实验八:叶绿体中色素的提取和分离(整理)资料

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实验过程:
1、提取叶绿素的步骤 : (1)称:用天平称量5g除去叶柄的叶
片 (2)剪:越细越好,尽量去除叶脉等
部分 (3)加药品:加少量二氧化硅,碳酸
钙和丙酮(约5mL)快速充分研磨。
(4)磨:研磨要领是要用力压快速研 磨。
(5)过滤:用纱布(或棉花)、漏斗 和试管,最后提取液置于试管中待用, 及时用棉塞(或塞子)将试管塞严 .
2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验
描述中,不属于实验要求的是 ( )
A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类
3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出 现的最窄的一条色素带的颜色是 ( )
A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色
2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准,重复 画线时必须等上次画线干燥后再进行,重复 2-3次。
3.层析时不要让滤液细线触及层析液。
随堂演练 :
1.通过纸层析分离叶绿体色素,结果在滤纸 条上出现四条色素带,从上到下依次为 () A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素
4.提取叶绿体中的色素时要加丙 酮,其原因是 ( )
A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏 C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离
5.在叶绿体色素的提取和分离实验中, 在滤纸条上扩散速度最快的色素是( )
A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素
6.绿色植物的光合作用中,叶绿
A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色
(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离”
实验时,向研钵中加入SiO2的目的
是:

加入CaC03的目的是
在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的是 在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是 其颜色是
(3)某同学在做“叶绿体中色素的提
取分离”实验时,操作情况如下所述, 结果实验失败,请指出其错误所在:
②层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。 叶绿体色素在层析液中的溶解度不同, 分子量小的溶解度高,随层析液在滤 纸上扩散得快,溶解度低的随层析液 在滤纸上扩散得慢。所以用层析液来 分离四种色素。
实验材料用具:
1、材料:新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 2、仪器:干燥的定性滤纸,烧杯(100mL),
研钵 玻璃漏斗,尼龙布(或棉花),毛 细吸管,剪刀,小试管,培养皿盖,药勺, 量筒(10mL),天平,镊子,铅笔,尺子。 3、药品:丙酮,层析液,二氧化硅,碳 酸钙。
实验6:叶绿体中色素 的提取和分离
马山县周鹿中学
陆保宗
二、实验原理
(一)叶绿体色素:
1.叶绿素
叶绿素a 叶绿素b
3:1 (阳生) 2:1 (阴生)
3:1
2.类胡萝卜素 胡萝卜素
2:1
叶黄素
叶绿素a、b的结构式
类胡萝卜素的结构式
(二)四种色素的化学性质
▪ 均为亲脂性>亲水性, ∴均不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用 乙醇、丙酮等有机溶剂提取。
④观察实验结果:最后滤纸条上将分离出四 条色素带,颜色从上往下分别是橙黄色、 黄色、蓝绿色和黄绿色,四种色素分别是 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
实验结果:
问题讨论:
1、加入SiO2、CaCO3的作用是 什么?
二氧化硅的作用是使研 磨更加充分、迅速;碳酸钙 的作用是保护叶绿素不分解
2、 将滤液放在试管中,为什么 要及时用棉塞将试管塞严?
滤液含有丙酮,丙酮 有毒,防止挥发
3、 画滤液细线时重复画几次的 目的是什么?
增加色素的含量, 使分离后的色素带更 加清晰
4. 为什么不能让滤液细线触及层 析液?
层析液会溶解色素 使色素无法分离 。
5.观察实验结果有什么现象?滤纸条 上出现了几条色素带?每条色素带的 颜色和排序如何?
滤纸条上将分离出四条色素带, 颜色从上往下分别是橙黄色、黄 色、蓝绿色和黄绿色,四种色素 分别是胡萝卜素(最快)、叶黄 素、叶绿素a(最多)和叶绿素b (最慢)。
二、实验原理
(一)叶绿体色素:
1.叶绿素
叶绿素a 叶绿素b
3:1 (阳生) 2:1 (阴生)
3:1
2.类胡萝卜素 胡萝卜素
2:1
叶黄素
胡萝卜素(百度文库黄色)
绿 叶
类胡萝卜素

(含量约1/4)
叶黄素(黄色)

色 素
叶绿素
叶绿素a(蓝绿色)
(含量约3/4)
叶绿素b(黄绿色)
实验关键:
1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁 的叶片.(如菠菜叶)
2、分离色素的步骤
①制备滤纸条:将预备在试验桌上的滤 纸条一端剪去两个角作标记,在距离 这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
②画滤液细线:沿铅笔线轻轻均匀地画 一道线,用提取液反复划好几次,每 次划完尽量吹干,不要弄破纸条。
③层析分离叶绿体中的色素:将3mL层析液 倒入烧杯中,注意将纸条画有滤液细线的 一端置于烧杯中的层析液中,注意千万不 要将滤液细线浸没在层析液中。
▪ 极性大小: 叶绿素b>叶绿素a>叶黄素>胡萝卜素。
∴根据相似相溶原理,在有机溶液中的溶解 度: 叶绿素b<叶绿素a <叶黄素<胡萝卜素。
(二)叶绿素的光学性质
叶绿素的吸收光谱
类胡萝卜素的吸收光谱
实验原理:
①叶绿体中的色素是有机物,不溶于水, 易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙 酮、无水乙醇等能提取色素。
①将5克新鲜完整的菠菜叶,放在研钵中,加入 丙酮、石英砂、CaCO3以后,迅速研磨。 (原因是没有去除粗叶脉和将叶剪碎,这样降低了 叶绿素的提取率 )
②用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线处小心均 匀地划出一条滤液细线,并连续迅速地重复划 2~3次。
(原因是上一次滤液细线未干燥,即划下一 次线,使滤液线过粗或线上色素量较低 .
素是
()
A.光合作用的原料 B.光合作用的产物 C.能量转换器 D.氢的接受器
7.下列作用不属于叶绿素的功能
的是
()
A.吸收光能 B.利用光能使水分解 C.利用光能合成ATP D.固定和还原二氧化碳
能力提高练习:
(1)在圆形滤纸的中央,点上叶绿体色素的 提取液进行层析,随着层析液从滤纸的中 央向四周扩散,形成四个色素环带,排在 最里圈的色素是( )
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