4.1.2DNA的粗提取
高一生物DNA的粗提取与鉴定知识详解
高一生物DNA的粗提取与鉴定知识详解DNA是生物的遗传物质，是高考生物的考点之一，需要学生去掌握，下面是店铺给大家带来的有关于高一生物的DNA的粗提取介绍，希望能够帮助到大家。
高一生物DNA的粗提取与鉴定知识点该知识点主要包括提取DNA的方法、实验设计及操作提示等要点。
1. 提取DNA的方法：首先要掌握提取生物大分子的基本思路，其次是要掌握DNA提取与鉴定的具体方法。
当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时，随浓度升高，DNA的溶解度升高。
此外，DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。
蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。
大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在80oC以上才会变性。
洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。
在加热条件下，DNA遇二苯胺会生成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
2. 实验设计及操作提示：实验的步骤及注意事项是同学们要掌握的关键。
(1)制备鸡血细胞液时，要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因：制备鸡血细胞液时，要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠，防止血液凝固。
其原理是柠檬酸钠能与血浆中Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的Ca2+大大减少，血液便不会凝固，因为鸡的红细胞，白细胞都有细胞核，DNA主要存在于细胞核中，所以在离心或静置沉淀后，要弃出上清液——血浆。
(2)提取DNA的第一步是材料的选取，一定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解;第三步是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA 与杂质分开;最后一步是对DNA进行鉴定，这是对整个实验的结果的检测。
DNA的粗提取和鉴定分析
加热 加热
4、植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。
植物细胞需要先用洗涤剂（洗发香波、沐浴液、洗洁 精等）溶解细胞膜。
•洗涤剂可以瓦解细胞膜的原因是： 洗涤液中含有十二烷基硫酸钠和碱， 它们可使细胞膜破裂，蛋白质变性， 使蛋白质与DNA分离开来。利于DNA 的释放。
• 动物细胞膜是不用试剂（洗涤剂） 破坏的，因为动物细胞膜外面没 有细胞壁的保护，放在清水中自 然的就会吸水而胀破，释放出其 中的DNA等物质。
3、方法与过程
1).制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌，
活鸡鲜血180mL
离心或静置沉淀。
血浆
血细胞 离心或静置后去掉上清液
2)实验方法步骤：
提取细胞核物质：利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得出含核DNA的溶液。
（3）生活在牧区的人们，采集羊、牛和马血比较方便，若他们按 实验要求完成实验步骤后，结果是 在实验中很难提取到DNA， 这是因为 哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，反靠，白细胞
和淋巴细胞中的少量DNA，在实验中很难提取到
但若改用动物肝脏做实验材料，实验可以顺利进行，这是因 为肝细胞中含有细胞核，并且肝组织容易。被破坏，有利于DNA的提取 （4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 若使肝组织易分离，将肝细胞剪碎、研磨是一种简便易行的方法。程 序，使组织细胞更易分离。
关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较， 最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：
（新1陈）代鸡谢血旺中盛红，细因胞而含血有液完中整红的、细成胞形数的目细较胞多核，，可家以鸡提属供于丰鸟富类的，
高中生物实验—DNA的粗提取和鉴定
14
4
3、方法与过程
1).制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌， 离心或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL
血浆
血细胞 离心或静置后去掉上清液
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关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较， 最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题： （1）鸡血中红细胞 含有完整的、成形的细胞核，家鸡属于鸟类， 新陈代谢旺盛，因而血液中 红 细胞数目较多，可以提供丰富的 DNA量，所以一般采用鸡血 （2）实验前由老师制备鸡血细胞液供同学们做实验材料，而不用 鸡全血，主要原因是 鸡的全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA， 全血中除掉血浆后就是浓缩的血细胞液，DNA的相对含量提高了。
）
DNA在不同浓度的NaCl 溶液中的溶解度不同 溶于NaCl ，在0.14 mol/L的 溶液中并 NaCl溶液中的溶解度 稀释 最低
DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质（酶的专一性
DNA耐高温
DNA不溶于酒精溶液
高温
DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA 热稳定性不同。大多数蛋白质不能忍受60～ 80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
2)实验方法步骤：
提取细胞核物质： 利用细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，后用纱布过滤取其滤液。 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂，据此可得出含核DNA的溶液。
溶解核内DNA：在滤液中加2mol/L的NaCl溶液并搅拌，使染色质中DNA 与蛋白质分离，DNA充分溶解，过滤(除杂质)
8 用二苯胺须加热。用甲基绿不用水浴加热。 洋葱的鳞片叶表皮细胞
9
注
意
实验 DNA的粗提取与鉴定
研磨。鉴定时要用二苯胺。
答案
D
6、某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活 动，具体步骤如下： 材料处理： 称取新鲜的花菜、 辣椒和蒜黄各 2 份， 每份 10 g。剪碎后分成两组，一组置于 20℃、另 一组置于－20℃条件下保存 24 h。 DNA 粗提取： 第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入 15 mL 研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取 滤液备用。 第二步： 先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液， 再加入 20 mL 体积分数为 95%的冷酒精溶液， 然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物 缠绕在玻璃棒上。
第三步： 6 支试管， 取 分别加入等量的 2 mol/L NaCl 溶液溶解上述絮状物。 DNA 检测： 在上述试管中各加入 4 mL 二苯胺试剂， 混合均匀后，置于沸水中加热 5 min，待试管冷却 后比较溶液的颜色深浅，结果如下表： 材料保 存温度 20℃ －20℃ 花菜 ＋＋ ＋＋＋ 辣椒 ＋ 蒜黄 ＋＋＋
DNA 鉴定时 加入的试剂 二苯胺 双缩脲试剂 二苯胺 二苯胺
A．实验材料选择错误的组别是丙 B．沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁 C．甲组实验现象差的原因是 25℃的酒精对 DNA 的 凝集效果差 D． 乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试 剂
解析
菜花有细胞壁，加入蒸馏水不破裂，须经过
⑶、析出含DNA的粘稠物：
在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻轻搅拌， 出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加水（此时NaCl溶液 的浓度相当于0.14mol/L）。 ⑷、滤取含DNA的粘稠物： 用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上。 ⑸、 DNA粘稠物的再溶解： 20mL 2mol/L的NaCl溶液 步骤⑷含DNA的粘稠物 ⑹、过滤含有DNA的NaCl溶液： 在20mL烧杯中轻缓搅拌3min， 使尽可能多的DNA溶解在 NaCl溶液。
DNA的粗提取与鉴定教案
我们通常通过研磨来破碎植物细胞的细胞壁。在研磨的过程中，一般还会加入洗涤剂和食盐。
洗涤剂的作用：Βιβλιοθήκη 洗涤剂也分为亲水基团和亲脂基团，可以与细胞膜中的蛋白质结合，使之溶解，进而瓦解细胞膜。
食盐的作用：
食盐中主要含有NaCl，有利于DNA的溶解。
去除滤液中的杂质
用高浓度的盐溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。
第一步：
在浓度较高的NaCl溶液溶液中核蛋白容易解聚，游离出的DNA溶解在溶液中。
方法：在溶液中加入两倍体积的浓度为2mol/L的NaCl溶液，用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使DNA充分溶解。
问题：这时的滤液可能含有哪些细胞成分？
主要有RNA、核蛋白、多糖等
那么我们应该如何将DNA单独分离出来？
板书：去除滤液中的杂质
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
教学过程
教学阶段
教师活动
学生活动
设计意图
时间
引入
这节课，我们一起学习“DNA的粗提取与鉴定”技术。
板书：DNA的粗提取与鉴定
DNA的提取技术是整个基因工程技术基础。基本上，不论是出于何种目的的分子生物学实验，大到被称为“人类阿波罗计划”的人类基因组计划，小到今天已经被我们熟知的亲子鉴定，DNA提取技术都是其中基础的基础。而其他诸如RNA的提取，质粒的提取等实验，都可以说是参考这一技术改进，或者重新设计出来的。
dna粗提取步骤
DNA粗提取步骤一、目的要求本实验旨在使学生掌握DNA粗提取的基本原理和操作步骤，了解DNA的物理、化学性质以及其在生物科学研究中的应用。
通过实验，要求学生能够独立完成DNA的粗提取，并对实验结果进行分析和解释。
二、实验原理DNA粗提取的原理基于DNA在不同物理和化学环境中的稳定性。
在一定浓度的盐溶液和适当的温度条件下，DNA的溶解度会发生变化，从而实现DNA 的分离和提取。
本实验采用盐析法进行DNA粗提取，具体操作步骤如下：1.细胞破碎：通过物理或化学方法破碎细胞，释放出细胞内的DNA。
常用的破碎方法包括机械破碎（如研磨、匀浆等）、化学破碎（如用酸、碱或酶处理）和冷冻破碎等。
2.去除杂质：通过离心、过滤等方法去除细胞碎片、蛋白质和其他杂质，使DNA充分溶解在溶液中。
3.调节盐浓度：通过调节盐浓度，使DNA在盐溶液中的溶解度发生变化，从而实现DNA的分离和提取。
常用的盐溶液包括氯化钠、氯化钾、氯化钙等。
4.沉淀DNA：通过降低pH值、加入乙醇或异丙醇等方法，使DNA从溶液中沉淀析出。
5.洗涤与干燥：用70%乙醇或无水乙醇洗涤DNA沉淀，去除残留的盐分和杂质，然后干燥得到粗提取的DNA。
三、实验步骤1.准备实验材料与试剂（1）实验材料：鸡血细胞；（2）试剂：氯化钠、柠檬酸钠、蒸馏水、95%乙醇、70%乙醇；（3）仪器与器皿：离心管、离心机、滴管、玻璃棒、烧杯。
2.操作步骤（1）制备鸡血细胞溶液：取适量鸡血细胞，加入等体积的柠檬酸钠溶液，混合均匀后离心，去除上清液，得到鸡血细胞沉淀。
（2）破碎细胞：将鸡血细胞沉淀重新悬浮于适量蒸馏水中，加入适量的玻璃珠或石英砂，搅拌破碎细胞。
也可以采用匀浆、超声破碎等方法破碎细胞。
（3）去除杂质：将破碎后的溶液离心，去除上清液，得到的沉淀物为富含DNA的细胞碎片。
可以进一步用蒸馏水冲洗沉淀物，去除残留的蛋白质和其他杂质。
（4）调节盐浓度：向沉淀物中加入适量的氯化钠溶液，搅拌均匀，使DNA充分溶解在盐溶液中。
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
DNA粗提取与鉴定
DNA粗提取与鉴定“dna的粗提取与鉴定”实验研究综述文摘：在“DNA粗提取与鉴定”实验中，实验原理较为抽象复杂，实验步骤较多，实验效果不理想。
因此，目前我国在实验材料的选择、实验试剂和工具的处理、实验方法的优化、实验教学设计的创新等方面进行了大量的研究。
本文综述了粗DNA提取与鉴定的实验研究进展和教学。
关键词：DNA的粗提取与鉴定实验改进教学设计中文图纸分类号：G633-91“dna的粗提取与鉴定”实验是人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题五课题1的实验内容，教材中详细介绍了动植物细胞dna提取、分离、提纯所涉及到的一般原理、方法和实验材料的选取，但并没有以哪一种材料为例具体介绍其操作过程。
且在dna分离、提纯过程中理想的方法应该是通过离心来不断分离、提纯，而一般中学的实验室又不具有离心设备，这就对本实验的可行性带来了一定的影响。
为了使实验变得简单、可行，许多学者对该实验进行了研究与改进。
1.实验原理真核生物dna核蛋白的溶解度随nacl浓度的变化而改变。
在0.14mol/l时,溶解度最小,而在纯水或1～2mol/l的盐溶液中,溶解度则较大。
利用这一原理,可以将dna溶于nacl溶液中,而与其他物质分开。
在dna的提取物中常常含有蛋白质及其他一些杂质,而使dna提取物呈黄色。
为了去除这些杂质(主要是蛋白质),利用十二烷基磺酸钠(sds)使蛋白质变性的原理,使蛋白质与dna分开。
dna不溶于酒精,而细胞中有些物质则可溶于酒精。
在中等浓度单价阳离子(2mol/l1nacl)存在下,酒精易使DNA沉淀，这就是为什么教科书实验使用2mol/lnacl溶液溶解DNA而不是蒸馏水。
2.实验材料的选择2.1原材料改进的原因根据教材的介绍，该实验的材料可以选择动物材料(如鸡血)，也可以选择植物材料(如菜花、洋葱等)。
但是，选用dna含量相对较高的生物组织，实验成功的可能性更大。
课本推荐使用的实验材料是鸡血,优点是细胞易破裂,dna含量大,现象明显;缺点一是费用太高,对普通学校来说,买活鸡显然不现实,与市场上的小商贩联系购买新鲜鸡血,很难定时、定量地保证供应;二是实验步骤烦琐,操作要求高,学生一堂课很难完成实验。
实验2-DNA的粗提取与鉴定s
（5）. DNA的鉴定
向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液2ml
其中一支试管中加入DNA丝状物
各加入二苯胺试剂2ml
混匀后，置于沸水浴中加热5min
待冷却后，比较两只试管中溶液的颜色变化
观察现象：
溶解丝状物的溶液变为蓝色
思考题： 1、研磨的目的是什么，如果研磨不充分，会对 实验结果产生怎样的影响？ 2、研磨液中可能含有哪些成分？ 3、研磨液中SDS和食盐的作用分别是什么？
⑶.过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨 液过滤到烧杯中(有条件可将滤液倒入塑料离心 管中进行离心，用1000 r/min的转速，离心 2～5 min，取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰 箱中放置几分钟后，再取上清液 ⑷.沉淀：将一倍体积的上清液倒入两倍体积 的体积分数为95％的预冷乙醇溶液中，并用 玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直 插到烧杯底部)。沉淀3～5 min后，可见白色 的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，将 絮状物缠绕在玻璃棒上
实验2 DNA的粗提取与鉴定
实验原理
1. 研磨液中的变性剂可使细胞破裂，释放 DNA。 2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些 物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理， 可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因 此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
以菜花为实验材料进行DNA的粗提取
Байду номын сангаас
1、课前准备
将新鲜菜花和体积分数为95％的乙醇溶液放 入冰箱冷冻室24h。
2、提取DNA的具体步骤
⑴.取材：称取5-10g菜花，去梗取花，切碎。 ⑵.研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入2-4mL 研磨液，充分研磨10min。
“DNA 的粗提与鉴定” 实验教学的探索
题记：努力吧，年轻的鹰；奋斗吧，年轻的鹰；惜时吧，年轻的鹰：回忆往事的时候不为碌碌无为而羞耻，不为虚度年华而悔恨！“DNA的粗提与鉴定”实验教学的探索王重力辛力新编高中生物教学大纲，增加了“DNA的粗提取与鉴定”等一些细胞学、生物化学基本方法的实验内容，我们利用课堂和课外的时间，初步对“DNA的粗提取与鉴定”这一实验进行了实验方案和课堂教学的探索。
1实验原理以蒸馏水作为低渗溶液，将新鲜鸡血细胞破裂，使其细胞核物质溶解于氯化钠溶液。
核酸的溶解度随氯化钠浓度的变化而变化，即在0.14M浓度时最低（如图所示）。
在高盐状态使核酸溶解，再加蒸馏水以稀释氯化钠浓度，当接近0.14M时，核酸溶解度最低，凝集成絮状物析出。
DNA分子中的脱氧戊糖基，在酸性溶液中变成ω-羟基–γ-酮基戊醛，与二苯胺试剂作用生成蓝色化合物（λmax＝595nm）。
可用比色法测定。
反应式如下。
DNA（脱氧戊糖基）[]−−→−+H HO-CH2- C-CH2-CH2-CHO−−→−二苯胺蓝色化合物2实验材料新鲜的鸡血、10%的柠檬酸钠溶液、95%酒精、2M氯化钠溶液、0.015M氯化钠溶液、玻棒、滤纸、滴管、漏斗、量筒（25ml、50ml）、烧杯（50ml、100ml、500ml）、纱布、二苯胺溶液。
3实验准备3.1取样及处理取10%柠檬酸钠溶液100ml于500ml的烧杯中，取健康活鸡断颈取血，马上注入烧杯中，搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免血液凝固。
将此混合样品用4000r/min离心2min即可，去上清液，留血细胞备用。
若无离心机，也可在实验前一天按照上述方法取得血液，置入冰箱内以防腐败，血液长时间静置后，血细胞会自行沉淀，待实验时，将上清液除去，即得血细胞。
3.2药品配制取11.7g氯化钠溶于100ml的蒸馏水，即为2M氯化钠溶液；取8.7g氯化钠溶于1000ml 的蒸馏水中，即为0.015M氯化钠溶液。
取0.5g二苯胺溶于50ml冰醋酸中，再加1.25ml的浓硫酸，即得二苯胺试剂（使用前配制）O4实验步骤4.1提取细胞核物质取制备好的离心沉淀物5～10ml，置入50ml烧杯中，加蒸馏水20ml，同时用玻棒充分搅拌，使血细胞加速破裂，核酸溶解到蒸馏水中，然后用2层纱布置于漏斗上过滤，取其滤液3～4ml。
高二生物dna的粗提取与鉴定
9、DNA的鉴定
用二苯胺（沸水浴）鉴定，DNA遇二苯 胺会变蓝色。
问：2和4过程中都有加入蒸馏水，两次加入的 作用一样吗？为什么？
问：DNA的直径约为2nm，实验中出现的丝状 物的粗细是否就表示一个DNA分子直径的大小？
练习：
1、用蛋白质中含有35S的噬菌体去侵染细菌（细菌 内为32S），则在子代噬菌体的蛋白质的S应为 （）
DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂。
材料：
鸡血细胞液（5-10ml），体积分数为95%的酒精 溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸 钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯 化钠溶液，二苯胺试剂
方法步骤：
1、制备鸡血细胞液
4、析出含DNA的黏稠物
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时轻轻搅拌，这时 会有丝状物出现，随着蒸馏水的加入逐渐增多，一 直到氯化钠浓度约为0.14mol/l时，不再继续增加。
头瓶，随着Ｚ．纽基斯克画师的扭动，肥肠状的仙翅枕头瓶像弯刀一样念动咒语：“七臂哄哩喂，锁孔哄哩喂，七臂锁孔哄哩喂……『黑雾浪仙细雨经文』！党棍！党棍！党 棍！”只见Ｚ．纽基斯克画师的身影射出一片浅黑色幽光，这时西南方向突然出现了五片厉声尖叫的亮红色光蛙，似银光一样直奔浓黑色粼光而来。，朝着月光妹妹清秀流畅
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液（抗凝剂） 100ml，置于烧杯中，将新鲜鸡血180ml注入，同时 用玻璃棒搅拌，以免凝血，然后倒入离心管中用 1000r/min的离心机离心2min，此时，血细胞沉淀于 离心管的底部，除去上清液，就可以得到鸡血细胞液。
问：提取鸡血中的DNA时，为什么要除 去血液中的上清液？
、宛如泉光溪水般的肩膀乱跳过来。紧；微生物资源中心 https:/// 微生物资源中心；跟着Ｚ．纽基斯克画师也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向月光 妹妹乱跳过来月光妹妹突然精美透明的冰红色水晶靴突然飞出魔棕险境色的椰泥虎动味……光洁秀美、闪着珍珠般光泽的指甲跃出浓哼水晶声和呜喂声……不停旋转闪光的晶 黄色弯月眉心石变幻莫测射出飘梦水晶般的漫舞……接着演了一套，摇羊油条翻一千零八十度外加蛙啸纸条旋七周半的招数，接着又耍了一套，云体羊窜冲天翻七百二十度外 加狂转两千周的艺术招式。紧接着玲珑活泼的美鼻子闪眼间转化颤动起来……似乎总是带着一丝迷人笑意的小嘴唇跃出墨黑色的缕缕丑云……清丽动人、会说话的的秀眉跃出 水青色的点点神热！最后转起秀美挺拔、轻盈矫健的玉腿一旋，威猛地从里面跳出一道银光，她抓住银光悠然地一摆，一件凉飕飕、青虚虚的咒符⊙月影河湖曲＠便显露出来 ，只见这个这件宝器儿，一边紧缩，一边发出“呜呜”的怪声！！猛然间月光妹妹高速地秀了一个滚地振颤颤廊柱的怪异把戏，，只见她犹如云粉色冰莲花般的蓝边渐变裙中 ，猛然抖出五串甩舞着⊙玉光如梦腿＠的深潭玻璃喉雀状的麻袋，随着月光妹妹的抖动，深潭玻璃喉雀状的麻袋像灯柱一样在双腿上华丽地组织出飘飘光罩……紧接着月光妹 妹又使自己青春跃动、渐渐隆起的胸脯萦绕出暗白色的葫芦味，只见她善于跳跃的小脚丫中，轻飘地喷出五片转舞着⊙玉光如梦腿＠的槟榔状的仙翅枕头耙，随着月光妹妹的 旋动，槟榔状的仙翅枕头耙像骷髅一样念动咒语：“雪峰咋 喱，仙子咋 喱，雪峰仙子咋 喱……⊙月影河湖曲＠！姑奶奶！姑奶奶！姑奶奶！”只见月光妹妹的身 影射出一片橙白色银辉，这时偏西方向酷酷地出现了二片厉声尖叫的亮黄色光兽，似佛光一样直奔深橙色余辉而去……，朝着Ｚ．纽基斯克画师细长的极似香肠造型的肩膀乱 跳过去。紧跟着月光妹妹也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向Ｚ．纽基斯克画师乱跳过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞，半空顿时出现一道淡黄色的闪光，地面变成了紫宝石 色、景物变成了火橙色、天空变成了深蓝色、四周发出了粗鲁的巨响。月光妹妹清秀流畅、宛如泉光溪水般的肩膀受到震颤，但精神感觉很爽！再看Ｚ．纽基
高二生物dna的粗提取与鉴定
2、提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5-10ml，注入烧杯中，加入 蒸馏水20ml，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌， 使血细胞加速破裂，过滤，取其滤液。
3、溶解细胞核内的DNA
将物质的量浓度为2mol/l的氯化钠溶液40ml加入到 滤液中，搅拌使其混合均匀，这时DNA在溶液中呈 溶解状态。
DNA的粗提取与鉴定
实验原理：
DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓 度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为 0.14mol/l时，DNA的溶解度最低。利用这个原理，可 以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质可以 溶于酒精，就可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂。
材料：
鸡血细胞液（5-10ml），体积分数为95%的酒精 溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸 钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯 化钠溶液，二苯胺试剂
方法步骤：
1、制备鸡血细胞液
A35S
B32S
C35S和32S
D35S或32S
2、用噬菌体去感染体内含32P的细菌，在细菌解体 后，含32P的应是（ ）
A子代噬菌体DNA
B子代噬菌体蛋白质外壳
C子代噬菌体所有部分 D子代噬菌体不含32P
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液（抗凝剂） 100ml，置于烧杯中，将新鲜鸡血180ml注入，同时 用玻璃棒搅拌，以免凝血，然后倒入离心管中用 1000r/min的离心机离心2min，此时，血细胞沉淀于 离心管的底部，除去上清液，就可以得到鸡血细胞液。
dna的粗提取与鉴定
dna的粗提取与鉴定dna的粗提取与鉴定实验十一 DNA的粗提取与鉴定教学目的1、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法2、观察提取出来的DNA物质实验原理1、DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
注意事项1、步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。
2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具鸡血细胞液(5～10mL);体积分数为95%的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液，二苯胺试剂;烧杯(100mL，1个， 50mL，500mL，各2个)，漏斗，试管(20mL，2个)，玻璃棒，滴管，量筒(100mL，1个)，纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。
课时安排一课时课前准备制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血(约180mL)，用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。
静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。
也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。
用吸管吸去上清液。
板书实验十一 DNA的粗提取与鉴定实验原理1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2、用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
方法步骤：1、提取鸡血细胞的细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。
5 min2、溶解细胞核内的DNA3、析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4、过滤：取黏稠物5、再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。
4.1dna的粗提取第二课时
DNA的粗提取实验撰写人：孟祥成审定人：卢华香编号：14 2010-4-23学习目的1. 学会DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。
2. 通过本实验培养实验操作能力和观察能力。
实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
实验步骤一、实验原理DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的_________的变化而改变的。
当氯化钠的物质的量浓度为________mol/L时，DNA的溶解度最______。
利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中_______的析出。
DNA不溶于_________溶液，但是细胞中的某些物质可以溶于________溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出___________的DNA。
DNA遇___________（沸水浴）会染成蓝色，因此，___________可以作为鉴定DNA的试剂。
二、目的要求初步掌握DNA的________和________的方法，观察提取出来的_____物质。
三、材料用具鸡血细胞液（5～10mL）。
铁架台，铁环，镊子，三脚架，________，石棉网，载玻片，_______，滤纸，_________，滴管，量筒（100 mL一个），烧杯（100 mL1个，50 mL、500 mL各两个），试管（20 mL2个），___________，试管夹，纱布。
体积分数为________的酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却____h），蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为____mol/L和_____mol/L的氯化钠溶液，二苯胺试剂。
DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
6、在60—75度条件下加温处理，蛋白质变性，而 DNA结构不会受到破坏，提取纯度较高的DNA 7、二苯胺的沸水浴能使DNA染成蓝色
根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案：
方案一：30mL含DNA的滤液＋2mol/L NaCl→同方向搅拌，DNA溶解→加入蒸 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到 2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶 解液 方案二：30mL滤液＋嫩肉粉（木瓜蛋白 酶）→静置10～15分钟→DNA滤液 方案三：30mL滤液→60～75℃恒温保温 10~15分钟→过滤获得DNA滤液
知识目标
1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA 进行粗提取，了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法，能利用 DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计 及操作，锻炼科学的思维方法，培养实 事求是的科学态度。
植物组织
１.取新鲜植物组织（菜花） 放置于冰箱中冷却1~2天 ２.取30克植物组织,切碎, 置于研体中,倒入适量洗洁 精,加入适量的NaCl,充分 研磨10分钟 ３.过滤研磨液，取上清夜 置于冰箱中冷却几分钟 ４.取1倍体积的上清液， 加入2倍体积的95%的冷酒 精当中，用玻棒轻轻搅拌 ，沉淀3~5分钟后可见白色 絮状DNA缠绕于玻棒末端 。 ５.DNA的提纯同鸡血细胞 为实验材料的实验操作步 骤6、7，具体数据有一定 的差异。 ６.鉴定
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
DNA粗提取和鉴定实验
DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA 析出。
③DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
⑷DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、实验材料和用具鸡血细胞液（5~10ml）；体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；蒸馏水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的氯化纳溶液（新教材不要求0、015的浓度了，都是用的2mol/L）；二苯胺试剂；铁架台；镊子；水浴锅；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯；（1000ml，一个，50ml、100 ml 、500ml各二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。
三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，置于500ml烧杯中。
注入新鲜的鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。
将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞自行沉淀。
（也可以将血液倒入离心管内，用1000r/min（转每分）的离心机离心2min，血细胞沉淀于离心管底部。
实验时。
用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。
四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到50 mL烧杯中。
向烧杯中加入蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使血细胞加速破裂。
然后，用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL。
取其滤液。
②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使其混合均匀，这时DNA在溶液中呈溶解状态。
高二生物选修三教案系列DNA的粗提取与鉴定
6.此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？
7.为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？
8.方案二与方案三的原理有什么不同？
9.实验成功的关键是什么？
10.从鸡血细胞中提取DNA：
（1）柠檬酸钠的作用？
（2）第一步中，蒸馏水和玻璃棒的作用什么？过滤后取得是滤液还是滤出物？
③洗涤剂能够瓦解，但对_________没有影响。
(3)DNA的鉴定:DNA在 条件下，DNA遇会被染成
色，因此_________可以作为鉴定DNA的试剂。
二.实验设计：
1.实验材料的选取：凡是含有的生物材料都可以考虑，但是使用的生物组织，成功的可能性更大。
2．破碎细胞，获取含DNA的滤液：
（1）动物细胞的破碎（以鸡血细胞为例）：在鸡血细胞液中加入一定量的，同时用搅拌，过滤后收集滤液即可。
三．结果的分析与评价
学生通过阅读课本P2-11 页，独立完成以下内容并在书上作出标记，加以记忆
教师对学生提出的疑难知识进行梳理；
学生进行理解并加以记忆。
10
思考讨论
1.DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线如下图即（图5—1），请根据曲线图，思考：
①在什么浓度下，DNA的溶解度最小？
DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？
（9）DNA鉴定时，为什么要设置对照组？实验中能观察到什么现象？
学生按小组分工合作讨论完成，课上展示
教师利用给予指导点拨
20
当堂达标
1.在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（）
A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质
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2mol/L的NaCl溶液 20ml
使含DNA的粘稠物尽可能 地溶于溶液中。
7、过滤含DNA的NaCl 溶液 8、提取含有杂质较少 的DNA 冷却的95%的酒精 50ml
除去含DNA的滤液中的杂 质。 提取DNA。
实验步骤
• 制备鸡血细胞液（加抗凝剂）——获取鸡 血细胞（离心或静置）——获取鸡血细胞 核物质（提取——溶解——析出——溶 解——析出）——鉴定DNA
提取杂质较少的DNA
1. 用浓度为2mol/L的NaCl溶液溶解DNA粘稠
物，并用多层纱布过滤。 2. 用预冷的体积分数为95%的酒精凝集DNA。 因其可以抑制核酸水解酶活性，防止降 解。降低分子运动，易析出沉淀。低温 利于增加DNA柔韧性，减少断裂。 3.鉴定DNA.将DNA溶解，加入二苯胺试剂， 沸水浴加热几分钟，观察溶液是否呈蓝色
方法步骤
加入物质
目的
1、制备鸡血细胞 2、提取鸡血细胞的细 胞核物质。 3、溶解细胞核内的 DNA。
柠檬酸钠溶液 20mL蒸馏水 2mol/L的NaCl溶液 40ml
防止血凝 加速血细胞破裂。 溶解DNA
4、析出含DAN的粘稠 物
5、滤取含DNA的粘稠 物 6、将DNA的粘稠物再 溶解
蒸馏水
使2mol/L的NaCl溶液稀释 至0.14mol/L， 促使DNA 最大限度析出。