组织培养概述
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——用单细胞分离培养或通过筛选的方法，从 原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或 标志物的培养物称为细胞株
体内培养/In vivo culture ——是将活体的组织细胞、器官等取出，放置在
其它生物体内让其生长和发育的方法。
– 器官移植/transplantation – 干细胞/stem cell
cell culture
器官培养/Organ culture
体外器官原基或整个器官或部分器官的维持或 生长，包括结构和功能上的维持和分化。
（The maintenance or growth of organ primordia or the whole or parts of an organ in vitro,in a way that may allow differentiation and preservation of the architecture and/or function.）
taken directly from organisms.） 严格地说，是指成功传代之前的培养，此时的细胞
保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然 保留二倍体数。 实际应用上，常把第一代至第十代以内的培养细胞 统称为原代细胞培养。
新生大鼠肺成纤维细胞（原代）
培养的天数：48h
放大倍速：倒置显微镜 X40
1.概念
体外培养/In vitro culture ——将动植物活体内取出的组织、细胞或器官等，放置
在类似体内生存环境中，使其维持、生长或繁殖的方 法。
whole culture microorganism parasite
organ culture parts culture tissue culture
– 一般情况下可传代10-50次。
无限细胞系/ infinited cell line
– 细胞群体能无限制生长下去，不进入衰退期。 – 肿瘤细胞系可无限增殖；正常细胞系可发生自发
转化，使细胞获得永久增殖的能力。
Infinited cell line: Hela
细胞株（cell strain）
细胞培养的类型/Types of cell culture
（1）原代培养/Primary culture （2）传代培养/ Subculture （cell line）
（1） Primary culture
——直接来自活体的细胞（组织或器官）的初次培养。 （A culture start from cells,tissues or organs
组织块（O.5～1立方毫米）或薄片（厚0.2 毫米）
细胞培养/Cell culture
是指单细胞在体外培养。 （This term is used to denote the growing of
cell in vitro, including the culture of single cell. ） 通常体外培养中的单细胞不再形成组织。 细胞培养也称为组织培养（tissue culture）， 二者可作为同义语使用。
传代/passage or subculture
将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶的 过程。
– 当细胞增殖达到一定密度后，则需要分离出一部分 细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存
– 培养细胞的“一代”，不表示细胞分裂一次，而是 指培养细胞从接种到再次转移培养的过程。
原代培养细胞的生命归宿 原代培养期 传代期 衰退期
and Sterilization Ⅴ. 无菌操作/Aseptic technique Ⅵ. 培养细胞的形态/Morphology of culture cell
I.绪言/ Introduction
1.概念/Concept 2.发展史/Developing history 3.应用/Application
组织培养技术
Tissue Culture Techniques (In Vitro Culture)
概述
Ⅰ. 绪言/Introduction Ⅱ. 细胞生长的基本需要/ Basic requirement of
cell growth Ⅲ. 细胞培养的配备/Equipment Ⅳ. 清洁、消毒与灭菌/Cleaning , Disinfection
Organ culture
•பைடு நூலகம்
组织培养/Tissue culture
体外组织的维持或生长，包括结构和功能上 的维持和分化。
（ The maintenance or growth of tissue in vitro,in a way that may allow differentiation and preservation of the architecture and/or function.）
（2）Subculture
细胞系/Cell line ——原代培养成功后的细胞，传代再培养，称
细胞系。 有限细胞系/Finited cell line
无限细胞系/ infinited cell line
有限细胞系/Finited cell line
– 细胞群体在体外生长有一定限度，即体外传代 （passage or subculture）到一定次数时，细 胞停止繁殖、衰退、死亡。
培养基种类：1640+10%小牛血清 细胞状态与特征简述:细胞呈梭形，
有伪足，边缘清晰整齐，贴壁生长
幼兔骨髓基质干细胞（原代）：
细胞种类：幼兔骨髓基质干细胞 培养的天数：五天后 放大倍数：倒置显微镜 X40培养基种类：DMEM+20%胎牛血清 细胞状态与特征简述:细胞呈梭形，有伪足，边缘清晰整齐，贴壁 生长
2.发展史
19世纪末，20世纪初 – 温生理盐水培养鸡胚髓板组织→存活数天→提出组 织培养(tissue culture)概念 （ 1885 Roux ） – 血浆凝块试管中培养成年兔肝、肾、甲状腺、卵巢 植块→3天→早期器官培养 （ 1897 Loeb ） – 应用悬滴培养法，用动物血清培养狗的肉瘤细胞， 存活约72小时。 （1906 Beebe等） 短期存活，没有细胞的生长和增殖。
体内培养/In vivo culture ——是将活体的组织细胞、器官等取出，放置在
其它生物体内让其生长和发育的方法。
– 器官移植/transplantation – 干细胞/stem cell
cell culture
器官培养/Organ culture
体外器官原基或整个器官或部分器官的维持或 生长，包括结构和功能上的维持和分化。
（The maintenance or growth of organ primordia or the whole or parts of an organ in vitro,in a way that may allow differentiation and preservation of the architecture and/or function.）
taken directly from organisms.） 严格地说，是指成功传代之前的培养，此时的细胞
保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然 保留二倍体数。 实际应用上，常把第一代至第十代以内的培养细胞 统称为原代细胞培养。
新生大鼠肺成纤维细胞（原代）
培养的天数：48h
放大倍速：倒置显微镜 X40
1.概念
体外培养/In vitro culture ——将动植物活体内取出的组织、细胞或器官等，放置
在类似体内生存环境中，使其维持、生长或繁殖的方 法。
whole culture microorganism parasite
organ culture parts culture tissue culture
– 一般情况下可传代10-50次。
无限细胞系/ infinited cell line
– 细胞群体能无限制生长下去，不进入衰退期。 – 肿瘤细胞系可无限增殖；正常细胞系可发生自发
转化，使细胞获得永久增殖的能力。
Infinited cell line: Hela
细胞株（cell strain）
细胞培养的类型/Types of cell culture
（1）原代培养/Primary culture （2）传代培养/ Subculture （cell line）
（1） Primary culture
——直接来自活体的细胞（组织或器官）的初次培养。 （A culture start from cells,tissues or organs
组织块（O.5～1立方毫米）或薄片（厚0.2 毫米）
细胞培养/Cell culture
是指单细胞在体外培养。 （This term is used to denote the growing of
cell in vitro, including the culture of single cell. ） 通常体外培养中的单细胞不再形成组织。 细胞培养也称为组织培养（tissue culture）， 二者可作为同义语使用。
传代/passage or subculture
将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶的 过程。
– 当细胞增殖达到一定密度后，则需要分离出一部分 细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存
– 培养细胞的“一代”，不表示细胞分裂一次，而是 指培养细胞从接种到再次转移培养的过程。
原代培养细胞的生命归宿 原代培养期 传代期 衰退期
and Sterilization Ⅴ. 无菌操作/Aseptic technique Ⅵ. 培养细胞的形态/Morphology of culture cell
I.绪言/ Introduction
1.概念/Concept 2.发展史/Developing history 3.应用/Application
组织培养技术
Tissue Culture Techniques (In Vitro Culture)
概述
Ⅰ. 绪言/Introduction Ⅱ. 细胞生长的基本需要/ Basic requirement of
cell growth Ⅲ. 细胞培养的配备/Equipment Ⅳ. 清洁、消毒与灭菌/Cleaning , Disinfection
Organ culture
•பைடு நூலகம்
组织培养/Tissue culture
体外组织的维持或生长，包括结构和功能上 的维持和分化。
（ The maintenance or growth of tissue in vitro,in a way that may allow differentiation and preservation of the architecture and/or function.）
（2）Subculture
细胞系/Cell line ——原代培养成功后的细胞，传代再培养，称
细胞系。 有限细胞系/Finited cell line
无限细胞系/ infinited cell line
有限细胞系/Finited cell line
– 细胞群体在体外生长有一定限度，即体外传代 （passage or subculture）到一定次数时，细 胞停止繁殖、衰退、死亡。
培养基种类：1640+10%小牛血清 细胞状态与特征简述:细胞呈梭形，
有伪足，边缘清晰整齐，贴壁生长
幼兔骨髓基质干细胞（原代）：
细胞种类：幼兔骨髓基质干细胞 培养的天数：五天后 放大倍数：倒置显微镜 X40培养基种类：DMEM+20%胎牛血清 细胞状态与特征简述:细胞呈梭形，有伪足，边缘清晰整齐，贴壁 生长
2.发展史
19世纪末，20世纪初 – 温生理盐水培养鸡胚髓板组织→存活数天→提出组 织培养(tissue culture)概念 （ 1885 Roux ） – 血浆凝块试管中培养成年兔肝、肾、甲状腺、卵巢 植块→3天→早期器官培养 （ 1897 Loeb ） – 应用悬滴培养法，用动物血清培养狗的肉瘤细胞， 存活约72小时。 （1906 Beebe等） 短期存活，没有细胞的生长和增殖。