油红O染色液(细胞涂片专用)

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油红o染色异丙醇溶出测紫外吸收

油红o染色异丙醇溶出测紫外吸收
油红O是一种合成染料，它可以溶解在异丙醇中。

在测量其
紫外吸收时，可以使用紫外可见分光光度计。

首先，需要准备一定浓度的油红O溶液。

可以将一定量的油
红O固体加入适量的异丙醇中，并用搅拌棒或磁力搅拌子充
分混合，直到溶解。

然后，取一定量的油红O溶液放入紫外可见分光光度计的样
品池中。

选择合适的波长范围进行测量，通常紫外吸收峰位于200-400 nm的范围内。

启动分光光度计，并设置所需参数，如波长范围、积分时间等。

将样品池放入光度计中，并进行测量。

在测量过程中，可以记录吸光度值随波长的变化，并绘制吸光度-波长曲线。

从曲线中可以确定油红O的吸收峰位置和相对
强度。

需要注意的是，测量过程中要保持样品池的温度稳定，并避免有害物质和光源干扰测量结果。

另外，对于浓度较小的样品，可能需要进行稀释操作，以确保测量结果的准确性。

细胞油红O染色的操作步骤精修订

细胞油红O染色的操作步骤SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#细胞油红O染色的操作步骤点击次数：348 发布时间：2011-4-11、10%中性甲醛的配制材料：中性甲醛(多聚甲醛) 密封瓶称取1g中性甲醛粉末，加入10ml的三蒸水中，密封，在60度水浴中过夜才能溶解。

配好的溶液1个星期内有效，最好4度保存。

2、的配制材料：油红染料棕色可密封瓶异丙醇研钵漏斗定性滤纸称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存，为储存液，可长期保存。

用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。

3、培养载体 3毫升培养瓶。

如果培养载体为塑料制品，hoechst33342染核的话，塑料板自发荧光也为蓝色，必须考虑。

4、.染色对象间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。

5、注意事项：脂肪油红染色，有的是动物/人体脂肪组织切片，或细胞爬片。

各有操作差异。

以下是各论坛方法小结，不全。

(1).完全成熟饱满的脂肪，容易破裂，脂滴泄漏，所以压片，切片都要考虑到这个问题。

(2).细胞爬片细胞溶液脱落，特别是脂滴大的。

操作务要轻柔。

不要把细胞冲掉。

(3).如果做脂肪组织冰冻切片，冰冻温度比普通要低，切片厚度加厚。

6、染色步骤：(1) 先小心轻缓倒去培养夜。

(2) 用pbs轻缓漂洗(不洗没问题)。

(3)加10%中性甲醛固定30min(实际固定时间过夜都没问题。

固定液用95%酒精也可)。

固定的是细胞膜。

(4) 稀释油红储存液，油红：去离子水＝3:2，滤纸过滤，室温放置10min(除去一些杂质，结果更清晰)。

(5)染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可，如6孔加，24孔加(实际染色时间1小时都可以)。

(6)脱色，用75%酒精/60%异丙醇漂洗，除去多余的染料(实际用其他平衡液洗也没问题，背景并不会残留多少)。

主动脉大体油红o染色步骤

主动脉大体油红o染色步骤主动脉大体油红染色是一种常用的组织学染色方法，它可以用来观察和研究主动脉的结构和组成。

下面将介绍主动脉大体油红染色的步骤。

1. 材料准备需要准备好主动脉组织标本和染色试剂。

主动脉标本可以来自于人体解剖标本或动物实验标本。

染色试剂包括油红染色液、脱水醇、透明剂和封片剂等。

2. 标本处理将主动脉标本取出，并在生理盐水中清洗干净，去除血液和其他污物。

然后，将主动脉标本固定在福尔马林中进行固定处理。

固定时间根据标本的大小和厚度而定，通常为24-48小时。

3. 切片制备固定处理后的主动脉标本，需要进行切片制备。

首先，将固定标本从福尔马林中取出，用水洗涤去除福尔马林。

然后，将标本进行脱水处理，逐渐浸泡在不同浓度的醇溶液中，使其逐渐脱水。

最后，将脱水后的主动脉标本浸泡在透明剂中，使其透明化。

透明化的时间根据标本的大小和厚度而定。

4. 染色处理将透明化后的主动脉标本取出，放置在油红染色液中浸泡。

油红染色液能够染色主动脉组织中的胶原纤维，使其呈现红色。

染色时间一般为数分钟至数小时，具体时间根据标本的大小和染色效果而定。

5. 染色后处理染色完成后，将主动脉标本从油红染色液中取出，用水洗涤去除多余染料。

然后，将标本进行脱水处理，逐渐浸泡在不同浓度的醇溶液中，使其逐渐脱水。

最后，将脱水后的主动脉标本浸泡在透明剂中，使其透明化。

透明化的时间根据标本的大小和厚度而定。

6. 制作封片将透明化后的主动脉标本取出，放置在封片剂中进行浸泡。

然后，将标本置于显微镜镜片上，加入透明剂，将封片覆盖在标本上。

最后，用封片剂将封片固定，并晾干。

通过以上步骤，主动脉大体油红染色就完成了。

通过观察染色后的主动脉标本，可以清晰地看到主动脉组织中的胶原纤维呈现红色，从而了解主动脉的结构和组成。

这对于研究心血管疾病和主动脉病变等方面具有重要的意义。

总结起来，主动脉大体油红染色的步骤包括材料准备、标本处理、切片制备、染色处理、染色后处理和制作封片。

细胞油红O染色的原理

细胞油红O染色的原理细胞油红O染色是一种常用的组织学和细胞学染色方法，它能够明确染色体的分布、核仁和核板的存在以及区分亚基质。

细胞油红O染色原理主要基于细胞和组织中核酸、糖脂和脂质等成分的生理特性和化学反应。

细胞油红O染色的原理如下：1. 细胞脂质和糖脂的亲和性：细胞油红O染色可以特异性地与细胞中的脂质和糖脂结合，形成可见的染色物质。

这是因为油红O是一种亲油性的有机染料，它能够与脂质和糖脂等亲油性成分发生结合。

2. 油红O的吸附作用：油红O是一种亲油性颜料，具有很强的吸附作用。

在细胞油红O染色过程中，油红O会吸附到细胞和组织中的脂质和糖脂等成分上，使其显色。

这种吸附作用是细胞油红O染色的关键过程。

3. 油红O与核酸的反应：除了与脂质和糖脂等成分结合外，油红O还可以与核酸等亲水性物质反应。

这是因为核酸具有负电荷，在染色过程中与带正电荷的油红O发生静电作用，形成染色物质。

这种反应可以使细胞核和核酸等结构明显显色。

细胞油红O染色的步骤如下：1. 取得样品：首先需要从目标细胞或组织中取材样品，可以是细胞培养物、组织切片或血液等。

2. 固定样品：将样品进行固定处理，可以使用4%的中性缓冲福尔马林固定液，将样品浸泡在固定液中一段时间，使细胞、细胞器和细胞组织结构固定。

3. 染色处理：将固定的样品进行染色处理，可以使用油红O染色液，将样品浸泡在染色液中一段时间，使染料与样品中的脂质、糖脂和核酸等结合。

4. 清洗和封片：将染色后的样品进行清洗处理，去除多余的染色液，并用适当的溶剂，如苯胺或二甲苯，对样品进行湿润和透明化处理。

最后，将样品封装在显微镜载玻片上，以便观察和保存。

细胞油红O染色的应用：1. 组织学研究：细胞油红O染色可以用于研究细胞和组织结构的相关性质，如细胞脂质和糖脂的分布、核酸和核蛋白的存在以及细胞器的形态等。

2. 细胞分析：细胞油红O染色可以用于细胞分析，如细胞数量、大小和形态等的测定。

染色后的细胞与未染色的细胞相比，可更清晰地观察和区分细胞结构和细胞器。

细胞油红O染色的操作步骤

细胞油红O染色的操作步骤点击次数：348 发布时间：2011-4-11、10%中性甲醛的配制材料：中性甲醛(多聚甲醛) 密封瓶称取1g中性甲醛粉末，加入10ml的三蒸水中，密封，在60度水浴中过夜才能溶解。

配好的溶液1个星期内有效，最好4度保存。

2、染色液的配制材料：油红染料棕色可密封瓶异丙醇研钵漏斗定性滤纸称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存，为储存液，可长期保存。

用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。

3、培养载体 3毫升培养瓶。

如果培养载体为塑料制品，hoechst33342染核的话，塑料板自发荧光也为蓝色，必须考虑。

4、.染色对象间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。

5、注意事项：脂肪油红染色，有的是动物/人体脂肪组织切片，或细胞爬片。

各有操作差异。

以下是各论坛方法小结，不全。

(1).完全成熟饱满的脂肪细胞，容易破裂，脂滴泄漏，所以压片，切片都要考虑到这个问题。

(2).细胞爬片细胞溶液脱落，特别是脂滴大的。

操作务要轻柔。

不要把细胞冲掉。

(3).如果做脂肪组织冰冻切片，冰冻温度比普通要低，切片厚度加厚。

6、染色步骤：(1) 先小心轻缓倒去培养夜。

(2) 用pbs轻缓漂洗(不洗没问题)。

(3)加10%中性甲醛固定30min(实际固定时间过夜都没问题。

固定液用95%酒精也可)。

固定的是细胞膜。

(4) 稀释油红储存液，油红：去离子水＝3:2，滤纸过滤，室温放置10min(除去一些杂质，染色结果更清晰)。

(5)染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可，如6孔加1.5ml，24孔加0.5-1ml(实际染色时间1小时都可以)。

(6)脱色，用75%酒精/60%异丙醇漂洗，除去多余的染料(实际用其他平衡液洗也没问题，背景并不会残留多少)。

(7) 复染，淡苏木染色1/5分钟，pbs漂洗(这一步不做也可，看试验需要，并且苏木素会把胞浆染红，如要显示核， hoechst33342也可以，浓度5微克/毫升染10分钟即可把核染上)。

油红O染液的配制及染色方法

油红O染液的配制方法
油红 O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。

脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类，它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。

当组织切片置人染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质（如脂滴）中，使组织内的脂滴呈橘红色。

一、油红O染液的配制
1．oil red O 0.5 g/100 ml 异丙醇；
临用前取6 ml原液 + 4 ml dH2O-->静置5-10 min-->过滤后于2 hr内使用二、染色程序
1．切片用甲醛―钙(40% 甲醛溶液10 ml （确切的应该是40% 福尔马林溶液原液 + CaCl2 1 g + dH2O-->100 ml)固定10分钟；
2．蒸馏水洗；
3．60％异丙醇浸洗；
4．由红O染液10分钟（染液可回收再利用）；
5． 60％异丙醇分色至背景五色；
6．蒸馏水洗；
7．Mayer苏木精复染；
8．自来水洗（蓝化）1～3分钟；
9．蒸馏水洗；
10．甘油明胶封片。

结果：组织细胞中脂滴呈橘红色，核呈蓝色。

饱和油红 O 染色液（Oil Red O Staining Solution）说明书

北京普利莱基因技术有限公司电话：************，62027915Email:************************Applygen Technologies Inc.DocRev:201704Page 1of 1-饱和油红O 染色液（Oil Red O Staining Solution ）B1094描述：油红O (Oil Red )CAS 号1320-06-5，分子式C26H24N4O ，分子量408.495。

油红O 是一种亲脂染料，不溶于水，可溶于醇和油酯，根据其在溶剂中可以向脂质扩散的特点，可使脂滴呈红色。

本品以适量的醇为溶剂，无需稀释、可直接使用。

控制染色时间，可避免溶剂导致的脂滴溶解融合、形态破坏的问题，而且能降低背景染色。

可用普通光学显微镜和荧光显微镜（激发波长540-580nm ）观察。

如果肝、肾、心等实质脏器发生脂肪变性，细胞内会出现多数中性脂肪滴。

适用范围：本产品主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着、以及干细胞向脂肪细胞定向分化的研究。

用于固定组织或细胞的脂肪染色。

组成：100ml储存：室温避光保存，有效期12个月。

操作步骤：样品处理：1.冷冻切片：（1）4%多聚甲醛固定10分钟。

（货号B1057）（2）蒸馏水洗3次，每次3分钟。

2.培养细胞：（1）4%多聚甲醛固定10分钟。

（货号B1057）（2）蒸馏水洗3次，每次3分钟。

饱和油红O 染色：1.苏木精染色液染色3分钟，后水洗。

（货号C1411）2.盐酸乙醇分化后，反蓝，水洗。

（如不需复染细胞核，第1、2步骤可省略）3.蒸馏水冲洗干净的切片放入60%的异丙醇5分钟。

4.入饱和油红O 染色液染色5分钟。

5.在异丙醇中稍洗，脱去肤色即可。

6.保持切片湿润，滴加甘油水溶液封片。

（货号C1213）温馨提示：1.普通光镜观察：细胞质内脂滴呈红色；胞核呈蓝色。

2.荧光显微镜：在540-580nm 波长下，发出红色荧光；也可采用Cy3528-552nm 的波长。

油红O说明书

油红O染色液说明书【产品名称】油红O染色液【包装规格】货号：DL0011单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml；每套/盒包装规格分别为：3×20ml、3×100ml、3×250ml。

【预期用途】用于组织细胞中脂肪的染色。

【检验原理】油红O又名苏丹红5B，苏丹染料对脂质染色的机制一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色即先把苏丹染料溶于有机溶剂中，这种染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色，油红O染色可用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着，鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质等。

【主要组成成分】试剂组成主要成分1、油红O储存液油红O2、油红O稀释液水3、苏木素染色液苏木素【储存条件及有效期】5～35℃保存，原包装未开封试剂的有效期为18个月，在有效期内的已开封试剂建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

【样本要求】冰冻切片或碳蜡切片，厚度约6～10μm。

【检验方法】1、冰冻切片厚约若干μm，裱贴于玻片，蒸馏水稍洗；2、切片入60%异丙醇若干秒；3、配制油红O染色工作液：取适量的油红O储存液和油红O稀释液，按2：1比例混合，即为油红O 染色工作液，静置若干分钟，尽量吸取上层液体染色；4、入油红O染色工作液浸染若干钟，用60%异丙醇稍洗去多余染色液，流水洗若干秒；5、苏木素染色液染色若干分钟，流水冲洗若干分钟；6、用滤纸将切片周围水分吸干，用阿拉伯糖胶或甘油明胶封片。

【检验结果的解释】中性脂肪呈橙红色或橘红色，细胞核呈蓝色。

【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物染色观察。

【注意事项】1、冰冻切片制备后无需固定即可进行染色，也可于10%中性福尔马林固定液中稍固定1～2分钟，固定时间不宜过长，避免脂质溶解。

2、由于脂肪易溶于有机溶剂，所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理，而通过冰冻切片染色来显示。

油红o染色原理

油红o染色原理油红染色原理。

油红染色是一种常用的组织学染色方法，它可以使细胞核染成红色或粉红色，胞质呈现浅蓝色或淡紫色。

油红染色的原理主要是利用染料与细胞组织中的不同成分发生特异性的化学反应，从而实现对细胞器官和结构的染色显示。

首先，油红染色所用的染料主要是油红O，它是一种亲脂性染料，能够与细胞膜和脂肪等亲脂性物质结合，使其呈现红色或粉红色。

其次，油红染色的原理还涉及到细胞组织中的蛋白质和核酸等成分。

油红O染料能够与细胞核中的核蛋白结合，使细胞核染成红色，而胞质中的蛋白质则呈现浅蓝色或淡紫色。

在进行油红染色时，需要先对组织标本进行固定、脱水和透明化处理，然后将其浸入染料溶液中进行染色。

油红O染料会与细胞组织中的特定成分发生化学反应，形成染色复合物，从而实现对细胞器官和结构的染色显示。

在观察染色结果时，可以通过显微镜观察到细胞核呈现红色或粉红色，胞质呈现浅蓝色或淡紫色，从而对组织结构进行分析和研究。

总的来说，油红染色的原理是利用油红O染料与细胞组织中的特定成分发生化学反应，实现对细胞器官和结构的染色显示。

通过这种染色方法，可以清晰地观察细胞核和胞质的形态和结构，为细胞学和组织学研究提供重要的技术支持。

同时，油红染色也在医学诊断和病理学研究中得到广泛应用，为疾病诊断和治疗提供重要的帮助。

在实际操作中，需要根据具体的实验目的和样本特点选择合适的油红染色方法，并严格控制染色条件，以获得清晰、准确的染色结果。

同时，对染色结果的观察和分析也需要结合其他技术手段和实验数据，全面理解细胞组织的结构和功能，为科研工作和临床诊断提供可靠的依据。

综上所述，油红染色原理是基于染料与细胞组织中特定成分的化学反应，实现对细胞器官和结构的染色显示。

通过这种染色方法，可以为细胞学和组织学研究提供重要的技术支持，也在医学诊断和病理学研究中发挥着重要作用。

因此，深入理解油红染色的原理和应用，对于开展科研工作和临床实践具有重要的意义。

油红O染色说明书

油红O染色说明书
产品简介
以油红O溶液染色是鉴定间充质干细胞向成脂细胞分化的一个重要指标。

用特定的成脂诱导培养基（货号：PH-B009）培养一段时间后，间充质干细胞可分化为成脂细胞，并在细胞中形成脂滴。

油红 O属于偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，与甘油三酯结合呈小脂滴状。

脂溶性染料能溶于细胞中的脂滴。

当染料加入细胞中，染料则离开染液而溶于细胞内的脂滴中，使细胞内的脂滴呈红色或橘红色。

包装组成成分
油红O染色操作规程：
所需材料：
菩禾生物油红O染色试剂盒
操作方法与步骤（以6孔板为例）
1.油红O工作液制备：油红染色液与染色稀释液按照3:2的比例进行稀释，混
匀后室温静置10min，滤纸过滤；
2.移除孔内培养基，每孔加入2ml洗涤液1号静置1min后移除，洗涤2次；
3.每孔加入2ml固定液，37℃（或室温）固定30min；
4.移除固定液，每孔加2ml洗涤液1号冲洗，洗涤2次；
5.每孔加入油红O工作液2ml，37℃（或室温）染色10-20min；
6.每孔加入洗涤液3号2ml，快速移除，根据染色背景情况可重复1-2次；
7.每孔加洗涤液2号2ml，洗2次后显微镜下观察
成脂细胞油红O染色图例：
产品保存及使用注意事项：
1.需避光保存。

2.请于保质期内使用。

3.为了您的健康，请在实验过程中穿上实验服，带好手套。

本产品仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。

油红O染色试剂盒说明书

深圳市达科为生物工程有限公司地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703518122油红O 染色试剂盒说明书Cat#：6063221产品描述：油红O 是一种脂溶性的偶氮染料，在脂肪内高度溶解，能特异性地使组织和细胞内中性甘油三酯、脂质和脂蛋白染色。

该染色液使用便捷，性能稳定，显色清晰。

包装规格：用户自备：DPBS 去离子水注意事项：●本品久置会出现沉淀，属于正常现象。

●本品仅供研究使用，不能用于动物或人体的体外诊断。

●使用时，请做好个人卫生防护。

●废弃物按相关规定进行处理。

使用方法：以六孔板为例：1.工作液准备，将油红O 染色液（6063221-1）和去离子水按照3:2的比例进行稀释，滤纸过滤，配置为工作液，该工作液2h 内用完；2.将培养基轻柔吸出，避免破坏细胞层；3.DPBS 轻柔洗涤细胞两次，每次1mL ；4.加入固定液-油红O （6063221-2）至覆盖整个底部，室温固定15min ；5.移除固定液后，去离子水轻柔洗涤3次；6.移除去离子水后，加入工作液至覆盖住整个底部即可（通常加入1mL ），室温放置15min ；7.移除染色液，去离子水洗涤3-5次；8.加入1mL 去离子水防止细胞脱水，随后将样本置于镜下观察。

货号组分数量规格保存6063221-1油红O 染色液1100mL 2~8℃6063221-2固定液-油红O1100mL2~8℃深圳市达科为生物工程有限公司地址：深圳市坪山区坑梓街道金辉路14号深圳市生物医药创新产业园区1号楼702、703518122Tel**************E-mail:*************相关产品：货号名称规格6063211茜素红染色试剂盒100mL/kit 6063231阿利新蓝染色液100mL/瓶6114531人间充质干细胞成脂分化培养基200mL/kit 6114541人间充质干细胞成骨分化培养基200mL/kit 6114551人间充质干细胞成软骨分化培养基200mL/kit 6062011DPBS500mL/瓶版本号：C/1。

油红O染色具体操作方法

脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。

它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。

在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。

脂类的主要功能是氧化供能。

脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。

在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。

脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。

脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。

经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。

根据这一原理，适当提高温度（37℃-60℃）对组织切片染色效果是有好处的。

脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。

一、苏丹Ⅲ(SudanⅢ)染色法：操作方法：（1）固定于10%甲醛的组织。

（2）水洗后采用冰冻或石蜡切片。

（3）经蒸馏水后，浸染于Harris苏木素或明矾苏木素中淡染1-2分钟。

（4）自来水冲洗。

（5）水洗后，移入70%酒精5秒钟。

（6）投入苏丹Ⅲ染液中约30分钟或更长时间，置于56℃温箱中。

（7）在70%酒精中洗涤5-10秒钟。

（8）洗于蒸馏水中，然后将切片移于载玻片上。

（9）切片移于玻片上，将切片周围的水分小心擦掉。

（10）甘油明胶封固。

结果：脂肪呈橙红色或鲜红色或黑色，胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。

试剂配制：1.苏丹Ⅲ染液配法：将0.15克苏丹Ⅲ溶解于100ml70%酒精或纯丙酮和70%酒精混合液中（各50ml），临用时过滤，所得滤液即为饱和浓度。

注：浸染时，容器必须盖好，否则酒精或丙酮挥发，染料沉淀。

2.甘油明胶配制：明胶40g蒸馏水210ml甘油250ml石碳酸结晶5ml先将明胶浸入蒸馏水中2小时或更长时间，然后加甘油和石碳酸，加热15分钟，摇搅直至混合液均匀为止。

二、苏丹Ⅳ(SudanⅣ)染色法：苏丹Ⅳ又名猩红，是苏丹Ⅲ的衍生物，作为脂肪染剂，经各地实验证明，其结果优于苏丹Ⅲ。

油红o染色原理

油红o染色原理
油红染色是一种常用的染色方法，广泛应用于组织学、细胞学和生物化学研究中。

它主要基于油性颜料与细胞或组织中的特定物质发生亲和性反应的原理。

油红染色的基本原理是利用染料的亲油性，使其在组织切片上形成可见的颜色。

油性染料通常由非极性的有机化合物构成，如有机酸（如油红O）或有机碱。

这些染料能够与细胞或组织中的特定成分发生化学反应，形成染色复合物。

在进行染色之前，通常需要对组织或细胞进行固定处理，以保持其形态结构和细胞内的化学成分。

然后，将固定后的组织或细胞用水洗涤，使其去除固定剂和其他可能干扰染色的物质。

接下来，将切片放入染液中进行染色。

染色过程中，油红染料与目标物质发生反应，形成染色复合物。

这种反应通常是通过亲和吸附、化学结合或离子交换等方式实现的。

这些染料在组织或细胞中的某些成分上产生颜色变化，从而使其在显微镜下观察时更易于辨认和分析。

染色完成后，需要将切片进行脱水、透明化和封片等步骤，以保护染色结果并使其能够长期保存。

脱水可以通过将切片依次置于浓度逐渐升高的醇溶液中进行。

透明化则是通过将切片浸泡在透明化剂中，以使其透明度增加，便于观察。

最后，将切片置于显微镜镜片上，并使用透明胶封好，以防止切片移位或损坏。

总的来说，油红染色是一种利用染料的亲油性与细胞或组织中特定成分发生反应的染色方法。

通过这种方法，可以使细胞或组织在显微镜下呈现出明显的染色，从而方便观察和研究。

油红O染色法

油红O染色法
油红O染色法
试剂：
油红O液：
油红O（Oil red O)0.5克，异丙醇（Isopropanol )100毫升，倒入三角烧瓶内，水浴加热溶解，冷却后过滤。

用细口磨砂瓶保存。

用时取油红O液6毫升加蒸馏水4毫升，混合后静置10分钟，即可染色。

方法：
⑴组织用10%甲酸液固定
⑵冰冻切片厚6~10微米。

⑶用玻璃钩把切片捞入60%异丙醇，稍洗。

⑷油红O液加盖染色5~10分钟，60%异丙醇稍洗去多余的染液。

⑸蒸馏水洗。

⑹Mayer苏木精淡染细胞核。

⑺1%盐酸水溶液快速分化，水漂洗10分钟或于稀碳酸锂水溶液促蓝。

⑻贴于载玻片，把周围的水抹干。

⑼阿拉伯胶或甘油明胶封片。

结果：
中性脂肪呈深橙红色，细胞核蓝色。

细胞油红O染色的操作步骤

细胞油红O染色的操作步骤1.准备工作-准备蜡块或切片的载玻片，确保干净无尘。

-准备所需的试剂和材料：油红O染色液、甘油、石蜡切片、显微镜玻璃片、显微镜、显微摄影设备等。

2.油红O染色液的制备- 准备0.5%油红O染色液。

将0.5g的油红O溶于100ml的乙醇中，充分溶解。

-过滤染色液以去除发生絮团的杂质，得到一个均匀混合溶液。

3.油红O染色液的使用- 取一个载玻片，将其轻轻插入显 microscopy 可见的草酸溶液中清洗，然后用蒸馏水清洗，并擦干。

-在载玻片上滴加一滴染色液，将油红O均匀分布在玻片上。

-取脱水后的石蜡切片，放入油红O染色液中，使其完全覆盖。

-在油红O染色液中浸泡的时间根据需要而定，一般约为15-30分钟。

-拿出石蜡切片，用蒸馏水冲洗数次，直到液体变为无色。

-轻轻擦干载玻片上的石蜡切片。

4.显微镜观察和摄影-将载玻片放置在显微镜上，用低倍镜或高倍镜观察样品。

-调整光源和焦距，找到合适的条件以观察和拍摄样品。

-用显微摄影设备拍摄所需的图像，根据需要进行保存和分析。

5.注意事项-油红O是有毒物质，使用时需佩戴手套并避免接触皮肤和吸入。

-操作时要注意避免样品受到空气中的灰尘、皮脂等污染。

-染色时间和沥青切片的浸泡时间可以根据实验需求进行调整。

-染色后及时清洗玻片和仪器，避免油红O污染其他实验物品。

-拍摄图像时，要调整曝光时间和对比度以获得清晰的图像。

总结：细胞油红O染色是一种简单且经典的染色方法，可用于研究细胞内的脂质结构和颗粒物质。

操作步骤包括准备工作、油红O染色液的制备和使用、显微镜观察和摄影等。

在操作过程中需要注意安全性，保持样品的干净和避免污染。

通过细胞油红O染色，可以获取清晰的图像以进一步研究细胞和组织的结构和功能。

细胞油红O染色的操作步骤

细胞油红O染色的操作步骤Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】细胞油红O染色的操作步骤点击次数：348 发布时间：2011-4-11、10%中性甲醛的配制材料：中性甲醛(多聚甲醛) 密封瓶称取1g中性甲醛粉末，加入10ml的三蒸水中，密封，在60度水浴中过夜才能溶解。

配好的溶液1个星期内有效，最好4度保存。

?2、的配制材料：油红染料棕色可密封瓶异丙醇研钵漏斗定性滤纸称取预先研磨粉碎的0.5g油红干粉，溶于少量异丙醇中，然后加异丙醇至100ml，棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4℃保存，为储存液，可长期保存。

用时取6ml加三蒸水4ml混匀，定性滤纸过滤，稀释后数小时内用完。

3、培养载体 3毫升培养瓶。

如果培养载体为塑料制品，hoechst33342染核的话，塑料板自发荧光也为蓝色，必须考虑。

4、.染色对象间充质细胞脂肪诱导后不同时间段。

5、注意事项：脂肪油红染色，有的是动物/人体脂肪组织切片，或细胞爬片。

各有操作差异。

以下是各论坛方法小结，不全。

(1).完全成熟饱满的脂肪，容易破裂，脂滴泄漏，所以压片，切片都要考虑到这个问题。

(2).细胞爬片细胞溶液脱落，特别是脂滴大的。

操作务要轻柔。

不要把细胞冲掉。

(3).如果做脂肪组织冰冻切片，冰冻温度比普通要低，切片厚度加厚。

6、染色步骤：(1) 先小心轻缓倒去培养夜。

?(2) 用pbs轻缓漂洗(不洗没问题)。

(3)加10%中性甲醛固定30min(实际固定时间过夜都没问题。

固定液用95%酒精也可)。

固定的是细胞膜。

?(4) 稀释油红储存液，油红：去离子水＝3:2，滤纸过滤，室温放置10min(除去一些杂质，结果更清晰)。

(5)染色10min左右，加的体积覆盖住板底即可，如6孔加，24孔加(实际染色时间1小时都可以)。

(6)脱色，用75%酒精/60%异丙醇漂洗，除去多余的染料(实际用其他平衡液洗也没问题，背景并不会残留多少)。

油红O染色--步骤

油红O染液试剂组成：
试剂一：贮备液--红色液体；稀释液--无色透明液体试剂二：复染液--紫红色液体
试剂三：水性封固剂--黄色液体
第一步：试剂一应用液的配制--贮备液:稀释液=5:2,需要多少配多少，配好后需用滤纸过滤两遍，去除残渣（否则易观察到黑色杂质）。

应用液保存时间最好不要超过2h，贮备液可放置1-2年。

第二步：冰冻切片回温—将预先制好的并保存在-20℃冰箱中的冰冻切片放置切片架上室内温度回温10min，待染。

第三步：取冰冻切片直接放入装有试剂一应用液的染缸中染色13min，后在37℃左右的蒸馏水中洗20s。

第四步：在试剂二复染液染色5min，水洗60s。

第五步：封片—未待表面水干透即可滴加试剂三水性封固剂于玻片表面，后加盖玻片封片。

（在封片前应先将水性封固剂于60℃温水中加热至液状，待其稍稍凝固后滴于玻片上）。

第六步：镜检。

染色结果：脂肪被染成鲜红色，细胞核被染成深蓝色，其他组织被染成淡蓝色。

油红O染液使用说明书

利用染料易溶于脂质的性质，检测组织中脂肪含量的多少。
准备
工作液的配制：将油红 O 储存液与去离子水以 6:4 混合，室温下放置 10min，0.22μ m 滤膜
过滤，新鲜配制的工作6×105cells/ml 时，倒掉培养基，用 0.01M PBS 洗涤细胞 2 次；
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单
货号
品名
包装
HCY118
油红 O 染液
100mL
/
说明书
1份
1
2.细胞固定：用含 10%甲醛的磷酸盐缓冲液固定细胞 10min；
3.漂洗：细胞用 PBS 漂洗一次（1min），然后用 60%异丙醇冲洗 15 秒，促进中性脂肪的染色；
4.油红 O 染色：避光处，37℃下，用已过滤的油红 O 工作液染细胞 1min；
5.脱色：用 60%异丙醇处理细胞 15 秒；
6.漂洗：用 PBS 漂洗 3 次，每次 3min；
杭州昊鑫生物科技股份有限公司成立于2008年坐落于素有天堂之称的杭州由一群专业从事生物领域十年以上的人士创立是一家面向生命科学领域从事科研机构及生产企业所需科研试剂耗材仪器销售和服务的高新技术企业
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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油红 O 染液
油红 O 染液（Oil Red O Staining Solution）
7.复染：可用苏木素复染 1min；
8.漂洗：用 PBS 漂洗 3 次，每次 3min；
9.封片剂封片；
10.显微镜下观察：阳性染色细胞为红色。
冰冻切片染色程序
1 福尔马林固定冰冻切片后，流动自来水冲洗 1~10min；

油红o染色改良

油红O染色：溶液配制：称取0.5g油红0干粉，加入100ml异丙醇,避光静置8-10小时，使用前6ml原液加入4ml双蒸水，静置5-10min，最后以0.40um 滤膜过滤。

油红O定量：染色1.吸弃培养孔的培养基，PBS（1ml/孔）冲洗2次。

2.加入10%甲醛磷酸盐缓冲液（1ml/孔），室温固定1小时。

3.吸弃固定液，每孔加入800ul油红O溶液，室温染色2小时。

4.吸弃染色剂，无菌双蒸水或75%酒精冲洗2次，充分洗去为着染料。

5.倒置显微镜观察、照相。

定量6.每孔加入600ul异丙醇（用于染料提取），反复吹打使之溶解油红0染料。

7.吸取150ul上述染料提取液加入96孔板内，24孔板的一个空重复3次，即每个浓度重复9次。

8.酶标仪492测OD值。

（1）10%甲醛：对组织渗透性强，固定均匀。

对组织膨胀约5%，经酒精脱水时有较大的收缩。

能保存脂肪，不能沉淀核蛋白及白蛋白，长期用其固定的组织使组织变为酸性，不利于染色，特别是细胞核的着色。

经自来水冲洗6~24小时后，可以使其酸碱中和，并减少结晶。

（2）4%多聚甲醛：对组织穿透性好，组织收缩小，对大多数抗原物质保存较好，特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。

固定的时间不宜太长，以24小时以内为宜，适用于免疫组织化学染色。

油红O染色后，PBS清洗，加入100-200ul的异丙醇抽提油红O，然后在510（有的518，520，570nm)波长测定OD值。

虽然都没描述异丙醇加入后怎样抽提脂质，我想应该加入异丙醇后裂解细胞，油红O染色的脂质就可溶解到异丙醇中，因此就可以测OD值。