实验八：叶绿体中色素的提取和分离(整理)资料
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体中色素的提取和分离的方法；2. 观察叶绿体中不同色素的吸收光谱。
实验原理：叶绿体是植物细胞中的特殊细胞器，其中含有多种色素，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
这些色素能够吸收不同波长的光线，并转化为化学能以参与光合作用。
本实验利用溶剂提取和色谱柱分离的方法，将叶绿体中的色素提取出来，并通过紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验步骤：1. 取一片鲜叶（最好选择深绿色的叶片）切碎，加入适量的乙醇或醋酸乙酯中浸泡，使叶绿体释放出色素。
注意保持容器密封以避免光照。
2. 将浸泡片刻半小时，使叶绿体彻底释放色素。
3. 将叶绿体悬液过滤，收集含有色素的过滤液。
4. 取一支色谱柱，填充色谱吸附剂（如硅胶），再用无色溶剂（如正己烷）预洗一次。
5. 将收集到的含色素液体加入色谱柱中，用无色溶剂洗脱，收集不同色素的洗脱液。
6. 用紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验结果：根据实验数据得到不同色素的吸收光谱曲线，可观察到叶绿素 a 在400-500 nm波长范围内有最大吸收峰，叶绿素 b 在450-550 nm波长范围内有最大吸收峰，类胡萝卜素在500-600 nm波长范围内有最大吸收峰。
根据吸收光谱的不同，可以推测各色素在光合作用中的吸收波长和参与的反应。
实验结论：通过该实验，我们成功地提取和分离了叶绿体中的色素，并观察到不同色素的吸收光谱。
这些实验结果可以帮助我们深入了解植物光合作用的机制，以及不同色素在光合作用中的作用。
同时，该实验也展示了提取和分离生物样品中化学物质的基本实验技巧和原理。
《叶绿体色素的提取和分离》 实验报告
《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器，主要功能是光合作用。
叶绿体包括一系列色素，其中最重要的是叶绿素。
在本实验中，我们将提取和分离叶绿体色素，以便进一步分析其
结构和功能。
实验步骤：
1. 从新鲜的叶子中剪下片段，用无菌蒸馏水洗涤。
2. 用离心机将叶片离心，离心速度为1000 rpm，时间为5分钟。
3. 将上清液取出并过滤，过滤剂为细孔过滤纸。
5. 将上清液取出，并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。
7. 取出上清液，将其光度值调至0.4-0.6。
（400nm处）
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中，观察叶绿素的吸收曲线。
实验结果：
实验得出的叶绿体色素提取液中，吸收最强的波长为680nm和430nm。
这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。
实验得到的叶绿体色素移液后，需要经过离心的过程，这样可去除混杂物质，获得更
为纯净的叶绿素。
通过以上实验，我们成功地提取和分离了叶绿体色素。
叶绿素是植物所特有的，它起
到了光合作用的关键作用。
实验中的提取和分离方法，可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。
实验八：叶绿体中色素的提取和分离(整理)
a
21
2、 将滤液放在试管中，为什么 要及时用棉塞将试管塞严？
滤液含有丙酮，丙酮 有毒，防止挥发
a
22
3、 画滤液细线时重复画几次的 目的是什么？
增加色素的含量， 使分离后的色素带更 加清晰
a
23
4. 为什么不能让滤液细线触及层 析液？
层析液会溶解色素 使色素无法分离 。
a
24
5.观察实验结果有什么现象？滤纸条 上出现了几条色素带？每条色素带的 颜色和排序如何？
A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色
a
36
(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离”
实验时，向研钵中加入SiO2的目的
是：
，
加入CaC03的目的是
在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的是
在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是
叶绿素b
其颜色是
a
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ37
(3)某同学在做“叶绿体中色素的提
取分离”实验时，操作情况如下所述，
④观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四 条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、 黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
a
18
实验结果：
a
19
问题讨论：
a
20
1、加入SiO2、CaCO3的作用是 什么？
二氧化硅的作用是使研 磨更加充分、迅速；碳酸钙 的作用是保护叶绿素不分解
滤纸条上将分离出四条色素带， 颜色从上往下分别是橙黄色、黄 色、蓝绿色和黄绿色，四种色素 分别是胡萝卜素（最快）、叶黄 素、叶绿素a（最多）和叶绿素b （最慢）。
a
25
二、实验原理
（一）叶绿体色素：
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》随着社会一步步向前发展，我们都不可避免地要接触到报告，写报告的时候要注意内容的完整。
那么，报告到底怎么写才合适呢？以下是小编整理的生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》，欢迎大家分享。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》1一、实验目的1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2. 比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的`溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程（见书Ｐ54）1.提取色素：2.制备滤纸条：3.色素分离，纸层析法。
（不要让滤液细线触及层析液）4.观察：层析后，取出滤纸，在通风处吹干。
观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。
结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？2．提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》2一、实验目的1、学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体色素的提取和分离实验步骤
叶绿体色素的提取和分离实验步骤一、实验前的准备首先呢，咱们得把材料都准备好。
新鲜的绿叶是必须的啦，像菠菜叶就很不错哦。
还有要准备好研钵、漏斗、滤纸、层析液、无水乙醇这些东西。
这一步看起来很平常，但可千万别小瞧它，要是少了啥东西，实验过程中再去找就麻烦啦！我就有过一次，忘记准备滤纸了，当时那个手忙脚乱所以大家一定要仔细检查材料是否齐全哦！二、叶绿体色素的提取1. 取几片新鲜的绿叶，把它们剪碎放在研钵里。
这里呢，叶子不用太多，适量就好，大概四五片大菠菜叶就差不多了。
然后加入少许的二氧化硅和碳酸钙。
二氧化硅有助于研磨得更充分，碳酸钙呢，可以防止叶绿素被破坏。
这一步很关键哦！我每次都会多检查一遍有没有加这两样东西，真的很重要呢！2. 接着倒入适量的无水乙醇。
无水乙醇的量啊，大概能把叶子都浸湿就可以了。
然后就开始研磨啦。
研磨的时候要用力均匀，慢慢磨，别太着急。
这一步虽然不难，但也需要点耐心。
我通常会在这个环节花多一些时间，确保研磨得足够细。
你看，如果研磨不充分，可能就会影响后面色素的提取量呢，是不是？3. 研磨好之后，咱们就用漏斗和滤纸进行过滤，把研磨液过滤到一个小试管里。
这时候要注意，滤纸要折叠好放在漏斗里，不要有缝隙，不然过滤的时候就会漏得到处都是，那就糟糕了！三、叶绿体色素的分离1. 准备好一个滤纸，把它剪成一个长条形，并且一端要剪去两角。
为啥要剪去两角呢？嘿嘿，这是个小技巧，可以让色素在滤纸上跑得更整齐哦。
然后用铅笔在距离剪去两角那端大概一厘米的地方画一条细线，这条细线就是用来蘸取我们前面提取出来的色素滤液的。
这一步可不能画得太粗啦，不然色素带就会重叠在一起，那就分不清啦。
2. 用毛细吸管吸取少量的色素滤液，轻轻地沿着铅笔线涂抹。
注意哦，不要涂太多，一点点就好。
如果涂多了，色素就会扩散得乱七八糟的。
这一点真的很重要，我通常会再检查一次，真的，确认无误是关键。
3. 把这个滤纸条放进装有层析液的层析装置里。
叶绿体色素的提取分离实验报告
叶绿体色素的提取分离、理化性质实验报告第一部分提取与分离一实验目的学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法二实验原理叶绿体是进行光合作用的细胞器。
叶绿体中的叶绿体a(C55H72O5N4Mg)、叶绿素b(C55H72O6N4Mg)、胡萝卜素(C40H56)和叶黄素(C40H56O2)与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。
这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。
提取液可用薄层色谱法加以分离与鉴别。
薄层色谱分析法是将吸附剂均匀的涂在玻璃板上成一薄层，将此吸附剂薄层做固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂做流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂中。
流动相通过毛细管作用由下而上的逐渐浸润薄层板，并带动样品在板上也向上移动，样品中各组分在吸附剂和展开剂之间发生连续不断的吸附、脱附、再吸附、再脱附……的过程。
由于吸附剂的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，而吸附力弱的则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。
三实验材料与试剂1 新鲜的菠菜叶片2 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂(石油醚:丙酮:苯=7:5:1，体积比)3 天平，研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸四实验步骤(一)色素提取液的制备1 取新鲜叶片4至5片(2g左右)，洗净，擦干叶表面，去中脉剪碎，放入研钵中。
2 研钵中加入少量碳酸钙粉末，加2至3ml体积分数为95%的乙醇，研磨至糊状，再加10至15ml体积分数为95%的乙醇，上清液用漏斗过滤，残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中，即制成叶绿体色素提取液。
提取液应避光保存。
(二)叶绿体色素的分离1 取硅胶预制板一个，用点样毛细管吸取上述提取液，平行于硅胶板的短边，距下边缘约1cm处用毛细管划线，风干后再划第二次，重复操作3至4次。
2 在干洁的层析缸中加入适量的展开剂，高度约0.5cm，将硅胶预制板带有色素的一端放下，使其浸入展开剂中(但不要使待测样品浸入展开剂中)。
叶绿体色素提取与分离实验
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降
低植物光合作用的强度，最好安装（ B）
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。
处理 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈，
排在外圈的色素呈 [ A]
叶绿体中色素的提取和分离47733
极 细 光 束
黑暗中
光照下
结论： 叶绿体是植物进行光合作用的场所
光合作用需要在光下进行
光合作用中释放氧气
24
C18O2
O2
CO2
18O2
（一）
HH22OO
（二）
HH221188OO
绿藻
绿藻
结论: 光合作用释放的氧全部来自水。 25
美国卡尔文
用14C标记14CO2，供小球藻 进行光合作用，探明了 CO2中的C的去向，称为卡 尔文循环。
H2O
O2
水在光 下分解
[H]
光能
叶绿体中 的色素
ATP
酶
2C3
多种酶参 加催化
CO2 固定
C5
ADP+Pi
还原
（CH2O）
光反应过程
暗反应过程
29
原料和产物的对应关系：
C （CH2O） H
O
O2
能量的转移途径：
CO2 H2O CO2 H2O
光能
ATP中活跃 的化学能
碳的转移途径：
(CH2O)中稳定 的化学能
所以用无水乙醇可提取叶绿体中色素。 2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素
分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度 低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢， 因而可用层析液将不同的色素分离。
4
➢ 方法与步骤：称
取5g左右的鲜叶，剪碎， 放入研钵中。加少许的 石英砂（充分研磨）和 碳酸钙 (防止研磨中色 素被破坏)与10ml无水乙 醇。在研钵中快速研磨。 将研磨液进行过滤。
能量之源——光与光合作用
1
太阳光中有能量，我 们制造出太阳能电池板 可以捕获其中的能量并 转化为电能。
叶绿体色素的提取与分离实验
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
（一）捕获光能旳色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色旳溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表达加，“—”表达不加。
处理
二氧化硅（少许） 碳酸钙（少许）
95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（1）A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（6）色素分离旳成果：相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
叶绿体色素的提取和分离
⑵、分离色素 制备滤纸条：剪去两角－使扩散均匀，防止边
缘毛细现象
画滤液细线：直、细、浓(风干后重复数次）
层析液不能没及滤液细线：防止色素 溶于层析液 层析分离 加盖：防止挥发 洗手：丙酮有毒
类 胡 萝 卜 素
叶 绿 素
叶绿素 色素
叶绿素a
叶绿素b 叶黄素
（蓝绿色）
（黄绿色）
（黄色）
含量约占3/4 含量约占1/4
（3）细胞的代谢
——进行叶绿体色素的提取和分离
1、实验原理 提取：色素能溶解在有机溶剂中，不溶于水 如：丙酮溶液 无水乙醇 分离：色素在层析液中溶解度不同，使四种色素 随层析液在滤纸上扩散的速度不同而分离
2、实验用：称取
5g左右的鲜叶，剪碎，放 入研钵中。加少许的石英 砂（充分研磨）和碳酸钙 (保护叶绿素)与丙酮溶液。 在研钵中快速研磨。将研 磨液进行过滤。
类胡萝卜素 胡萝卜素 （橙黄色）
吸收可见 的太阳光 叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的本次实验的主要目的是了解叶绿体中色素的提取和分离方法，掌握色素的分离技术，并了解不同色素对叶绿体的作用。
实验原理叶绿体是植物和藻类细胞中最重要的细胞器之一，也是进行光合作用的场所。
其中，叶绿素是其最主要的色素，在光合作用中起到吸收太阳能的作用。
叶绿体中还包含其他色素，如类胡萝卜素、花青素等，它们具有吸收不同波长的光线的能力。
叶绿体中色素的提取和分离主要利用其不同的亲水性和亲油性，通过不同的溶剂将其提取出来，并进行分离、纯化。
其中，有机溶剂如丙酮、乙醇等可以提取出叶绿素和类胡萝卜素等亲油性色素，而酸性溶液可以提取出卟啉类、铁类等亲水性色素。
实验步骤1.取适量菠菜叶，去掉梗部，用清水反复洗净，去除表面的灰尘。
2.将菠菜叶放入离心管中，加入约5毫升丙酮，使用手持式超声波仪器超声处理10分钟。
3.将超声处理后的菠菜混合物离心10分钟，待叶绿体沉淀下来。
4.取叶绿体沉淀，加入少量乙酸乙酯，经超声震荡3分钟。
5.将混合物离心10分钟，分离出上层的色素提取液，放置在离心管中。
6.加入冷水，将提取液分层，即可分离出不同色素。
7.将分离好的色素涂于色谱纸上，将色谱纸浸泡至溶液面之下，待上端溶液移动至色素液的1/2处时，取出晾干，即可得到不同色素的分离结果。
实验结果通过叶绿体中色素的提取和分离实验，我们成功地分离出了叶绿体中的色素，其中包括叶绿素、类胡萝卜素等。
在色谱纸上的分离结果如下：色素名称相对迁移率叶绿素0.48氧化型叶绿素0.39类胡萝卜素0.92实验分析在本次实验中，我们使用丙酮和乙酸乙酯等溶剂成功地提取了叶绿体中的色素，也尝试了不同溶剂对色素的亲水性和亲油性的作用。
通过色谱纸的分离结果，我们可以清晰地观察到各色素的迁移情况，进一步了解到不同色素在不同溶剂中的特点和性质。
实验总结叶绿体中色素的提取和分离是生物学实验中常见的实验之一，通过本次实验，我们加深了对叶绿体和其中色素的了解，掌握了相关的实验技术和方法。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验目的1. 掌握叶绿体色素的提取和分离方法；2. 了解叶绿体色素的成分和结构特点；3. 通过实验观察，加深对叶绿体结构和功能的理解。
实验原理叶绿体是植物细胞中的一种独特细胞器，因为其含有叶绿素而呈现绿色。
叶绿体是光合能量的主要场所，能够将光能转化为化学能，进而为生物体提供能量。
叶绿体中含有多种色素，如叶绿素、类胡萝卜素等。
其中，叶绿素是最重要的色素，其分子结构由一个类胡萝卜素环（porphyrin环）和一个酰基侧链（phytyl侧链）组成。
叶绿素在光合作用中起着重要的作用，它能够吸收光线，将光能转化为化学能，进而提供生物体所需的营养。
叶绿体中的色素可以通过酒精沉淀的方法进行提取和分离。
酒精沉淀方法是根据不同色素在不同酒精浓度下的溶解度差异来进行色素分离的。
在实验操作中，首先要将植物组织用液氮或手动研磨方法研磨成细碎的粉末，然后将其置于离心管中，加入一定比例的酒精，并放置在温水浴中摇匀，使颜料完全溶解。
接着，将混合液离心，待沉淀出现后将上层液体倒出，待沉淀干燥后即可得到色素提取物。
实验步骤1. 准备材料。
首先准备好新鲜的菠菜叶片、冰醋酸和95%酒精；2. 研磨植物组织。
将菠菜叶片用液氮或手动研磨器研磨成细碎的粉末；3. 加入酸性试剂。
将研磨后的菠菜叶片粉末加入1ml冰醋酸，使其均匀分散；4. 加入酒精。
向组织粉末中缓慢加入5ml 95%酒精，搅拌均匀；5. 离心。
将混合液置于离心管中，进行离心30分钟；6. 取上层液体。
取离心后上层液体，避免沉淀、残渣的干扰；7. 干燥。
将取出的上层液体放置在冷暗处自然晾干；8. 分析。
对干燥后得到的叶绿体色素进行观察和分析。
实验结果实验分析本次实验使用了经典的酒精沉淀法对叶绿体中的色素进行提取和分离。
酒精沉淀法是比较简单、有效的提取方法，但是在实验中需要注意操作细节，比如酒精的浓度需要控制好，否则会影响色素的分离效果。
叶绿体中的色素具有不同的波长吸收谱，通过对其吸收谱的分析，可以确定叶绿体中各种色素的相对量和种类组成。
实验八叶绿体中色素的提取和分离
实验八叶绿体中色素的提取和分离一．实验原理：色素提取原理：利用相似相溶原理，色素可以溶解于酒精、丙酮等有机溶剂中，形成色素液。
色素分离原理：由于四种色素在层析液的溶解度不同，因而四种色素在滤纸上的扩散速度也不同，从而将它们分离开来。
二．实验材料：新鲜的绿色叶片、干燥的定性滤纸、烧杯、研砵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、小试管、培养皿盖、药勺、量筒、天平。
药品：丙酮、层析液、二氧化硅、碳酸钙。
三．实验过程：（一）。
制备色素滤液：1．取叶：称取5克新鲜的绿色植物叶片，然后剪碎，放入研砵中；2。
研磨：A．研砵中分别加入以下物质：二氧化硅：为了使研磨充分；碳酸钙：保护色素免受破坏；丙酮：作为色素的溶剂。
思考题：（1）研磨时要使叶绿素能够提取出来，要破坏多少层膜？提示：应该是3层，一层细胞膜，两层叶绿体膜。
（2）碳酸钙保护色素的原理是什么？因为叶绿素极易分解，在研磨过程中，细胞结构被破坏，细胞液中的有机酸释放出来，很容易破坏叶绿素分子，为了缓冲研磨液中的PH值一，可以加入碳酸钙，来中和释放出来的有机酸，从而避免了叶绿素被破坏。
B．充分迅速地研磨；充分是为了彻底破坏细胞结构，迅速是为了防止丙酮挥发；防止挥发采取的措施：在研砵上加一个中间有洞的纸，把玻璃棒插在中间研磨可以减少挥发。
3．取滤液：在一支试管上插入一个小漏斗，中间用脱脂棉或者尼龙布作为过滤用，迅速倒入研磨滤液，进行过滤，然后在试管口用棉花塞紧。
思考题：为什么要迅速倒入？为什么要用棉花塞紧试管管口？同样为了防止丙酮挥发；同时由于色素极容易被光和空气所破坏，所以要避光和隔绝空气保存。
（二）制备滤纸条：1。
干燥处理过的定性滤纸；为何干燥处理？有利于层析液在滤纸上的扩散；2．规格：6㎝×1㎝3．处理：在滤纸的一端，剪去两角，大约距1㎝处，角度约45°；剪角的目的是什么？因为在靠近两侧的层析液扩散的速度比较快，剪去两角后，扩大了两侧层析液扩散的距离，可以调整层析液扩散处于同一平面。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体色素的提取和分离方法。
2. 了解叶绿体中色素的组成和结构。
实验原理：叶绿体是植物和藻类细胞中含有叶绿素的细胞器。
叶绿体中有多种不同类型的色素，包括叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等。
这些色素通过吸收太阳光能量进行光合作用。
提取叶绿体中的色素可以使用酒精提取法。
酒精可以溶解叶绿体膜，使色素溶解到酒精中。
然后，使用色谱技术可以将不同类型的色素分离出来。
实验材料：1. 鲜叶样品2. 酒精3. 氯仿4. 丙酮实验步骤：1. 将鲜叶样品切碎并置于研钵中。
2. 加入足够量的酒精，用研钵研磨混合，直到叶碎细胞完全破裂。
3. 使用滤纸过滤混合物，得到澄清的叶绿体提取物。
4. 将叶绿体提取物转移到试管中，加入少量氯仿。
5. 等待一段时间，观察到叶绿体提取物分为两个层次：上层为酒精层，下层为氯仿层。
6. 使用滴管将上层的酒精取出，置于干燥的容器中保存。
7. 将下层的氯仿层转移至另一个试管中。
8. 加入适量的丙酮，轻轻摇匀，观察色素在丙酮中溶解。
9. 使用滤纸过滤丙酮溶液，得到单一色素溶液。
实验结果：从叶绿体提取物中分离出不同类型的色素，如叶绿素a、叶绿素b等。
通过色素的溶解性质和色谱技术，可以将这些色素分离出来。
实验总结：通过本次实验，我们学习了叶绿体中色素的提取和分离方法。
了解了叶绿体中的色素组成和结构。
同时，也掌握了使用色谱技术进行色素分离的基本步骤。
这对于进一步研究叶绿体的功能和光合作用具有重要意义。
生物实验八：叶绿体色素的提取和分离(必修1)
生物实验8：叶绿体中色素的提取和分离（必修1）一、实验原理1、叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以可以用无水乙醇提取叶绿体中的色素。
2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散的快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散的慢，因而可用层析液将不同的色素分离。
二、实验目的1、初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法与原理。
2、探索叶绿体中有几种色素。
三、实验材料用具新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）、干燥的定性滤纸、试管、棉塞、试管架、研钵、小玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、药勺、量筒、天平、无水乙醇、层析液、二氧化硅、碳酸钙四、实验步骤1、提取色素⑴称取5g绿色叶片，剪碎放入研钵中（剪得越细越好，尽量去除叶脉等部分）；⑵向研钵中放入少量二氧化硅、碳酸钙，再加入5mL丙酮。
加二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸钙的作用是保护叶绿素不分解；丙酮用来溶解提取叶绿体中的色素。
⑶将研钵中物品进行研磨、漏斗过滤，最后将滤液收集到试管内并塞紧管口。
2、制滤纸条⑴将干燥的滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角（使之呈梯形）。
⑵在距剪角端1cm处用铅笔画一条细横线。
3、画滤液细线⑴用毛细吸管吸少量的滤液沿铅笔线小心均匀地画一道线。
⑵待滤液干燥后，重复划2~3次。
4、纸上层析⑴向烧杯中倒入3mL层析液，以层析液不没及滤液细线为准。
⑵将滤纸条画有滤液细线的一端向下插入层析液中，随后用棉塞塞紧试管口。
注意千万不要将滤液细线浸没在层析液中，否则会使色素溶解而导致实验失败。
层析液是挥发性较强的有机溶剂，并且具有一定的毒性，所以在操作中要尽量用棉塞塞紧试管口。
5、观察结果滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
最宽：叶绿素a；最窄：叶绿素b；相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素五、实验关键1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片，如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
叶绿体色素的提取和分离
叶绿体色素的提取和分离
叶绿体色素是位于植物叶绿体中的一类有机化合物，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
提取和分离叶绿体色素的方法如下：
1. 手工研磨法：将植物叶片取出后，加入适量的减水醇（如乙醇或甲醇），用研钵或机械研磨器搅拌研磨，使细胞破碎释放叶绿体色素。
然后通过离心将悬液离心分离出叶绿体色素。
2. 酒精沉淀法：将植物叶片切碎后加入适量的酒精溶液，用撇去悬浮物，然后再用滤纸滤除酒精中的杂质。
过滤后的溶液可以进行酒精沉淀，即加入适量的酒精悬浮叶绿体色素，并通过离心分离出沉淀。
3. 层析法：将植物叶片经过研磨和过滤后得到的色素溶液，可以通过色谱柱层析进行分离。
常用的色谱柱包括硅胶柱、纸层析柱和高效液相色谱柱等。
通过向色谱柱中加入适当的溶剂系统，可以将叶绿体色素按照其亲水性和亲油性进行分离。
4. 液-液萃取法：将植物叶片研磨并与适量的有机溶剂（如二氯甲烷、苯或正己烷）混合，通过摇晃、振荡或搅拌等方法，使叶绿体色素在有机相和水相之间分配。
随后，分离有机相并蒸干，即可得到叶绿体色素。
这些方法可以根据实验需求和设备条件选择使用，提取和分离叶绿体色素可以用于进一步的分析和研究。
实验八 叶绿体色素的提取、分离及定量测定
胡萝卜素实验八 叶绿体色素的提取、分离及定量测定一、实验结果叶绿素提取液在在纸带上层析的结果图叶绿素提取液在圆纸片上层析扩散图测量结果叶黄素叶绿素a叶绿素b胡萝卜素叶黄素叶绿素a叶绿素b稀释前：在波长为663 时吸光度为3.303 波长为645时为3.230稀释后：在波长为663时吸光度为1.529（平均）波长为645时为0.529（平均）计算结果：稀释前：Ca=12.7*3.303-2.69*3.230=33.26mg/lCb=22.9*3.230-4.68*3.303=58.51mg/lCa:Cb=0.55:1稀释后;Ca=12.7*1.529-2.69*0.529=18.00mg/lCb=22.9*0.529-4.68*1.529=4.96mg/lCa:Cb=3.63:1波长663吸光度数据：1.527 1.531 1.529 平均：1.529波长645吸光度数据：0.530 0.529 0.528 平均：0.529二、实验结论高等植物叶绿体体内的色素主要是叶绿素a,叶绿素b，胡萝卜素和叶黄素。
叶绿素主要吸收蓝紫光和红光，将绿光反射出来，因而叶片颜色呈现出绿色。
胡萝卜素和叶黄素最大吸收带在蓝紫光的部分。
叶绿素和叶黄素胡萝卜素两种色素的总含量比大致为3：1，叶绿素a和叶绿素b比也大致为3：1.层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂，由于四种色素的化学组成和结构不同，因此每一种色素分子在层析液分子的作用下，向层析液中扩散的速度不同，即在层析液中的溶解度不同，因而四种色素随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同，其中胡萝卜素在层析液中的溶解度最高，扩散速度最快，其次是叶黄素、叶绿素A，叶绿素B溶解度最低，扩散得最慢。
依据此原理使滤纸条上处于同一滤液细线上的四种色素在扩散中分离开来。
三、问题解答1.叶片选材有何要求？答：要选取新鲜的颜色较深的叶片，是因为以便使滤液中含较多的色素。
2.研磨时加入石英砂的目的是什么？答：研磨时加入石英砂的目的是为了研磨得充分，更有效地破坏细胞结构.3.研磨时加入碳酸钙的目的是什么？答：防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏。
叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体色素提取和分离是一种应用生物技术进行生物分子分析和
实验的重要方法。
最近几年，越来越多的研究表明在分子生物学实验中，叶绿体色素提取和分离具有十分重要的意义和必要性。
叶绿体色
素提取及其分离也成为Molecular Biologists在生物分子实验研究中
广泛应用的重要技术。
通过实验研究，叶绿体色素可以从叶绿体杂质中提取和分离出来，其过程一般分为三个步骤：破坏叶绿体的结构，分离色素和其他物质，并重新形成叶绿体结构。
第一步要使用一种有效的抗菌剂中和叶绿体
结构，为色素的提取提供有利的条件。
第二步就是要使用一种有效的
溶剂去沉淀提取的色素，可以在避免损害和损失色素的情况下实现色
素分离。
最后一步就是要重新形成叶绿体细胞结构，以恢复其正常功能。
如今，叶绿体色素提取和分离技术已经成为应用于众多实验的重
要工具，其中的方法正在被不断改进，在帮助分子生物学实验取得最
佳结果方面发挥着重要作用。
叶绿体中色素的提取和分离,实验报告
叶绿体中色素的提取和分离,实验报告实验报告设计叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离一、实验目标1、知识方面（1）探究叶绿体中含有几种种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系（2）了解纸层析法的原理。
2、能力方面掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
3、情感态度与价值观方面认识生物科学的价值，乐于学习生物科学，养成质疑、求实、创新及勇于实践的科学精神和科学态度二、实验原理1、色素提取的原理：叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中，故可用丙酮和无水乙醇提取色素。
2、色素分离的原理：叶绿体中的各种色素在层析液中的溶解度不同。
溶解度大的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度快；溶解度小的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度慢。
三、实验准备实验材料：新鲜的绿叶（如新鲜菠菜叶片）。
实验仪器及用具：定性滤纸，研钵，玻璃滤斗，脱脂棉，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10mL），天平，试管，试管架，滴管，培养皿，三角瓶，烧杯试验试剂：无水乙醇（或丙酮），层析液（CCl4），石英砂（SiO2）和碳酸钙（CaCO3）四、实验步骤1、叶绿体色素的提取（1）取菠菜新鲜叶片5g，洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。
（2）向研钵中加入少许碳酸钙和二氧化硅，再加10mL无水乙醇，进行迅速、充分研磨（二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏）。
（3）将研磨液迅速倒入漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。
将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
2、制备滤纸条用预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长10 cm、宽1cm 的滤纸条，在滤纸条的一端剪去两角（防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快），并在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
3、画滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。
待滤液干后，再画二三次。
4、分离叶绿体中的色素将3 mL层析液到入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微斜靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖上烧坏。
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实验材料用具：
1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)，
研钵 玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛 细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺， 量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。 3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳 酸钙。
A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色
(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离”
实验时，向研钵中加入SiO2的目的
是：
，
加入CaC03的目的是
在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的是 在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是 其颜色是
(3)某同学在做“叶绿体中色素的提
取分离”实验时，操作情况如下所述， 结果实验失败，请指出其错误所在:
素是
（）
A.光合作用的原料 B.光合作用的产物 C.能量转换器 D.氢的接受器
7.下列作用不属于叶绿素的功能
的是
（）
A.吸收光能 B.利用光能使水分解 C.利用光能合成ATP D.固定和还原二氧化碳
能力提高练习：
(1)在圆形滤纸的中央，点上叶绿体色素的 提取液进行层析，随着层析液从滤纸的中 央向四周扩散，形成四个色素环带，排在 最里圈的色素是（ ）
4.提取叶绿体中的色素时要加丙 酮，其原因是 （ ）
A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏 C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离
5.在叶绿体色素的提取和分离实验中， 在滤纸条上扩散速度最快的色素是（ ）
A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素
6.绿色植物的光合作用中，叶绿
①将5克新鲜完整的菠菜叶，放在研钵中，加入 丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。 (原因是没有去除粗叶脉和将叶剪碎，这样降低了 叶绿素的提取率 ）
②用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均 匀地划出一条滤液细线，并连续迅速地重复划 2～3次。
(原因是上一次滤液细线未干燥，即划下一 次线，使滤液线过粗或线上色素量较低 .
2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验
描述中，不属于实验要求的是 （ ）
A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类
3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出 现的最窄的一条色素带的颜色是 （ ）
A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色
2、分离色素的步骤
①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤 纸条一端剪去两个角作标记，在距离 这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
②画滤液细线：沿铅笔线轻轻均匀地画 一道线，用提取液反复划好几次，每 次划完尽量吹干，不要弄破纸条。
③层析分离叶绿体中的色素：将3mL层析液 倒入烧杯中，注意将纸条画有滤液细线的 一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不 要将滤液细线浸没在层析液中。
滤液含有丙酮，丙酮 有毒，防止挥发
3、 画滤液细线时重复画几次的 目的是什么？
增加色素的含量， 使分离后的色素带更 加清晰
4. 为什么不能让滤液细线触及层 析液？
层析液会溶解色素 使色素无法分离 。
5.观察实验结果有什么现象？滤纸条 上出现了几条色素带？每条色素带的 颜色和排序如何？
滤纸条上将分离出四条色素带， 颜色从上往下分别是橙黄色、黄 色、蓝绿色和黄绿色，四种色素 分别是胡萝卜素（最快）、叶黄 素、叶绿素a（最多）和叶绿素b （最慢）。
二、实验原理
（一）叶绿体色素：
1.叶绿素
叶绿素a 叶绿素b
3:1 (阳生) ２:1 (阴生)
3：1
2.类胡萝卜素 胡萝卜素
2：1
叶黄素
胡萝卜素（橙黄色）
绿 叶
类胡萝卜素
中
（含量约1/4）
叶黄素（黄色）
的
色 素
叶绿素
叶绿素a（蓝绿色）
（含量约3/4）
叶绿素b（黄绿色）
实验关键:
1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁 的叶片.(如菠菜叶)
▪ 极性大小： 叶绿素b>叶绿素a>叶黄素>胡萝卜素。
∴根据相似相溶原理，在有机溶液中的溶解 度： 叶绿素b<叶绿素a <叶黄素<胡萝卜素。
（二）叶绿素的光学性质
叶绿素的吸收光谱
类胡萝卜素的吸收光谱
实验原理：
①叶绿体中的色素是有机物，不溶于水， 易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙 酮、无水乙醇等能提取色素。
实验6：叶绿体中色素 的提取和分离
马山县周鹿中学
陆保宗
二、实验原理
（一）叶绿体色素：
1.叶绿素
叶绿素a 叶绿素b
3:1 (阳生) ２:1 (阴生)
3：1
2.类胡萝卜素 胡萝卜素
2：1
叶黄素
叶绿素a、b的结构式
类胡萝卜素的结构式
（二）四种色素的化学性质
▪ 均为亲脂性>亲水性， ∴均不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用 乙醇、丙酮等有机溶剂提取。
实验过程：
1、提取叶绿素的步骤 ： （1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶
片 （2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等
部分 （3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸
钙和丙酮（约5mL）快速充分研磨。
（4）磨：研磨要领是要用力压快速研 磨。
（5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗 和试管，最后提取液置于试管中待用， 及时用棉塞（或塞子）将试管塞严 .
2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复 画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复 2-3次。
3.层析时不要让滤液细线触及层析液。
随堂演练 ：
1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸 条上出现四条色素带，从上到下依次为 （） A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素
④观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四 条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、 黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
实验结果：
问题讨论：
1、加入SiO2、CaCO3的作用是 什么？
二氧化硅的作用是使研 磨更加充分、迅速；碳酸钙 的作用是保护叶要及时用棉塞将试管塞严？