微生物的培养和应用ppt课件
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氮源
可作为氮源的物质有: a. 含氮无机物:氮气 氨气 铵盐 硝酸盐 b. c. b.含氮有机物蛋:白胨
牛肉膏 尿素
二、无菌操作 1、获得纯净培养物的关键:
防止外来杂菌的入侵
2、无菌操作
1、下列细菌中,能利用含碳无机物作碳源 的是A.C
A 光合细菌 B 根瘤菌
C 硝化细菌 D 乳酸菌
2、培养大肠杆菌的培养基中,必需含有的 碳源和氮源是A.C
3. 消毒和灭菌有何不同?
4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些?
5·哪些地方有菌可能导致菌体感染?
•
操作者
•
培养基、接种工具、器皿
•
空间
1、灭菌和消毒
1.)灭菌:强烈的因素杀死所有微生物,包括芽 孢和孢子。
思考:哪些因素可以灭菌、消毒?
物理——高温、紫外线
化学——酒精、氯气、石碳酸
不包括芽孢和孢子
2.)消毒:温和的因素杀死一部分对人体有害的 微生物。
1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方
(2)特殊营养:
细菌生长必需,而往往自身不能合成的 化合物,如维生素、某些氨基酸、碱基等
(3)pH、氧气等要求
碳源
① 可作为碳源的物质有: a. 含碳无机物: 碳酸盐、碳酸氢盐、二氧化碳 b. 含碳有机物:糖蛋类白(质主要)
脂肪酸
②不同微生物所利用的碳源不同 a.异养型微生物的碳源为含碳有机物(有机碳) b.自养型微生物的碳源为含碳无机物(无机碳)
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
微生物生长需要条件
1、夏天为什么食物容易腐败?
细菌30~37 霉菌25~28 放线菌25~28
1~2d 3~4d
5~7d
如何处理可以防止腐败?
2、为什么真空包装的食品不容易腐败?
大肠杆菌 乳酸菌 破伤风杆菌 大多数细菌为好氧型
举例:煮沸 问题:一段时间后为什么会腐败?
3). 常用的消毒方法:
煮沸消毒法,巴氏消毒法,紫外线或化学药剂消毒法
牛奶
接种室、接种箱或超净工作台
4)常用的灭菌方法: 灼烧灭菌 接种工具,接种环、接种针或其他金属用具 干热灭菌 Βιβλιοθήκη Baidu璃器皿(吸管、培养皿) 高压蒸汽灭菌 :100kPa 121℃ 15-30min
3、霉醋菌酸5是.0否~具6.0有杀细菌菌6作.5用~7?.5 放线菌 7.5~8.5
以上反应了微生物生长受到哪些条件影响?
微生物的类群 病毒:
无细胞结构
原核生物: 细菌、蓝藻等 原核细胞
真菌: 如酵母菌、霉菌 原生生物:单细胞的动植物
真核细胞
如草履虫、单细胞藻类等
微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物
3.培养基营养成分: (1)基本成分:
不管哪种培养基,一般都含有水、 碳源、和氮源、 无机盐等营养物质。
讨论:为什么大多数培养基
都含有这四类物质?
自养微生物 碳源 无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源: 牛肉膏、蛋白胨等
异养微生物
氮源
自养微生物 无机氮源: NH4+、NO3-
有机氮源: 牛肉膏、蛋白胨、 酵母膏、尿素等 异养微生物
3、为了避免周围环境中微生物污染,实验操作应
在
酒精灯附近进行。
4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 周围物品相接触。
例:下列关于腐乳制作的描述中,错误的 是 A.在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白 酶的微生物参与 B.含水量大于85%的豆腐利于保持湿度, 适宜制作腐乳 C.加盐和加酒都能抑制微生物的生长 D.密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防 杂菌污染
基础培养基:含有微生物生长所需的基本物质。 选择培养基:培养基加入某种物质或缺少某种营养物 质而抑制不需要的微生物生长,促进需要微生物生长。 举例说明:加链霉素培养基作用 抗生素,抑制细菌
加青霉素培养基作用 无氮培养基作用 鉴别培养基:区别微生物
伊红——美蓝 产气杆菌菌落大、灰棕色 大肠杆菌菌落小、绿色金属光泽
思考:以下应当用何种方法灭菌、消毒? 操作者 ——手用酒精消毒 培养基 ——高压蒸汽灭菌
接种工具 ——灼烧
器皿 ——干热灭菌
空间 ——紫外线
牛奶 ——巴氏消毒 70~75度30min 80度15min
a.灼烧灭菌
微生物的接种工具 ( 接种环、接种针)或 其他金属用具直接 在火焰的充分燃烧 层灼烧
六、培养基的配制 (一)、细菌培养基的配制
1.计算: 100ml蒸馏水中各物质的量。 2.称量:注意牛肉膏的粘稠度大。 3.溶化:
b.干热灭菌
c. 160-170℃ ;1- 2h
能耐高温的需要保 持干燥的物品( 玻 璃器皿)
c.高压蒸汽灭菌
d.100kPa 121℃ e. 15-30min
通常用于培养基的灭菌
总结:无菌技术
1、实验操作空间、操作者、衣着和手要 清洁和 消毒。
2、将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基 等进行 灭菌 。
1·1微生物的培养和应用
一、微生物培养基的配制
1、培养基定义: 培养基(培养液)是为人工培养微
生物而制备的,提供适合微生物生长、 繁殖或积累代谢产物的营养基质。
思考:微生物细胞的元素组成是什么?
2·类型
应用微生物分离、鉴定、计数和 菌种保存等方面
(1)按物理状态分:固体培养基、液体 培养基、半固体培养基。
区别:加入琼脂的量决定培养基的形态。
熔点:96度 凝固点:40度 注意:一般细菌不能利用琼脂。
微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉 眼可见的菌落
用途:纯化、计数、鉴定
液体培养基:工业生产
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
半固体培养基:观察运动
无动力 有动力(弥散)
(3)按功能分:基础培养基、选择培养 基和鉴别培养基。
按功能状态分
选择培养基 鉴别培养基 基础培养基
从众多微生物 中分离所需的 微生物
加入青霉素分离得 到酵母菌和霉菌
鉴别不同种 类的微生物
伊红—美篮培养基 使大肠杆菌的菌落 呈深紫色,可以鉴 别大肠杆菌
几种选择培养基:
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐
C 蛋白质
D 无机氮化物
二. 无菌技术(思考)
1. 什么是无菌技术?包括哪些方面? 无菌技术:泛指培养微生物操作中,所有防 止杂菌污染的方法。
2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来 微生物污染外,还有什么目的?
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。