考马斯亮蓝法测定微量蛋白质

考马斯亮蓝法测定微量蛋白质含量
1．目的：测定发酵液中的总蛋白质含量
2．原理：考马斯亮蓝染液与蛋白质中的碱性氨基酸（精氨酸）和芳香族残基结合，呈红色在595nm波长处有吸收。

3．材料和方法：
3.1考马斯亮蓝：考马斯亮蓝0.01% 100 mg
95%乙醇4.7% 50 mL
8%磷酸8.5 100 mL
(1)称取100 mg考马斯亮蓝，溶解于50mL乙醇95%.
(2)加入100 mL浓磷酸，定容至1000 mL。

3.2牛血清蛋白标准溶液: 牛血清蛋白100ug
Nacl 0.15mol/L
称取牛血清蛋白100ug，溶解于0.15mol/L的nacl中。

4.标准曲线的制作
5.样品的测定：、
同标准曲线的制作，样品稀释时用0.15mol/L的nacl。

6．注意事项：
(1)比色杯用酒精清洗干净。

(2)测定的是总蛋白的含量。

附：戴坤标准曲线y=188.6x-39.9 Y是蛋白浓度ug/ML, X是吸光度。