几种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞_K562_的作用研究
昆虫免疫系统中的抗菌肽研究
昆虫免疫系统中的抗菌肽研究昆虫免疫系统是一种原始而高效的抗病系统，其抗菌肽是一类重要的非特异性免疫分子，广泛存在于昆虫体内。
研究发现，这些抗菌肽不仅具有强烈的抑菌和溶菌作用，而且对许多病原菌也具有一定的抗菌活性。
本文将针对昆虫免疫系统中的抗菌肽进行研究和探讨。
一、抗菌肽概述抗菌肽是由多肽组成的低分子量蛋白质，主要存在于昆虫、植物、动物等生物体内，是一类具有强烈的抑菌和溶菌作用的非特异性免疫分子。
昆虫免疫系统中的抗菌肽数量众多，具有不同的结构和生物活性，如防御素（Defensin）、透明质锁定素（Chitinase）、抗菌肽1（AMP1）等。
抗菌肽具有广谱抗菌活性，可用于治疗多种细菌感染，对抗多重药物耐药的病原体也具有一定的作用。
近年来，研究人员还发现，抗菌肽还具有抗肿瘤、促进创伤愈合等作用，具有广泛的应用前景。
二、抗菌肽的分类及结构抗菌肽根据其氨基酸序列的差异可分为多种类型，如防御素（Defensin）、透明质锁定素（Chitinase）、抗菌肽1（AMP1）等。
其中，防御素是最广泛研究的一类抗菌肽，具有较强的抑菌活性和抗微生物活性。
抗菌肽的结构也各异，其基本结构包括两个或三个半胱氨酸的二硫键，主链形态的α-螺旋，螺旋周围下沉的热稳定性区域，以及亲水性的N-末端或C-末端。
这些结构保证了抗菌肽的生物活性和稳定性。
三、抗菌肽的作用机理抗菌肽的作用机理复杂多样，主要包括破坏细胞膜、破坏细胞壁、抑制细胞质分裂等多种方式。
研究表明，抗菌肽作用于革兰氏阳性菌细胞时，可以通过与细胞膜结合，使其孔隙化，最终导致细胞死亡。
作用于革兰氏阴性菌时，则是通过与菌体上磷脂的负电荷相互吸引，破坏菌体的外膜和内膜，达到抑菌作用。
四、抗菌肽的筛选方法随着生物技术的不断发展，抗菌肽的筛选方法也得到了极大的改进。
目前常用的筛选方法主要包括生物计算、磁珠分离、高效液相层析法、三维荧光检测法等。
生物计算方法主要是利用生物信息学软件，通过建立分子模型和模拟实验，预测抗菌肽的分子结构和生物活性。
细谈抗菌肽抗肿瘤作用的研究进展
细谈抗菌肽抗肿瘤作用的研究进展本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！癌症是导致数以百万计人死亡的重要原因之一，其发病机理多由于异常细胞不受控制地生长和扩散。
常规的治疗手段，如手术和化疗成功率均低，且存在复发的风险;同时，前列腺癌、胰腺癌和恶性黑色素瘤仅用化疗治疗效果较差。
为避免肿瘤的复发和( 或) 发生转移，辅助治疗药物( 如DNA 烷基化剂、激素激动剂/ 拮抗剂和抗代谢药物等) 被广泛应用，但这些药物选择性较差，攻击癌细胞的同时，对正常细胞损害较大，导致患者发生骨髓抑制和血小板减少( 血细胞生成减少)、黏膜炎( 消化道炎症) 和脱发等。
此外，这些化合物可使癌细胞产生耐药性，不宜长期使用。
如今，随着与癌症相关的疾病数量的日益增加，面对常规疗法的缺点和不足，新的治疗方案呼之欲出。
抗菌肽已被证实是一种分子靶向抗癌药物，这种小分子多肽可有效进行组织渗透并被异质癌细胞吸收，进而杀伤肿瘤细胞。
与现有疗法联合作用将极大改善抗癌药物对肿瘤细胞的选择性，并减少对健康组织的有害影响，它的开发与应用为癌症治疗带来新的希望。
1具有抗癌活性的抗菌肽的分类和选择性从结构的角度来看，大多数具有抗癌活性的抗菌肽具有α- 螺旋或β- 折叠的构象[4]，针对其靶细胞，可将它们分为两大类：第一类包括对微生物和癌细胞具有活性而对健康的哺乳动物细胞无活性的肽，如cecropins 和magainins ;第二类包含的抗菌肽对微生物、正常细胞和癌细胞均具有杀伤作用，如人中性粒细胞防御素HNP-1。
抗菌肽以溶膜或非溶膜机制选择性杀伤肿瘤细胞。
基于这种选择性机制的溶膜肽的活性依赖于抗菌肽自身特点及靶膜的特性。
抗菌肽对肿瘤细胞和正常的哺乳动物细胞的选择性基于恶性肿瘤细胞膜带的净负电荷，这些负电荷由磷脂酰丝氨酸、O- 糖基化的黏蛋白唾液酸和肝素等赋予。
家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562生长抑制作用的研究
·临床检验研究论著·家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞Ｋ５６２生长抑制作用的研究张金花１，２，贺莉芳１，杨霞霞１，万启惠１△（１．遵义医学院寄生虫学教研室，贵州遵义５６３００３；２．川北医学院附属医院检验科，四川南充６３７０００） 摘 要：目的 研究家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞Ｋ５６２的抑制作用。
方法 利用脂多糖诱导家蝇胚胎细胞ＭＤＥＣ－０７１１４，提取抗菌肽，将家蝇胚胎细胞抗菌肽分为４０、８０、１６０、３２０和６４０μｇ／ｍＬ ５个实验组，ＰＢＳ作为阴性对照组，采用ＭＴＴ法测定不同浓度抗菌肽对人髓样白血病细胞Ｋ５６２和人脐静脉血管内皮细胞的抑制作用并绘制Ｋ５６２细胞生长曲线。
结果 家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞Ｋ５６２具有明显抑制作用，其浓度与抑制率具有显著相关性，浓度越高，作用时间越长，对Ｋ５６２的抑制杀伤越强。
各浓度组对人体正常细胞均无抑制作用。
结论 家蝇胚胎细胞抗菌肽可抑制肿瘤细胞生长而不杀伤人体正常细胞。
关键词：白血病，髓样； 抗菌肽； 胚胎细胞系ＭＤＥＣ－０７１１４； 家蝇； 内皮细胞ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１２．１６．０１０文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－４１３０（２０１２）１６－１９４１－０２Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａｏｎ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ Ｋ５６２Ｚｈａｎｇ Ｊｉｎｈｕａ１，２，Ｈｅ Ｌｉｆａｎｇ１，Ｙａｎｇ Ｘｉａｘｉａ１，Ｗａｎ Ｑｉｈｕｉ１△（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ，Ｚｕｎｙｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｕｎｙｉ，Ｇｕｉｚｈｏｕ５６３００３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｃｈｕａｎｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｎａｎｃｈｏｎｇ，Ｓｉｃｈｕａｎ６３７０００，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｈｅｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｕｓｃａ ｄｏ－ｍｅｓｔｉｃａ ｏｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｋ５６２．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃ ｇｒｏｗｔｈ ｐｈａｓｅ′ｓ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＬＰＳ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ ｆｌｕｉｄ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｗａｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ４０，８０，１６０，３２０ａｎｄ ６４０μｇ／ｍＬ ｆｉｖｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｇｒｏｕｐｓ ｂｙ ＰＢＳ．Ｔｈｅ ＭＴＴ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍａｄｅ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ Ｋ５６２ａｎｄｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｖｅｉｎ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ Ｋ５６２ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｆｉｖｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｍａｄｅ ｂｙＭＴＴ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｕｍｏｕｒ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｉｓｏｍｅｔｒｉｃ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｂｅｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍ ｔｈｅ ｔｈｅｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ ｈａｄ ｒｅｍａｒｋａｂｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｎ Ｋ５６２ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔ－ｗａ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅｓ ａｎｄ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ａｌｏｎｇ ｗｉｔｈ ｔｉｍｅ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ，Ｋ５６２ｃｅｌｌ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｒａｔｅ ｒｉｓｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉｃａｌ ｐｅｐｔｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ ｈａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｉｎ－ｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｃｅｌｌｓ Ｋ５６２，ａｎｄ ｈａｓ ｎｏ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｎ ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｖｅｉｎ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｌｅｕｋｅｍｉａ，ｍｙｅｌｏｉｄ； ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｉ； ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＭＤＥＣ－０７１１４； ｍｕｓｃａ； ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａ ｃｅｌｌｓ 抗菌肽（ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ）是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，相对分子质量在２ ０００～７ ０００左右，由２０～６０个氨基酸残基组成。
昆虫天然抗菌肽的分子结构与抗菌机理研究
昆虫天然抗菌肽的分子结构与抗菌机理研究随着抗生素的广泛使用，细菌对抗生素的耐药性越来越严重。
因此，寻找替代治疗方案变得尤为重要。
昆虫天然抗菌肽作为一种广泛存在于昆虫体内的免疫分子，因其优良的抗菌特性而备受研究者的关注。
本文将介绍昆虫天然抗菌肽的分子结构与抗菌机理的最新研究进展。
一、昆虫天然抗菌肽的分子结构昆虫天然抗菌肽包括两种主要类型：线性和环状肽。
其中，线性肽由氨基酸单元组成，而环状肽则是通过一个或多个脯氨酸残基的内酯化而形成的环状结构。
线性肽和环状肽都是由20-50个氨基酸残基组成，这些残基的序列和长度可以不同。
昆虫天然抗菌肽的丰度也因昆虫种类而异。
例如，蚂蚁体内的抗菌肽丰度要比蝗虫体内的要高。
二、昆虫天然抗菌肽的抗菌机理昆虫天然抗菌肽具有抗菌活性，可以杀死各种类型的病原体。
它的抗菌机理体现在以下几个方面：（一）破坏细胞膜昆虫天然抗菌肽可以与细菌表面的膜脂层相互作用，导致细菌细胞膜的破坏或变形。
这种作用机制被称为“膜溶解作用”，其效果类似于使用碱性溶液清洗细菌细胞。
（二）进入细胞内部破坏昆虫天然抗菌肽不仅可以与细胞膜相互作用，还可以穿透细胞膜进入细胞内部，直接作用于细胞的DNA和RNA。
这种作用机制被称为“靶向核酸作用”，其效果相当于使用DNA分子笼罩物抵抗细菌细胞内的DNA损伤。
（三）调节免疫反应昆虫天然抗菌肽可以与人类和动物的免疫细胞相互作用，增强免疫细胞的抗菌能力。
它可以促进巨噬细胞和T细胞的生成，从而增强人体的抗病能力。
它还可以作为一种免疫调节剂，促进人体免疫系统的平衡。
三、昆虫天然抗菌肽在医学方面的应用由于昆虫天然抗菌肽具有广泛的活性谱和极高的抗菌效果，因此在医学领域中应用前景广阔。
一些具体的应用包括：（一）治疗感染昆虫天然抗菌肽可以作为一种新型的抗生素来治疗感染疾病。
不同类型的抗菌肽可以结合不同的病原体，并根据它们的细胞膜成分和其他特定的生物化学特性改变其抗菌效果。
（二）开发创新的医疗器械昆虫天然抗菌肽可以在医疗器械中起到抗菌作用。
论抗癌药用昆虫研究进展
论抗癌药用昆虫研究进展作者：癌症严重威胁人类的生命，科学家们不断地研究探索抑癌抗瘤的方法。
早在几千年前，我国就有用昆虫治疗肿瘤的案例。
近些年来由于研究手段的深入和改进，我国研究人员发现一部分药用昆虫对恶性肿瘤的生长和增殖有明显的抑制作用。
文章即对研究较热的几种抗癌药用昆虫的抗癌机理进行简要的介绍，为药用昆虫成功地应用于抗癌治癌领域奠定理论基础。
药用昆虫抗癌治癌近年来，随着抗肿瘤药物和其他治疗技术的研究逐渐深入，人们发现抗癌药用昆虫具有综合调理功能、毒副作用少等优点，是抗癌治癌的重要手段之一。
因此，国内外很多学者都致力于抗癌药用昆虫的药理学研究中，并且有一些种类已被开发运用于药物疗法或作为其他疗法的辅助药物（见表1）。
现将几种主要的抗肿瘤药用昆虫的抗癌作用研究进展作一介绍。
表1 几种主要的抗癌药用昆虫（略）1.1 芫菁类芫菁类是鞘翅目芫菁科的昆虫，入药的主要是南方大斑蝥Mylabris phalerata Pallas和黄黑小斑蝥Mylabris cichorii Linnaeus等种类的干燥体。
临床上用于抗肿瘤的芫菁类药物的主要成分是斑蝥素和斑蝥素衍生物。
它们对白血病、肝癌、胆囊癌、肺癌、食道癌、胃癌、乳腺癌及子宫颈癌细胞都具有一定的抑制作用。
1.1.1 斑蝥素斑蝥素是一种半帖烯毒素，可通过活体取毒或试剂提取法从虫体提取以及人工合成的方法获得。
最早的研究认为斑蝥素的抗肿瘤作用首先是抑制癌细胞RNA 和DNA合成，继而影响蛋白质的合成，最终抑制癌细胞的分裂。
史清华等［1］认为斑蝥素对比于其他抗癌药物可以更好地刺激骨髓的活性，从而提高了生物体自身的免疫力。
近年来，人们对斑蝥素抗肿瘤作用的研究更加深入。
2000年孙震晓等［2］发现斑蝥素可通过作用于细胞周期的M期从而诱导人红白血病K562细胞的凋亡，张卫东等［3］则通过实验观察得出斑蝥素可相对特异性地引起肺癌A549细胞周期阻滞的结论。
另外，何太平等［4］认为斑蝥素可抑制卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭、运动和粘附能力。
昆虫抗菌蛋白的研究进展
昆虫抗菌蛋白的研究进展第8卷1999年第3期9月河南医学研究HENANMED眦AllRES]-ARCH昆虫抗菌蛋白的研究进展Theprogressof~lildiesoilinsectantilmeterialproteins齐静姣综述(洛阳医学高等专科学校寄生虫学教研室洛阳471(]O3)昆虫的种类繁多约儿百万种,为适应各种不同的生态环境,建立了自己独特的防御体系,抗菌蛋白就是其中的关键成分=抗菌蛋白是昆虫血淋巴中的一类生物活性肽.具有可诱导性,有抗细菌,病毒,真菌,原虫及肿瘤细胞等作用,应用前景广阔t.目前对昆虫抗菌蛋白的研究已成为一些实验室的目标, 本文扼要地从抗菌蛋白的诱导,性质,分子结构抗菌机制方面的研究进展作综述.1昆虫抗菌蛋白的诱导昆虫体内抗菌蛋白的产生或合成,是外界因素诱导作用下发生的生物鼓应厩可用细菌直接感染诱导,也可用一些物理或化学因素诱导,例如超声波,射线,生理盐水,聚肌胞核苷(polyl:C)等.我国科学家用超声波处理家蚕(Bombyxmoil),蓖麻蚕(Philosamaacynthiafieina)或柞蚕(AIithe’l’aeap哪),或直接用大肠杆菌(Esd~richiacoil)注射,均可诱导这些昆虫产生抗菌物质.实验结果表明,同一种昆虫经不同诱导源处理后形成相同的抗菌物质.龚琪等l用帅c0,射线,活的太肠杆菌盟热灭活的金黄色葡萄球菌(Staphylococe~umus),绿脓杆菌(Pseu—domonasaenl出0sa)和生理盐水作诱导源,诱导美洲太蠊(Peri—plm~etaamericana)的结果表明,不同诱导源诱导产生的抗菌物质的活性太小有所不同,抗菌特性上也有一些差异.刘玉滨等0 用小白鼠肝癌细胞,大肠杆菌或巨大芽胞杆菌诱导柞蚕,蓖麻蚕等昆虫,均获得抗菌蛋白.除以上昆虫外,在太头金蝇(chn帅amace】ala)引,家蝇(Muse~domestica).5J,麻蝇(s盯一0p}诅gaP盯嗜m),果蝇(DI∞叩hmelenogaster),蜜蜂(Ap mellifera)[及粉蚜(z!【I10lah劬岫)等昆虫中都诱导出抗菌蛋白由此可见,在外界诱导源的刺激下产生抗菌蛋白是昆虫个共同的普遍特性,但昆虫对诱导源不能区分,抗菌蛋白是非专一性的免疫应答产物,非常相似于高等生物体内的某些生物活性因子,例如干扰素,白细胞开索2等.因此,昆虫抗菌蛋白的研究正引起人们极大的兴趣:2昆虫抗菌蛋白的性质近年来的一些研究结果表明抗菌蛋白具有广谱的抗菌作用黄自然等发现柞蚕抗菌肽D对草绿色链球菌,乙型溶血链球菌,金黄色葡萄球菌等有抑制作用.龚琪等观察到美洲大赫产生的抗菌物质对致病性太肠杆菌,伤寒杆菌,绿脓杆菌,痢疾杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草杆菌,变形杆菌,灵杆菌等都有抑菌效果绿蝇经诱导产生的抗菌物质也对革兰氏阳性菌和肼280Sel~eroberl999性菌有抑制作用.戴祝英等用家蚕抗菌肽对菖蓿Y纹夜蛾核型多角体病毒进行作用,发现抗菌肽在不同程度上抑制病毒多角体的形成_I.昆虫的抗菌蛋白不仅有抗细菌,病毒的作用,而且还能抗原虫和癌细胞.日本东京大学的名取俊二教授从杯尾别麻蝇幼虫中分离到两种抗菌肽,能促进小鼠巨噬细胞及异型棱白细胞对癌细胞的攻击作用,叉能使细胞产生干扰索, 井使肿瘤坏死园子活化张双全等1]用透射和扫描电子显微镜及激光共聚焦显微断层图像分析观察到家登抗菌肽对K562 (人髓样白血病)细胞有明显的杀伤作用.黄自然等观察到柞蚕免疫血淋巴对鼻咽癌细胞株的细胞膜有破坏作用Ja)aaes 等…从天蚕中分离到一种全能肽(Ve~epepfide),对多种细菌,病毒,原虫及癌细胞均有很强的杀伤作用.可见,上述结果对昆虫抗菌蛋白的进步研究,将会起到积极推动的作用.3抗菌蛋白的分子结构抗菌蛋白是昆虫血淋巴中的类生物活性肤.从目前已确定一级结构的二十几种抗菌肽来看,它们有不少相似之处. 肽的端半分子富含亲水的氨基酸残基,特别是碱性氨基酸如赖氨酸,精氨酸,而C端则含较多的疏水残基,末端都是酰胺化.最早分离纯化的抗菌肽是美国天蚕索(ce唧-玛).所有的∞c兀,I坞均为3l～39个氨基酸残基组成,不含半胱氨酸,有强碱性的N端区域,C端为疏水段,有两个a螺旋,两螺旋阃有甘氨酸和哺氨酸形成的铰链区域.棕尾别麻蝇经诱导产生的抗菌蛋白一肉毒索I,是由三种结掏相同的蛋白分子(肉毒索T,JI:)组成的混合物.这些蛋白由39个氨基酸残基组成,只有2～3个残基的差异.这些分子氨基末端富含亲水的氨基酸残基,羧基末端含疏水的氨基酸残基.用二维棱磁共振光谱研究肉毒素I溶液掏型,表明它有两个亲水脂的n螺旋,对抗菌活性的表达十分重要,两螺旋同也有一个铰链区域.Bulet 等J也从鞘翅目昆虫中得到结构相似的三种高教抑菌的抗菌肽pedeA,B,C.其中pedeA由74个氨基酸组成,富含甘氨酸,具有抗革兰氏阴性菌的活性;peptideB和C有43个氨基酸残基,含6个半胱氨酸,这两种肽对革兰氏阳性菌有抑制作用. 从已测知的抗菌蛋白的一级结构中看出,抗菌蛋白具有疏水性和亲水性,而且亲水性的氨基酸残基在昆虫生理环境下往往带电荷这些多肽分子之间的氨基酸残基变化小,保守性较强.说明昆虫在生物进化过程中遗传的稳定性,其免疫防卫系统中抗菌物质的生物合成由一些古老的基因所控制.Sceiner等15用ch0u—Famlmn方法对cecropinA,B的一级结构进行了第3期昆虫抗苗蛋白的研究进展理论计算.发现cecmpinA的1—11残基有很强的形成螺旋倾向:并摸索出在15%六氟异丙醇环境F,利用二维核磁技术获得它的’HN’~/IR谱,用Nilges等的动力学摸拟遇火方法进行计算,得到了ce~ropinA的三维结构蛋白质的功能主要决定它的高级结构因此,对抗菌蛋白的高级结构还有待进步深研究4抗菌蛋白的抗菌机制BonLan等3从天蚕脂肪体内分离到mRNA,反转录后得到eDNA.再经表达后得到抗菌肽前体.Se-RokLee等为SapeeinB几乎全部在脂肪水脂n螺旋结构,在细胞膜上形成孔道,破坏晦膜,然后再改变整个细胞膜.总之.抗菌蛋白丹lf首先在细菌质膜上形成离子通道,使细胞内K大量外渗,破坏膜势,ATP台成急剧下降,细胞内物质流失,以致细胞死亡一端的两性螺旋是裂解细菌的主要部分:c末端的酰胺化对于抗菌蛋白的广谱抗菌有重要作用.5抗菌蛋白的研究展望昆虫抗苗蛋白具有分子量小,热稳定,水溶性好,抗菌谱,及材料丰富等优点.更为重要的是抗菌蛋白对真核细胞几乎段有作用,仅仅作用于原梭细胞和发生病变的真棱细内,戴祝英等对抗菌肽作用于肿瘤细胞和病毒的机理进行了,泛研究并取得可喜结果韩献萍等发现柞蚕抗茁肽对官颈癌细胞和阴道毛滴虫有明显的杀伤作用:张双全等”观察到家蚕抗菌肽CM4对培养的K562(人髓样白血病细胞)有很强的杀伤作用昆虫是很多人类疾病的传播媒介,其传播疾病中的环节是复杂的.关于昆虫及虫媒病已有大量研究,但通过昆虫免疫学知识来控制这些疾病的工作刚开始起步抗菌肽可有效地杀灭人体寄生虫,如疟原虫,锥虫利什曼原虫.在对杀采蝇的研究中,彤成一个新思维.即将各种传播人娄传染病的昆虫通过转基因构建一个新品系,对上述寄生虫有抗性.此中断传播途径.围此,对昆虫抗菌蛋白的研究不仅对生物体乃至整个生物界的防御体系和机制有了新的从识.而{]l示出昆虫抗菌蛋白令人瞩目的应用前景和潜在的开发价值参考文献lJ哪嘴』Llcd:Ambullet?鼬‰-19~;10:82龚琪.孟阳春.周洪福不同诱导豫诱导龚洲太鳙血琳巴抗菌聊质舯研究中国媒舟生转学厦控制杂志.L993;4:813刘玉滨,宗舜.扬明华几种昆虫的免疫试验研究动特学集刊, 1992;9:494王晓束,靳庆生走叠金蝇幼虫免疫系统对丘脑杆菌诱导的应答研究昆虫知识.1鲫f:勰:405f远程,刘伟.扬峰,等.家蝇血淋巴的提取厦抗苗物质的诱导微生翱,1992拙:4396№wu且~otiS|Ⅷoonthree~fibaetefiolo把Lnsfromtheeult~n~’diam【IHISPe_4,arIemb~,oniccellline目p}1a,腼∞a;∞:I71127KP,mb订c,Itultra~Dthe~~mpin【0叫8inI)嘴Pl|il,o0叫dgeeluste~invvin山erp(峨to【帅f~4BO』,1990~9:2I78C~,tlMe~eL,.IB0l曲.manddl—tiza【mnf珊mba.棚P如ink目(A9ma)』Biad~m,I990;187:3819BluetP,nchS.肺Ⅱ口DqJ—L..1帅lml呷r丌I口…d舯目in一宴ectofanovelir:d~eibLeanfibaetori~lpe~ideⅢdun帅hin—sectd&rainf~nily』B/dC,1991;2:2452t~】f】郭玉梅,戴祝英昆虫抗荫肚的研究进展生物工程进展,】996;16: 24_l张般全,贾红武,戴祝英抗苗肚CN4抗K562螬f细胞的超微结构研究生物化学与生物物理进展,1997;:159『2胡孟兜,赵学忠,屈贤铭抗苗肚的分子生物学研究进展.生抽工程进展,1997;1714L3Ⅱ蛐ItG,l”~geI,曲Ⅱs帅nGH,Cdl一Lm1儿mib’in~empia:amodelsyst~htproteinsr』B~era,1991;20l:23L45e-P,okLee,51m~~hlmNllraaa,s}ILⅡulN~oriMD【e口darclr~ningofeDNAforsapeeinB,a口tproteinofS},anditsdete~inlmvb月”,1995;36s:48515Stei~哪D,Men~filelelaRBBlrLd吨andt【0玎eeer~inco—e[标签:快照]。
昆虫抗菌肽的研究进展
论文题目：昆虫抗菌肽的研究进展摘要：昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽，它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性，是昆虫能够抵御自然界中有害微生物侵染的重要因素。
近年来，随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入，其在医药领域的研究越来越引起人们的关注。
本文就昆虫抗菌肽的分类、生物功能、基因工程研究进展以及在医药领域的应用等作一综述。
关键词：昆虫；抗菌肽；基因研究；Title：Research progress of insect antimicrobial peptidesAbstract: Insect antimicrobial peptides are a class of immune response of the small molecule peptide, it has a heat-stable, broad spectrum anti-bacterial, non-immunogenic, and other unique characteristics of the mechanism is able to absorb the nature of insects harmful to an important factor in microbial infection. In recent years, with the role of the mechanism and function of antimicrobial peptides in-depth study, and its research in the field of medicine a growing cause for concern. In this paper, the classification of insect antimicrobial peptides, biological functions, genetic engineering research as well as the application of the field of medicine are reviewed.Keywords: Insects; Cecropin; gene research;目录摘要 (I)Abstract (II)绪论 (1)1 抗菌肽研究的历史 (1)2 抗菌肽的结构和性质 (1)2.1含有α2螺旋结构的线性抗菌肽 (1)2.2含有2～3 个二硫键的β2折叠抗菌肽 (1)2.3富含1～2 种氨基酸残基的抗菌肽 (2)2.4具有环状结构的抗菌肽 (2)3昆虫抗菌肽的分类 (2)4抗菌肽的作用机制 (2)4. 1胞膜攻击作用 (2)4. 2诱导细胞凋亡 (2)4. 3抗菌肽的抑制细胞呼吸作用学说 (3)4. 4抑制细胞外膜蛋白的合成 (3)4. 5 抑制细胞壁的形成 (3)5昆虫抗菌肽的基因工程 (3)6昆虫抗菌肽在医药中的应用前景 (4)7展望 (4)参考文献 (6)致谢 ...................................................................................................... 错误！未定义书签。
抗菌肽的抗肿瘤作用
酶需要通过结合于核骨架上而被激活，所以抗菌 肽也可能是通过核骨架的破坏而造成染色质 ＤＮＡ 的断裂。抗菌肽损伤核染色体的作用机制尚待进 一步研究证实。 １．５ 细胞毒性与免疫作用 抗菌肽的最初获得 是通过昆虫天然免疫获得，提示抗菌肽是调动机 体免疫功能的产物。１９９８ 年，许玉澄等［９］ 用天然 抗菌肽作用于荷瘤小鼠，连肿瘤及周围组织取下 制成病理切片，发现给药组正常机体与癌瘤接触 区有大量结缔组织增生现象，形成区域化结构， 有抑制癌细胞扩散的趋势。同时，肿瘤周围有非 常明显的炎细胞，如淋巴细胞、单核细胞和中性 粒细胞，而阴性对照组未观察到这一现象。在鳞 状细胞癌病人的唾液中及与肿瘤组织相毗邻的朗 氏细胞内发现了防御素［１０］，这些可能与肿瘤免疫 有关。Ｃｈｅｎ 等［１１］ 提出鲎抗菌肽是通过激活经典 的补体途径损害胞膜导致肿瘤细胞死亡的。因 此，有学者认为抗菌肽不仅能接触性抑杀肿瘤， 还能调动机体的免疫系统对抗癌细胞的侵入。 １．６ 诱导细胞凋亡 细胞骨架及核骨架的紊乱是 细胞凋亡的特征之一。Ｍａｉ 等 ［１２］ 以 融 合 抗 菌 肽 ＤＰ１ 局部注射小鼠实体瘤 ＭＣＡ２０５，观察到瘤体缩 小，肿瘤细胞发生凋亡。Ｌｉ 等［１３］ 发现，鲎抗菌肽 对人肝癌细胞作用中，能下调与细胞凋亡密切相 关的突变型 Ｐ５３ 蛋白及 ｃ－ ｍｙｃ ｍＲＮＡ。Ｃｈｅｎ 等［５］ 用鲎抗菌肽作用于小鼠前列腺癌细胞株 ＴＳＵ，发 现凋亡相关蛋白，如胱天蛋白酶－ ９、胱天蛋白 酶－ ８、胱天蛋白酶－ ３ 及 Ｆａｓ 配体表达升高，提示 抗菌肽可以通过线粒体途径和 Ｆａｓ 依赖受体途径 诱导肿瘤细胞凋亡。 １．７ 抑 制 蛋 白 质 及 ｍＲＮＡ 合 成 Ｌｉ 等 ［１３］ 研究 鲎抗菌肽对人肝癌细胞周期调节作用发现，它可 以阻止细 胞 于 Ｇ０ ／ Ｇ１ 期 ，上 调 Ｐ１６ 蛋 白 和 Ｐ２１ ｍＲＮＡ，下调突变型 Ｐ５３ 蛋白，细胞周期蛋白 Ｄ１ 和 ＣＤＫ４ 蛋白及 ｃ－ ｍｙｃ ｍＲＮＡ。抗菌肽如何通过这 一机制抑杀肿瘤细胞有待于进一步研究得出结论。
昆虫抗菌肽的作用机制与应用研究进展
昆虫抗菌肽的作用机制与应用研究进展Osama A O Elhag;宋旗;郑龙玉;喻子牛;张吉斌【摘要】抗菌肽是进化上保守的天然免疫应答成分并且在所有生物体中存在.其抗菌谱宽,对病原性的病毒、细菌、寄生虫和真菌等病原微生物都具有拮抗活性.来源于昆虫的抗菌肽通常是带阳离子的,一般少于100个氨基酸.昆虫抗菌肽的作用机制是通过作用其多样性的靶标来实现的,包括破坏细胞膜、作用细胞质成分和干扰代谢等,但部分昆虫抗菌肽的抗菌机制仍未完全明确,深入了解抗菌肽作用机制将推进昆虫抗菌肽药物开发.对已发现的昆虫抗菌肽的作用机制及其应用进行了综述.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2014(031)003【总页数】4页(P1-4)【关键词】昆虫抗菌肽;天然免疫;应用;作用机制【作者】Osama A O Elhag;宋旗;郑龙玉;喻子牛;张吉斌【作者单位】华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心,湖北武汉430070;Department of Biotechnology-Sc.& Tech-Omdurman Islamic University,Sudan;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心,湖北武汉430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心,湖北武汉430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心,湖北武汉430070;华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心,湖北武汉430070【正文语种】中文【中图分类】Q516;Q966昆虫是动物世界种类数目最庞大的一类。
目前，除了极地和深海，昆虫能在大多数的生物生境被发现。
超过一百万的昆虫物种已被鉴定，且约有同等数量的种类仍有待确定。
昆虫的抵抗病原体能力必然有助于其大量增殖和多样性。
昆虫的免疫系统具有一些共同的特点，没有发现类似于高等动物中的特异性免疫系统。
抗菌肽的抗肿瘤研究进展
抗菌肽的抗肿瘤研究进展抗菌肽的抗肿瘤研究进展药学与临床研究PharmaceuticatandclinicaIResearch李正洋,童明,姚文兵中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009摘要抗茵~k(AMPs)是具有抗茵活性的一类多肽,广泛存在于生物界.抗菌肽对肿瘤细胞有广谱杀伤作用.却对正常的哺乳动物细胞没有毒性作用.本文概述抗菌肽杀伤肿瘤细胞的多种作用机制,并探讨了将其开发为新型抗肿瘤药物的可行性.关键词抗茵肽;抗肿瘤活性;作用机制;应用前景中图分类号R979.1文献标志码A文章编号1673—7806(2010)04-377-04自从1974年瑞典科学家Boman[-2]等人发现第一种抗菌肽cecropin以来,科学家相继在不同生物体内发现了多种抗菌肽.抗菌肽广泛存在于从细菌到哺乳动物的生物体内,是天然免疫防御系统的一个重要的组成部分,是动物体液免疫系统中具有广谱杀菌,抑病毒,抑杀肿瘤细胞等作用的一类活性多肽.被称为"第二防御体系".迄今为止,国内外文献报道大约有2000多种抗菌肽被分离,鉴定出来,而以天然抗菌肽作模板进行人工合成的模拟肽已达数千种.由于抗菌肽具有理化性质稳定,抗菌谱广,不易产生耐药性等特点,早期对抗菌肽的研究集中于将其开发成为新一代的抗菌药物.随着对抗菌肽研究的深入,抗菌肽的抗肿瘤活性逐渐引起科研工作者的关注.抗菌肽由于其特殊的抗肿瘤机制,不易产生耐药性,以及对哺乳动物正常细胞毒性较低等特点,已经成为抗肿瘤药物研发的热点之一.1抗菌肽的抗肿瘤作用机制Claudia~】等发现—defensin不仅在中性粒细胞中表达.在肾特异性上皮细胞中也有表达.因此可能参与了肾肿瘤发生的病理过程,并通过影响肾肿瘤细胞的增殖和免疫识别,调节肾肿瘤的进展.Chen.1yre等报道一种来自鱼类的抗菌肽tilapiahepcidinTH2—3对人纤维肉瘤细胞HT1080的增殖有呈浓度依赖性的抑制作用,经TH2—3处理48～96小时,c—iun mRNA的表达明显下调;此外,ChenJY等还证实抗菌肽Epinecidin一1抑制人白血病细胞的增殖,诱导细胞凋亡:赵瑞君[61等报道家蝇成虫抗菌肽对肿瘤细胞109,K562,Daudi及T24的有效杀伤力都在85%以上:魏晓丽171等报道鼠13一de—fensin能够抑制宫颈癌移植瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存时间.这些研究表明,抗菌肽所致某些基因的表达与肿瘤的发生有一定的关联,且大多数研究结果表明,抗菌肽对肿瘤作者简介通讯作者收稿日期李正洋,男,硕士生E-mail:******************姚文兵,男,教授,研究方向:生物技术与生物制药Tel:025—83271218E—*****************.cn2010-05—12修回日期2010—06—03的发生,发展有显着的抑制作用.具有抗肿瘤活性的抗菌肽已经成为开发对正常细胞毒性低,不易产生耐药性的新型抗肿瘤药物的研究热点之一(见表1).与其杀菌机制相比较,抗菌肽抑杀肿瘤细胞的机制更为复杂.目前,比较认同的机制主要有以下几种:1.1细胞膜差别决定抗菌肽对肿瘤细胞的选择性抗菌肽对肿瘤细胞的选择性作用可能是由于肿瘤细胞与正常细胞的一系列根本差别.肿瘤细胞过度表达磷脂酰丝氨酸[8-9],硫酸乙酰肝素㈣等阴离子物质,使细胞膜带负电.然而,正常哺乳动物细胞膜表面主要由中性的磷脂和固醇类物质组成…1.真核细胞膜的主要成分胆固醇,被推测可以通过改变膜的流动性保护其不受抗菌肽的细胞溶解作用.研究发现,当细胞膜中胆固醇含量增加时,插入细胞膜的抗菌肽cecropin及其类似物则相应减少.除此以外,一些乳腺和前列腺癌细胞的富含胆固醇的脂筏水平提高,增强细胞对抗菌肽溶菌活性的抵抗能力n3】.肿瘤细胞和正常细胞的另外一个区别源于肿瘤细胞相对于正常细胞所含的微绒毛数目.这些微绒毛促使肿瘤细胞与更多数目的抗菌肽接触.由于结构蛋白发生变化,与正常细胞相比,肿瘤细胞的微绒毛形态更不规则.这些变化可能会影响受体的易接受性,细胞粘附性,以及肿瘤细胞与环境之间的交流.因此,细胞膜组成,流动性,以及细胞表面积的差别对于抗菌肽特异性识别肿瘤细胞是十分关键的.1.2抗菌肽对肿瘤细胞的膜裂解作用与抗菌肽裂解细菌细胞壁方式类似,抗菌肽可能通过选择性裂解肿瘤细胞膜实现其抗肿瘤活性.一项关于mag. ainin及其合成类似物的杀伤造血细胞及固态肿瘤细胞的研究,最先证实了此种膜裂解的作用机制.此项研究的一个关键发现在于,横穿细胞膜的负离子梯度对于膜裂解以及细胞毒性是决定性的.另外,将magainin的L一氨基酸替换为D一氨基酸,其抗肿瘤活性保留,推测有一种受体介导的作用机制.扫描电子显微镜观察显示,抗菌肽magaininⅡ通过介导膀胱癌细胞的破裂直接导致肿瘤细胞的溶解.而对成纤维细胞无明显杀伤作用[51(见图1).377l墨I妻i0-:0一表1部分具有抗肿瘤活性的抗菌肽图1扫描电子显微镜观察magaininll对膀胱癌细胞和成纤维细胞的作用(A)未处理的膀胱癌细胞486P;(B)膀胱癌细胞486P经50mM magaininII处理,细胞膜破裂;(C)未处理的成纤维细胞;(D)成纤雏细胞经50raMmagaininII处理,细胞膜无明显损伤通过对其他抗菌肽的研究,包括melittin,cecropin,roc—tonin等,也得出类似的结论.通过研究含有D一和L一氨基酸的抗菌肽对不同肿瘤细胞的杀伤作用,发现在细胞膜发生紊乱后.这些肿瘤细胞逐渐死亡.抗菌肽的膜裂解作用可能通过两种机制,分别是"毡毯"模型和"桶板"模型-q.根据"毡毯"模型,抗菌肽以类似毡毯的结构平行排列在带负离子的细胞膜表面,待抗菌肽达到I界浓度,便会穿透细胞膜.而根据"桶板"模型,抗菌肽在细胞膜表面通过疏水作用聚集,形成跨膜通道或者孔隙.抗菌肽的膜裂解作用不仅局限于细胞膜,而且同样可以渗透进入线粒体,使其发生膨胀,释放细胞色素C,诱导细胞凋亡.损伤的线粒体释放细胞色素C同样诱导Apaf_1寡聚化,激活caspase一9,使pro—caspase3向caspase一3转化.近期研究发现,抗菌肽buforinⅡb(RAGLQFPVG[RLLR]3),是一种组蛋白H2A衍生化多肽,对60种人肿瘤细胞表现出选择性的细胞毒性.BuforinⅡb穿过肿瘤细胞细胞膜,并且不会损伤细胞膜,而通过激活caspase一9和释放细胞色素C进入细胞液.诱导依赖于线粒体的细胞凋亡.尽管如此,buforinⅡb介导的细胞凋亡具体作用机制仍然不清楚㈣,而且,细胞凋亡的线粒体途径与死亡受体途径相关.比如,抗菌肽tachyplesin结合到整联蛋白RGDhomingdomain,通过两种机制诱导细胞凋亡.在破坏线粒体膜的同时,促进死亡受体途径的作用因子的表达,包括Fas配体,FADD和caspase一8t2ol.1.3细胞膜的糖基化作用当一个细胞转化为肿瘤细胞时,膜相关的糖蛋白和糖脂的糖基化会发生变化.这可能是抗菌肽对肿瘤细胞发挥细胞378毒性的关键过程.因此研究分子水平的这些重要变化是非常有意义的.糖蛋白的这些变化主要是由于部分糖基转移酶被激活,催化糖蛋白的合成.此外,催化降解过程的糖苷酶的过量表达也是导致这些变化的原因12".N一乙酰萄糖胺(GlcNAc)存在于各种糖蛋白,催化其形成过程的N一乙酰葡萄糖氨基转移酶Ⅲ(GnT一Ⅲ)可能与肿瘤发生过程有关.过量表达GnT一Ⅲ可引起表面糖蛋白及其他特殊蛋白质的GlcNAc残基含量增加,进而导致一系列与肿瘤扩展相关的细胞过程,比如,对蛋白水解作用敏感性的变化;粘附能力增加,帮助肿瘤细胞转移:对免疫系统的杀伤细胞抵抗能力增强;信号途径的损伤等.此外,研究发现,肿瘤细胞含有更大的N—glycans分支㈤.有趣的是,糖基化作用同样增强了抗菌肽drosocin的活性.因此,阳离子抗菌肽与肿瘤细胞的吸附作用以及接下来的穿透细胞膜的过程很可能至少部分依赖于肿瘤细胞细胞膜蛋白质的糖基化作用.1,4其它作用机制除了与膜相关的作用机制以外,越来越多的研究表明,抗菌肽还通过其他的作用机制表现其抗肿瘤活性.比如, melittin(GIGAVLKVLTFGLPALISWIKRKRQQ)是一个含有26 个氨基酸的抗菌肽,特异性地杀伤过度表达肿瘤ras基因的细胞.Melittin通过过度激活肿瘤ras基因转化细胞中的磷脂酶A(PIA2),选择性的杀死细胞.alloferons是来源于昆虫富含组氨酸的抗菌肽,具有类似于细胞因子的调节作用.体外实验中,用alloferon1(HGVS—GHG0HGvHG)和alloferon2(GVSGHGOHGVHG)合成的多肽可促进淋巴细胞的活性;而在体内试验中,此合成多肽可诱导小鼠体内干扰素(IFN)的表达.2具有抗肿瘤的新型抗菌肽的研发由于多肽药物的药代动力学特征,抗菌肽作为抗肿瘤药物的研究开发受到了阻碍.蛋白水解作用限制了药物在体内的保留时间.降低了其I:I服生物利用度.此外,抗菌肽对人体有潜在的毒性作用.目前,许多研究正在致力于解决这些问题.2.1化学修饰抗菌肽将L一氨基酸部分或者完全替换为D一氨基酸,以及在不影响药物抗肿瘤活性的支链引入非天然氨基酸,可以增强抗菌肽对蛋白水解作用的抵抗能力.比如,对小鼠腹腔注射抗菌肽magainin2以及all～D一氨基酸类似物MSI一238;两种药物都对P388非白血性白血病,S18O腹水癌和自发性卵巢癌有抑制作用.与magainin相比,MSI一238体外活性是其10 倍.而抑制小鼠肿瘤细胞的体内活性是其2倍.2-2抗菌肽偶联回归蛋白抗菌肽可通过载体介导的运输方式进入肿瘤细胞,克服抗菌肽药物的药代动力学缺陷及其潜在的毒性作用.利用与回归蛋白偶联,抗菌肽也可实现减低毒性的目的.由于回归蛋白对体内的特异性位点有选择性,因此,对于治疗性和诊断性药物是一种适宜的载体.过去的研究表明,多种脉管系统回归蛋白与抗肿瘤药物偶联,可以抑制肿瘤的血管生成,减轻药物对其他器官的副作用.但是,由于不能载运药物进入肿瘤细胞,肿瘤回归多肽的作用受到了抑制.为了克服这个缺陷,目前已经开始研究包含具有穿透细胞功能的抗菌肽序列和回归多肽序列的嵌合体多肽,比如,包含蛋白转导结构域,整联蛋白受体以及可以特异性识别肿瘤血管和红细胞间质中凝结血浆蛋白的序列为CREKA的线性多肽[2627j.在一项近期研究中,将阳离子抗菌肽pV ec(LLIILRRRIRKQA—HAHSK)与回归多肽CREKA以及DNA烷基化因子Cbl (chorambucil)偶联.在体外实验中,此偶联多肽Cbl—CRE. KA—pV ec将MDA—MB一231细胞扩增的百分比从100%降至约40%.这项研究表明,CREKA—pVec可以作为一个有效的载体,将DNA烷基化因子靶向性转运进入肿瘤细胞∞.3展望目前,由于抗肿瘤药物不仅针对肿瘤细胞.而是所有快速增殖的细胞,现有的抗肿瘤治疗存在严重的副作用.然而,某些抗菌肽表现出对肿瘤细胞特异性的杀伤作用,被人们寄予厚望,并且相关的研究已经取得了一定的进展.但是,在将抗菌肽开发成为新型抗肿瘤药物的过程中,仍然需要深人研究引发抗菌肽与肿瘤细胞特异性结合的肿瘤细胞的自身特征以及两者之间相互作用的机制,尤其是与结构,动力学,形态学,膜破裂机制相关的生物物理学研究.抗菌肽进入抗肿瘤治疗的临床应用需要其具有对肿瘤细胞的特异性杀伤作用和在血清中的稳定性.许多表现出杀伤肿瘤细胞作用的抗菌肽由于生物利用度较差,潜在的毒性作用或工艺成本太高,难以开发成为临床抗肿瘤药物.近期研究表明,通过化学修饰的方法或者将抗菌肽与回归蛋白相偶联,可以提高抗菌肽的生物利用度,降低毒性.随着研究的进一步深入,抗菌肽将为抗肿瘤药物的研发开辟出一个新的领域,为临床肿瘤治疗提供更安全有效的新方案.参考文献[1】JenssenH,HamillP,HancockRE,eta1.Peptideantimicru- bialagents叨.ClinMicrobiolRev,2006,19(3):491—511.【2】RathinakumarR,WMkenhorstWF,WimleyWC,eta1.Broad—spectrumantimicrobialpeptidesbyrationalcombinatorialde- signandhigh—throughputscreening:theimportanceofinter—facialactivitym.JAmChemSoc,2009,131(22):7609—17.[3】GambichlerT,SkryganM,HuynJ,eta1.PatternofmRNA expressionofB-defensinsinbasalcellcarcinoma『JI.BMCPharm～aceu…tic…a,an—d驾ClinicalRe黧sear;ch恝fl巳!!】疆cancer,2006,6(8):163.[4JChenJY,LinWJ,LinTL.Afishantimicrobialpeptide,tilapia hepcidinTH2—3,showspotentantitumoractivityagainsthu- manfibrosarcomacells『J].Peptides,2009,30(9):1636—42.[5]ChenJY,LinWJ,WuJL,eta1.Epinecidin一1'peptideinduces aDoptosiswhichenhancesantitumoreffectsinhumanleukemiaU937cells[J1.Peptides,2009,30(12):2365-73.[6]赵瑞君,张庆华,李飞栋.家蝇成虫抗菌肽对4种肿瘤细胞的作用观察[J].中国媒介生物学及控制杂志,2007,18(1):17-9.[7】魏晓丽,丁剑冰,蒋忠华,等.鼠p一防御素2抗宫颈癌的实验研究fJ1.细胞与分子免疫学杂志,2009,25(12):1186—8.[8】UtsugiT,SchroitAJ,ConnorJ,eta1.Elevatedexpressionof phosphatidylserineintheouterleafletofhumantumorcells andrecognitionbyactivatedhumanbloodmonoeytes[J1.Con—cerRes,1991,51(11):3062-6.【9】DobrzynskaJ,Szachowicz-PetelskaB,Sulkowskis,etaLChangesin electricchargeandphospholipidscompositioninhumancolorectal cancerceilsMolCeUBioche~2005,276(1-2):l13--9.【10]KleeffLIshiwataT,KumbasarA,eta1.Thecell-surfacehep- araBsulfateproteoglyeanregulatesgrowthfactoractionin pancreaticcarcinomacellsandisoverexpressedinhuman pancreaticcancerfJ].JClinInvest,1998,102(9):1662—73.【11】HoskinDW,RamamoorthyA.Studiesonanticanceractivities ofantimicrobialpeptides[J】.BiochimBiophysAeta,2008,1778(2):357—75.[12】SimonsK,IkonenE.Howcellshandlecholesterol[JJ.Science, 2000,290(5497):1721—6.【13]LiYC,ParkSK,Y eCW,eta1.Elevatedlevelsofcholesterol richlipidraftsincancercellsarecorrelatedwithapoptosis sensitivityinducedbycholesteroldepletingagents[J】.AmJ Pathol,2006,168(4):1107—18.[14]ChanSC,HuiL,ChenHM.Enhancementofthecytolyticel- feetofanti-bacterialcecropinbythemicrovilliofcancercells[J】.AnticancerRes,1998,18(6A):4467-74.【15】WangKR'ZhangBZZhangeta1.Antitumoreffects,cellse—lectivityandstructure-activityrelationshipofanovelantimi- crobialpeptidepolybia-MPI[JlPeptides,2008,29(6):963--8.f16]OrenShaiY.Modeofactionoflinearamphipathiealpha-heli—calantimicrobialpeptidesBiopolymers,1998,47(6):451--63. [17】ShaiY.Mechanismofthebinding,insertion,anddestabiliza—tionofphospholipidbilayermembranesbyalpha-helicalan—timicrobialandcellnon—selectivemembrane-lyticpeptidesⅢ.BiochimBiophysAeta,1999,1462(1-2):55—70.[18]MaiJC,Mi五KimSH,eta1.Aproapoptoticpeptideforthetreat—mentofsolidtumorslJlCancerRes,2001,61(21):7709--1Z[19]LeeHS,ParkCB,KimJM,eta1.Mechanismofanticancer activityofbuforinIIh,ahistoneH2A—derivedpeptidefJ].CancerLetters,2008,271(1):47—55.f20]ChcnY,XuX,HongS,eta1.RGD-tachyplesininhibitstumorgrowth叨.CancerRes,2001,61(6):2434-8.【21]TaniguchiN,GaoCX,IharaY,eta1.Theinvolvementof bisectingN—acetylgluc0samineincancer,in:M.Aubery GlycansinCellInteractionandRecoguition:Therapeutic379抗菌肽的抗肿瘤研究进展Aspects嗍HarwoodAcodemicPublishers,Japan,2001:73—88.[22】DennisJWGranovskyMB1,6N-acetylglucosaminyhransferaseV isadeterminantofcancergrowthandmetastasi&irrj垤Aubery~d.), GlyeansincellInteractionandrecognition:therapeuticas—peers[M】.HarwoodAcademicPublishers,Jop.~2001:89--104.[23]SharmaSV.Melittinresistance:acounterselectionforrastransformation[J】.Oncogene,1992,7(2):192—201.[24]ChernyshS,KimSI,BekkerG,eta1.Antiviralandantitumor peptidesfrominsects[JJ.户rocNatlAcodSciUSA,2002,99(20):12628—32.[25】BakerMAMaloyWLZaslofetalAnticancerefficacyofmagainin2andanaloguepeptides讲CancerRes,199353(13):3052-7.[26】SimbergD,DuzaT,ParkJH,eta1.Biomimeticamplification ofnanoparticlehomingtotumorsfJ1.ProcNatlAcadSciUSA,2007,104(3):932—6.【27】Mh'eM,MyrbergH,E1一AndaloussiS,eta1.Designofatu. mothomingcellpenetratingpeptidefordrugdelivery【JJ./ntJPeptResTher,2009,5(1):11-5. EvolutionofAnticancerMechanismofAntimicrobialPeptidesLIZheng-yang,TONGYue,YAOWen—bing SchoolofLifeScienceandTechnology,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210009, ChinaABSTRACTAntimicrobialpeptides(AMPs),whichhavebeenseparatedfromagreatnumb eroforganisms,arenovelantibacterialagents.Manystudieshavedemonstratedthat,someAMPs exhibitabroadspectrumofcytotoxicactivityagainsttumorcells,butnottonormalmammalcells.Thisrevie wfocusesonrecentstudiesaboutanticancermechanismofAMPs,andtheapplicationprospectofAMPsas anticancerdrugs.KEYWORDSAntimicrobialpeptides;Anti——canceractivity;Mechanism;Applicationprospect2010年6～7月美国FDA公布的部分药物警示1关键词:长效13激动剂(LABAs)安全使用的最新要求06/I,2O1OFDA通知相关医护人员和患者.由于涉及安全问题.FDA正在要求对所有的长效13受体激动剂类药物(LABAs)制定一项风险控制计划(KEMS),并进行整类药物的标签变更.该项风险控制计划将要求包括一份经修订的专为患者编写的用药指南.以及一份用于指导医护人员正确使用LABAs的计划.上述要求是基于FDA对相关研究的分析后而做出的.这些研究显示在一些使用LABAs治疗哮喘的儿童和成人患者中可能会增加哮喘症状严重加剧的风险,并可能导致患者住院甚至死亡以下内容将会被用于提醒医护人员,以保证LABAs的安全使用:(1)单成分的LABAs应与一种哮喘控制药物(asthmacontrollermedication)联用,而不应单独使用:(2)LABAs应只能用于通过哮喘控制药物无法有效控制症状的哮喘患者的长期治疗:(3)LABAs应使用达到控制哮喘症状所需要的最短持续时间,一旦哮喘已被控制,则应尽快停用LABAs,之后患者应通过接受哮喘控制药物以进行维持治疗:(4)需要在吸入型皮质激素类药物中加用LABA的儿童和青少年患者应使用一种同时含有这两种药物的复方制剂.以保证同时接受两药的治疗FDA已确认,在需要加用LABAs的患者中.当这类药物与哮喘控制药物正确联用时,LABAs在改善哮喘症状方面的益处大于其潜在的风险,并认为上述推荐的安全措施将有助于LABAs的安全使用.2关键词:吉妥单抗(myiotarg)撤市06/21/2010美国食品药品监督管理局(FDA)提醒医生.近来的临床数据显示吉妥单抗(吉妥珠单抗奥唑米星)有新的药品安全问题.且在临床研究中其并未表现出预期的良好治疗效果吉妥单抗用于治疗急性髓细胞性白血病,于2000年5月经FDA快速审查程序批准上市,2004年由惠氏公司(现辉瑞)设计并主持了一项对其验证性的上市后临床试验.该试验设计是对比在化疗的基础上增加使用Mylotarg.验证是否能有效延长患者生命,旱些时间该试验被终止,因为没有明显的药效,且会发生更高的死亡率.FDA建议新的患者不要使用该药.正在服用的患者要遵循医生的意见,医生要提醒患者该药物的风险.以后Mylotarg如想要在美国上市必须重新提交新药临床研究申请3关键词:硫酸奎宁误用存在风险07,08,2O10FDA发布Qualaquin(quininesulfate硫酸奎宁)药品安全警告380由于持续收到患者将硫酸奎宁用于治疗夜闻的腿部抽筋而发生严重副反应的报告.而这一用法为"非说明书指定用途"(即非FDA批准的用途).因此FDA批准了一项风险管理计划(P.EMS)以提醒人们不要将药品如此使用.使用硫酸奎宁可能引起严重甚至致命的血液病变,包括由于血4,板减少而引起的严重出血,溶血性尿毒症/血栓,血小板减少性紫癜等,有时候会引起永久性肾损伤,一些患者需要住院,甚至会死亡.4关键词:Arava(来氟米特J肝损伤07/13/2010FDA对风湿性关节炎药物Arava(采氟米特)增加了严重肝损伤的黑框警告,以便提醒患者使用该药物的风险并尽量避免.在此之前FDA曾要求该药品增加黑框警告:来氟米特禁用于怀孕妇女及未采取有效避孕措施的待孕女性.5关键词:血管紧张素受体阻滞剂(ARBs)潜在癌症风险07,l5,2010最近一项与与癌症相关的临床试验荟萃分析报告提示.血管紧张素受体阻滞剂(ARBs)可能会引起癌症风险略有增高血管紧张素受体阻滞剂(ARBs)用于高血压患者或其他症状的患者.商品名包括坎地沙坦(Atacand),厄贝沙坦(Avapro),奥美沙坦(BeMc~),氯沙坦(Co~ar),缬沙坦(Diovan),替米沙坦(Mi—c~dis)和依普罗沙坦(Teveten),FDA还没有确定ARBs增加罹惠癌症的风险.该机构正在审查与此安全问题有关的信息,并会及时将新的信息提供给公众. FDA相信AREs的益处大于其潜在的风险6关键词:Cubicin(达托霉素)嗜酸细胞性肺炎风险07,29,2010FDA通知医疗保健专业人士和病人在使用icin(这托霉素)治疗过程中有可能发展成为嗜酸细胞性肺炎Cubicin是一种静脉注射的抗菌药.用于治疗严重的皮肤感染和血行性感染嗜酸细胞性肺炎是一种罕见但严重的痛,即白血细胞类型(嗜酸性粒细胞)充满了肺部.嗜酸细胞性肺炎的症状包括发烧,咳嗽,呼吸急促和呼吸困难.该病可导致随之的呼吸衰竭,并且如果没有迅速认识和合理管理.具有潜在致命性危险医疗保健专业人士应密切监察使用Cubicin治疗的病人.以防止发生嗜酸性细胞性肺炎.接受Cubicin治疗的病人如果出现新发的或恶化的发烧,咳嗽,气短或呼吸困难.应立即联系医疗保健专业人士. (由江苏省药品不良反应监测中心提供)。
细谈抗菌肽抗肿瘤作用的研究进展
细谈抗菌肽抗肿瘤作用的研究进展抗菌肽是一类具有抗菌活性的小分子肽，广泛存在于动物、植物和微生物中。
近年来，越来越多的研究表明，抗菌肽不仅能够发挥抗菌作用，还具有抗肿瘤活性。
在肿瘤治疗领域，抗菌肽的研究进展迅速，成为一个热门的研究方向。
抗菌肽通过多种途径发挥抗肿瘤作用。
首先，它们可以直接诱导肿瘤细胞的凋亡。
研究发现，一些抗菌肽能够通过破坏肿瘤细胞膜的完整性，进而导致细胞内外环境的紊乱，从而触发细胞凋亡的启动机制。
其次，抗菌肽还能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
研究表明，抗菌肽能够通过相互作用和调控特定的信号通路（如Wnt、NF-κB、MAPK等），发挥抑制肿瘤细胞增殖和迁移的作用。
此外，抗菌肽还能够调节肿瘤免疫应答，增强免疫细胞活性，提高肿瘤细胞的免疫识别和清除能力。
近年来，越来越多的研究表明，抗菌肽具有抗肿瘤活性的潜力，并且已经取得了一定的突破。
首先，研究人员发现，一些天然存在的抗菌肽，如防御素（defensin）、嗜盐菌素（bacteriocin）等，具有显著的抗肿瘤活性。
其中，防御素抑制效应最为明显，对多种肿瘤细胞系具有很强的杀伤作用。
此外，研究人员还通过改造和合成抗菌肽，进一步增强其抗肿瘤活性。
例如，改造抗菌肽的氨基酸序列，使其更容易与肿瘤细胞特异性结合；通过插入特定的模体序列或改变抗菌肽的空间结构，增强其抗肿瘤作用。
在一些实验研究中，这些改造后的抗菌肽表现出更强的肿瘤细胞的杀伤效应。
此外，研究人员还探索了将抗菌肽与传统的化疗药物或放疗联合应用，以增强肿瘤治疗效果。
研究发现，抗菌肽与化疗药物或放疗同时应用，能够相互协同作用，产生更强的抗肿瘤效应。
其中，抗菌肽可以通过增加药物或放疗的细胞内外转运，减少肿瘤细胞耐药性的形成，从而提高治疗效果。
然而，目前抗菌肽在临床应用的过程中还存在一些挑战。
一方面，抗菌肽的转化研究相对滞后，其在临床应用中还面临着药代动力学、药效学、毒理学等问题。
另一方面，抗菌肽的抗肿瘤机制和作用靶点尚不明确，需要进一步的研究深入解析。
家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562的杀伤作用
文章编号：1673-8640（2019）02-0173-03 中图分类号：R446.1 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2019.02.018家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562的杀伤作用张金花1，贺莉芳2，邓仁兵1，万启惠2（1.川北医学院附属医院检验科，四川南充 637000；2.遵义医学院寄生虫学教研室，贵州遵义 563003）摘要：目的探讨家蝇胚胎细胞抗菌肽和高三尖杉酯碱（HHT）对人髓样白血病细胞K562的抑制、杀伤作用。
方法采用脂多糖诱导家蝇胚胎细胞，提取抗菌肽。
采用磷酸盐缓冲液（PBS）配制80、160、320及640 μg/mL 4个浓度，阴性对照组仅加入PBS和培养基。
采用流式细胞术检测不同浓度抗菌肽对K562细胞周期和细胞凋亡率的影响。
用处于对数生长阶段的K562和人脐静脉血管内皮细胞制备成浓度相同的2个药物组（HHT组和抗菌肽组），不加入药物的2种细胞作为正常对照组。
采用流式细胞术检测正常对照组及2个药物组对2种细胞的有效杀伤率。
结果 4个浓度组抗菌肽均使K562的S期降低，增殖指数降低，并引起G0/G1期升高，与阴性对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。
4个浓度组K562细胞凋亡率与阴性对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。
HHT组和抗菌肽组对K562的有效杀伤率显著升高，HHT组和抗菌肽组与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。
HHT 组对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率显著高于正常对照组和抗菌肽组（P<0.05）。
结论家蝇胚胎细胞抗菌肽能有效抑制肿瘤细胞的生长，对正常人体细胞无抑制、杀伤作用。
关键词：抗菌肽；家蝇胚胎细胞；高三尖杉酯碱；人髓样白血病细胞K562；人脐静脉血管内皮细胞Inhibition of antibacterial peptide from embryonic cells of Musca domestica on human myeloid leukemia cell K562 ZHANG Jinhua1，HE Lifang2，DENG Renbing1，WAN Qihui2. （1. Department of Clinical Laboratory，the Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College，Nanchong 637000，Sichuan，China；2. Department of Parasitology，Zunyi Medical University，Zunyi 563003，Guizhou，China）Abstract：Objective To study the inhibition of antibacterial peptide from embryonic cells of Musca domestica and homoharringtonine（HHT） on human myeloid leukemia cell K562. Methods The embryonic cells of Musca domestica were induced using lipopolysaccharide. Antibacterial peptide was extracted and prepared 80，160，320 and 640 μg/mL level groups by phosphate-buffered saline（PBS）. The medium only adding PBS was used as negative control group. The cell cycle and the cell apoptosis ratio of K562 were determined by flow cytometry. The K562 and human umbilical vein vascular endothelial cells during logarithmic growth phase were prepared as HTT and antibacterial peptide groups. K562 and human umbilical vein vascular endothelial cells without treatment were used as normal control group. The effective inhibition ratios of HHT and antibacterial peptide on K562 and human umbilical vein vascular endothelial cells were determined by flow cytometry. Results Compared with negative control group，the G0/G1 of K562 was increased，the S was decreased，and the proliferation index was decreased（P<0.05）. Compared with negative control group，the cell apoptosis ratio of K562 in various level groups had no statistical significance（P>0.05）.The effective inhibition ratios of HHT group and antibacterial peptide group on K562 were increased and had statistical significance compared with normal control group（P<0.05）. The effective inhibition ratio in HHT group on human umbilical vein vascular endothelial cells was higher than those in normal control and antibacterial peptide groups （P<0.05）. Conclusions Antibacterial peptide from embryonic cells of Musca domestica can inhibit tumor cells effectively，but no damage to normal cells.Key words：Antibacterial peptide；Musca domestica embryonic cell；Homoharringtonine；Human myeloid leukemia cell K562；Human umbilical vein vascular endothelial cell作者简介：张金花，女，1978年生，硕士，副主任技师，主要从事临床免疫学研究。
黄粉虫对幼刺参生长、消化和免疫力的影响
黄粉虫对幼刺参生长、消化和免疫力的影响刺参是中国海产经济资源的重要海珍品，目前随着养殖规模的不断增大，出现了成参免疫力下降、幼参生长慢和成活率低等一些问题，严重制约了刺参养殖业的发展。
而黄粉虫幼虫粉不仅蛋白质含量高，而且脂肪和各种微量元素也很丰富，尤其是含有甲壳素和天然抗菌肽等物质对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和猪链球菌等具有较强的抑制作用，且黄粉虫具有饲养投资小、食性杂、抗病力强、生长周期短和随时随地即可养殖等优点，有效地弥补了鱼粉的缺乏。
因此将黄粉虫粉作为新型的具有免疫增强效果的饲料添加剂对从根本上提高刺参免疫力、降低生产成本、减少病害和经济损失及促进刺参养殖业可持续发展具有重大的现实意义。
据研究，在畜禽饲料中添加一定量的黄粉虫粉能显著提高动物的生产性能及健康水平，而将黄粉虫粉作为饲料添加剂或鱼粉的替代物应用于刺参养殖的饲喂效果目前罕有报道，尤其是黄粉虫粉对刺参免疫酶与消化酶活性的影响尚未见研究。
试验尝试在幼刺参饲料中用黄粉虫粉替代鱼粉，通过观测淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)与溶菌酶(LSZ)的活性等评价指标，初步研究黄粉虫粉对幼刺参生长性能、消化功能与免疫机能的影响，旨在为黄粉虫粉在刺参健康生态养殖中的合理应用提供科学依据。
参考行情：海参市场行情一、材料与方法1、饲料的制作用马尾藻、鼠尾藻、海泥、豆粕、小麦粉、谷物调和鱼油、优质鱼粉及刺参专用复合多维制成粗蛋白含量为18．60％的均匀粉末状基础饲料，所有饲料原料均通过80目标准筛。
在等氮的基础上将黄粉虫粉以20％、4O％、60％和80％的比例代替基础饲料中的鱼粉，制成4种试验饲料。
黄粉虫幼虫购自锦州市花鸟鱼虫市场，于7O℃烘干研粉备用。
5种试验饲料配方见表1。
2、饲养试验试验用幼刺参取白辽宁省锦州市金域刺参良种场，将225头质量(平均体质量为2.62g)和大小相似的健康幼参随机均匀放人15个(试验饲料即为5种处理，每处理设3个重复)塑料整理箱中(50cmX40cmX30cm)，每箱养15头参，每箱放12L水。
昆虫抗菌肽在抗肿瘤方面的研究与应用
王瑜 琼 李 沛 哲 王 琪 郭 姗 赵 瑞 君 程 璨 侠
（１． 山 西 医 科 大 学 ， 山西 太 原 ０３０００１；２． 山 西 省 疾 病 预 防 控 制 中心 病 媒 生 物 防 控科 ，山 西 太 原 ０３０００１）
摘 要 昆 虫 抗 菌 肽 是 生 物 防御 体 系 的 重要 组 成 部 分 ，具 有 一 定 的抗 肿 瘤 效 果 ，在 细 胞 选 择 性 、理 化 性 质 的 稳 定 性 及 耐 药 性 方 面 具 有 明显 优 势 。本 文 从 昆 虫 抗 菌 肽 的 分 类 、活 性 检 验 、作 用 机 制 等 方 面对 昆 虫 抗 菌 肽 的研 究 现 状 进 行 了 综 述 ，并 讨 论 了利 用 基 因工 程 技 术 制 备 抗 菌 肽 并 用 于 肿 瘤 治 疗 的前 景 。 关 键 词 昆虫 ；抗 菌 肽 ；肿 瘤
昆虫 抗菌 肽 可 以非 特异 性杀 伤肿 瘤细 胞而 对 正常 体 细胞无 毒性 影 响 ，这 预示 着抗 菌肽 作为 一 种新 型抗 肿 瘤 药 物 在 临床 应 用 中具 有 光 明 的 前 景 。王 文 健 等 （２０１５） 用 家 蝇 Ｍｕｓｃａ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ 幼虫 抗菌 肽对 肿瘤 细 胞 ｓｕｐ－ｂ１５急 淋 白血病 小 鼠 模 型进行 实验 ，发现该 抗 菌肽具 有增 殖抑 制及 诱 导凋 亡 的 作 用 。包 永 芬 等 （２０１０） 将 草 地 贪 夜 蛾 ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ卵 细胞 系 ＳＦ一９产 生 的抗 菌肽 作用 于荷 人 宫 颈 癌 细胞 ＳｉＨａ裸 鼠模 型 ，发
第 ２５卷 第 １期 ２０１８年 ３月
寄生虫与 医学 昆虫学报
Ａｃｔａ Ｐａｒａｓｉｔｏ１． Ｍ ｅｄ． Ｅｎｔｏｍｏ１． Ｓｉｎ
昆虫抗菌肽在抗肿瘤方面的研究与应用
昆虫抗菌肽在抗肿瘤方面的研究与应用
王瑜琼;李沛哲;王琪;郭姗;赵瑞君;程璟侠
【期刊名称】《寄生虫与医学昆虫学报》
【年(卷),期】2018(025)001
【摘要】昆虫抗菌肽是生物防御体系的重要组成部分,具有一定的抗肿瘤效果,在细胞选择性、理化性质的稳定性及耐药性方面具有明显优势.本文从昆虫抗菌肽的分类、活性检验、作用机制等方面对昆虫抗菌肽的研究现状进行了综述,并讨论了利用基因工程技术制备抗菌肽并用于肿瘤治疗的前景.
【总页数】5页(P61-65)
【作者】王瑜琼;李沛哲;王琪;郭姗;赵瑞君;程璟侠
【作者单位】山西医科大学, 山西太原030001;山西医科大学, 山西太原030001;山西医科大学, 山西太原030001;山西医科大学, 山西太原030001;山西医科大学, 山西太原030001;山西省疾病预防控制中心病媒生物防控科, 山西太原03000l 【正文语种】中文
【相关文献】
1.抗肿瘤效果截然不同的两种昆虫抗菌肽 [J], 赵瑞君;张庆华;赵志玲;李飞栋
2.新型抗肿瘤杂合抗菌肽的设计、合成及抗肿瘤活性研究 [J], 陈香君;刘二强;回丽媛;朱明星;王秀青
3.昆虫抗菌肽的分子结构、作用机理及其在抗肿瘤细胞方面的应用 [J], 强承魁;杨兆芬;赵万勇
4.昆虫抗菌肽天蚕素的研究进展 [J], 卞璐
5.抗菌肽在抗肿瘤方面的研究进展 [J], 胡荣贵;李改瑞;陆家海
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几种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞(K562)的作用研究
几种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞(K562)的作用研究杨晓红;张庆华;段希玲;董建臻;侯玉英;赵瑞君【期刊名称】《热带医学杂志》【年(卷),期】2006(6)6【摘要】目的研究各种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果。
方法对家蝇(Muscadomestica)幼虫、蛹及德国蜚蠊(Blattellagermanica)、美洲蜚蠊(Periplanetaamericana)若虫采用针刺感染大肠杆菌诱导产生抗菌肽,经研磨、层析提取其抗菌肽,并通过流式细胞仪测定各种抗菌肽对人髓样白血病细胞(K562)的作用。
结果①抑菌圈显示所提取的各种抗菌肽均有一定的抑菌作用。
所提抗菌肽浓度:家蝇幼虫6.51mg/ml,家蝇蛹4.08mg/ml,美洲大蠊6.93mg/ml,德国小蠊6.71mg/ml。
②家蝇幼虫和蛹的抗菌肽对K562有一定的杀伤作用,而美洲蜚蠊和德国蜚蠊不仅不能杀伤K562,在某种程度上还有减少其死亡和促进其生长的作用。
结论各种昆虫抗菌肽由于结构不同,因而功能也太不同。
【总页数】3页(P669-671)【关键词】抗菌肽;抗肿瘤作用;结构和功能【作者】杨晓红;张庆华;段希玲;董建臻;侯玉英;赵瑞君【作者单位】山西职工医学院寄生虫教研室;山西医科大学寄生虫教研室;河北农业大学植物保护学院【正文语种】中文【中图分类】R730.5【相关文献】1.黄粉虫抗菌肽促K562细胞凋亡作用及其机制的研究 [J], 樊宏英;刘颜岗;赵瑞君;乔丛静;申金雁2.家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562生长抑制作用的研究 [J], 张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠3.抗菌肽CM4组分对K562癌细胞染色质DNA断裂作用的SCGE研究 [J], 王芳;张双全;戴祝英4.昆虫抗菌肽的分子结构、作用机理及其在抗肿瘤细胞方面的应用 [J], 强承魁;杨兆芬;赵万勇5.家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞K562作用的扫描电镜观察 [J], 程璟侠;代培芳;罗景星;张庆华;赵瑞君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562生长抑制作用的研究
家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562生长抑制作用的研究张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2012(033)016【摘要】目的研究家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562的抑制作用.方法利用脂多糖诱导家蝇胚胎细胞MDEC-07114,提取抗菌肽,将家蝇胚胎细胞抗菌肽分为40、80、160、320和640 μg/mL 5个实验组,PBS作为阴性对照组,采用MTT法测定不同浓度抗菌肽对人髓样白血病细胞K562和人脐静脉血管内皮细胞的抑制作用并绘制K562细胞生长曲线.结果家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞K562具有明显抑制作用,其浓度与抑制率具有显著相关性,浓度越高,作用时间越长,对K562的抑制杀伤越强.各浓度组对人体正常细胞均无抑制作用.结论家蝇胚胎细胞抗菌肽可抑制肿瘤细胞生长而不杀伤人体正常细胞.【总页数】2页(P1941-1942)【作者】张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠【作者单位】遵义医学院寄生虫学教研室,贵州遵义,563003;川北医学院附属医院检验科,四川南充,637000;遵义医学院寄生虫学教研室,贵州遵义,563003;遵义医学院寄生虫学教研室,贵州遵义,563003;遵义医学院寄生虫学教研室,贵州遵义,563003【正文语种】中文【相关文献】1.家蝇胚胎细胞抗菌肽对黑色素瘤细胞A375抑制作用的实验研究 [J], 张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠2.家蝇胚胎细胞抗菌蛋白对人髓样白血病细胞K 562选择性杀伤作用的研究 [J], 张金花;赵明才;贺莉芳;万启惠3.钙调素拮抗剂O-(4-乙氧基-丁基)-小檗胺对人白血病细胞K562和K562/A02生长的抑制作用 [J], 邹凌琳;周圆;杨铭;代晓华;齐静;熊冬生;范冬梅;杨纯正;朱惠芳4.家蝇胚胎细胞抗菌蛋白对人髓样白血病细胞K562抑制作用的研究 [J], 张金花;贺莉芳;杨霞霞;邓仁兵;万启惠5.家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562的杀伤作用 [J], 张金花;贺莉芳;邓仁兵;万启惠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
家蚕抗菌肽对K562白血病细胞的杀伤作用及对细胞超微结构的影响
家蚕抗菌肽对K562白血病细胞的杀伤作用及对细胞超微结
构的影响
贾红武;张双全;戴祝英
【期刊名称】《南京师大学报（自然科学版）》
【年(卷),期】1999(022)0z1
【摘要】无
【总页数】5页(P133-137)
【作者】贾红武;张双全;戴祝英
【作者单位】无
【正文语种】中文
【相关文献】
1.家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562生长抑制作用的研究 [J], 张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠
2.生长抑素对人红白血病K562细胞超微结构的影响 [J], 张圣明;陈红霞;吴红娟;李峰杰;王尊哲
3.低频超声对阿霉素杀伤人白血病多药耐药细胞K562/A02作用的影响 [J], 孟庆齐;陈宝安;吴巍;邵泽叶;高峰;赵慧慧
4.家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562的杀伤作用 [J], 张金花;贺莉芳;邓仁兵;万启惠
5.低强度中频超声对白血病细胞株k562杀伤作用的初步研究 [J], 何勇;夏新蜀;余和平;白定群;谭勇;许川山
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家蝇蛹抗菌肽对肿瘤细胞膜破坏作用
家蝇蛹抗菌肽对肿瘤细胞膜破坏作用
赵瑞君;程璟侠;代培芳;罗景星;于娟
【期刊名称】《中国公共卫生》
【年(卷),期】2007(23)11
【摘要】目的观察4种肿瘤细胞在家蝇蛹抗菌肽作用下细胞表面的变化,探讨抗菌肽杀伤肿瘤细胞的机制。
方法用针刺对家蝇幼虫感染大肠埃希菌,诱导其产生抗菌肽,然后至蛹期提取该抗菌肽并作用于4种肿瘤细胞(人髓样白血病细胞株K562;人淋巴瘤细胞株Daudi;人食管癌细胞株Eca109;人膀胱癌细胞株T24)。
36 h后用扫描电镜观察其细胞表面变化。
结果4种肿瘤细胞表面出现大小不等的创伤,且大部分创伤为孔洞型。
【总页数】2页(P1399-1400)
【关键词】家蝇蛹;抗菌肽;肿瘤细胞;穿孔
【作者】赵瑞君;程璟侠;代培芳;罗景星;于娟
【作者单位】山西医科大学寄生虫学教研室;山西省疾病预防控制中心;山西省第二人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R730.231.3
【相关文献】
1.MSL抗菌肽对绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜的损伤作用研究 [J], 刘艳环;李海涛;朱言柱;张润祥;肖佳美;苗利光
2.抗菌肽与细胞膜相互作用机制的分子动力学模拟研究 [J], 彭冉;毛文超;赵立岭;曹赞霞;王吉华
3.抗菌肽对创伤弧菌细胞膜破坏的抑制作用 [J], 田卓;梁健健;曹际娟;麻丽丹
4.抗菌肽Met-Ala-Lys对铜绿假单胞菌细胞膜的作用机制 [J], 刘映君;李素芬;王琴;刘袆帆
5.天然性抗菌肽对肿瘤多药耐药细胞膜的作用 [J], 黄静;宫贤阁;阎欣
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药用昆虫抗肿瘤机制的研究进展
药用昆虫抗肿瘤机制的研究进展
药用昆虫中含有丰富的活性物质，如多糖、多肽、二萜类化合物等。
这些活性物质具有抗氧化、免疫调节、促进细胞凋亡等多种作用机制，可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
蜜蜂中的蜂胶可以通过激活免疫系统、抑制肿瘤细胞增殖和转移来发挥抗肿瘤作用。
蚕丝中的蚕蛹草酸具有抗氧化和抗肿瘤活性，在肿瘤细胞中可以促进细胞凋亡和抑制细胞增殖。
药用昆虫对肿瘤相关的信号通路具有调控作用。
蜂胶中的活性成分可以抑制PI3K/Akt 和NF-κB信号通路，从而抑制肿瘤细胞的生长和转移。
杀虫剂菊花素可以抑制肿瘤细胞的生长和侵袭，其机制可能与抑制MAPK和PI3K通路有关。
药用昆虫还可以调节肿瘤血管生成，抑制肿瘤的血液供应。
蠕蝇幼虫中的一种抗菌肽可以通过抑制血管内皮生长因子（VEGF）的表达，抑制肿瘤的血管生成。
药用昆虫具有丰富的活性物质和多种抗肿瘤作用机制，可以抑制肿瘤细胞的生长和转移，调节肿瘤相关的信号通路，并增强化疗和放疗的疗效。
尽管目前对药用昆虫抗肿瘤机制的研究还相对有限，但这些研究进展为进一步研发和应用药用昆虫提供了重要的科学依据。
希望未来的研究能够进一步深入探索药用昆虫的抗肿瘤机制，并推动其在临床肿瘤治疗中的应用。
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热带医学杂志２００６年６月第６卷第６期昆虫作为自然界较大的一个类群，对人们的生活有着极重要的影响，其体内的抗菌肽是首先被人类关注和研究的物质。
自７０年代Ｂｏｍａｎ［１］教授首次从美国天蚕蛹体内获得了抗菌肽并确定了天蚕素Ａ、Ｂ的多肽化学结构后，至今已有１００余种昆虫抗菌肽被发现［２－５］。
它们具有的共同特征是分子量小、热稳定性强、水溶性好、无免疫原性，强碱性、抗菌谱广等特点［６］。
虽然昆虫抗菌肽结构差异并不大，但其功能却大相径庭。
抗菌肽可作用于某些细菌，还可作用于一些真菌，对肿瘤细胞和一些原虫也有作用［７］，还有些昆虫的抗菌肽，几乎可作用于所有的病原体包括细菌、真菌、病毒、原虫等和自身的变异细胞［８］。
本研究提取了家蝇（Ｍｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａ）的幼虫、蛹，以及德国蜚蠊（Ｂｌａｔｔｅｌｌａｇｅｒｍａｎｉｃａ）和美洲蜚蠊（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ）若虫的抗菌几种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞（Ｋ５６２）的作用研究杨晓红１，张庆华２，段希玲１，董建臻３，侯玉英２，赵瑞君２＊（１．山西职工医学院寄生虫教研室，太原０３００１２；２．山西医科大学寄生虫教研室，太原０３００１２；３．河北农业大学植物保护学院，保定０７１００１）【摘要】目的研究各种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果。
方法对家蝇（Ｍｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａ）幼虫、蛹及德国蜚蠊（Ｂｌａｔｔｅｌｌａｇｅｒｍａｎｉｃａ）、美洲蜚蠊（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ）若虫采用针刺感染大肠杆菌诱导产生抗菌肽，经研磨、层析提取其抗菌肽，并通过流式细胞仪测定各种抗菌肽对人髓样白血病细胞（Ｋ５６２）的作用。
结果①抑菌圈显示所提取的各种抗菌肽均有一定的抑菌作用。
所提抗菌肽浓度：家蝇幼虫６．５１ｍｇ／ｍｌ，家蝇蛹４．０８ｍｇ／ｍｌ，美洲大蠊６．９３ｍｇ／ｍｌ，德国小蠊６．７１ｍｇ／ｍｌ。
②家蝇幼虫和蛹的抗菌肽对Ｋ５６２有一定的杀伤作用，而美洲蜚蠊和德国蜚蠊不仅不能杀伤Ｋ５６２，在某种程度上还有减少其死亡和促进其生长的作用。
结论各种昆虫抗菌肽由于结构不同，因而功能也太不同。
【关键词】抗菌肽；抗肿瘤作用；结构和功能中图分类号：Ｒ７３０．５文献标识码：ＡＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌＰｅｐｔｉｄｅｓＩｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＴｈｒｅｅＩｎｓｅｃｔｓＹＡＮＧＸｉａｏ－ｈｏｎｇ１，ＺＨＡＮＧＱｉｎｇ－ｈｕａ２，ＤＵＡＮＸｉ－ｌｉｎｇ１，ＤＯＮＧＪｉａｎ－ｚｈｅｎ３，ＨＯＵＹｕ－ｙｉｎｇ２，ＺＨＡＯＲｕｉ－ｊｕｎ２＊（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｒａｓｉｔｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｘｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｏｎｔｉｎｕｉｎｇ，Ｔａｉｙｕａｎ０３００１２，Ｃｈｉｎａ）【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｃｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａ，ＢｌａｔｔｅｌｌａｇｅｒｍａｎｉｃａａｎｄＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ．ＭｅｔｈｏｄＴｈｅｔｈｒｅｅｉｎｓｅｃｔｓｗｅｒｅｉｎｆｅｃｔｅｄｗｉｔｈＥｓｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｂｙａｓｔｉｎｇ，ｔｈｅｎｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｔｈｅｉｎｓｅｃｔｓ．Ｔｈｅｐｅｐｔｉｄｅｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｂｙｇｒｉｎｄｉｎｇｏｆｔｈｅｉｎｓｅｃｔｗｉｔｈｂｕｆｆｅｒ．ＴｈｅｐｅｐｔｉｄｅｓｗｅｒｅｔｈｅｎｉｓｏｌａｔｅｄｂｙｇｅｌｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｐｇｒａｐｈｙｔｈｒｏｕｇｈａＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０ｃｏｌｕｍｎ．ＴｈｅａｎｔｉｃａｎｃｅｒｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｅｐｅｐｔｉｄｅｓｏｎＫ５６２ｃｅｌｌｓｗａｓａｎａｌｙｚｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｅｒｙ．ＲｅｓｕｌｔＡｌｌｏｆｐｅｐｔｉｄｅｓｃｏｕｌｄｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ．ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｅｐｔｉｄｅｓｉｓｏｌａｔｅｄａｒｅＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｌａｒｖａ６．５１ｍｇ／ｍｌ，Ｍｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｐｕｐａ４．０８ｍｇ／ｍｌ，Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ６．９３ｍｇ／ｍｌ，ａｎｄＢｌａｔｔｅｌｌａｇｅｒｍａｎｉｃａ６．７１ｍｇ／ｍｌ．ＴｈｅｐｅｐｔｉｄｅｓｆｒｏｍＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄａｋｉｌｌｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｎＫ５６２ｃｅｌｌｓ，ｗｈｉｌｅｐｅｐｔｉｄｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｔｗｏｃｏｃｋｒｏａｃｈｃｏｕｌｄｎｏｔｋｉｌｌＫ５６２ｃｅｌｌｓｂｕｔｐｒｏｍｏｔｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆＫ５６２ｃｅｌｌｓｔｏａｃｅｒｔａｉｎｅｘｔｅｎｔ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＳｏｍｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓｆｒｏｍｉｎｓｅｃｔｓｌｉｋｅｆｌｙｃｏｕｌｄｋｉｌｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌ，ｂｕｔｓｏｍｅｏｔｈｅｒｓｍａｙｈａｖｅａｎｏｐｐｏｓｉｔｅｅｆｆｅｃｔ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓ；ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ；ｓｔｕｃｔｕｒｅａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎ基金项目：山西省科技开发基金（Ｎｏ．晋教计财［２００３］４６）。
作者简介：杨晓红（１９６１～），女，副教授，主要从事寄生虫学教学和科研工作。
＊通讯作者：赵瑞君，Ｅ－ｍａｉｌ：４９３５１８６ａａａ２２７２ｓｉｎａ．ｃｏｍ［文章编号］１６７２－３６１９（２００６）０６－０６６９－０３・论著・６６９・・ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏｌ．６Ｎｏ．６Ｊｕｎ．２００６肽作用于Ｋ５６２细胞，试图观察各种昆虫抗菌肽对该癌细胞的杀伤作用。
１材料与方法１．１材料家蝇（Ｍｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａ）、德国蜚蠊（Ｂｌａｔｔｅｌｌａｇｅｒｍａｎｉｃａ）、美洲蜚蠊（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ）取自山西省卫生防疫站多代培养的纯种品系；大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ８０９９）取自军事医学科学院流行病研究所。
人髓样白血病细胞（Ｋ５６２）由中国医学科学院北京药物所引进；各种特异性单克隆抗体（Ｍｃ－Ａｂ）购自北京中衫金桥生物技术有限公司；荧光标记的羊抗鼠或兔抗鼠第二抗体、灭活正常兔血清购自北京中衫金桥生物技术有限公司；１０％ＦＣＳ，ＲＰＭＩ－１６４０，ＤＰＢＳ（储存液ＮａＣｌ，ＫＣｌ，Ｎａ２ＨＰＯ４，ＫＨ２ＰＯ４），洗涤液（ＤＰＢＳ，葡萄糖，甲醛ＮａＮ３）购自上海恒信化学试剂有限公司。
１．２方法１．２．１抗菌物质的诱导［９］取３龄家蝇幼虫４００条，以０．１５ｍｏｌ／Ｌ浓度的大肠杆菌液醮沾刺伤幼虫，然后将其放回新鲜配制的麸皮饲料培养２４ｈ；再取３龄家蝇幼虫４００条，以０．１５ｍｏｌ／Ｌ浓度的大肠杆菌液醮沾刺伤幼虫，然后将其放回新鲜配制的麸皮饲料培养至化蛹；另取两种蜚蠊的若虫各４００只，以０．１５ｍｏｌ／Ｌ浓度的大肠杆菌液醮沾刺伤，将其放回培养２４ｈ。
１．２．２抗菌物质的提取［１０］血淋巴提取：将家蝇幼虫、蛹、两种蜚蠊的若虫各置于研钵中，加苯甲基磺酰氟，再加入２ｍｌ生理盐水研磨，于４℃１２０００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ，取上清。
层析：将热处理过的上清液移入经磷酸缓冲液平衡过的羧甲基纤维素ＣＭ５２层析柱进行阳离子交换层析，用磷酸缓冲液洗脱至基线，然后用含０～０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的相同缓冲液进行梯度洗脱，上样量为１００ｍｌ。
取１３～１８管抑菌活性强的样品，每管收集４ｍｌ，洗脱速度为１ｍｌ／ｍｉｎ。
测定每管收集液的抑菌活性及２８０ｎｍ紫外吸收光值。
１．２．３抑菌活力测定［１１］在营养琼脂培养基上接种大肠杆菌，再将直径为３ｍｍ的药敏纸片上滴加２μｌ制备好的家蝇幼虫、蛹及德国蜚蠊、美洲蜚蠊若虫血淋巴，３７℃培养２４ｈ，观察并测量抑菌圈大小。
１．２．４细胞毒活性测定取在ＲＰＭＩ－１６４０培养基上生长旺盛的细胞计数，用完全ＲＰＭＩ－１６４０培养基调整细胞浓度为１×１０６备用。
取无菌９６孔培养板，加靶细胞悬液到９６孔培养板，２００μｌ／孔，将各种昆虫抗菌肽加入到靶细胞中，１００μｌ／孔，单纯靶细胞做对照。
震荡混匀，放入３７℃，５％ＣＯ２培养箱中孵育３６ｈ。
将培养板中细胞收集到流式样品管中，加入适量ＰＢＳ离心（１０００ｒ／ｍｉｎ），弃上清。
样本细胞中加入５μｌｒｈＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＰＥ，混匀，在室温（２０～２５℃）避光放置２０ｍｉｎ，加入适量ＰＢＳ离心（１０００ｒ／ｍｉｎ），弃上清，沉淀中加入ＰＢＳ液５００μｌ，混匀，１ｈ内上流式细胞仪测定。
２结果２．１抑菌活力抑菌圈显示所提取的各种抗菌肽均有一定的抑菌作用。
所提抗菌肽浓度：家蝇幼虫６．５１ｍｇ／ｍｌ，家蝇蛹４．０８ｍｇ／ｍｌ，美洲大蠊６．９３ｍｇ／ｍｌ，德国小蠊６．７１ｍｇ／ｍｌ。
２．２对癌细胞Ｋ５６２的作用图中纵轴代表细胞数，横轴代表荧光强度。
曲线１代表受试组，曲线２代表对照组。
曲线中ａ峰代表初始Ｋ５６２细胞的浓度，ｂ峰代表死亡细胞结合荧光物的数量。
在对照组Ｋ５６２细胞中荧光物结合的死亡细胞已有一定的数量，但受试组死亡细胞数很少（图１，２）。
曲线２在荧光区结合的死亡细胞比对照组多，家蝇幼虫对Ｋ５６２细胞略有杀伤力（图３）；家蝇蛹抗菌肽对Ｋ５６２细胞的杀伤力较其幼虫强（图４）。
图１美洲大蠊对Ｋ５６２ｃｅｌｌ的作用Ｆｉｇ．１ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ图２德国小蠊对Ｋ５６２ｃｅｌｌ的作用Ｆｉｇ．２ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＢｌａｔｔｅｌｌａｇｅｒｍａｎｉｃａ图３家蝇幼虫对Ｋ５６２ｃｅｌｌ的作用Ｆｉｇ．３ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｌａｒｖａ６７０・・热带医学杂志２００６年６月第６卷第６期３讨论家蝇和蟑螂都是卫生害虫，出没于最脏、病原体最多的环境，但本实验结果证实了家蝇和蟑螂体内的免疫物质———抗菌肽完全不同。
从实验中我们可以看出，家蝇的幼虫和蛹体内的抗菌肽对Ｋ５６２均有一定的杀伤能力，但德国蜚蠊和美洲蜚蠊若虫不仅无抗肿瘤的作用，在某些程度上还能促进其生长。
已有一些学者对家蝇的抗肿瘤作用进行过研究。
从家蝇幼虫中提取的抗菌肽不仅对Ｋ５６２有杀伤力［１２］，而且对人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７，人胃癌细胞ＢＧＣ－８２３和ＭＧＣ－８０３，以及人肺癌细胞ＳＰＣ－Ａ－１这４种癌细胞体外增殖均有明显的抑制作用［１３］。
本实验采用先进的流式细胞仪也证实了家蝇对癌细胞的抑制作用，同时发现２种蟑螂体内的抗菌肽对癌细胞没有抑制作用。
从流式细胞仪打出的图形来看，在２种蟑螂的提取物加进后，Ｋ５６２几乎无任何死亡。
是否蟑螂体内有某些特殊成份降低了Ｋ５６２的死亡率还有待进一步研究证实，但至少说明蟑螂体内的抗菌肽不能杀伤该肿瘤细胞。