高效液相色谱法测定蚓粪中的植物激素
植物激素的测定方法
植物激素的测定方法植物激素是一类由植物自身合成并参与生长发育调控的活性物质,对植物的生长发育起着重要作用。
因此,准确测定植物激素的含量对于研究植物生长发育调控机制具有重要意义。
本文将介绍几种常用的植物激素测定方法。
一、高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法是目前应用最广泛的植物激素测定方法之一。
该方法基于植物激素在高效液相色谱柱上的保留时间和峰面积,通过与已知浓度的标准品比较,可以计算出待测样品中植物激素的含量。
高效液相色谱法具有分离效果好、分析速度快、准确度高的优点,但需要专用的仪器设备,操作较为复杂。
二、气相色谱法(GC)气相色谱法是另一种常用的植物激素测定方法。
该方法通过将待测样品中的植物激素转化为易挥发的衍生物,然后在气相色谱柱上进行分离和定量分析。
气相色谱法具有测定灵敏度高、分离效果好的特点,但需要对样品进行预处理,并且对仪器的稳定性要求较高。
三、酶联免疫吸附法(ELISA)酶联免疫吸附法是一种常用的免疫学测定方法,也可以用于测定植物激素的含量。
该方法通过将植物激素与特异性抗体结合,然后再用酶标记的二抗进行检测,最后通过比色反应或发光反应来测定植物激素的含量。
酶联免疫吸附法具有操作简便、成本较低的优点,但需要特异性较好的抗体。
四、放射免疫测定法(RIA)放射免疫测定法是一种使用放射性同位素标记的植物激素进行测定的方法。
该方法通过将放射性同位素标记的植物激素与待测样品中的植物激素结合,然后通过放射性计数来测定植物激素的含量。
放射免疫测定法具有灵敏度高、测定范围广的特点,但需要使用放射性同位素,存在辐射危险。
五、质谱法(MS)质谱法是一种高灵敏度的分析方法,可以用于测定微量的植物激素。
该方法通过将待测样品中的植物激素通过质谱仪进行分子质量分析,从而测定植物激素的含量。
质谱法具有高灵敏度、高分辨率的特点,但需要专用的仪器设备和较高的技术水平。
植物激素测定方法有高效液相色谱法、气相色谱法、酶联免疫吸附法、放射免疫测定法和质谱法等。
高效液相色谱法在肥料中的检测及应用
高效液相色谱法在肥料中的检测及应用摘要:高效液相色谱法是一种方便、快速、有效、准确地分离分析的方法,在肥料的实际应用中,可以满足多种肥料的检测要求,有良好的商业价值。
本文介绍了高效液相色谱法的基本概念、类型和原理,以及在肥料中的检测,并提出了在实际运用当中的一些优化措施。
关键字:高效液相色谱法;肥料;检测;应用20世纪70年代起,高效液相色谱法得到了迅速发展,是一种常规的分离分析技术。
一般肥料的检测方法通常采用离子交换色谱和凝胶排阻色谱方法来进行不同类型的检测,本身的检测方法也比较有效,效率较高。
但是相对于这两种办法,高效液相色谱法能更好地分析肥料的成分和质量。
这种方法在实际操作过程中,需要工作人员收集基础数据和相关资料,然后根据收集的数据和资料进行肥料检测。
在传统检测过程中,一般都会采用灵敏度高的仪器来进行检测,仪器成本投资较高。
目前使用高效液相色谱法技术,能单纯地减少微颗粒直径,提升肥料检测的灵敏度,对我国农业未来的发展起到了一定的贡献和作用。
一、高效液相色谱法的简介1.1高效液相色谱法的概念和类型高效液相色谱法是一种基于仪器研发的高性能分离方法,改变了传统液相色谱法应用的局限性,使检测的范围更广泛。
但是高效液相色谱法作为一种新的高效能分离技术,在实际操作中分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱等几种类型。
1.2高效液相色谱法的技术原理高效液相色谱法的技术原理比较复杂。
因为色谱柱和检测的系统是由很多部分所组成的。
在实施过程中,依靠输液泵输出稳定的流速传送到分析系统,提高系统整体的稳定性。
另外还需要先在进样器里将样本导入,然后进入色谱柱,并按照分配系统将检测到的信息输送到数据系统进行记录。
同时,高效液相色谱法还能处理和保存检测的数据,随着技术的日益成熟,已经慢慢成为检测肥料的主要技术工具,具有重要的价值。
1.3高效液相色谱法的分离模式高效液相色谱法的关键在于分离模式。
一般来说,分离模式会对某些功能上有一定程度的影响,造成了一些物理和化学功能上的差异,但是却为肥料分离的检测提供了基础。
蚯蚓粪的功效和特性
蚯蚓粪的功效和特性蚯蚓粪的功效和特性随着现代化畜牧业生产的发展和人民生活水平的不断提高,城乡奶牛业得到迅速发展,奶牛厂的建立日趋增多,但大量的牛粪排出,导致粪屎等废弃物堆积,造成城郊环境的污染。
目前各国广泛研究应用蚯蚓来防治公害。
特别是利用蚯蚓处理废物已引起各国重视,如日本、美国、加拿大、法国等国已建立蚯蚓养殖场作为城市垃圾的处理补充系统,以解决城郊环境污染问题。
利用蚯蚓处理粪便的研究,至今报导较少。
利用蚯蚓处理畜禽粪便,不仅为发展畜牧业开辟了动物蛋白质饲料新来源,也为城市净化、处理公害找到了新途径。
本研究的目的在于利用蚯蚓处理牛粪获得蚓粪,分析测定蚓粪的化学成分,以探讨蚓粪作为饲料、肥料的可行性及其优越性。
1 试验材料和方法1 1 蚓粪收取方法新鲜奶牛牛粪常温自然发酵后投放一定数量的蚯蚓,任其自由吞食牛粪,由于生长发育的环境条件适宜,蚯蚓大量繁殖,牛粪被蚯蚓全部吃掉而排泄成无臭、多孔的黑色团粒即蚓粪,在蚓粪堆用插样器分上下两层抽取原始样品,后用分样器分取平均样品,最后用十字分样法分取试验样品。
表1 蚓粪的有机质和NPK含量表全氮全磷全钾有机质 PH(N%) (P%) (K%) (%)蚓粪 0.96 0.36 0.97 19.47 7.10牛粪 1.13 0.48 0.69 25.62 7.502 检查分析项目2 1 肥效测定采用土壤肥料肥力成分分析的方法,分析蚓粪的有机质、pH和全氮、全磷、全钾。
2 2 养分测定用常规分析法测定蚓粪的吸附水、粗脂肪、粗纤维、粗蛋白、粗灰分、无氮浸出物和钙、磷含量。
表2 蚯蚓粪的化学成分(%)2 3 氨基酸含量用日立835-60型高速氨基酸分析仪测定了18种氨基酸含量。
2 4 微量元素测定用电感藕合等离子体光度计测定了5种矿物元素含量。
2 试验结果分析2 1 蚓粪的肥效测定通常情况下,植物所需要的氮、磷、钾三种元素的数量很多,但土壤所能提供的数量又比较少,在饲料生产上往往需要通过施肥才能满足植物(包括作物、牧草)的需要。
植物激素检测
植物激素检测植物激素是植物体内自身合成的可调节植物生理反应的活性物质。
在植物体内含量甚微且组成复杂,相互共存的干扰组分多。
已知植物体内产生的激素有六大类,即生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯和油菜素甾醇,虽都是简单的小分子有机化合物,但生理效应复杂、多样。
迪信泰检测平台使用高效液相色谱(HPLC)的方法,使用Agilent 1260 Infinity型高效液相色谱仪对样品进行分离,蒸发光散射检测器(ELSD)或DAD检测器对样品进行鉴定,实现对植物激素高效、精准的测定。
此外,迪信泰检测平台还提供LC-MS测定植物激素服务,以及植物激素系列检测试剂盒产品,以满足您的不同需求。
植物激素类检测项目玉米素(ZA)检测赤霉素(GA)检测吲哚乙酸(IAA)检测脱落酸(ABA)检测水杨酸(SA)检测茉莉酸(JA)检测生长素(Auxin)/植物生长激素检测细胞分裂素(CTK)检测玉米素核苷(ZR)/反式玉米素核苷(TZR)检测吲哚丁酸(IBA)/吲哚-3-丁酸检测6-苄氨基腺嘌呤/6-苄氨基嘌呤(6-BA)检测激动素(KT)检测萘乙酸(NAA)检测异戊烯基腺嘌呤(IP/2ip)检测异戊烯基腺嘌呤核苷(IPA/2ipr)检测结合吲哚乙酸检测结合脱落酸检测水杨酸甲酯(MESA)检测茉莉酸甲酯(MeJA)检测油菜素内酯/芸苔素/油菜素甾醇(BR/BL)检测独角金内酯(SLs)检测乙烯(ETH)检测褪黑素(MT)/褪黑激素/褪黑色素检测HPLC测定植物激素样本要求:1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL,测定样品不返还,请您保留备份。
周期:2~3周项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报告包括:1. 实验步骤(中英文)2. 相关质谱参数(中英文)3. 质谱图片4. 原始数据5. 植物激素含量信息。
蚯蚓粪测定
研究表明,蚯蚓处理污水处理厂排出的生活污泥,对其中的重金属特别是镉去除效率高,消解后的污泥中镉的含量接近土壤中的背景值。据悉,在污泥处理问题上,欧美等发达国家均大力推行使用蚯蚓来处理,我国的《北京春联生物科技中心》这一课题在国内属领先水平。
1、肥效测定
全氮 0.95~2.5%
全磷 1.1~2.9%
全钾 0.96~2.2%
有机质 25~38%
腐植质 21~40%
有益菌群2000万个/克~2亿个/克
PH值 6.8~7.1
2、营养成份(风干)
吸附水 4.60~5.2%
粗脂肪 0.59~0.65%
粗纤维 5.10~6.2%
五十年代以来,农作物施肥主要靠化肥。化肥的出现使农作物产量成倍增长,对解决温饱问题立下了汗马功劳。但是化肥的副作用也日益明显,施用化肥的瓜不香、果不甜、菜无味,而且化肥生产投资大、成本高、价格贵。特别是长期施用化肥,会对土壤结构造成严重的破坏,如今土壤板结已成为一个严重的问题。有关专家呼吁:大量养殖蚯蚓,减少化肥用量,从根本上改良土壤,以保证农业持续发展。
4.将蚯蚓粪追加在花卉土壤的表层1-2厘米,可充分发挥肥效,经常保持蚯蚓粪湿润的同时也可对吸收室内甲醛、苯、挥发性有机化合物起到神奇的作用。
5.蚯蚓粪与园土等的区别, 取少许蚓粪肥料,加水搅拌,用手指揉搓,手感细腻,无任何颗粒,则为纯蚓粪。如混有少量沙土或其他物质,通过手指揉搓会明显颗粒感。
主要养分:
蚯蚓粪不仅含有氮、磷、锌等各类元素,而且含有铁、锰、锌、铜、镁等多种微量元素和18种氨基酸,有机质含量和腐植质含量可达30%左右。
激素测定方法
激素的测定方法参考王学奎(2015)《植物生理生化实验原理与技术》一书中的高效液相色谱法,以2016年采自尚志市水稻田的野慈姑球茎为材料,6-12月每个月测定一次野慈姑球茎内CA3和ABA的含量。
试验材料的处理称取1-2g样品,在冰浴下研磨匀浆,加入80%的预冷甲醇20ml,保鲜膜密封,在4℃冰箱里冷浸过夜。
浸提液抽滤,10ml甲醇润洗研钵2次,过滤后与浸提液合并,40℃下减压蒸发至没有甲醇残余。
剩余水相完全转移到三角瓶中,用30ml石油醚萃取脱色2次,弃去醚相。
加0.01gPVPP(交联聚乙烯吡咯烷酮,crosslinked polyvinylpyrrolidone),超声30mim,抽滤用30ml,乙酸乙酯萃取3次,合并酯相,40℃下减压蒸干。
用甲醇(色谱纯)溶解残留物并定容至2ml,经0.45μm微孔滤膜过滤得待测液,保存于4℃冰箱中。
测定(1)标准曲线的绘制取一定量GA3和ABA标准品,用甲醇(色谱纯)溶解,配制成不同浓度的溶液,点击“运行控制”菜单,再选择“运行方法”,手动或自动进样器进样10-30μL,进行液相检测分析。
在一定浓度范围内,4种激素峰面积与浓度呈良好线性关系时,即可绘制标准曲线。
(2)取同样体积的待测样品,进样。
待样品峰全部出完,冲洗30min待基线平直后,即可分析下一个样品。
(3)定性根据标准品的保留时间判断样品中的对应激素峰。
选择与已知标样具有相同保留时间的样品的峰面积,并根据对应的标准曲线查出对应激素的浓度ρ(μg/mL),然后根据下式计算鲜样(FW)中各激素的含量:样品中激素含量(μg/kg FW)=ρ·V Tm·V S式中:ρ为根据样品峰面积从标准曲线查得的对应激素浓度(μg/mL);V T为待测样总体积(mL);V S为进样量(μL);m为样品鲜质量(g)。
超高效液相色谱检测农作物中农药残留
超高效液相色谱检测农作物中农药残留超高效液相色谱(UHPLC)是一种高效的色谱分析技术,它可以用于检测农作物中的农药残留。
农药残留是指在农作物生长和加工过程中,由于农药施用不当或者残留期限制不当而导致的农药在农作物中残留的问题。
农药残留不仅会影响农产品的质量和安全,还可能对人体健康和环境造成危害。
及时、准确地检测农作物中的农药残留,对于保障农产品质量安全至关重要。
UHPLC技术在农药残留检测中具有高效、精准、快速的优势。
它采用超高压力泵和超高效率柱,使得样品在短时间内即可分离出各种农药成分,大大提高了检测的效率和分辨率。
UHPLC技术还可以结合不同的检测方法和检测指标,能够检测更多种类的农药残留,包括有机磷、有机氯、吡唑醚类、三唑醇类、内酯类等多种常见的农药成分。
UHPLC技术在农药残留检测中得到了广泛的应用。
UHPLC技术检测农作物中的农药残留主要包括以下几个步骤:1. 样品处理:首先需要从农作物样品中提取出农药残留物,并将其转化为适合UHPLC 检测的样品。
这个过程包括样品的研磨、提取和净化等步骤,需要使用一系列的溶剂和化学试剂进行处理。
2. 色谱分离:经过样品处理后,需要将提取的农药残留物通过UHPLC技术进行色谱分离。
这一步骤需要采用高效率的色谱柱和优化的分离条件,以保证各种农药成分能够得到有效的分离和富集。
3. 检测分析:经过色谱分离后,样品中的农药残留物需要通过检测器进行检测分析。
UHPLC技术通常会配备不同种类的检测器,如紫外检测器(UV)、荧光检测器(FLD)、质谱检测器(MS)等。
这些检测器能够对不同种类的农药成分进行高效、快速、准确的检测与定性分析。
4. 数据处理:检测出的数据需要进行处理和分析,以得出样品中农药残留的含量和种类,并与相关的监管标准进行比较。
这一过程通常采用软件进行自动化处理,能够大大提高数据的准确性和可靠性。
UHPLC技术在农作物中农药残留检测中具有明显的优势。
HPLC法测定黄牛粪中的植物激素
分 裂 素 ( ) 量进 行 测 定 , 果 表 明 , 牛 粪 中含 有 G 、A 、B Z含 结 黄 A IA AA和 Z 含 量 分 别 为 : .9 0 Xg/g , , l 43 I 4
24 0 Ig/g 08 g/g和 1 1 8 g/g .4 9 X 。 .1 4 5 .4 3 .
1 . 2仪器 与试 剂
粪 中的 IA和 G A A,而对黄牛粪 中植物激 素的分
析 尚未 见 报道 , 文 用 高 效 液 相 色谱 法 分 析 测 定 本
A in 10 get 10高 压液 相 色谱 系统 ;榆测 器 : l
G11A; 34 色谱 柱 : t s I柱 (5 .,. m, Wae 8 2 0X465O ) rC g ;
木该实验在湖南农业大学湖南省植物激素重点实验室完成 .
5 2
邵 阳 学院 学报 ( 自然科 学版 )
第 7卷
和 z标 准 品 均为 Fua 司 的H L lk 公 P C试 剂 .
13色谱 条件 .
胶 ( E E sp a a 一 5 柱 , S p a C 8小 柱 D A eh dxA 2 ) 以 e P k l
1实验材料与 方法
1 1实 验材 料 .
供 试 材 料 为 黄 牛粪 , 自邵 阳 市 大 祥 区城 南 采
高效液相色谱法快速分析植物内源性激素
高效液相色谱法快速分析植物内源性激素植物内源性激素在植物生长和发育过程中起着重要的调节作用。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作为一种先进的分析技术,被广泛地用于植物内源性激素的定量分析和研究。
通过快速、准确地分析植物内源性激素,我们可以深入了解植物的生长和发育调控机制,为农业生产和植物育种提供重要的理论指导和实践应用。
一、植物内源性激素的概述植物内源性激素是一类在植物体内合成和调节生长发育的化合物,包括生长素、赤霉素、脱落酸、激素酮、保护素和亚硫酸氨基酸等。
它们在调节植物生长和发育过程中发挥着不可或缺的作用,如控制细胞分裂和伸长、调节根系和茎的形态发育、调控开花和果实发育等。
了解植物内源性激素的合成、分布和调控机制对于揭示植物的生长发育规律具有重要意义。
二、高效液相色谱法在植物内源性激素分析中的优势高效液相色谱法是一种在液相中进行分离和测定的分析技术,具有分离能力强、选择性好、分析速度快以及样品处理简单等优点,因此被广泛应用于植物内源性激素的定量分析中。
与传统的色谱方法相比,高效液相色谱法具有以下几个优势:1.分离能力强:高效液相色谱法能够有效地将混合样品中的激素物质分离出来,得到高纯度的化合物。
这一点对于复杂的植物组织和生理液体样品分析尤为重要。
2.选择性好:高效液相色谱法能够通过调整色谱柱、流动相和检测器等条件,实现对不同内源性激素的选择性分离和测定,从而提高了分析的准确性和可靠性。
3.分析速度快:高效液相色谱法具有快速分析的特点,一般可以在几分钟到几十分钟内完成一次分析,提高了实验效率。
4.样品处理简单:高效液相色谱法在样品处理时通常只需简单的提取和净化步骤,可以大大简化实验过程,提高了实验效率。
三、高效液相色谱法快速分析植物内源性激素的方法高效液相色谱法快速分析植物内源性激素的方法主要包括激素提取、净化和检测。
根据不同植物内源性激素的特性和含量,可以选择不同的样品处理方法和色谱条件。
植物激素检测方法
植物激素检测⽅法植物激素是植物体内合成的⽤于调控植物⽣成发育的⼩分⼦化合物。
⽬前,被公认的植物激素有6⼤类:细胞分裂素类(CK)、⾚霉素类(GAs)、⽣长素类(Auxins)、脱落酸类(ABA)、⼄烯和油菜素甾醇类(BRs)。
以下介绍⼏种常⽤的植物激素检测⽅法。
1. ⽣物检测法利⽤植物激素作⽤于植物组织或离体器官后产⽣的特异性反应,从⽽间接对植物激素的含量进⾏检测。
然⽽,不同结构的⾚霉素、⽣长素或激动素对不同⽣物检测法的响应有差异,因此有时可能⽆法测出。
由于⽣物检测法可以检测植物激素的活性,常⽤于植物激素的定性分析,也常与其他检测⽅法结合使⽤。
2. ⽓相⾊谱法通过与标准样品共⾊层分离来鉴定样品中植物激素的含量,但由于⽆法排除杂质与标准品的共⾊层分离,所以不能准确检测植物激素含量。
待测样品必须形成易挥发的甲基化和三甲基硅烷化衍⽣物才可以运⽤⽓相⾊谱法检测,所以在⼄烯的测定种,⽓相⾊谱法⽐较常⽤。
3. 酶联免疫法(ELISA法)将抗原或抗体与酶结合形成酶标抗原或抗体,加⼊酶反应的底物后,底物被酶催化⽣成有⾊产物,通过颜⾊反应的深浅来进⾏定性或定量分析。
酶联免疫吸附法的主要缺点在于抗体的制备复杂,且检测中难以排除交叉反应,⽆法保证植物激素检测的准确性。
4. ⾼效液相⾊谱法⾼效液相⾊谱法与不同检测器结合,能直接分析多种植物激素,是⽬前应⽤较⼴泛的植物激素检测⽅法之⼀。
除⼄烯外的其它植物激素均可以采⽤⾼效液相⾊谱法进⾏检测。
5. 质谱法液质联⽤(LC-MS)和⽓质联⽤(GC-MS)克服了⾼效液相⾊谱和⽓相⾊谱的在植物激素定性和定量⽅⾯的局限性,成为普遍接受和认可的植物激素检测⽅法。
GC-MS具有选择性好、专⼀性强、灵敏度⾼等特点,不⾜之处在于对样品的纯化要求很⾼,且样品需要衍⽣化处理。
不同于GC-MS,LC-MS不需要衍⽣化处理,简化了操作步骤,缩短了检测时间。
因此LC-MS更适⽤于植物激素的检测(除⼄烯外)。
植物激素研究的一般方法
植物激素研究的一般方法
1. 激素的提取和分离,研究人员通常会从植物组织中提取激素,并通过化学方法或生物学方法进行分离纯化,以便进行后续的分析
和实验。
2. 生物测定法,生物测定法是研究植物激素活性的重要方法,
包括生物学活性测定、生长调节测定等,常用的方法包括生长曲线
实验、生物测定实验等。
3. 分子生物学方法,利用分子生物学技术对植物激素进行研究,包括克隆激素合成基因、激素受体基因、信号转导途径相关基因等,通过转基因技术和基因敲除技术研究植物激素的功能。
4. 生化分析方法,利用生化分析方法对植物激素进行研究,包
括高效液相色谱法、质谱法、酶联免疫吸附实验等,用于检测和定
量植物激素的含量。
5. 组织培养技术,利用植物组织培养技术研究植物激素的生物
学功能,包括激素的促进生长、诱导愈伤组织等,通过组织培养的
方式研究植物激素的作用机制。
总的来说,植物激素研究的一般方法涉及到多个学科领域的知识和多种实验技术的应用,通过综合运用这些方法,可以全面深入地研究植物激素在植物生长发育中的作用机制和调控网络。
植物激素的测定方法
植物激素的测定方法植物激素是一类在植物生长和发育过程中起调节作用的化合物。
它们能够通过调节细胞分裂、扩展和分化以及调控植物对环境的适应能力,从而影响植物的形态和功能。
为了研究和了解植物激素的作用机制,科学家们发展了多种测定植物激素的方法。
这些方法可以帮助我们准确地测定植物激素的浓度,并进一步揭示植物激素在植物生长和发育中的作用。
一种常用的测定植物激素的方法是高效液相色谱法(HPLC)。
HPLC 是一种基于植物激素在液相中的分离和检测原理的分析方法。
首先,样品中的植物激素会被提取出来,然后通过在柱子中的固定相上进行分离,最后利用紫外光谱仪或质谱仪等设备进行检测和定量。
这种方法具有高分离效果、高灵敏度和高准确性的优点,常用于测定植物激素如生长素、赤霉素、脱落酸等的浓度。
除了HPLC,放射免疫测定法(RIA)也是一种常用的测定植物激素的方法。
RIA利用植物激素与标记同位素结合的原理,通过测量放射性同位素的放射线强度来定量植物激素的浓度。
这种方法具有高灵敏度和高特异性的优点,可以测定植物激素如赤霉素、激动素、玉米素等的浓度。
酶联免疫吸附测定法(ELISA)也是一种常用的测定植物激素的方法。
ELISA利用植物激素与特异性抗体的结合反应,通过测量抗体与酶标记物质之间的酶活性来定量植物激素的浓度。
这种方法具有简单、快速和高灵敏度的优点,常用于测定植物激素如赤霉素、生长素、激动素等的浓度。
除了上述几种常用的测定方法,还有一些新兴的测定植物激素的方法也在不断发展中。
例如,质谱法(MS)是一种基于植物激素分子的质量和质荷比的分析方法,可以精确测定植物激素的结构和浓度。
另外,生物传感器和光谱法等新技术也被应用于植物激素的测定领域,为研究人员提供了更多的选择。
测定植物激素的方法多种多样,各有优劣。
科学家们根据研究目的和需求选择合适的方法来测定植物激素的浓度。
这些测定方法的发展和应用,不仅有助于我们深入了解植物激素的作用机制,还为植物生长和发育的调控提供了重要的理论和实践基础。
一种使用高效液相色谱测定粪便中褪黑素的方法[发明专利]
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010208718.5(22)申请日 2020.03.23(71)申请人 华中农业大学地址 430000 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号(72)发明人 熊家军 李可可 何长久 齐德生 陈建国 许学林 荆焕松 孙旭阳 (74)专利代理机构 武汉今天智汇专利代理事务所(普通合伙) 42228代理人 邓寅杰(51)Int.Cl.G01N 30/02(2006.01)G01N 30/06(2006.01)G01N 30/14(2006.01)(54)发明名称一种使用高效液相色谱测定粪便中褪黑素的方法(57)摘要本发明公开了一种使用高效液相色谱测定粪便中褪黑素的方法,包括:将待测粪便捣碎混匀,用冻干机冻干,甲醇浸提待测粪便,离心取上清液用氮吹仪吹干;用乙腈正己烷溶液溶解,离心取下层液,经微孔滤膜过滤;上机进行高效液相色谱检测,采用外标法对粪便样品中褪黑素进行定量。
本发明首次实现了对粪便中褪黑素的提取和检测,检测方法的灵敏度高、专一性强、稳定性好、结果准确可靠,可以建立动物非创伤性褪黑素检测新方法,阐明动物内源褪黑素分泌昼夜节律。
权利要求书1页 说明书5页 附图1页CN 111505134 A 2020.08.07C N 111505134A1.一种使用高效液相色谱测定粪便中褪黑素的方法,其特征在于:包括:将待测粪便捣碎混匀,用冻干机冻干,甲醇浸提待测粪便,离心取上清液用氮吹仪吹干;用乙腈正己烷溶液溶解,离心取下层液,经微孔滤膜过滤;上机进行高效液相色谱检测,采用外标法对粪便样品中褪黑素进行定量。
2.根据权利要求1所述一种使用高效液相色谱测定粪便中褪黑素的方法,其特征在于:在用乙腈正己烷溶液溶解,离心取下层液与微孔滤膜过滤之间增加重复离心,取上清的步骤。
3.根据权利要求1所述一种使用高效液相色谱测定粪便中褪黑素的方法,其特征在于:所述待测粪便与甲醇加入量的比为0.1g:6ml。
植物激素的hplc测定标准曲线的制作
植物激素的hplc测定标准曲线的制作
制作植物激素的HPLC测定标准曲线主要包括以下步骤:
1. 准备工作
- 购买合适纯品植物激素标准品,例如植物生长素(IAA)、生长素酸(IAA)、脱落酸(ABA)等。
- 找到合适的溶剂用于制备标准品的浓度梯度溶液。
一般情
况下,可以选择高纯度的有机溶剂,如甲醇、乙酸乙酯等。
2. 制备标准品溶液
- 使用分析天平称量适量的纯品植物激素到不同容量的瓶中。
- 使用溶剂逐一溶解不同容量瓶中的植物激素,制备出一系
列浓度梯度的标准品溶液。
3. 准备HPLC流动相
- 根据HPLC仪器说明书的要求,配置合适的流动相。
一般
情况下,可以选择有机溶剂和缓冲溶液的混合物作为流动相。
4. 进行HPLC分析
- 调整HPLC仪器的参数,如流速、柱温、检测波长等。
- 依次注入不同浓度的标准品溶液到HPLC仪器中,记录各
自的保留时间和峰面积。
5. 绘制标准曲线
- 将标准品溶液的浓度与相应的峰面积进行线性回归分析。
- 通过线性回归方程计算植物激素在样品中的浓度。
需要特别注意的是,在制作植物激素的HPLC测定标准曲线时,应保证各个工序的操作的高度准确和可重复性。
同时,应注意选择适用的HPLC仪器和柱以及合适的检测波长。
不同的植物激素可能需要不同的分析条件,所以在制作标准曲线之前最好先进行一些预实验以确定最佳的分析条件。
蚓粪对大蒜中蒜氨酸和大蒜素含量及大蒜精油抗菌活性的影响
蚓粪对大蒜中蒜氨酸和大蒜素含量及大蒜精油抗菌活性的影响作者:叶嘉张浩郭海燕宁辉来源:《中国瓜菜》2021年第10期摘要:以大蒜为材料,测定不同处理下蒜氨酸和大蒜素含量并检测大蒜精油对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑制效果,为开发大蒜天然抑菌药物和高效防腐保鲜剂提供参考。
结果表明,施用蚓粪和化肥的大蒜蒜氨酸含量(w,后同)分别为44.05 mg·g-1 和33.86 mg·g-1,大蒜素含量分别为0.33 mg·g-1和0.13 mg·g-1,施用蚓粪的大蒜蒜氨酸和大蒜素含量均显著高于施用化肥处理;施用蚓粪的大蒜精油得率显著高于化肥处理;在1.25~40.0 mg·mL-1质量浓度内,2种施肥处理大蒜提取得到的精油对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的最小抑菌质量浓度均为2.5 mg·mL-1,并表现出一定的量效关系;同一浓度处理下,蚓粪处理的大蒜精油对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑制作用优于化肥处理。
关键词:大蒜;高压液相色谱法;蒜氨酸;大蒜素;大蒜精油;抑菌中图分类号:S633.4 文献标志码:A 文章编号:1673-2871(2021)10-098-06Effects of vermicompost on alliin and allicin contents and antibacterial activity of garlic oil in garlicYE Jia1, 2, ZHANG Hao1, 2, GUO Haiyan1, 2, NING Hui1(1. School of Life Science and Engineering, Handan College, Handan 056005, Hebei,China; 2. Wild Plant Resources Research Centre in Taihang Mountain of Southern Hebei, Handan 056005, Hebei, China)Abstract: In order to provided reference data for the development of natural antibacterial drugs and high-efficiency preservatives, the contents of alliin, allicin and the inhibitory effect of garlic oil on Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium were detected. The results showed that the contents of alliin were 44.05 mg·g-1 and 33.86 mg·g-1, after treated by vermicompost and chemical fertilizer respectively, and allicin were 0.33 mg·g-1 and 0.13 mg·g-1, respectively. The contents of alliin and allicin treated with vermicompost were significantly higher than those of fertilizer treatment. The yield of garlic essential oil in vermicompost substrate was significantly higher than that in fertilizer substrate. The minimum inhibitory concentration of garlic oil contained in vermicompost and chemical fertilizer substrate to Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium was 2.5 mg·mL-1 in the range of 1.25-40.0 mg·mL-1, and it was showed a certain dose effect relationship. With the increase of garlic essential oil concentration, the diameter of bacteriostatic circle of Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium increased gradually. At the same concentration, the inhibition of garlic essential oil in vermicompost matrix on Staphylococcus aureus and Salmonella typhimurium was better than that in fertilizer matrix.Key words: Garlic; HPLC; Allicin; Alliin; Garlic essential oils; Bacterial inhibition隨着我国现代农业协同发展的不断加快,如何促进农业可持续化发展成为当前农业种植的关键问题。
植物激素 液质标曲
植物激素液质标曲植物激素是植物体内合成的用于调控植物生成发育的小分子化合物。
目前,被公认的植物激素有6大类:细胞分裂素类(CK)、赤霉素类(GAs)、生长素类(Auxins)、脱落酸类(ABA)、乙烯和油菜素甾醇类(BRs)。
以下介绍几种常用的植物激素检测方法。
利用植物激素作用于植物组织或离体器官后产生的特异性反应,从而间接对植物激素的含量进行检测。
然而,不同结构的赤霉素、生长素或激动素对不同生物检测法的响应有差异,因此有时可能无法测出。
由于生物检测法可以检测植物激素的活性,常用于植物激素的定性分析,也常与其他检测方法结合使用。
对植物激素的研究可以追溯到1880年,现今,植物激素检测通常有酶联免疫(Elisa),高效液相色谱(HPLC),气质联用(GC-MS)等方法。
但是这些方法或灵敏度有限,或重现性较低,或前处理方式繁琐,现在已逐渐淘汰。
随着色谱、质谱技术的不断发展,高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)逐渐兴起并成熟。
本实验以安捷伦1290高效液相色谱串联AB公司Qtrap6500质谱仪,高效液相色谱二元泵将流动相泵入系统并混合,自动进样器将待测样品注入流动相中,随流动相进入色谱柱,由于样品不同组分在色谱柱中保留时间不同,各组分被分开,依次进入离子源。
在离子源中,各组分以电喷雾电离(ESI)方式电离,被加速后进入质量分析器。
Qtrap6500质量分析器由Q1、Q2、Q3三级质谱串联组成。
Q1可将分子离子按质荷比(m/z)大小分开,Q2是碰撞室,可将母离子进一步裂解为碎片离子;Q3具有四级杆和线性离子阱两种功能,作为四级杆时可将分子离子或碎片离子按质荷比大小分开,作为离子阱还可富集离子从而提高检测灵敏度。
各组分的不同离子在质量分析器中被破碎、分离,并按质荷比大小依次抵达监测器,得到检测数据。
本实验以多反应检测(MRM)模式扫描检测待测物质。
该模式是一种基于已知或假定的反应离子信息,有针对性地选择数据进行质谱信号采集,对符合规则的离子进行信号记录,去除不符合规则离子信号的干扰,通过对数据的统计分析从而获取质谱定量信息的质谱技术。
高效液相色谱法测定肥料中吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸含量
高效液相色谱法测定肥料中吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸含量本文引用格式:张娟,朱海荣,董茜,等.高效液相色谱法测定肥料中吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸含量[J].肥料与健康,2020,47(5):67-70.阅读提示基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFF0201801-1)作者简介:张娟(1976—),女,硕士,教授级高级工程师,主要研究方向为土壤、肥料、农药、化工等产品质量安全监测以及产品研发、检测方法开发和标准科研工作吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸是常用的植物生长调节剂类农药,同时也是植物体内普遍存在的内源生长素,属吲哚类化合物。
我国相关法规规定,含有农药成分的肥料产品必须以农药产品的登记方式进行登记,但由于农药产品登记周期长、费用高,一些不法厂商为了谋取不正当利益,在肥料中违禁添加吲哚-3-乙酸或吲哚丁酸,以突显所谓“肥效”。
此种做法对农产品质量安全、生态环境以及人体健康造成潜在威胁。
因此,建立准确度高、稳定性好的测定肥料产品中吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸含量的方法非常必要。
测定植物生长调节剂的方法主要有生物鉴定法、免疫检测法、光谱法、色谱法,其中测定吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸的主要方法为液相色谱法和液质联用法等。
与液质联用法相比,液相色谱法相对经济、快捷,本文建立了同时测定肥料中吲哚-3-乙酸和吲哚丁酸的高效液相色谱法,可为肥料产品质量安全提供技术支撑。
1 试验部分1.1 仪器与试剂Agilent 1260型高效液相色谱仪,带二极管阵列检测器和自动进样器,色谱工作站,美国Agilent公司;Sigma 3-18K型高速冷冻离心机,德国Sigma公司;电子天平,瑞士Sartorius公司;SIR型漩涡混合器,德国IKA公司。
标准品:吲哚-3-乙酸、吲哚丁酸,质量分数均为98.0%,美国Stanford Chemicals公司。
混合标准溶液:准确称取0.01 g(精确至0.0001 g)的吲哚-3-乙酸、吲哚丁酸标准品置于10 mL容量瓶中,用甲醇溶解后定容,配制成吲哚-3-乙酸、吲哚丁酸质量浓度均为1000 mg/L的标准溶液,现用现配。
GC_ECD测定秸秆堆肥中百菌清_三唑酮_氯氰菊酯及溴氰菊酯四种农药
沈哲峰等:GC-ECD 测定秸秆堆肥中百菌清、三唑酮、氯氰菊酯及溴氰菊酯四种农药
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药常被用于作物的病虫害防治,成为农药的日常检测 的项目之一。
探究秸秆的重复生物安全利用,是对原产地果蔬 生产质量保证的一条措施。秸秆堆肥是目前对作物废 弃物资源利用的重要途径之一,Belewu, M.A 等人用 堆肥过的香蕉叶来栽培蘑菇取得非常好的结果[2]。目 前,国内很多学者对蔬菜和水果中的百菌清及拟除虫 菊酯类农药进行了检测报道[1,3-5],Lentza-Rizos Ch 等国 外学者对轻榨橄榄油中的拟除虫菊酯类等农药进行了 检测分析[6-7],在秸秆堆肥过程中对于这几种农药检测 跟踪还未见报道。百菌清,三唑酮及拟除虫菊酯类农 药经常用于香蕉病虫害的防治,而目前香蕉秸秆的利 用主要为直接还田或用作堆肥[8],该实验以香蕉秸秆 肥为材料,利用气相色谱 ECD 检测器进行检测,最低 检测浓度达 0.0003 μg/ml~0.004 μg/ml,该测定方法具 有较高的准确性和精确性。 1 材料与方法 1.1 实验时间、地点
载气:高纯氮(1.5 ml/min);尾气吹流量:60 ml/min; 进样方式:不分流进样,0.5 min 采集;定量方法:
以峰面积外标法多点校正定量。 2.2 淋洗液配比的选择
淋洗液的选择与配比直接影响到淋洗柱的活化和 对被分析物的净化提取,淋洗液的选择有很多,根据中 华人民共和国农业行业标准(NY/T761.2-2004)[9],选择 10%丙酮-正已烷(v/v)、正已烷作为淋洗液,首先使填 料表面键合的碳链展开,增加结合度,达到柱子活化目 的。并利用被测样品中的化合物与背景杂质在淋洗柱 填料的分配系数差异,根据相似相溶原理,匹配相应的 洗脱溶剂,将化合物与杂质分离。选择极性相对较小 的正已烷作为淋洗液,能充分将被分析化合物从样品 中与杂质分离,达到净化纯化的目的。 2.3 淋洗柱填料的选择
蚯蚓粪对土壤酶活性的影响
蚯蚓粪对土壤酶活性的影响作者:徐洪岩刘丽张明爽来源:《农业研究与应用》2020年第03期摘要:为研究施用蚯蚓粪对土壤理化性质的影响,通过田间对比试验研究了施入蚯蚓糞后深度为5 cm、10 cm和15 cm的土壤样品中蔗糖酶、纤维素酶、脲酶、过氧化氢酶、蛋白酶和磷酸酶这6种酶的活性变化。
结果表明:施用蚯蚓粪可显著提高6种土壤酶的活性(P<0.05);对深度10 cm的土壤酶活性提高程度最强;对蔗糖酶活性影响最大,提高了67.3 %。
关键词:蚯蚓粪土壤酶活性中图分类号:S666.1 文献标志码:AEffect of Vermicompost on Soil Enzyme ActivitiesXU Hongyan, LIU Li, ZHANG Mingshuang( Keshan Branch, Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences,Keshan, Heilongjiang 161606, China )Abstract:In order to study the effect of vermicompost application on soil physicochemical properties, the activity changes of sucrase, cellulase, urease, catalase, protease and phosphatase in soil samples at the depth of 5 cm, 10 cm and 15 cm after vermicompost application were studied by field comparative test. Results showed that vermicompost application could significantly increase the activity of six enzymes in soil (P < 0.05); the enzyme activity in soil at the depth of 10 cm was improved at the highest degree; invertase activity was affected most, being increased by 67.3%.Key words:Vermicompost; soil; enzyme activities土壤酶是土壤中各类酶的总称。
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高效液相色谱法测定蚓粪中的植物激素胡 佩1,杨 红2,刘德辉1,胡 锋13(1.南京农业大学资源与环境科学学院,南京210095;2.南京农业大学理学院,南京210095)摘 要:建立了高效液相色谱法(HP LC )测定蚓粪中赤霉素(G A 3)和吲哚乙酸(I AA )的方法。
蚓粪中植物激素可不经DE AE 纤维素柱分离和薄层层析纯化,就可进行高效液相色谱测定。
线性范围G A 3为19.3~0.03μg ,I AA 为6.4~0101μg 。
标准曲线的相关系数均为0199999。
G A 3和I AA 的最低检测量分别为0102μg 和01004μg 。
关键词:植物激素;蚓粪;高效液相色谱中图分类号:O658.1 文献标识码:A 文章编号:100020720(2001)0620008203 蚯蚓粪便及排泄物(简称蚓粪)是一种优质的有机肥料,对提高作物产量和改善品质效果显著。
这可能和蚓粪中存在的植物激素有关[1,2]。
有关植物样品中植物激素的分析方法报道较多[3~8],但有机粪肥中植物激素的测定方法较少。
据文献[9],奶牛粪肥中植物激素可采用扫描分光光度法和荧光光度法测定,但提取液需先经DE AE 纤维素柱分离,再用薄层层析纯化后测定。
此方法费时、烦琐,所需试剂较多,不便操作。
而对土壤动物排泄物(包括蚓粪)中植物激素的分析尚未见报道。
本文建立了一种高效液相色谱法(HP LC )测定蚓粪中赤霉素(G A 3)和吲哚乙酸(I AA )的方法。
试液无需过柱分离和薄层纯化处理,就可用高效液相色谱测定。
1 实验部分1.1 仪器与试剂CSF 21A 超声波发生器;UV 2PC2410扫描仪(日本岛津公司);高效液相色谱仪(带77251定量进样阀、510定量输液泵、481型紫外可调波长检测仪、745B 自动数据处理机,Waters 公司)。
赤霉素(生化试剂,G A 3含量90%);吲哚乙酸(C.P ,I AA 含量97%);石油醚(A.R ,30~60℃);其它试剂均为分析纯。
112 实验方法112.1 样品处理 称取过1mm 筛的风干蚓粪15~20g ,加入100m L 80%丙酮水溶液,在冰浴上超声提取30min ,离心(5000r/min )分离,上清液移入分液漏斗中,残渣用少量80%丙酮水溶液洗涤一次,离心分离,合并上清液,加入等体积的石油醚,水相移入旋转蒸发器内,减压浓缩(30~35℃)至原体积的1/3,用0.1m ol/L HCl 调pH 2.8~3.0,再用乙酸乙酯萃取3次,合并有机相,减压浓缩(30~35℃)蒸干,用5m L 重蒸甲醇溶解后离心分离,上清液用HP LC 分析测定。
112.2 色谱条件 流动相甲醇∶水∶醋酸=50∶45∶5;检测波长254nm ;流速0.7m L/min ;进样量20μL ;记录速度(CS )0.25cm/min ;色谱柱C 18(μBon 2dapak ,10μ,300×3.9mm )。
112.3 标准曲线的绘制 精确称取107.2mg 的G A 3和32.8mg 的I AA 于100m L 容量瓶中,用流动相定容(该溶液含G A 3965μg/m L 、I AA 318μg/m L )。
再用流动相依次稀释5倍,连续进行4次,配成5份浓度依次相差5倍的标准溶液。
以实际注入标准物的量为横坐标,相应的峰面积为纵坐标作图,得到两条直线。
经一元线性回归分析,标准溶液中G A 3和I AA 两条标准曲线的相关系数均达到0199999。
线性范围G A 3为19.3~0.03μg ,I AA 为6.4~0.01μg 。
G A 3和I AA 的最低检测量(噪音2.5收稿日期:22;修订日期:2001203205基金项目:国家自然科学基金(49871046)和国家重点基础研究发展规划项目(G 1999011801)作者简介:胡佩(1965-),男,硕士研究生,讲师,现在四川师范大学化学与生物学院工作;E 2mail :fenghu @—8—第20卷第6期2001年11月 分析试验室Chinese Journal of Analysis Laboratory V ol.20.N o.62001-11倍)分别为0.02μg 和0.004μg 。
2 结果与讨论2.1 样品峰的鉴定2.1.1样品及标样的保留值t R 在选定的色谱条件下,样品中有两个峰的保留值与标样G A 3和I AA的保留值相同,即分别为5.41min 和7.22min 。
说明样品中存在G A 3和I AA 。
(见图1a 、b )。
图1 样品的色谱图Fig.1 Chrom atograms of samplesa —标样;b —样品1;c —样品2;d —样品2+标样;色谱条件见11212节2.1.2 加入标样法 在样品提取液中加G A 3和I AA 标样,发现标样和样品G A 3、I AA 叠加出峰,峰的积分面积增大(图1c :t R 5.37峰积分面积447182,t R 7.19峰积分面积141925;图1d :t R 5.36峰积分面积732584,t R 7.19峰积分面积391325),由此进一步证明样品中存在G A 3和I AA 。
2.1.3 样品及标样紫外光谱 经UV 2PC2410扫描仪检测,标样G A 3在210nm 、254nm 处有吸收;标样I AA 在229、278、289nm 处有吸收。
而样品提取液在上述波长处均有吸收,证明样品中存在G A 3和I AA 。
2.2 样品分析外标法定量。
测定时,由于峰高受仪器人为设定的AT 增溢值的影响而变化,在其它色谱条件不变的情况下,AT 值改变,峰高也会改变,但峰的积分面积不变。
峰的积分面积受记录速度(CS )的影响。
选定色谱条件和记录速度后,利用自动数据处理机打印出的峰的积分面积和标准曲线进行定量计算。
结果见表1。
2.3 加标回收试验在已测样品中定量加入G A 3和I AA 标准品,与样品一起处理,测定结果见表2。
表1 样品测定结果(n =3)T ab.1 Determination results of samples(n =3)样品编号被测物测得值(μg/g )标准偏差(μg/g )RS D (%)1G A 3I AA 44.613.9 2.21.2 5.08.92G A 3I AA55.313.92.41.44.410.1表2 加标回收试验T ab.2 R ecovery tests of adding stand ard样品编号被测物测得值(μg/g )加入量(μg/g )测得量(μg/g )回收率(%)1G A 3I AA 44.613.922.77.565.917.698.082.22G A 3I AA55.313.922.77.578.617.1100.880.0—9—第20卷第6期2001年11月 分析试验室Chinese Journal of Analysis Laboratory V ol.20.N o.62001-112.4 提取过程的影响因素分别采用80%甲醇水溶液、80%丙酮水溶液、75%乙醇水溶液作提取剂,结果表明,80%丙酮水溶液效果最好,不仅因为丙酮沸点低容易除去,而且回收率高。
无论上述哪3种溶剂作提取剂,提取液都呈浅黄色,使用活性碳脱色效果好,但吸附植物激素,使回收率降低,故不宜使用脱色。
尽管石油醚脱色效果不理想,但可除去一些杂质,且对回收率影响不大,本文选择石油醚作为脱色剂。
参考文献[1] Edwards C A ,Lofty J R.Biology of Earthw orms.London :Chapman and Hall ,1977.138[2] T omati U et al .Biology and Fertility of S oils ,1988,5(4):288[3] Crozier A ,M onteiro A M.Chromatogr Anal ,1990,(11):5[4] G arcia S F ,G arnero R C ,Heredia B A.T alanta ,1990,37(12):1137[5] Meuwly P ,Pilet P E.Plant Physiol ,1991,95(1):179[6] Archer T E ,S tokes J D ,J Agric.F ood Chem.1993,31(2):286[7] 李金昶,石 晶,赵晓亮等.分析化学,1994,22(8):801[8] 唐根源,吴红京.分析试验室,1997,16(5):66[9] 王林权,赵伯善,李和生等.土壤通报,1997,28(3):139Determination of plant grow th hormones in earthw orm casts by high perform ance liquid chro 2m atography HU Pei ,LIU De 2hui ,HU Feng (C ollege ofNatural Res ources and Environmental Sciences )andY ANG Hong (C ollege of Science ,Nanjing AgriculturalUniversity ,Nanjing 210095),Fenxi Shiyanshi ,2001,20(6):8~10Abstract :A HP LC method was developed for determina 2tion of gibberellin (G A 3)and 32indole acetic acid (I AA )in earthw orm casts.The pre 2separation and purification procedures for hte sam ples were sim plified.The linear ranges for determination of G A 3and I AA were from 0.03to 19.3μg and 0.01to 6.4μg ,respectively ,with cor 2relation coefficient of 0.99999.The detection limits ofG A 3and I AA were 0.02μg and 01004μg ,respectively.K eyw ords :Plant growth horm ones ;Earthw orm casts ;High performance liquid chromatography—01—第20卷第6期2001年11月 分析试验室Chinese Journal of Analysis Laboratory V ol.20.N o.62001-11。