时,检查溶剂和流动相的浓度和pH值是否符合实验要求。

2. 样品预处理
样品在进入层析柱之前,需要进行适当的预处理。

通常包括溶解、过滤或稀释等步骤,以确保样品的纯度和浓度符合层析柱的使用要求。

3. 层析条件选择
根据样品的特性和分离要求,选择合适的层析柱和流动相。

流动相的选择包括了溶剂的种类、比例和流速等参数,需要根据实验要求进行合理选择。

4. 样品加载
将经过预处理的样品通过适当的方法加载到层析柱中。

可以采用重力流动、压力注入或者其他方法,确保样品均匀地进入层析柱。

5. 层析过程监控
在样品加载后,需要监控层析过程并进行记录。

包括流出液的收集、色谱图谱的观察等,以便及时发现异常情况并进行调整。

6. 收集和分析分离物
根据层析过程中的监控数据,及时收集目标物质,并进行分析和检测。

可以通过色谱、质谱等技术进行分析,得到分离物的纯度和产率数据。

7. 层析柱的清洗和保养
在操作完毕后,及时清洗和保养层析柱。

包括流动相的冲洗、柱子和柱底的清洗以及存放,以保证下次使用时的质量。

在实验操作层析柱时,严格按照规程进行操作,能够确保实验的准确性和重复性,同时也保证了仪器设备的长久使用。

层析柱操作规程

层析柱操作规程

层析柱操作规程
《层析柱操作规程》
一、前言
层析柱操作是化学分离和纯化技术中常用的一种手段,它能够对混合物中的成分进行有效的分离。

为了确保操作过程的顺利进行和分离效果的最大化,需要制定一套严格的操作规程。

二、设备准备
1. 确认层析柱和相关设备是否完好,无污染;
2. 准备好使用的溶剂,保证纯度和新鲜度;
3. 根据实验需求,准备好实验所需的各种样品和标准物质;
4. 准备好密封垫和管接头等辅助器材。

三、操作步骤
1. 将层析柱连接至固定相泵;
2. 实验前先进行层析柱的扫表,观察并记录基础数据;
3. 使用实验样品进行预洗柱操作,确保固定相表面无污染;
4. 将样品溶解于溶剂中,装入进样瓶,连接至固定相泵;
5. 开始进行层析分离操作,收集分离出的目标成分,并记录各分离组分的流出时间;
6. 根据实验需求,对分离得到的目标物质进行进一步的纯化操作;
7. 实验结束后,对层析柱进行清洗消毒,保持设备的卫生和使用寿命。

四、实验注意事项
1. 操作过程中要随时检查设备状态,及时处理出现的故障和异常;
2. 严格遵守操作规程,不得随意更改操作步骤;
3. 对固定相、流动相、样品等各项实验条件进行严格控制,确保实验的准确性和可重复性;
4. 清洗消毒后的层析柱应储存于干燥通风的地方,避免细菌污染。

五、结语
层析柱操作规程的制定和执行对于保证实验的顺利进行和分离效果的最大化具有重要意义。

实验人员在操作过程中需严格遵守规程,不得有过失。

同时,定期检查和维护层析柱设备,确保设备处于良好状态,也是保证实验顺利进行的重要环节。

Blue层析柱说明书

Blue层析柱说明书

Blue预装柱(FF)Blue Sepharose 6 Fast Flow原理Cibacron TM Blue F3G-A是一种合成的多环染料,其作用类似于芳香族的阴离子配基,通过静电力和/或疏水性相互作用结合白蛋白。

相似的互相作用也发生在凝血因子,脂蛋白和干扰素上。

促皮质素Blue F3G-A连接到Sepharose上制备成Blue Sepharose亲和介质。

*图为Blue Sepharose 6 Fast Flow部分结构分离操作结合缓冲液:50mM KH2PO4, pH 7.0或者20mM 磷酸钠, pH7.0洗脱缓冲液:50mM KH2PO4, 1.5M KCl, pH 7.0或者20mM 磷酸钠,2M NaCl, pH7.01,用5倍柱体积的结合缓冲液平衡柱子。

2,上样。

3,用10倍柱体积的结合缓冲液平衡分离柱,直到基线,即所有未结合物质都被冲洗出柱子。

紫外吸光A280nm处监测。

4,用5倍柱体积的洗脱缓冲液进行洗脱。

使用连续的或者阶梯式的梯度洗脱,洗脱缓冲液的浓度从0%-100%。

净化1,用5倍柱体积冲洗,使用高pH(0.1M Tris-HCl,0.5M NaCl,pH8.5)溶液冲洗,然后再使用低pH(0.1M 醋酸钠,0.5M NaCl,pH4.5)冲洗。

重复4~5次,立即再用结合缓冲液再平衡。

2,用4倍柱体积的0.1M NaOH溶液在较低的流速下去除沉淀的蛋白质,接下来用3~4倍柱体积的70%的乙醇或者2M的硫氰酸钾冲洗。

也可以选择用2倍柱体积的6M的盐酸胍冲洗柱子。

立即用结合缓冲液在此平衡柱子。

3,通过用3~4倍柱体积的70%的乙醇或者30%异丙醇冲洗柱子,去除结合很强的疏水性蛋白质,脂蛋白和脂质等物质。

另外可以选择用2倍柱体积的碱性或者酸性去污剂溶液,例如0.1%的非离子去污剂在1M乙酸溶液中,以较低的流速流过柱子,接下来用5倍柱体积的70%的乙醇除去残留的去污剂。

立即用结合缓冲液在此平衡柱子。

层析柱使用方法

层析柱使用方法

层析柱使用方法
哇塞,层析柱可是个很重要的实验工具呢!它在很多领域都有着广泛的应用。

那咱就来好好说说层析柱的使用方法哈。

首先得准备好层析柱,检查是否完好无损。

然后就是装柱啦,这可是关键步骤哦!要将填料慢慢倒入柱中,同时用适当的溶剂冲洗,注意不能有气泡产生呀,这就好比盖房子得根基牢固一样重要呢!接着就是上样啦,把样品小心地加到柱子上,可别弄撒了哦。

再进行洗脱,控制好洗脱液的流速,就像把握好节奏一样重要呢。

在整个过程中,要注意保持操作环境的清洁,不然杂质混入可就麻烦啦!还有呀,使用的溶剂要合适,不然也达不到好的效果呀。

在使用层析柱的过程中,安全性和稳定性那也是相当重要的呀!就像走钢丝一样,稍有不慎可能就前功尽弃啦。

要确保实验装置的稳固,避免倒塌啥的危险情况发生。

同时呢,操作过程要规范,可不能马虎大意,这是对自己和实验结果负责呀!只有这样,才能保证实验的顺利进行,得到可靠的结果呢。

层析柱的应用场景那可多了去了呀!在生物化学、制药、食品等领域都能看到它的身影呢。

它的优势也很明显呀,比如能高效分离混合物,让我们更清楚地看到各种成分呢。

这就好像是在一堆混乱中找出秩序一样神奇呀!而且它还可以重复使用,多经济实惠呀!
给你们讲个实际案例哈。

有一次在一个生物实验中,我们就是用层析柱来分离蛋白质的。

哇,效果那叫一个好呀!很清晰地就把不同的蛋白质分离开了,为后续的研究提供了重要的数据支持呢。

这就充分说明了层析柱在实际应用中的强大呀!
总之呢,层析柱真的是个超棒的实验工具呀,只要我们正确使用它,就能发挥出它巨大的作用呀!。

博格隆层析柱说明书

博格隆层析柱说明书

博格隆层析柱说明书层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。

根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。

柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

使用方法如下:1、吸附剂的处理及柱子装填:将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。

C活化2H后,取出放置室温即可装柱。

柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。

2、上样:将冬凌草的乙醇提取物400G用适量丙酮溶解,泵入中压柱柱头,然后泵入石油醚1000RID。

3、洗脱:以一定比例的石油醚一丙酮为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~3KG/C 。

按每份500ML收集,TLC检识展开剂丙酮一氯仿(2:8),显色剂5%香草醛浓硫酸乙醇液至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。

将冬凌草甲素流份合并蒸干。

加入适量甲醇热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。

4、层析柱再生、平衡:有效成分经TLC检识全部流出后,用纯丙酮5000ML再生,丙酮一石油醚(5:95)平衡后,可再次上样,反复使用(使用次数随原料不同而异,一般可连续使用2—6个月以上)。

5、重结晶:冬凌草甲素结晶析出完全后,减压过滤,然后用少量甲醇洗涤(洗涤液保留,作下次热溶冬凌草甲素用)。

将冬凌草甲素再用适量甲醇热溶后放置,结晶再次析出,待结晶完全后,抽滤,用少量乙醚洗涤,将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中,35度真空干燥至恒重。

密封于瓶中,置干燥器中保存。

6、薄层层析分析:取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品甲醇溶解后点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿一丙酮(8:2)为展开剂进行展开,5% 香草醛浓硫酸乙醇液显色,于105。

层析柱装柱操作规范

层析柱装柱操作规范

层析柱装柱操作规范(总2页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面,使用请直接删除层析柱装柱流程装柱材料层析柱:BXK层析柱装柱仪器:ÄKTA装柱器装柱溶液20%乙醇匀浆的准备精确计算所需介质的量(这对固定柱高的层析柱尤其重要)。

1L填充柱所需的介质量大约是1.15L自然沉淀匀浆的量,于干净烧杯中,取 100%沉降胶(静止放置一天以上,倾去20%乙醇后的胶为100%沉降胶)与等体积20%乙醇混合备用。

安装层析柱1.检测层析柱的各个部件,确保干净、完整,拧上下端堵头,拧紧膨胀圈,然后将层析柱垂直固定在铁架台上。

2.将装柱器安装在层析柱上端。

3.往层析柱中加入适量的20%乙醇,打开下端口,重力流,排除下筛网中滞留的气泡,在液面低至1-2cm高度时关闭层析柱下端出口。

装柱1.用玻璃棒紧靠柱子内壁引流,将摇匀的介质加入到层析柱中,这可以减少气泡的产生。

迅速用20%乙醇填满柱子和装柱器,装上装柱器盖子,连接到ÄKTA上。

2.打开层析柱下端,开始以30cm/h流速装柱,直至柱床界面平稳。

停止装柱。

3.打开装柱器盖子,用虹吸法去除界面上端的液体,去掉装柱器,然后小心的用20%乙醇封满柱子剩余部分。

4.将上端转接头一端连上ÄKTA,打开机器,以装柱流速用装柱液排出转接头管路中及筛板中残留的气泡,然后将转接头另一端装到层析柱上,使转接头下端刚好接触胶界面。

(装柱流速约为70-100%的最大流速)5.拧紧膨胀圈,继续用装柱流速压柱,至少保持3个柱体积,以界面不变为主,在界面处做上记号。

6.关闭泵,并关闭柱子下端出口,使层析柱上端和泵断开(转接器上接口是打开的),略拧松膨胀圈,缓慢向下转动调节杆,到记号处停止,然后再拧紧膨胀圈,关闭上接口。

7. 检测柱效3。

层析柱原理和使用方法

层析柱原理和使用方法

层析柱原理和使用方法层析柱是一种常用的色谱分离技术,它通过不同物质在固定相和移动相之间的分配系数差异来实现物质的分离和纯化。

在实际应用中,层析柱广泛应用于生物制药、化工、环境监测等领域。

本文将介绍层析柱的原理和使用方法,希望能为相关领域的研究人员提供一些参考和帮助。

层析柱的原理。

层析柱分离的原理主要是基于物质在固定相和移动相之间的分配系数不同而实现的。

固定相是填充在柱子内部的吸附剂,而移动相则是通过柱子内部的物质分离。

当样品混合物通过固定相时,不同成分会因为其与固定相的亲和力不同而在柱子内部发生分离。

这种分离过程可以通过控制移动相的流速和组成来实现,从而达到对混合物中不同成分的分离和纯化。

层析柱的使用方法。

1. 样品预处理,在进行层析柱分离之前,需要对样品进行预处理,包括溶解、过滤、稀释等步骤。

这些步骤能够保证样品的纯度和稳定性,有利于后续的分离过程。

2. 选择固定相,根据待分离物质的特性和分离要求,选择合适的固定相。

固定相的选择对于分离效果至关重要,不同的固定相对于不同的物质具有不同的亲和力,因此需要根据具体情况进行选择。

3. 封闭层析柱,在将固定相填充到柱子内部之后,需要进行封闭处理,以保证固定相的稳定性和均匀性。

这一步骤能够提高分离效果和保证实验的准确性。

4. 选择移动相,根据待分离物质的特性和固定相的选择,确定合适的移动相。

移动相的选择直接影响到分离的效果,因此需要进行仔细的考虑和实验验证。

5. 层析柱分离,将经过预处理的样品混合物通过封闭的层析柱,通过控制移动相的流速和组成,实现待分离物质的分离和纯化。

在分离过程中,需要密切关注柱子内部的情况,及时调整操作参数以保证分离效果。

6. 收集纯化物质,经过层析柱分离后,可以根据需要收集不同成分的纯化物质。

这些物质可以用于后续的实验研究或者工业生产中。

总结。

层析柱作为一种常用的色谱分离技术,具有分离效果好、操作简便等优点,在生物制药、化工、环境监测等领域有着广泛的应用。

柱层析色谱实验操作

柱层析色谱实验操作

柱层析色谱实验操作实验材料和仪器:-柱层析管:一般为玻璃柱或塑料柱,柱体高度和直径大小取决于分离样品的性质和分离条件。

- 色谱填料:根据样品特性选择合适的填料,如硅胶(Silica Gel)、石英砂等。

-柱层析溶剂:常用的溶剂包括乙醇、乙醇/醚混合溶剂、氯仿/甲醇混合溶剂等。

需要根据具体实验目的和样品特性选择合适的溶剂。

-样品溶液:待分离的样品需事先溶解在柱层析溶剂中。

-压力缓冲瓶:用于均匀地将柱层析溶剂注入柱中。

-分取装置:用于收集分离得到的化合物。

实验步骤:1.准备柱体:将填料均匀填充至柱体内,使用玻璃棒等器具轻轻敲打柱体,以使填料均匀密实。

2.预洗填料:使用柱层析溶剂预洗填料,以去除填料表面的杂质并平衡填料吸附性能。

洗涤过程中,需控制流速,避免填料结块或溢出。

3.载样:将待层析的样品溶液以毛细管滴入柱体顶部,可根据柱径大小和样品含量调整滴液量。

尽量将样品滴在填料的中央位置,避免样品直接接触柱壁。

4.层析:在样品上滴加柱层析溶剂,待样品被吸附后,逐渐加入柱层析溶剂使其通过填料床层。

控制流速,避免填料床层干燥。

5.分馏:根据样品在填料上的亲疏性质,样品分离成不同化合物带。

将收集瓶放在柱底并逐滴收集分离出的化合物带,每滴收集数毫升。

6. 监测:使用紫外-visible(UV-Vis)光谱仪或薄层色谱法检测一些化合物的洗脱位置,以确定分离出的化合物。

7.调整分离条件:根据监测结果,调整柱层析溶剂的成分、流速等条件以提高分离效果。

8.收集化合物:通过调整收集瓶位置和滴液速度,收集不同化合物带。

根据需要可收集多个分馏液。

注意事项:-柱层析操作应与急剧温变区分开,避免温度的突变导致柱体炸裂。

-柱层析溶剂的选择应根据样品特性、填料亲疏特性和期望的分离效果进行合理选择。

-控制柱层析流速,避免填料床层干燥或过湿。

-在收集分离得到的化合物时,注意收集次序,避免污染或错过目标化合物。

-柱层析过程中要保持柱体稳定,避免碰撞或倾倒。

层析柱设备的操作流程

层析柱设备的操作流程

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层析柱安全操作及保养规程

层析柱安全操作及保养规程

层析柱安全操作及保养规程1. 前言层析柱是一种广泛应用于化学、生物和制药领域的分离技术,用于分离、纯化、分析和鉴定各种化合物。

为了确保实验室工作人员的安全和设备的正常运行,本文档旨在介绍层析柱的安全使用和保养方法。

2. 安全操作2.1 实验室前的准备在进行任何实验前,需要进行以下准备:•确认实验室环境安全,如窗户是否关闭、通风是否畅通等;•检查实验仪器设备是否符合使用条件,如层析柱柱柱床、压力表、流量计等;•检查实验中重要物品的固定状态,如管路、试剂瓶等;•确认工作区域的清洁、整洁状态。

2.2 层析柱的安装•将柱床放于平整、稳固的支架上;•确认柱床与压力表、流量计、泵等设备管线连接正确、牢固;•安装层析柱时请勿受力过度使其变形;•检查保险丝和漏电保护器的状态,确保安全。

2.3 柱床的操作•初次启用柱床前,请先进行预洗;•操作柱床时,请先调节压力表和流量计到正确的数值;•确认流动相的污染情况,并适时进行更换;•当柱床内压力超出规定范围时,立即停止操作并检查问题所在;•操作时请勿使用手触碰柱床。

2.4 操作注意事项•操作层析柱时请佩戴合适的防护手套及口罩等防护用品;•实验过程中请注意防止试剂泼溅,避免接触试剂;•严禁将实验室内的食品和饮料放置在操作台上并在操作中食用;•实验完成后,请关闭气源及电源等设备,清洁试剂残留以及工作台面,并关上灯等未关闭的设备。

3. 保养规程3.1 日常保养•每次结束实验后,应将柱床内的样品用流动相冲洗,以减少内部残留;•随时保持柱床外壳的清洁;•对层析柱进行定期检验和保养。

3.2 定期保养•每6个月更换流动相及碳柱;•每12个月更换柱床和其他零部件。

4. 总结层析柱是一种广泛应用的实验仪器,但是在使用时需要严格遵守安全操作规程,并进行日常的保养工作。

只有保证实验的安全和设备的正常运行,才能够获得更准确的实验结果和更好的实验效果。

层析柱使用方法

层析柱使用方法

层析柱使用方法(总3页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--层析柱使用方法层析柱使用方法柱层析和TLC是有机化学工作者必须下苦功夫的两项实验技术。

这两项技术掌握与否,对于提高实验的效率至关重要。

常见的例子是:在柱层析时,由于层析柱中的硅胶填料装得不均匀(没有填严实),使得柱子在淋洗过程中就因为出现太多气泡变花,导致分离效果不好。

更常见的例子是:层析柱虽然装得不错,但是由于淋洗剂选择不恰当,结果导致几十毫克产品,用了几百毫升淋洗剂都还没有完全分离。

分离同样的东西,熟手可能只需要半个小时,而一个层析技术不过关的人可能半天都不能得到纯品。

由此可见,这两项技术掌握与否,对于提高工作效率,减轻工作量,减少有机溶剂的使用,从而对身心健康和环境保护都有明显的作用。

柱层析关键在于柱子是否装好和淋洗剂是否选择恰当。

而淋洗剂的选择则是通过TLC确定。

这里要指出的一点是:TLC的作用除了跟踪反应进程,检测试剂和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂。

首先谈柱层析: 1:装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。

不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。

湿法装柱:是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂“走柱子”,本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。

干法装柱:则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实。

接着是用淋洗剂“走柱子”,一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。

通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。

干法装柱较方便,但最大的缺陷在于“走柱子”时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚,二氯甲烷更为明显。

博格隆层析柱

博格隆层析柱

博格隆层析柱1. 简介博格隆层析柱(Boglon chromatography column)是一种用于分离和纯化生物大分子的柱状色谱技术。

该技术基于亲和层析原理,通过特定配体与目标分子之间的选择性相互作用,实现目标分子的富集和纯化。

2. 原理博格隆层析柱主要由以下几个组成部分构成:•柱体:通常由玻璃或不锈钢制成,具有一定的长度和内径。

•层析填料:填满柱体内部,提供表面积以增加目标分子与配体之间的接触面积。

•配体:固定在填料表面上,通过与目标分子的特异性相互作用实现富集和纯化。

博格隆层析柱的使用步骤如下:1.预处理:将填料置于适当的缓冲液中进行预处理,以去除杂质并激活配体。

2.样品加载:将待纯化样品溶液加载到层析柱中,并允许其与配体进行特异性结合。

3.洗脱:通过改变洗脱缓冲液的条件,如pH、离子强度等,实现目标分子与配体的解离和纯化物的洗脱。

4.收集纯化物:收集洗脱液中的目标分子,得到纯化物。

3. 应用博格隆层析柱在生物医药领域具有广泛的应用,主要包括以下几个方面:3.1 蛋白质纯化博格隆层析柱可以根据不同蛋白质的特异性与配体相互作用,实现对蛋白质的富集和纯化。

常见的应用包括抗体富集、酶富集等。

该技术具有高选择性和高效率的特点,可以在较短时间内得到高纯度的蛋白质。

3.2 高效液相色谱前处理博格隆层析柱可以作为高效液相色谱(HPLC)前处理步骤中的一部分,用于去除样品中的杂质和干扰物。

通过选择合适的配体和条件,可以实现对目标分子与杂质之间的差异性结合,从而净化样品并提高后续HPLC分析的灵敏度和准确性。

3.3 生物药物纯化博格隆层析柱在生物药物纯化中起到关键作用。

生物药物通常是由复杂的混合物组成,需要进行富集和纯化才能得到高纯度的目标产物。

博格隆层析柱可以通过与目标分子的特异性结合,去除杂质和副产物,得到高质量的生物药物。

4. 使用注意事项使用博格隆层析柱时需要注意以下几个方面:•配体选择:根据目标分子的特性选择合适的配体,以实现特异性结合和纯化。

flash柱层析使用方法

flash柱层析使用方法

flash柱层析使用方法Flash柱层析(Flash column chromatography)是一种常用于分离和纯化化合物的柱层析技术。

它基于分子在柱填料中的亲疏水性差异,通过溶剂的流动将混合物中的组分分离开来。

本文将介绍Flash柱层析的使用方法,帮助读者了解如何正确操作和利用该技术。

一、实验前的准备工作1. 选择合适的柱层析填料:根据待分离物的特性选择合适的填料,如硅胶、C18等。

2. 准备溶剂系统:根据待分离物的亲疏水性选择合适的溶剂体系,通常是两种或多种溶剂的混合物。

3. 预先准备好样品:将待分离物溶解在适当的溶剂中,并过滤以去除杂质。

4. 准备好适当大小的柱:根据样品量选择合适大小的柱,并用柱层析填料填充。

二、Flash柱层析的操作步骤1. 装填填料:将柱用适当溶剂洗涤,并用适当溶剂进行湿润,然后将填料装入柱中,注意不要产生气泡。

2. 将样品溶液加入柱中:用移液管将样品溶液缓慢地加入柱中,避免样品直接接触填料,以免影响分离效果。

3. 选择适当的溶剂流动速度:通过控制溶剂流速,使得样品在填料中适当停留时间,以实现有效分离。

4. 收集不同组分的洗脱液:根据待分离物的特性和溶剂系统的选择,调整洗脱液的组成和流速,以实现不同组分的分离和纯化。

5. 检测和收集目标化合物:使用合适的检测方法(如紫外可见光谱、质谱等)检测出目标化合物的洗脱峰,并及时收集。

6. 柱层析结束后的处理:将柱层析填料彻底洗净,并存放在适当的条件下,以备下次使用。

三、注意事项和常见问题1. 溶剂选择:根据样品的特性选择合适的溶剂系统,避免溶剂与填料发生反应或影响分离效果。

2. 填料的选择和装填:根据待分离物的特性选择合适的填料,并注意填充的均匀性和密实度。

3. 柱层析过程中的压力控制:避免柱层析过程中产生过高的压力,以免破坏柱和填料。

4. 分离效果的评估:通过监测洗脱液的波谱、质谱等检测方法,评估分离效果和纯化程度。

5. 样品的负荷量:根据填料的大小和待分离物的量选择合适的样品负荷量,避免超过填料的吸附容量。

flash柱层析使用方法

flash柱层析使用方法

flash柱层析使用方法(原创版4篇)《flash柱层析使用方法》篇1Flash 柱层析是一种快速、高效的液相色谱法,用于分离和纯化化合物。

以下是Flash 柱层析的使用方法:1. 准备Flash 柱:将Flash 柱连接到液相色谱系统中,使用适当的溶剂冲洗柱,以去除任何杂质或残留物。

2. 准备样品:将样品溶解在适当的溶剂中,使其适合进样。

对于液相色谱法,通常使用流动相作为溶剂。

3. 进样:将样品注入液相色谱系统中,使其通过Flash 柱。

可以采用手动或自动进样器进行进样。

4. 洗脱:样品在Flash 柱上通过液相色谱系统的流动相进行洗脱。

洗脱过程中,成分会在柱上形成不同的区带。

5. 检测:使用检测器检测柱上流出的成分。

常用的检测器包括紫外检测器、荧光检测器、电导检测器等。

6. 数据分析:通过数据分析,可以对分离的成分进行鉴定和定量。

可以使用各种软件工具进行数据分析。

7. 纯化:如果需要,可以使用Flash 柱层析对目标化合物进行纯化。

纯化过程中,可以通过多次洗脱和收集目标化合物来提高其纯度。

Flash 柱层析的使用方法取决于具体的应用和样品。

《flash柱层析使用方法》篇2Flash 柱层析是一种快速液相色谱技术,用于分离和纯化生物分子,如蛋白质、多肽、抗体等。

以下是Flash 柱层析的常用方法:1. 选择合适的Flash 柱:根据分离目标物的分子量、等电点、溶解度等因素选择合适的Flash 柱。

Flash 柱通常由硅胶基质、固定相和缓冲液组成。

2. 准备样品:将需要分离的样品溶解在适当的缓冲液中,并加入适量的蛋白质酶抑制剂以避免样品降解。

3. 上样:将样品注入到Flash 柱中,通常使用高压注射器。

样品在Flash 柱中通过固定相的吸附和解吸附进行分离。

4. 洗脱:样品分离后,使用适当的缓冲液将样品从Flash 柱中洗脱出来。

通常使用梯度洗脱方法,即逐渐改变缓冲液的pH 值或浓度,以将不同组分依次洗脱出来。

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目录
一产品介绍 (2)
二产品特点 (2)
三技术参数 (2)
四操作说明 (2)
五操作注意事项 (4)
六售后服务承诺 (5)
七合格证 (5)
八随机附件 (6)
一产品介绍:
层析过程是采用特殊的吸附剂,从植物提取液中选择性地吸附其中的有效部分,去除无效成分的一种分离纯化新工艺。

可以解决植提生产中所面临的剂量大、产品吸潮和重金属残留等实际问题。

经层析技术处理后所得到的精制物,可使有效成分高度富集,杂质少,提取得率仅为原生物的2~5%,而一般水煮法为30%左右,醇沉法为15%左右;可有效地去除吸潮成分,并增强产品的稳定性;可有效地去除重金属。

层析分离工艺所得提取物体积小,不吸潮,容易制成外型美观的各种剂型,尤其适用于颗粒剂、胶囊剂、片剂等的生产。

该技术将是对中药提取工艺影响最大、带动面最广的技术进步之一。

用于生物工程、制药工业、精细化工领域的分离纯化设计制造的工业制备,具有分辨高、选择性好、流动连续、效率高、处理稳定、样品可多可少、易于操作的特点,适用于含量少的复杂高分子物质的分离纯化,是中草药、化学合成药及生物活性物质有效成分分离提纯的核心设备。

二产品特点:
①合理的高径比,精密的进出口流体分布装置,保证层析柱装填效果和填
料再生效果,为高效分离提供了保障。

②产品采用不锈钢材料,并进行内外抛光,耐腐蚀、使用寿命长、硬度高、
运输安全,质量有保障。

③本设备确保无污染、效率高、操作方便等。

三技术参数
四操作说明
层析操作流程一般为:预处理,逆流洗柱,水洗,吸附,解吸、再生等工艺。

1、预处理:在吸附树脂的生产过程中,一般均采用工业级原料,产品没有经过进一步纯化处理,因此树脂内部往往残留少量单体,致孔剂和其他有机杂质,所以在使用之前必须进行预处理。

吸附树脂预处理方法如下:
(1)将准备装柱使用的新树脂,用2倍左右体积的甲醇或其他水溶性溶剂(如乙醇、丙酮)浸泡2小时,并不时搅动,使树脂充分溶胀。

(2)、将已充分溶胀的吸附树脂装柱,以每小时3至4倍床体积的流速,将5至8倍的甲醇或其他水溶性的溶剂(如乙醇、丙酮)通过树脂层,至流出液加水稀释不变混。

(3)、甲醇处理后,以每小时6至8倍床体积的流速将去离子水通过树脂层,置换出甲醇即可投入使用。

2、逆流洗柱:逆流洗柱是用水洗除去水离子及破碎填料,树脂装入交换柱后,用蒸留水反洗树脂层,展开率为50-70%,直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止,再用50%-100%乙醇10-15倍体积慢速淋洗。

2、用约2倍体积的4-5%HCl溶液,以2m/h流速通过树脂层。

全部通入后,浸泡4-8小时,
排去酸液,用洁净水冲洗至出水呈中性。

冲洗流速为10-20m/h。

3、用约2倍树脂体积的2-5%NaOH溶液,按上面进HCl的方法通入和浸泡。

排去碱液,用洁净水冲洗至出水呈中性。

流速同上。

酸碱溶液若能重复进行2-3次,则效果更佳。

经预处理后的树脂,在第一次投入运行时应适当增加再生剂用量,以保证树脂获得充分的再生。

3、水洗:水洗目的主要是除去层析柱上所附着的渣滓。

4、吸附:吸附操作自上而下(或自下而上)通液,可采用不同流速,以选取最佳条件,一般流速sV 2—8。

流出液每间隔一段时间取样检测,达泄漏点停止吸附,或多柱串联达饱和后解吸。

是最关键的一个过程,吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物,该过程应控制料液的速度及吸附量,大孔树脂应完全浸泡在料液里,这样吸附效果最好,整个过程应稳定运行。

5 、解吸:解吸(再生):解吸剂选择:吸附饱和后的树脂应选用最能溶解吸附质的溶剂进行解吸或洗脱再生。

解吸剂沸点要低以便回收处理。

典型的解吸剂有甲醇、乙醇、丙酮、二氧六环、苯、甲苯或稀酸、稀碱及有机溶剂与水、酸、碱的混合物、还有混合溶剂。

解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸剂,单柱吸附时,解吸效果与吸附操作对流为佳。

一般流速可控制在0.5~2SV,解吸剂用量约为树脂体积的2~3倍。

操作流程参数表:
注:以上参数供参考
五操作注意事项:
1.运输及贮存过程中应保持5-40℃环境中,避免过热过冷。

注意不使树脂变干,以免孔结构发生变化。

2.树脂装填在吸附柱中使用,装填前应对设备管道进行清洗,以防有害物对树脂产生污染(如铁污染)。

3.料液通入树脂床前应除杂、澄清、过滤,以免污染树脂。

4.树脂停运时间过长,停运前要充分解吸,洗净,并以大于10%食盐溶液浸泡,以避免细菌在树脂中繁殖。

六售后服务承诺:
1)及时向需方提供按合同规定的全部技术资料各图纸,有义务在必要时邀请需方
参与供方的技术设计审查。

2)按需方要求的时间到现场进行技术服务,指导需方按供方的技术资料各图纸要
求进行安装、分部与整套试运及试生产。

3)对于需方选购的与合同设备有关的配套设备,供方应主动提供满足设备接口要
求的技术条件各资料。

4)严格执行供需双方就有关问题如开会议的纪要或签订的协议。

5)根据需方的要求为需方举办有关设备安装、调试、使用、维护技术的业务培训,
保证需方运行、维修人员熟练掌握运行各维修技能。

6)加强售前、售中、售后服务,把“24小时服务”,“超前服务”,“全过程服务”,
“终身服务”贯彻在产品制造,安装、调试、大修的全过程。

7)接到需方反映的质量问题信息后,在24小时之内做出答复或派出服务人员,尽
快到达现场,做到用户不满意,服务不停止。

8)随时满足需方对备品备件的要求。

9)无论在何种情况下,供方决不以任何理由刁难需方。

七合格证。

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