半夏组织培养研究概况
半夏组织培养关键技术研究
LNAA中增 殖倍 数 高, 8 5倍 ; 为 . 叶片 、 叶柄 在 培 养基 30 .
mg L6B / -A+ 0 5m / A 中 小 块 茎 的 诱 导 率 较 高 , . g LN A 达
8 . , 6 7 在培养基 2 0 / 一A+0 1 / . mg L6B . mg LNA 中增 殖倍 A 数较 高, 54倍 ; 为 . 半夏试管苗在增殖培养 中同时分化 出根 ,
55 。
1 材 料 与 方 法
1 1 材 料 来 源 .
2 2 激素的不 同浓度和种 类对半夏芽及块茎诱导的影响 . 将处理好 的块 茎接 种 于诱 导 培养 基 F 1 0 F 3 0 、F 2、 0 、 F4 0 0 、F 5中, 7 1 d培养 , 茎顶端 的芽 逐渐萌动生 长 , 经 ~ 0 块 3  ̄4 0 0d后 , 长 至 2 3 m。从 表 1可 见 , 芽 ~ c 培养 基 F 1 0、
2 结果 与 分 析
2 1 外 植 体 不 同 时 间段 的 灭 菌 效 果 .
将半 夏的块 茎 、 片、 叶 叶柄作 为外植体 , 1 的升汞分 用 别进行 3 5 8 1 ri 、 、 、2 n的灭菌 消毒处 理结果表 明块 茎、 a 叶片、 叶柄 消毒 时间短 , 污染较严 重 , 但成活率 较高 ; 消毒时 间长 , 污染较低 , 但死亡率较 高; 块茎灭 菌 以 8 i a r n的效果 较好 , 成 活率 达 7 ; 5 叶片 、 柄 灭菌 以 5 i 果较好 , 活率 达 叶 a r n效 成
维普资讯
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20 0 8年
第 3期
半夏 组 织 培 养关 键 技 术 研 究
半夏的组织培养研究进展
0科教前沿0
科技信息
半夏的组织培养研究进展
陶兴魁 冯 志敏 ( 淮北 师范大 学 生命科 学学 院 安徽 淮 北
2 50) 3 0 0
【 摘 要】 半夏是一种常用的传统 中药材 , 具有重要 的药用价值。 本文叙述 了近年 来研 究人 员在半夏组织培 养上的研究进展 。 并对半夏进一 步 开 发 利 用所 涉及 到 的 一 些 问题 进 行 了初 步探 讨 。 【 关键词 】 半夏 ; 组织培养; 工种子 人 【 src】/el emt sacmm n t dt n C iee hra dcn。wt mpr n e iia vle h h s u mai srsac AbtatPh latr 2 i o o r io hns eblmeiie i i ot tm dcnl a .T etei sm r e eerh i a a i h a u s z
p o rs i tsue c l r n Ptraa i e e ty as rge sOl is ut e i . n t n rc n e r.An o eaie q eto s ae dsu s d p ei n rl so itd wih Ptrae’ ute u e d s me rlt u sin l ic se rlmiaiy a scae t .en t s f r r v h
生 出植 株 。
础
6 结语 和 展 望
植 物 组 织 培 养 作 为 一项 重 要 的 生 物 技 术 存 在 无 限 的 潜 力 和 市 场 开 发 价值 。半 夏 的 组 织 培 养 也 还有 不 少 问题 需 要 更 进 一 步探 讨 研 究 。 61 半 夏 组 织 培 养 条 件 的 完 善 . 对 于半 夏 最 佳 外 植 体 的选 择 ,不 同 的学 者 研 究 的结 果 有 所 差 异 , 甚 至 差异 很 大 , 生 的原 因 可能 跟 不 同 学 者 研 究 的半 夏 品 种 、 选 培 产 所 养 基 、 添 加 的 生 长 调 节 物 质 以 及 当 时 培 养 的外 界 条 件 等 不 同 可 能 有 关。 植 物 的 生 长 调 节 物 质 特 别 是 生 长 素 类 和 细 胞 分 裂 素类 已 证 实 对
半夏的组织培养研究
半夏的组织培养研究马宗新(安徽省阜阳市农科所,安徽阜阳236065)摘 要:本文以半夏茎尖,叶片为材料进行组织培养研究,结果表明茎尖培养基为MS+BA1.0+NAA0.05mg/L,增殖培养基为BA1-1.5mg/L+NAA0.5-1.0mg/L,半夏的不同器官均能够进行培养出芽,本文还探讨了试管小球的形成条件,BA对试管小球的形成起关键作用,糖浓度在30-160g/L范围均有试管小球形成而以80g/L形成小球较多,在MS+BA1.0+NAA0.8mg/L+糖45g/L,无光照条件下形成小球较大。
关键词:半夏;组织培养;试管小球中图分类号Q949.99 文献标识码B 文章编号1007-7731(2009)08-040-02Study on The tissue culture of Pinellia ternate(Thunb) BreitMa ZongXin(FuYang Agriculture Institute of AnHui Province, FuYang 236065, China)Abstract: The blade and shoot tip of Pinellia ternate(Thunb) Breit as a material in vitro culture are studeid , the result indicate that the shoot tip culture medium is MS+BA 1.0+ NAA0.05 mg/l, the multipropagation culture medium is MS +BA1-1.5 mg/l+ NAA0.5-1.0 mg/l, the different organ of Pinellia ternate(Thunb) Breit all produced adverilitious buds earsily, the formulating condition of the tube bulb was studied in this article ,the result showed that the BA is the key to the tube bulb formulation. when the sugar oncentration was 30-160 g/l, the tube bulb occurred ,and the concertration was 80 g/l, the bulb grow smaller, and with MS+ BA 1.0+ NAA0.8mg/l+sugar 45 g/l as media, the bulb grow biggest.Key words: Pinellia ternate(Thunb) Breit; tissue culture; tube bulb半夏[Pinellia ternate(Thunb) Breit],天南星科草本植物,有狗爪半夏[Pinella ternate(Thunb)Breit],三叶半夏(Pinella,ternate),掌叶半夏(Picria,Pedatisecta)3个种。
半夏组培研究综述
半夏组培研究综述半夏又叫水玉、地文、和姑、害田、示姑、羊眼半夏、地珠半夏、麻芋果、三步跳、泛石子、老和尚头、老鸹头、地巴豆、无心菜根、老鸹眼、地雷公、狗芋头。
多年生小草本,高15~30厘米。
花期5~7月。
果期8~9月。
野生于山坡、溪边阴湿的草丛中或林下。
中国大部分地区有分布。
二.半夏的药理作用1.镇咳作用生半夏、姜半夏、姜浸半夏和明矾半夏的煎剂,0.6-1g/kg i g或i v,对猫碘液注入胸腔或电刺激喉上神经所致的咳嗽有明显的镇咳作用,且可维持5小时以上。
0.6g/k g的镇咳作用接近于可待因lm g/k g 的作用。
2.抑制腺体分泌的作用:半夏制剂i p,对毛果芸香碱引起的唾液分泌有显著的抑制作用,亦有报道煎剂p o时,唾液分泌先增加,后减少。
3.镇吐和催吐作用半夏加热炮制或加明矾、姜汁炮制的各种制剂,对去水吗啡、洋地黄、硫酸铜引起的呕吐,都有一定的镇吐作用。
上述3种催吐剂的作用机制不同,而半夏都可显示镇吐作用,推测其镇吐作用机制是对呕吐中枢的抑制。
4.抗生育作用半夏蛋白 1.25mg/ml(在0.9%Na Cl中)s c0.2ml对早孕小鼠的抑孕率为50%。
结晶半夏蛋白经6M盐酸胍变性后,用分步透析法(即用缓冲液等体积递减稀释变性剂),最终恢复半夏蛋白在生理盐水中平衡,去除变性剂后可以重新天然化,并恢复其原有活力。
不同逆转条件的恢复半夏蛋白,对小鼠抗早孕的抑孕率在69-88%之间,仅一种逆转条件为5-8℃者,抑孕率仅36%。
利用辣根过氧化物酶标记定位术显示子宫内膜、腺管上皮细胞以及胚胎外胚盘锥体上某些部分细胞团和半夏蛋白有专一性的结合。
这些部位很可能就是外源蛋白质一半夏蛋白的抗孕作用部位。
如直接将半夏蛋白注入小鼠子宫腔内也表明有抗早孕作用。
如果上述结合部位确实是半夏蛋白影响小鼠已着床的子宫内膜和胚胎,产生抗早孕作用,则上述部位也可能起着床识别的作用,因为半夏蛋白不仅能终止小鼠早期妊娠,还有制止兔胚泡着床的效应。
半夏组织培养体系的建立
该试验 以野生半夏为试材 , 采 自湖南农 业大学校 园 内, 以半夏顶芽及块茎为外植体 。
收稿 日期 : 2 0 1 2 —1 O 一2 3
S c r e e n i n g T e s t o n t h e P r o p a g a t i o n Me d i u m o f Ac t i n i d i a e r i a n t h a B e n t h S e e d l i n g s i n v i t r o
YU Ha i - y a n 。 CHE N Ga n g 。 J I AN De - f e n g ( J i l i n Ag r i c u l t u r a l S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y Un i v e r s i t y , J i l i n , J i l i n 1 3 2 1 0 1 )
要进一 步探讨 如何高 效和最 大 限度 地利 用优 良单株有
由于长期过度 采挖 , 半 夏野 生资源 已近枯 竭 , 远 不 能满足市场需 求 , 现 已进行 人工种植 。半 夏 的人工 栽培 历史较短 , 始于 2 O 世纪 7 0年代 的山东和江苏等 地 。半 夏人工 种植 中通 常以块茎作 生产用种 , 产 量品质逐 年下 降, 而且种源退化严重 。而 由于半夏是一种 长期野 生的
中图分类号 : S 5 6 7 . 2 3 9 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 1 -0 0 0 9 ( 2 0 1 3 ) O 4 —0 1 1 3 一O 5
半 夏[ P i n e l l i a t e r n a t a ( T h u n b . ) B r e i t . ] 属 天南 星科
半夏组织培养方法的比较研究
北方园艺2008(8):188~190
半夏组织培养方法的比较研究
郝会军,陈美霞,丁雪珍,刘
(潍坊职业学院.山东潍坊261031)
英
摘要:研究半夏块茎组织培养,探讨不同灭茵方法对半夏成活率的影响及不同培养基对形 态发生的影响,结果表明:O.1%的升汞灭菌15 rnin效果最佳;2,4一D 1.o组合有利于愈伤组织形成,诱导率最高;6一BA 导生根效果好。 关键词:半夏;组织培养;比较研究 中图分类号:S 567.23+9文献标识码:A文章编号:100l一0009(2008)08一0188一03 半夏是天南星科半夏属多年生草本植物,是一种重 要的中药材。以块茎入药,具镇咳祛痰、和胃止呕、祛风 定惊、消肿散节等多种功效,目前仅国内全年用量就达
1材料和方法
1.1材料 半夏块茎取自潍坊职业学院实训基地组培中心。 1.2方法
1.2.1 o.5
灭菌
取半夏块茎切成o.5锄×o.5咖×
1.5嘲;处理Ⅱ:ⅣIS+6一BA
3.O+NAA O.4L20;
cm立方体小块,在流水中冲洗干净,经灭菌后接种
处理Ⅲ:MS+2,4一D 0.1+KT 1.o[u;处理Ⅳ:MS+KT
5.0+KT 1.O[13;处理V:MS+6一B氖O.75十NAA O.2。
1.2.3愈伤组织增殖
以半夏块茎诱导形成的愈伤组
织为材料进行增殖,接种到不同激素组合、不同激素浓 度的MS基本培养基上进行培养,2周后统计结果。不 同激素组合的培养基如下:处理I:MS+6一BA
MS+L气A 4.O+6-BA
2.o+N从
1.OL5J。
O.2[23;处理Ⅱ:MS+6一BA 1.0+NAA o.2Ⅲ;处理Ⅲ: O.5Ⅲ;处理Ⅳ:MS+IAA 1.2.4器官分化将诱导好的愈伤组织接种到不同激 素组合、不同激素浓度的MS培养基上。2周后统计结 果。不同激素组合的培养基如下:处理I:MS+2,4一D
半夏的分生组织培养与快速繁殖技术研究
TECH N oLo GY Y STEM S FoR STEM . PEX ERI A M STEM CU r URE AND
RAP D P I RoGAGAT oN oFP I
珊
A ( HUNB.BRE T 7 T ) I
PENG a g q a ZHANG e — i Xi n — in, W n hu
( l g f f ce c , a c e g Un v riy Lio h n , h n o g2 2 5 , ia) Co l eo Li S i n e Lio h n i e s , a c e g S a d n 5 0 9 Ch n e e t
Ab ta t iel raa(h n )B et vrsf e se l g n ts tb r ba e ytemeh d o src :P n la t n t T u b ri i — e e di si et u ewee o ti d b to f i e . u r n n h
不 同浓度 的外源激素的培养基进行 了一 系列优 化试验 ,筛选 出半夏脱病毒试管苗最佳 的繁殖培养 基。结果表明: 在 MS 6苄氨基腺嘌呤(一A) . mgL 萘 乙酸( AA 01 / + 一 氨基嘌呤( T 01mgL的培养基 中诱导效果 +- 6B 20 /+ N ) .mgL 6糠 K ). 0 /
半夏规范化种植关键技术及组培快繁体系建立的研究共3篇
半夏规范化种植关键技术及组培快繁体系建立的研究共3篇半夏规范化种植关键技术及组培快繁体系建立的研究1半夏规范化种植关键技术及组培快繁体系建立的研究半夏是一种草本植物,具有广泛的药用价值,包括清热解毒,活血止痛等功效。
然而,由于采摘和种植不规范,半夏种植的质量和产量受到了很大影响。
为了提高半夏种植的效率,保证半夏资源的可持续利用,需要进行规范化种植的研究。
半夏规范化种植的关键技术包括:选地、施肥、定植、灌溉、除草等。
如何选择适宜的种植地是规范化种植的第一步。
半夏喜欢生长在湿润的环境中,但不能太过潮湿。
因此,要选用排水良好的土地,并且在施肥时要采取科学的方法。
对于不同的土壤类型,要制定相应的施肥计划以满足植株的需求。
在定植时,应该根据实际情况选择适当的密度,以避免种植过密或过疏导致的影响。
在灌溉方面,需要注意避免水分过多或过少的问题,对于半夏的生长,要掌握好湿润度的平衡。
在除草方面,可以采用物理除草和化学除草相结合的方式,以达到最好的效果。
此外,为了提高半夏的种植效率和产量,建立组培快繁体系也是十分必要的。
半夏的组织培养和快速繁殖技术已经得到很好的研究,主要包括对组织培养基的合理配方和培养环境的优化,以及对半夏快速繁殖的方法和过程的研究。
建立起完整的半夏组培快繁体系,可以大大提高半夏的种植效率,并且能够更好地控制半夏的品质。
总之,半夏规范化种植的关键技术和组培快繁体系的建立对于提高半夏的种植效率和保护半夏资源具有重要作用。
在种植过程中,需要考虑到土壤、气候、栽培、病虫害等因素,综合分析选择最适合半夏生长的方法和技术,以实现稳定的种植产量和高质量的半夏药材综合以上分析可知,半夏的规范化种植和组培快繁体系的建立对于半夏药材的高质量和高产量具有重要作用。
若想要保护半夏资源和提高种植效率,应该在选择适宜的种植地、科学施肥、合理灌溉和除草等方面用心,同时建立起半夏的组培快繁体系,以有效地实现稳定的种植产量和高质量的半夏药材半夏规范化种植关键技术及组培快繁体系建立的研究2半夏是一种珍贵中药材,在中医学中广泛使用。
半夏组织培养体系和遗传转化体系的建立
半夏组织培养体系和遗传转化体系的建立半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit)属天南星科多年生宿根草本植物,主要产地是中国和日本。
半夏在中药材中的使用排名是第22位,作为一种传统的中草药,其加工的产品具有多种药理作用,如燥湿化痰,和胃,主治痰湿水饮,呕吐,咳喘等。
在自然生态条件下,野生半夏主要依赖块茎、珠芽进行无性繁殖,繁殖率偏低。
为满足用药需求,人类长期依赖采集半夏野生资源,但由于环境污染和耕作制度改革,导致了市场上半夏野生资源供不应求。
为满足市场需求,人工长期进行半夏的无性繁殖和高密度种植,不仅造成危害半夏的植物病毒、内生菌和致病微生物的快速横向扩散,而且造成病毒垂直传播在植株中大量积累,严重影响产量及品质。
同时调查发现,田间杂草也同样威胁着半夏产量。
随着生物技术的发展,使用植物组织培养技术可获得大批量的半夏种苗,利用茎尖脱毒技术对半夏进行脱毒,能够有效保障半夏品质,利用基因工程技术得到抗草甘膦半夏新品种,可有效降低半夏的栽培管理成本。
本研究选用半夏叶柄为研究材料,探索不同培养基配方对半夏无菌苗叶柄诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化、生根的影响。
结果表明:半夏叶柄诱导脱分化最佳培养基是MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L6-BA。
愈伤组织增殖最适培养基是MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA。
分化最适培养基是MS+1.0mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。
半夏生根最适培养基是1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.01 mg/L 6-BA。
同时得到半夏一步成苗的最佳培养基是MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA。
本研究运用茎尖脱毒技术,获得半夏脱毒苗。
用RT-PCR法检测黄瓜花叶病毒CMV和大豆花叶病毒SMV的脱毒情况,检测的5株脱毒苗中,有1株成功脱除黄瓜花叶病毒,有4株成功脱除大豆花叶病毒,仅有1株成功脱除两种病毒。
半夏调研报告
半夏调研报告半夏是一种中药材,也是一种具有药用价值的植物。
在传统中医药中,半夏被广泛用于治疗消化系统疾病、呼吸系统疾病和心血管疾病等。
随着现代科技的发展,越来越多的研究发现半夏具有抗菌、抗炎、抗肿瘤和增强免疫力等多种功效。
本报告将对半夏的调研进行详细阐述。
首先,我们对半夏的基本信息进行了收集和整理。
半夏,学名Pinellia ternata,为天南星科植物,以鳞茎入药。
主要产地有湖南、湖北、江西、安徽等地。
半夏植株通常高度介于20-100厘米之间,叶片呈心形,花朵比较小,呈现绿色或者白色。
其主要药用部位是鳞茎,呈块茎状。
其次,我们对半夏的药理学研究进行了调查。
半夏中含有大量的有效成分,其中主要成分是黄酮类物质、挥发油和脂肪油等。
这些成分对人体具有一定的药理作用。
研究发现,半夏具有抗菌、抗炎、抗肿瘤和增强免疫力等功效。
其中,半夏黄酮类物质具有一定的抗菌作用,可以抑制多种病原微生物的生长繁殖。
半夏挥发油具有净化空气、杀菌消炎和提神醒脑的作用。
半夏脂肪油则可以增加人体细胞的抗氧化能力,预防和延缓衰老过程。
另外,我们还对半夏在临床应用中的研究进行了梳理。
据统计,半夏在中医临床中被广泛应用于消化系统疾病、呼吸系统疾病和心血管疾病的治疗中。
例如,半夏可以用于治疗胃痛、腹泻和呕吐等消化系统问题。
半夏还可以用于治疗感冒、咳嗽和哮喘等呼吸系统疾病。
此外,半夏还具有舒张血管、降血压的作用,对心血管疾病的治疗也具有一定的效果。
最后,我们还对半夏的副作用和安全性进行了研究。
半夏作为一种中药材,它的使用也需要注意一些问题。
在临床应用中,半夏的剂量和用法需要严格控制,以避免出现不良反应。
同时,半夏对于儿童、孕妇和哺乳期妇女禁用。
此外,一些过敏体质的人可能对半夏过敏,出现皮疹、皮肤瘙痒等症状。
综上所述,半夏作为一种中药材具有重要的药用价值。
其药理学研究和临床应用表明,半夏具有多种药理作用,对人体具有一定的健康益处。
然而,在使用半夏前,需要充分了解药物的禁忌症和副作用。
半夏的组织培养与快繁试验
半夏的组织培养与快繁试验作者:杨玉珍王西雨胡如善孙廷来源:《山东农业科学》2010年第01期摘要:以传统中药半夏的小块茎为外植体进行组织培养,对适合不定芽分化增殖、生根的培养基进行了研究。
结果表明,利于愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L,利于不定芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L,利于生根的培养基为MS+ NAA 0.5 mg/L。
试验表明,应用本项组织培养技术大批量生产优质半夏种苗是可行的。
关键词:半夏;不定芽诱导;增殖;组织培养;快速繁殖中图分类号文献标识号:A文章编号:1001-4942(2010)01-0010-02Tissue Culture and Rapid Propagation of Pinellia ternataYANG Yu---(1. Center ofNanyang Garden Bureau, Nanyang 473003, China)Abstract The small tubers from Pinellia ternata were used as explants for tissue culture.The culture media for multiplication of adventitious bud and rooting were studied in this paper. The results indicated that the suitable culture medium for inducing calli was MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L, while that for multiplication of adventitious bud was MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,for rooting was MS + NAA 0.5 mg/L. And it was practicable to produce a large number of high quality Pinellia ternata plantlets by this tissue culture technique.Key words Pinellia ternata; Adventitious bud induction; Multiplication; Tissue culture; Rapid propagation半夏(Pinellia ternata)是一味常用中药,属天南星科半夏属,以块茎入药。
半夏人工种茎的组织培养优化与栽培及半夏子芽发生研究
半夏人工种茎的组织培养优化与栽培及半夏子芽发生研究半夏Pinellia ternat(Thunb.)Breit为天南星科多年生草本植物。
半夏以地下块茎入药,块茎扁球形,有毒,炮制后方可入药,具有化痰燥湿,降逆止呕,散结消痞的功效,是我国常用中药材。
由于半夏野生环境的破坏和人们的过度挖掘,野生产量锐减;人工种植因其繁育系数低,严重限制半夏栽培面积扩大和经济效益的提高。
目前关于半夏组培快繁已有报道,然组培苗移栽麻烦,成苗率低。
本实验室叶双凤通过组织培养获得了半夏人工种茎,克服了组培苗的不足,然愈伤组织到人工种茎全程固体培养基的培养使每瓶组培物长势不一致,需要获得成熟度一致的人工种茎就需要增加转瓶次生,导致操作繁琐,不利于生产推广。
本论文就半夏人工种茎组织培养流程进行了优化,采用悬浮培养扩繁得到长势一致的愈伤组织再进行人工种茎诱导,只需一次转瓶就可收获成熟期较为一致的人工种茎;本论文对组培的半夏无菌苗和人工种茎进行了盆栽试验,通过植株长势、物质积累及碳水化合物、叶绿素含量的变化比较,发现人工种茎的盆栽品质略优于无菌苗;本论文对田间发现的某些半夏块茎长有子芽现象进行研究,在实验室内对半夏块茎进行各种创伤处理,使其产生子芽。
主要试验结果如下:1.采用悬浮扩繁愈伤组织,组培流程中组培物的生长较为一致为了获得成熟期较为一致的人工种茎,需要将固体培养基上诱导获得的愈伤组织分批次的转瓶到人工种茎培养基上,每瓶愈伤要经过3-4次的转瓶,而采用悬浮扩繁愈伤组织可获得生长一致的愈伤组织,经过1次转瓶即可获得成熟期较为一致的人工种茎。
2.悬浮培养液配方及愈伤组织来源影响悬浮培养的结果胚性愈伤专用培养基(MS+0.1 mg/L IAA+0.2 mg/L ABA+20 g/L PEG+3%蔗糖)诱导获得的愈伤组织经低蔗糖浓度(10 g/L)蔗糖的营养液悬浮培养发育为质地较柔软的微块茎颗粒,经高蔗糖浓度(50 g/L)的营养液悬浮培养扩繁获得长势一致的愈伤;无菌苗专用培养基诱导获得的愈伤组织经高蔗糖浓度的营养液悬浮培养发育为较坚硬的微块茎小颗粒,胚性愈伤专用培养基(MS+0.1 mg/L IAA+0.2 mg/L ABA+20 g/L PEG+3%蔗糖)诱导获得的愈伤组织经悬浮培养扩繁出长势一致的愈伤组织。
旱半夏组织培养条件的优化研究
旱半夏组织培养条件的优化研究旱半夏(Panicumtortum)一种多年生草本植物,是一种重要的饲料作物。
虽然它在草原和林区的特定条件下能够自然繁殖,但是作为一种多花型植物,经过数代品种改良,它可以被用作饲料作物,种植在饲料农场中。
在种植饲料作物时,要获得更高的产量,就必须要充分考虑到旱半夏的生长发育条件,优化培育条件,使它适应种植环境。
旱半夏对环境条件要求非常高,它最主要的生长环境包括土壤、气候和水质等以及太阳辐射,全都需要调整到最佳的状态,才能使它获得最佳的生长条件,长出更优质的枝条、花朵和穗,从而产生更高的产量。
首先,旱半夏对土壤湿度要求较高,需要充分浇水,发芽、萌芽速度快,幼苗容易破伤,所以在种植之前要测量土壤的硬度,确保土壤处于合适的状态。
其次,旱半夏的沙质土壤比其他土壤要求更高,沙质土壤是一种缺乏肥力的土壤,需要施加充足的肥料,以提供植物所需的微量营养物质,保证土壤的肥力状态,使植物可以获得最佳的生长条件。
另外,旱半夏要求阴凉干燥的环境,不能长时间暴晒,此外,旱半夏也对水分要求较高,它需要在每天中午和傍晚分开施水,增加保水能力,使植物叶片朝向太阳,充分吸收光辐射,提高对光的利用。
此外,旱半夏对养分的需求也较高,可以预先施用氮、磷、钾等养分,还可以在植株发生病害时,施用相应的农药,以防止植株发生病变,以达到系统性治疗的目的。
总之,要想获得良好的旱半夏种植效果,就必须合理安排种植环境,充分考虑到旱半夏对土壤、气候和养分的要求,优化培育条件,使旱半夏植株得到最佳的生长环境,从而获得更高的产量。
经过多年科学研究,研究人员发现了旱半夏的生长发育条件,根据这些条件,研究人员设计了专门优化旱半夏植株培育条件的种植系统,研究了各种培养条件对旱半夏的影响,建立了一套人工干预技术,并培育出更高品质的植株,从而获得更高的产量。
例如,在温室种植旱半夏时,温室内要调节气温、湿度、光照和施肥等指数,这些指数是旱半夏在温室种植条件下不同生长发育变量的主要指标,可以调节旱半夏在温室种植中的生长发育,使植株获得最佳的生长环境,从而提高产量。
半夏栽培技术和组培育苗研究进展
半夏栽培技术和组培育苗研究进展作者:黄和平王辉高广印来源:《安徽农业科学》2017年第02期摘要半夏为常用中药材,因野生资源匮乏,药材商品主要来源于人工栽培。
对半夏近年来的栽培技术、组培育苗研究进行综述,为半夏资源的保护和利用提供依据。
关键词半夏;栽培;采收加工中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2017)02-0146-02Abstract Pinellia ternate is a kind of commonly used Chinese herbal medicine,medicinal products are mainly from artificial cultivation due to the scarcity of wild resources.Researches about cultivation technology of P.ternate and tissue culture for seedlings growing in recent years were reviewed,so as to provide a basis for protection and utilization of P.ternate resource.Key words Pinellia ternate;Cultivation; Harvesting and processing中药半夏为天南星科植物半夏[Pinellia ternate(Thunb.)Breit.]的干燥块茎,性温、味辛,有毒,具有降逆止呕、燥湿化痰、消痞散节之功效,临床上用于痰饮喘咳、胸脘痞闷、恶心呕吐、眩晕等症[1]。
近年来半夏野生资源日渐枯竭,为保证药材供应,人工栽培已成为必然选择。
笔者基于相关文献资料,对半夏栽培技术和组培育苗研究进行综述,以期为半夏资源的保护与利用提供依据。
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关于半夏组织培养物中生物碱含量的研究【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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关于半夏组织培养物中生物碱含量的研究【摘要】目的探讨不同激素种类和配比的培养基对半夏培养物生物碱合成的影响,为提高半夏有效成分在植物体内的富集提供理论依据。
方法采用氯仿提取,依据酸性染料比色法的原理,在417 nm 波长下测定,并作方差分析。
结果获得良好的线性关系(r=0.998 9)和回收率(100.1%),RSD 为2.3%。
MS + 2.0 mg/ml NAA + 0.5mg/ml KT 培养基最适合半夏培养物生物碱的积累,平均高达0.980 2%,不含2,4-D 的培养基所诱导的愈伤组织和分化出的不定芽、不定根、再生块茎所产生的生物碱明显高于含有2,4-D 的培养基所诱导的愈伤组织和分化出的不定芽、不定根、再生块茎所产生的生物碱。
结论激素种类和配比对半夏组织培养物中生物碱含量的影响较大。
【关键词】半夏; 组织培养物; 生物碱中药半夏为天南星科多年生草本植物半夏Pinellia ternate (Thunb.) Breit 的干燥块茎,在我国大部分地区及朝鲜半岛和日本均有分布。
半夏入药首载于《神农本草经》《中国药典》2005 年版收载为唯一的半夏类药材植物。
半夏块茎主要含有生物碱、- 谷甾醇、多糖、半夏蛋白、氨基酸、挥发油及无机元素等多种化学成分,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功效。
目前市售镇咳类中药复方制剂中多含有半夏,而生物碱在众多的化学成分中具有明显的生物活性和生理功能,是中药半夏中主要有效成分之一[1]。
近年来,由于临床配方、成方制剂中原料的需求和出口的增加[2],加上耕作技术的改变和常年采挖,半夏野生资源逐渐减少,已经多年不能满足市场需要。
为了满足国内外市场对半夏的需求,给国内外市场提供优质无公害的绿色半夏药材,本研究通过探讨不同激素种类和配比的培养基对半夏培养物生物碱的合成的影响,为中药半夏生产提供理论依据。
半夏组织培养研究进展
半夏组织培养研究进展
王朝英;李璐;王静;邱璐
【期刊名称】《云南农业》
【年(卷),期】2008(000)005
【摘要】半夏组织培养以根、茎、叶、种子、珠芽等做外植体,以浓度为0.2%的HgCh消毒4min(雨季消毒4.5min)。
以MS为基本培养基,以KT、ZET、2ip配合NAA诱导不定芽及愈伤组织,以NAA为0.5—1.0ng/L+活性碳0~0.3%诱导根形成,以浓度为3%的蔗糖作为碳源,以CH300mg/L、琼脂8g
/L控制褐化,pH值为5.8.光强为1500IX,光照时间为12h/d,黑暗12h/d,培养温度为25—28℃。
【总页数】3页(P29-31)
【作者】王朝英;李璐;王静;邱璐
【作者单位】楚雄师范学院,675000
【正文语种】中文
【中图分类】S567.239
【相关文献】
1.半夏的组织培养研究进展 [J], 陶兴魁;冯志敏
2.半夏组织培养一步成苗技术的研究进展 [J], 罗成科;彭正松
3.荆半夏组织培养条件的优化 [J], 骆淑媛; 宋薇; 樊康华; 邓丽娟
4.半夏组织培养研究进展 [J], 胡文斌;张少飞;王一峰;孙娜
5.半夏组织培养研究进展 [J], 胡文斌;张少飞;王一峰;孙娜
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半夏组织培养及其生物碱代谢调控的研究
半夏组织培养及其生物碱代谢调控的研究刘永红;杨渊华;梁宗锁【摘要】以野生半夏块茎为外植体,研究不同植物生长调节剂组合对半夏愈伤组织诱导的影响,发现MS添加0.3 mg/L Kin和1.0 mg/L IBA的培养基上可诱导出分化出芽点和根的愈伤组织;MS添加0.3 mg/L NAA和1.5mg/L 6-BA的培养基中外植体直接分化为小块茎.小块茎接种于无植物生长调节剂的MS液体培养基中振荡悬浮培养6周,逐渐抽叶长根成为半夏组培苗.比较愈伤组织、小块茎、组培苗及野生块茎的生物碱含量及显微结构,发现愈伤组织的分化程度低于半夏野生块茎及组培小块茎,但生物碱含量却高于二者,分别为0.0205、0.0189、0.0161g/g.为消除植物生长调节剂对次生代谢产物积累的不确定影响,可建立一种高度分化、经济、稳定的体系——无植物生长调节剂的半夏组培苗悬浮培养体系,为进一步的半夏生物碱代谢调控提供模式材料.【期刊名称】《浙江理工大学学报》【年(卷),期】2016(035)005【总页数】6页(P759-764)【关键词】半夏;愈伤组织;组培苗;生物碱;代谢调控【作者】刘永红;杨渊华;梁宗锁【作者单位】西安职业技术学院,生物工程系,西安710077;西安职业技术学院,党委组织部,西安710077;浙江理工大学生命科学学院浙江省植物次生代谢与调控重点实验室,杭州310018【正文语种】中文【中图分类】R932半夏(Pinellia ternata (Thunb.) Breit.)又名地文、水玉(《本经》),守田、示姑(《别录》),羊眼半夏(《唐本草》),是天南星科多年生草本植物。
植株生3小叶的复叶,基部有珠芽,佛焰苞绿色,浆果卵状椭圆形,全国大部分地区都有分布[1]。
通常以干燥块茎入药,是一种常用大宗药材。
半夏所含化学成分的种类较多,但其含量都不高。
已检测分离到的半夏化学成分有生物碱、葡萄糖苷、半夏淀粉、甾醇类、氨基酸、挥发油、芳香族成分、有机酸类、黄酮类、半夏蛋白、鞣质以及多种微量元素等[2]。
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方法采用氯仿提取,依据酸性染料比色法的原理,在417 nm 波长下测定,并作方差分析。
结果获得良好的线性关系(r=0.998 9)和回收率(100.1%),RSD 为2.3%。
MS + 2.0 mg/ml NAA + 0.5mg/ml KT 培养基最适合半夏培养物生物碱的积累,平均高达0.980 2%,不含2,4-D 的培养基所诱导的愈伤组织和分化出的不定芽、不定根、再生块茎所产生的生物碱明显高于含有2,4-D 的培养基所诱导的愈伤组织和分化出的不定芽、不定根、再生块茎所产生的生物碱。
结论激素种类和配比对半夏组织培养物中生物碱含量的影响较大。
【关键词】半夏; 组织培养物; 生物碱中药半夏为天南星科多年生草本植物半夏Pinellia ternate (Thunb.) Breit 的干燥块茎,在我国大部分地区及朝鲜半岛和日本均有分布。
半夏入药首载于《神农本草经》《中国药典》2005 年版收载为唯一的半夏类药材植物。
半夏块茎主要含有生物碱、- 谷甾醇、多糖、半夏蛋白、氨基酸、挥发油及无机元素等多种化学成分,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功效。
目前市售镇咳类中药复方制剂中多含有半夏,而生物碱在众多的化学成分中具有明显的生物活性和生理功能,是中药半夏中主要有效成分之一[1]。
近年来,由于临床配方、成方制剂中原料的需求和出口的增加[2],加上耕作技术的改变和常年采挖,半夏野生资源逐渐减少,已经多年不能满足市场需要。
为了满足国内外市场对半夏的需求,给国内外市场提供优质无公害的绿色半夏药材,本研究通过探讨不同激素种类和配比的培养基对半夏培养物生物碱的合成的影响,为中药半夏生产提供理论依据。
半夏组培
生长环境及习性: 半夏是一种杂草性很强的植物具体表现为:①具有多种繁殖方式. 它既可营块茎和珠芽无性繁殖,又可营种子繁殖,从而使半夏可 以避开许多不利因素,如严冬、酷夏、干旱、水涝以及传粉媒介 缺乏等情况,保证种质的延续和更新.②具有较强的耐受性. .③具 有较宽的生态幅.凡是杂草大多具较大的耐受性,表现有较宽的生 态幅和分布区. 半夏根浅,喜温和、湿润气候,怕干旱,忌高 温.夏季宜在半阴半阳中生长,畏强光;在阳光 直射或水分不足条件下,易发生倒苗.耐阴,耐 寒,块茎能自然越冬.要求土壤湿润、肥沃、深 厚,土壤含水量在20%~30%、pH值6~7呈中 性反应的沙质壤土较为适宜.一般对土壤要求不 严,除盐碱土、砾土、过沙、过粘以及易积水 之地不宜种植外,其他土壤基本均可,但以疏 松肥沃沙质壤土为好.野生于山坡、溪边阴湿的 草丛中或林下
2.半夏生育过程中的湿度条件 半夏不耐旱,喜爱在湿度较高的土壤中生长。
3.半夏生育过程中的光照条件 半夏是耐阴而不是喜阴植物,在适度遮光条件下, 能生长繁茂。但是,若光照过强,如高达9万1x, 半夏会100%倒苗;若光照在3000 1x以下,半夏 也难以生存。
半夏的组培:
外植体及培养基的选择及植物激素的选择 再生植株的形成 试管苗的生根炼苗及移栽
植株的再生: 1.从愈伤组织途径形成再生植株 (1)从块茎、珠芽愈伤组织的途径形成:块茎、珠芽的愈伤 组织继续培养3周后,表面出现淡绿色球形突起,其顶端 逐渐长出绿色芽,并伸展出单叶,叶柄上无肉眼可见的珠 芽。经2个月左右,每块外植体上可长出3~7个小叶片, 基部根系粗壮,长达locm以上。例如,愈伤组织在MS+6BA 2.0+NAA 0.1培养基上,2周左右愈伤组织由淡黄色 变为淡绿色,一部分在愈伤组织的下方产生许多细根,继 续培养,其颜色由炎绿色变为深绿色,1个月左右则发育 成为具叶的不茁。 出苗方式有2种:一种是直接由愈伤组织分化出小苗;另 一种是由愈伤组织逐渐形成为直径1~3mm形如珠芽的块 茎,然后再从小块茎上长出小苗,两者之比为2.1:1.0。 再将愈伤组织转入如MS+NAA 0.1~0.5+6-BA 0.2~ 2.0的分化培养基上,1个月左右可长成高5~lOcm的根 系完整的斌管苗。有实验报道,平均每支试管可得6.3~ 7.9个小苗,还有6.1~7.2个原块茎。1个lcm直径的半 夏块茎,理论上可繁殖1×10"以上的试管苗。
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半夏组织培养研究概况
组织培养,又称离体培养,是在无菌的条件下将活器官、组织或细胞放置在适宜的培养基内,并放在适宜的环境中,进行培养而重新形成的细胞、组织或个体。
该技术已广泛应用于农业生产、医药开发等研究。
应用药用植物组织培养技术主要包括以下两个方面:一是利用组培快繁和脱毒技术大规模生产优质种苗满足种植的需要;二是通利用组织培养产生的愈伤组织或悬浮细胞中直接提取药物所需的有效成分或通过生物转化、酶促反应等手段间接获取药物所需药物。
3.1 半夏组培扩繁的研究
为了解决某些药用植物天然野生资源过度采挖,人工栽培繁殖系数低,用种严重不足等问题,已经药用植物对植物组培快繁进行了广泛的研究和应用。
组培快繁技术具有成本低、效率高、等优点,可以有效解决某些有性繁殖系数低的药用植物的用种问题。
我国药用植物组织培养始于上世纪50年代,罗士韦(1964)首次报道了我国关于人参组织培养获得成功的研究成果。
1983年全国召开了第一届药用植物组织培养讨论会。
目前为止,我国药用植物已有100多种,其中大多数为珍贵的药用植物通过组培快繁技术繁殖获得了成功。
目前,通过组培快速繁殖已获得了半夏无菌苗苗。
张振媛(2008)报道了不不同激素对不同品系荆半夏的诱导作用是不同的。
黄海波等人比较不同激素对半夏植株再生的影响,结果发现较低浓度的6-BA和NAA对半夏植株再生有明显的促进作用。
张丽梅等(2003)以珠芽和块茎为外植体在添加1.0 mg/L BA的MS培养基中进行培养,发现不需要转移培养,就能在外植体上可长出多株根系粗壮,植株健壮小苗。
郝会军(2008)等报道了半夏组培苗炼苗技术的研究,发现对组培获得的无菌苗进行炼苗处理可以显著提高其无菌苗在大田的移栽成活率。
3.2 半夏的悬浮培养的研究
贾永芳等人采用半夏细胞悬浮培养对植株再生进行了研究,发现将半夏幼嫩叶片在MS + 2.0 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L BA培养基上一个月内可以诱导出较好的愈伤组织,取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮培养,经3-4次继代后得到分散性好的半夏细胞悬浮系,并将细胞悬浮液过滤获得到的小细胞团接种于MS + 0.2
mg/L NAA + 1.0 mg/L BA分化培养基上,40 d后分化出小植株。
侯学文(2000)以B5培养基,添加4.5 umol/L 2,4-D和2.3 umol/L KT为基本培养基,设置20、30、40、50 g/L蔗糖,考察不同蔗糖浓度对玫瑰茄细胞生长的影响,发现蔗糖浓度在20-50 g/L范围内,当40 g/L时,蔗糖是作为限制性基质而存在的,而蔗糖浓度超过40 g/L时,蔗糖就表现出基质抑制效应。
范美华(2004)在悬浮培养中比较两种碳源,发现葡萄糖比蔗糖更有利于愈伤组织的生长和总生物碱的合成,同时对钙盐、Fe盐及肌醇发现钙盐浓度为1.8 mmol/L、Fe盐浓度为0.06 mmol/L和肌醇浓度为100mg/L最适合细胞生长和总生物碱形成。
罗成科(2006)利用半夏幼嫩叶片接种到固体愈伤组织诱导培养基(MS + 3%蔗糖+ 0.7%琼脂+ 3.0 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L BA)获得的愈伤组织继代到液体培养基(MS + 3% 蔗糖+ 3.0 mg/ L2,4-D + 0.5 mg/L BA + 300 mg/L LH)中上,建立了胚性细胞悬浮系。
刘永红(2010)将外植体在MS + 0.2 mg/L NAA + 1.0 mg/L 6-BA的培养基上诱导出未的分化的小块茎继代于添加0.6 mg/L ABA的1/2MS液体培养基中,建立了小块茎的悬浮培养体系。
同时发现组培小块茎的总生物碱含量都高于栽培块茎。
丁兰(2007)以1/2 MS + 2.0 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L BA + 0.5 mg/L NAA为培养基,培养条件为温度23±2℃,转速90 rpm、pH值6.0进行半夏悬浮培养,发现黑暗培养有利于悬浮细胞的增殖,悬浮继代培养后,再添加0.5 mg/L BA + 0.5 mg/L NAA可诱导分化出芽和根,形成完整的植株。
低温诱导细胞同步化可以克服化学药物筛选法容易引起染色体变异的缺点,并且操作起来简单、方便。
毛春娜(2011)探索适合半夏悬浮培养细胞的低温诱导同步化时,发现8℃低温下处理24小时效果最好。
3.3 组培半夏药效成分的研究
Gautheret(1942)首次利用植物愈伤组织和悬浮培养细胞获得了植物的此生代谢产物。
此后研究者对药用植物的组织培养物得药效成分进行集中研究,用于与医药生产相结合。
上世纪70年代,Furuya等人研究发现,粗人参皂苷的干物质含量,愈伤组织中含21.11%,冠瘿组织中含19.30%,再分化根中含27.40,均显著高于天然根的4.10%的含量。
利用长春花的悬浮培养,将长春花碱和长春新碱生物转化成为阿吗碱和其他形式蛇根碱,为生产抗癌药长春新碱及长春花碱提供新的原料(Scott & Lee,1975)。
刘永红(2010)研究发现不同的激素组合不光影响诱导愈伤组织的生长速度、颜色、质地,还影响愈伤组织的生物碱含量,2.0 mg/L 2,4-D、1.0 mg/L Kin组合诱导的愈伤组织生物碱含量为0.0293%,0.2 mg/L 2,4-D、2.0 mg/L 6-BA组合生物碱含量为0.0234%,0.5 mg/L 2,4-D、1.0 mg/L
Kin组合生物碱含量为0.0175%,三种激素组合诱导的愈伤组织的生物碱含量都高于栽培块茎的生物碱含量(0.0072%)。
80年代末,日本Nitto Denko公司在20000L大型发酵罐中进行人参和紫草的大规模细胞悬浮培养并获得了人参苷和紫草素,标志着次生代谢产物生产进入了产业化。
到目前为止,细胞发酵工程研究过的植物已经超过了400多种,从培养的细胞中分离的次生代谢物在600种以上,其中超过60种植物获得的组培物此生代谢物含量超过或等于原天然植物的含量。
紫草、人参、老鹤草的细胞培养已实现商品化生产;黄连、长春花、毛地黄等的细胞发酵工程已达中试水平,同时将有一批植物发酵工程的研究即将进入中试,植物细胞发酵工程将显示出巨大的应用价值。