真菌培养基
微生物总数检测方法(真菌)
微生物总数检测方法（真菌）一、检测用培养基配方与培养条件1.培养基：马铃薯葡萄糖琼脂（PDA培养基）配制：以北京路桥PDA培养基为例，按说明上配制需称取培养基4克，加水100毫升。
2. 培养条件：25℃-30℃；时间：72-96小时。
二、检测与计数方法1. 梯度稀释称取适量的样品，加入带玻璃珠的三角瓶中，加入100mL的无菌水（无菌水中事先加入了分散剂3—5滴，分散剂可以是吐温，OP—80，用来分散菌团），用玻璃棒搅拌使之溶解吸水均匀后，上旋转式摇床200 r/min充分振荡60 min，,即成母液菌悬液（基础液）。
2. 用10mL无菌移液管分别吸取10mL上述母液菌悬液加入90 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……1:k稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管，每一个稀释度瓶种应放有适量的玻璃珠，以保证菌液分布均匀）。
3. 加样及培养取1个适宜的稀释度，用移液枪吸取菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，用无菌玻璃涂布棒将菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
此稀释度重复3次，同时以空白作对照，于适宜的条件下培养。
4. 菌落识别根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。
当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
5. 菌落计数以出现20—70个菌落数的稀释度的平板为计数标准，分别统计有效活菌数目和杂菌数目。
有效活菌数按式（1）计算，同时计算杂菌数：nm = x kv1/(m0v2) ×10-8或 nv = x kv1/(v0v2) ×10-8（1）式中：nm —质量有效活菌数，亿/gnv —体积有效活菌数，亿/mLx—有效菌落平均数，个k —稀释倍数v1—基础液体积， mLv2—菌悬液加入量， mLv0—样品量，mLm0—样品量， g重点需要注意的部分在菌悬液的制备及震荡过程上，因为固态发酵的的产品大部分为聚集状态不容易分散开来，这点与液态发酵产品不同。
真菌用的培养基
真菌用的培养基
真菌的培养基根据其特点和需求不同，可以分为以下几种常见的培养基：
1. 薄膜培养基：如麦芽琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于革兰氏阳性真菌和某些革兰氏阴性真菌的培养。
2. 液体培养基：如液体麦芽琼脂、液体马铃薯葡萄糖琼脂等。
适用于真菌的液体培养、发酵和产生次级代谢产物。
3. 饲养基：如麦麸葡萄糖培养基、马铃薯糖蛋白胨培养基等。
适用于饲养虫化真菌和真菌的寄生菌株。
4. 高营养培养基：如琼脂葡萄糖培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。
适用于真菌菌株的快速生长和高产菌。
5. 特殊培养基：如选择性培养基、鉴定培养基等。
根据不同的真菌种类和需求，可以添加抗生素、抑菌剂或特定的营养成分。
此外，还可以根据真菌的特殊要求，进行改良和添加其他成分，从而满足其生长和繁殖的需要。
培养细菌真菌的方法
培养细菌真菌的方法培养细菌和真菌是微生物学中非常重要的实验技术，它们可以用于各种生物学实验、药物研发和生物工程等研究领域。
针对这个问题，我将详细介绍培养细菌和真菌的方法，并提供一些实验室技巧和注意事项。
一、培养细菌的方法：1.选择培养基：常用的细菌培养基有富尔顿培养基、LB培养基和三碱培养基等。
选择适合所研究的菌种的培养基是非常重要的，可以促进菌种的生长和繁殖。
2.准备培养基：根据选定的培养基配方，准备好所需的培养基。
通常需要加热至沸腾以溶解培养基，并在冷却后加入适当的抗生素以防止其他细菌的污染。
3.菌液接种：将所选的细菌菌株从培养基中接种到含有相应培养基的培养皿中。
可以用铅笔或石墨棒在培养皿底部作标记。
4.培养温度：不同细菌对培养所需的温度有不同要求。
常见的细菌一般在25-37摄氏度下培养，但有些特殊菌株可能需要较低的温度或特殊培养条件。
5.培养时间：培养时间因菌种而异。
能够使细菌菌落生长至可见的大小可能需要24小时以上。
6.培养皿的选择和处理：常用的培养皿有琼脂糖平板、琼脂糖管和琼脂糖深培养皿等。
在使用培养皿前，务必高温高压灭菌杀菌以避免外源菌株的污染。
7.无菌操作：培养细菌时，需要进行无菌操作，以避免其他微生物的污染。
这包括使用无菌器材、消毒培养环境和正确处理实验物品等。
8.菌落计数和分离：在进行某些实验时，需要对细菌菌落进行计数。
为此，可以使用显微镜和细菌计数室等设备。
如果需要分离不同的细菌菌株，可以使用传代分离法或斑点分离法等。
二、培养真菌的方法：1.选择培养基：真菌培养基的选择与细菌培养基类似，常用的有马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基、玛丽培养基和云芝培养基等。
根据不同的真菌选择合适的培养基是非常重要的。
2.准备培养基：根据培养基配方准备所需的培养基。
常见的方法是将配方中的成分溶解在适当的溶剂中，并在经过滤消毒后冷却。
3.真菌接种：可以将真菌菌丝块切割成小碎块，接种到含有培养基的琼脂糖培养皿中。
146种细菌-真菌-酵母培养基配方
146种培养基配方——2009年2月1日星期日by尛森蟲1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15gDistilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation .适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1ｇNa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15gAdjust (调) pH to 7.2适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the li quid , then autoclave at 121℃for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。
真菌培养常用培养基
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，（一） 组成 40.0g 10.0g12.0- 15.0g 1000ml（二） 制法 上述混合后加入 200mg 氯霉素， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
（三） 目的 是常用的分离或保存菌种的培养基。
[ 沙氏液基， SDB]（一） 组成 葡萄糖 40.0g 蛋白胨 10.0g 蒸馏水1000ml（二） 制法 上述混合后加入 200mg 氯霉素， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
[ 加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic]（一） 组成 葡萄糖 40.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 12.0〜15.0g 蒸馏水 1000ml（二） 制法上述混合后加入 200mg 氯霉素。
250mg 放线菌酮， 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一） 组成 葡萄糖 20.0g 蛋白胨 10.0g 琼脂 12.0〜15.0g 蒸馏水1000ml（二） 制法 上述混合后 121 摄氏度 10 分钟灭菌后备用。
（三） 目的 保存菌种培养基。
[ 马铃薯葡萄糖琼脂， PDA]（一） 组成 马铃薯 200.0g 葡萄糖 20.0g 琼脂12.0〜15.0gSDA]葡萄糖 蛋白胨 琼脂 蒸馏水蒸馏水1000ml（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml ，煮沸30 分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml ，121 摄氏度灭菌后备用。
（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80 琼脂，CMA with T w80]（一）组成玉米粉琼脂蒸馏水吐温80（二）制法40.0g15.0g1000ml10ml先将玉米粉混于水中，65 摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10 分钟灭菌后备用。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文培养基是用于细菌、真菌、植物细胞等生物的培养和繁殖的一种营养物质。
不同生物种类和培养目的需求不同，所以有许多种不同的培养基配方。
以下是几种常见的培养基配方：1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）LB培养基是一种常用于培养细菌的全面培养基，其配方包括：5g酵母膏、10g蛋白胨、10g氯化钠，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至7.0。
LB培养基可用于大多数菌种的培养，是最常用的细菌培养基之一2. TSB培养基（Tryptic Soy Broth培养基）TSB培养基是一种适用于多种细菌的全面营养培养基，其配方包括：15g胰胨蛋白胨、5g酵母膏、5g氯化钠，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至7.3、TSB培养基可用于培养细菌、真菌等微生物。
3. MS培养基（Murashige and Skoog培养基）MS培养基是一种用于植物组织培养的配方，适用于各种植物种类的生长和繁殖。
其配方包括：4.4gMS盐基础培养基粉、30g蔗糖，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至5.8、MS培养基还可以根据不同植物种类的需求调整添加适当的植物激素。
4. YPD培养基（Yeast Peptone Dextrose培养基）YPD培养基是用于酵母菌培养的常用培养基，其配方包括：10g蛋白胨、20g葡萄糖、20g酵母浸出物，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至6.0。
YPD培养基可满足酵母菌对碳源、氮源等营养物质的需求。
5. SDA培养基（Sabouraud Dextrose Agar培养基）SDA培养基是一种常用的真菌培养基，其配方包括：20g葡萄糖、15g 琼脂、10g酵母提取物，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至5.6、SDA培养基可用于分离和培养真菌。
以上是几种常见的培养基配方，不同生物种类和培养目的需要选择适合的培养基。
培养基的配方还可以根据需要进行调整和优化，以满足特定菌种或细胞的生长需求。
最适合的培养基应根据具体实验需求进行选择。
实验室常用培养基
．常用培养基的制备（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和马铃薯蔗糖琼脂（PSA）培养基培养真菌最常用的培养基，成分如下：去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15－20g 水1000 ml配制方法：将马铃薯洗净去皮，称取200 g，切成小块（不必大小）放入锅中，加水1000ml，煮沸半小时，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加蔗糖20g，加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性，用于培养真菌，可以不必调pH。
如配制固体培养基，在加蔗糖前先加15－20g 琼胶加热熔化，最后加入蔗糖，混匀并加水补是至1000ml，趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管（15×150mm）分装量如下：一般用作斜面培养的每试管装培养基3－5ml，用作平面培养的每试管约10ml，加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性（pH7．0左右）。
（2）牛肉汁蛋白胨培养基（NA）是培养细菌最常用的培养基，又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下：酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖（或葡萄糖）l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法：称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用，在其余水中加入琼脂，加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀，然后加水补足到1000 ml，用NaOH或HCL调整至pH7.0，趁热分装，加棉花塞后灭菌。
（3）玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片，洗净后剪成1㎝2左右的小块，放在250ml的三角瓶中，盛放量一般为三角瓶的1／3，然后加少量的水以保持湿润，加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
（4）查氏（Czapek）培养基查氏培养基是一种组合培养基，其成分如下：NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0．5g KCl 0．5gFeSO4 0．01g 蔗糖30g水1000ml（5）灭菌水的配制蒸馏水（或自来水）经过灭菌处理即成灭菌水，是实验室用量最大的必备品之一，常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
真菌培养常用培养基(完整资料).doc
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（三）目的是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基，SDB]（一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic] （一）组成葡萄糖40.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后加入200mg氯霉素。
250mg放线菌酮，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]（一）组成葡萄糖20.0g蛋白胨10.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂，PDA]（一）组成马铃薯200.0g葡萄糖20.0g琼脂12.0～15.0g蒸馏水1000ml（二）制法先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml，煮沸30分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml，121摄氏度灭菌后备用。
（三）用途此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。
鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
][玉米吐温80琼脂，CMA with Tw80（一）组成玉米粉40.0g琼脂15.0g蒸馏水1000ml吐温80 10ml（二）制法先将玉米粉混于水中，65摄氏度水浴一小时，过滤，再补足水量，然后加入琼脂和吐温80，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）用途用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝；红色毛癣菌在此培养基产色素较好。
[米饭培养基rice grain medium](一)组成大米300.0g蒸馏水1000ml（二）制法将3g大米放入试管中，加入10ml蒸馏水，高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
念珠菌属真菌显色培养基 念珠菌属真菌显色培养基(
念珠菌属念珠菌属真菌显色培养基真菌显色培养基真菌显色培养基（（培养法培养法）） 使用说明书使用说明书【产品名称】念珠菌属真菌显色培养基（培养法）。
【组成、型号规格】组成型号规格 培养皿规格琼脂培养基、一次性塑料培养皿P07217cm【预期用途】适用于念珠菌属真菌分离培养及初步鉴定。
【检验原理】在培养基中加入检测某种菌种的特异性酶底物，该底物为人工合成由产色基团和微生物可代谢物质组成，通常为无色，但在特异性酶作用下，游离出发色基团并显示一定颜色，直接观察菌落颜色即可对菌种做出鉴定。
【主要组成成份】每1000mL 念珠菌属真菌显色琼脂含：a) 琼脂 （BR级） 15g， b) 蛋白胨 （BR级） 10.2g， c) 色素 （AR级） 22.0g， d) 氯霉素 （化学品） 0.5g。
e) 蒸馏水 1000mL【储存条件及有效期】2℃～8℃保存，切勿冻藏。
在储存条件下，自生产之日起有效期60天。
【样本要求】1、 各种分泌物——包括泌尿生殖道分泌物、耳垢、痰及其它2、 皮肤的角质性物质3、 脓汁及渗出物4、 血液及体液——体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等5、 粪便和尿液6、 活组织标本7、 环境中各种标本材料注意：（1） 采取部位要恰当：感染的类别不同，采取的标本也不同。
如为深部真菌感染可根据病的种类采取脓汁，痰液、血液、脑脊液等。
（2） 标本应新鲜：特别是深部真菌标本尽量在取材后立即检查，最长不得超过两小时。
如不能立即送检则必须放入冰箱中保存，尽速送检。
（3） 应在用药前采集标本，如已用药则须停一段时间药后再采集。
（4） 标本的量要充足，血液和脑脊液不得少于5ml，胸腔液不得少于20ml。
（5） 避免污染杂菌，须严格进行无菌操作。
【检验方法】1. 将培养基复温至常温25℃；2. 将标本接种于培养基琼脂面上；3. 35℃培养24～48小时。
【检验方法的局限性】本产品仅适用于念珠菌属真菌分离培养及鉴定用。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。
其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
培养细菌真菌的一般步骤
培养细菌真菌的一般步骤培养细菌和真菌是微生物学研究中的重要部分，也是生物学实验中常用的实验方法之一。
本文将介绍一般的培养细菌和真菌的步骤。
一、准备培养基培养基是培养细菌和真菌的基础，可以提供营养物质和适宜的环境。
准备培养基时，首先需要选择合适的基础培养基，如琼脂、蔗糖琼脂等。
然后，根据不同的需要，可以添加不同的营养物质，如氨基酸、糖类、无机盐等。
最后，将培养基加热至沸腾，使其中的成分充分溶解，然后分装到培养皿或试管中，待其冷却凝固。
二、接种菌液接种菌液是从原料中获得的含有细菌或真菌的液体。
可以通过多种方法获得接种菌液，如在富含目标微生物的环境中采集，或通过前期培养得到。
接种菌液时，需要注意无菌操作，避免外界微生物的污染。
三、接种培养基将准备好的接种菌液均匀地倒入凝固的培养基上，可以通过覆盖整个培养基表面，或者在表面划线、点菌等方式进行接种。
接种后，将培养皿或试管盖好，避免细菌或真菌的外界污染。
四、培养条件控制细菌和真菌的生长需要适宜的环境条件，如温度、湿度、光照等。
根据不同的微生物，需要设置不同的培养条件。
一般来说，细菌的培养温度在30-37摄氏度之间，真菌的培养温度在20-30摄氏度之间。
同时，需要注意培养环境的湿度，可以通过添加适量的水分或使用湿度控制器来控制。
光照对于某些细菌和真菌的生长也有一定影响，需要根据实际情况进行控制。
五、观察和记录在培养的过程中，可以通过肉眼观察菌落的形态、颜色等特征，或者使用显微镜观察细胞的形态和结构。
同时，需要记录实验的相关信息，如培养的时间、温度、观察到的现象等。
六、分离纯种在培养的过程中，可能会出现多种微生物混合的情况。
为了研究某一种细菌或真菌的特性，需要将其分离出来得到纯种。
可以通过传代培养分离，即将单个菌落或单个细胞分别接种到新的培养基中进行培养。
七、保存和传承在培养细菌和真菌的过程中，一些有价值的菌株可以保存下来，以备后续研究或应用。
保存的方法有多种，如低温保存、冷冻保存、冷冻干燥等。
pda培养基
PDA培养基简介PDA（Potato Dextrose Agar）培养基是一种常用于真菌及酵母的培养基。
它是由马铃薯提取物和葡萄糖混合制成的。
PDA培养基具有高透明度、无色无味、好制备、便于观察真菌和酵母生长等特点，在微生物实验室中被广泛应用。
材料制备PDA培养基所需的材料如下：•马铃薯 200克•葡萄糖 20克•蒸馏水 1000毫升•培养皿或试管步骤以下是制备PDA培养基的步骤：1.清洁材料：使用75%乙醇或其他消毒剂彻底清洁培养皿或试管，确保无细菌污染。
2.准备马铃薯提取物：将马铃薯削皮并切成小块。
将切好的马铃薯放入锅中，加入足够的蒸馏水，然后煮沸20-30分钟，直到马铃薯变软。
3.提取马铃薯汁液：使用纱布或滤纸将煮熟的马铃薯过滤，以去除固体残余物。
收集过滤得到的液体，这就是所需的马铃薯提取物。
4.加入葡萄糖：将葡萄糖加入马铃薯提取物中，搅拌均匀，直到完全溶解。
5.加入琼脂：将1000毫升蒸馏水倒入锅中，加热至沸腾。
然后，将琼脂逐渐加入，并持续搅拌，直到琼脂完全溶解。
6.混合培养基：将马铃薯提取物和葡萄糖溶液倒入含有溶解琼脂的锅中，搅拌均匀，确保混合到一致。
7.倒入培养皿或试管：将培养基均匀地倒入清洁的培养皿或试管中，注意避免产生气泡。
8.等待凝固：将培养皿或试管放置在平坦的表面上，等待培养基凝固。
9.高温蒸汽灭菌：将培养皿或试管用锡箔纸密封，并放入高温蒸汽灭菌器中，进行高温灭菌。
温度和时间根据需要进行设置。
注意事项•在制备PDA培养基过程中，要遵守无菌操作的原则，以确保培养基的纯度和无菌性。
面罩、手套、试验台面和实验室工具等都需要进行严格消毒和清洁。
•倒入培养皿或试管时，要小心避免气泡的产生。
气泡会影响培养基的均匀性和透明度。
•在使用培养基前，需要进行高温蒸汽灭菌以杀灭其中的细菌和真菌孢子。
高温和时间应根据实验的需要进行设置。
结论PDA培养基是一种简单易制备的培养基，常用于真菌和酵母的培养。
真菌类栽培技术培养基的制备
真菌类栽培技术——培养基的制备随着21世纪食用菌及药用菌类的市场发展，野生食用菌与菌类中药材的产量已不足以供应市场需求，人工种植菌类作物已进入农业生产范畴。
然而菌类无性繁殖技术目前只能应用于较大规模的实验室制备，广大农村要进行各种菌类菌种分离难以实现，而进行实验室建设，引进先进技术进行菌种分离培养则投资巨大，使小微企业与农村经济体难以承受。
本着帮助小微企业及农村经济体乃至农户减轻投资负担，弘扬国内传统种植培育技术相关文化的用意，依托家学传统、长辈多年种植经验中总结的菌类种植经验技术，将真菌类种植技术分类、分章节逐步完善并传播于网络，进行知识共享，以期家族长辈多年经验与技术得以传承，农业种植技术相关学术得以弘扬。
一、母种培养基（马铃薯培养基）的配方1.马铃薯—琼脂（PDA）培养基：（1）、配方：马铃薯（去皮）200g、、葡萄糖20g、琼脂20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1 1-2片、水1000ml；（2）制备方法：a、马铃薯200g切碎加入1000ml水，煮沸半小时，用双层纱布过滤去渣，得到滤液。
b、滤液中加入琼脂20g煮沸并搅拌使其融化，融化后加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、维生素B1搅拌融化。
完全溶解后加水至1000ml，即成液体培养基。
c、将配好的液体培养基分装入试管或培养皿中，试管加入量约1/5-1/4为宜、培养皿加入量约1/3-1/2为宜，同时避免培养液沾湿试管口及培养皿口。
d、分装后，试管采用棉塞塞住、培养皿使用棉垫覆盖，用两层牛皮纸扎紧。
e、放入高压锅高压灭菌，锅内夹层放入适量水，将分装好的培养基放入锅内，锅盖密闭加热，先把冷空气排出，然后关闭排气阀，加热升压。
锅内温度达到120℃时，恒压30分钟再逐渐打开排气阀。
f、气压归零后可以取出培养基，试管培养基可在此时放置成斜面，冷却凝固后即成固体斜面培养基。
广东环凯微生物科技有限公司无菌试验用真菌培养基产品说明书
产品说明书Product Manual产品中文名：无菌试验用真菌培养基PRODUCT NAME：FUNGUS CULTURE MEDIUM FOR STERILITY TEST【货号、名称、规格、产品形态及包装形式】货号规格名称产品形态021044250g无菌试验用真菌培养基脱水干粉【产品用途】用于真菌的无菌检验（WS/T367-2012）。
【检验原理】蛋白胨提供氮源；葡萄糖是可发酵的糖类；溴甲酚紫为pH指示剂。
成分含量（每升）磷酸二氢钾 1.0g硫酸镁0.5g蛋白胨 5.0g葡萄糖10.0g最终pH6.4±0.2【使用方法】称取本品16.5g，加入蒸馏水或去离子水1000ml，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管，115℃高压灭菌20min。
【质量控制】1.外观方面：脱水干粉培养基：淡黄色粉末。
2.生物学方面质控菌株及编号指标质控评判标准黑曲霉ATCC16404生长率生长良好。
白色念珠菌ATCC10231生长良好。
【储存条件及保质期】脱水干粉培养基：旋紧瓶盖，储存于干燥处，避免阳光直射；贮存期三年。
【注意事项】1、称量脱水干粉培养基时避免粉尘扬起，应佩戴口罩操作以免吸入粉尘引起呼吸道系统不适。
2、质检报告可以登录环凯网站，在主页中点击“质检报告”进入下载页面，输入产品批号点击搜索后方可进行下载。
【废物处理】检测之后带菌平板置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
【执行标准】Q/HKSJ03广东环凯微生物科技有限公司企业标准普通微生物培养基【说明版本】2017年02月05日【参考文献】1、WS/T367-2012医疗机构消毒技术规范。
细菌真菌放线菌培养基配方
一．细菌培养基：肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基,肉膏蛋白胨培养基的主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
肉膏蛋白胨培养基1.～7.6 2.、6管，10%3.（1速。
（2）加热溶解：在烧杯中加入少于所需要的水量，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒搅拌，待药品完全溶解后再补充水分至所需量。
若配制固体培养基，则将称好的琼脂放入己溶解的药品中，再加热融化，此过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，最后补足所失的水分。
（3）调pH：检测培养基的pH，若pH偏酸，可滴加lmol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸检测，直至达到所需pH范围。
若偏碱，则用lmol/LHCl进行调节。
pH的调节通常放在加琼脂之前。
应注意pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
（4）过滤：液体培养基可用滤纸过滤，固体培养基可用4层纱布趁热过滤，以利培养的观察。
但是供一般使用的培养基，这步可省略。
（5）分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。
分装量：固体培养基约为试管高度的l/5，灭菌后制成斜面。
分装入三角瓶内以（6（7（8（9（10）无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h，无菌生长即可使用，或贮存于冰箱或清洁的橱内，备用。
二.放线菌培养基:高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基,培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源，KNO3作为氮源，K2HP04、MgSO4和FeS04作为无机盐等高氏合成一号培养基1.药品比例：可溶性淀粉20gNaCI 0．5gKNO31gK2HPO4MgSO4FeSO4琼脂水pH2.3.成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4．7H2O可先配成高浓度的贮备液，按比例换算后再加入。
待所有试剂完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。
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真菌培养基
一、沙保罗琼脂培养基
[用途]
供真菌及酵母样真菌的分离培养用。
[配法]
麦芽糖40g,蛋白胨10g,琼脂20g，蒸馏水1L。
将上述成分溶于水，加热溶解，调pH至6.0±0.2，分装三角瓶或试管中，118℃灭菌15mi n，倾注平板或置斜面，无菌试验后备用。
[用法]
将标本接种培养基，如系血液标本，则采取1～2ml，与冷却至45℃左右沙保琼脂混合，倾注接种平板。
分别置35℃和25℃恒温箱内同时培养。
35℃培养48h,25℃需连续培养5天,逐日观察结果。
发现真菌及酵母样可疑菌落，转种沙保菌斜面，获得纯培养后进行鉴定。
[质量控制]
白色念珠菌和新型隐球菌生长良好。
注：
⑴本培养基如不加入琼脂，即为沙保罗液体培养基，供真菌及念珠菌的增菌培养用。
⑵增加氯霉素0.05～0.125mg/ml或放线菌酮0.5mg/ml，可抑制细菌和污染的霉菌及隐球菌生长。
此二种药均耐热，可直接加入培养基内高压灭菌。
⑶添加酵母浸膏5mg/ml，可促进皮肤癣菌生长。
增加维生素B 0.1mg/ml，可促进紫色癣菌和断发癣菌生长。
⑷将麦芽糖减少到20g/L，为沙保罗20g/L麦芽糖琼脂培养基，可供诱导真菌产生孢子用。
⑸该培养基呈酸性，应提高20%的琼脂用量。
二、玉米粉琼脂培养基
[用途]
鉴定酵母样真菌用。
白色念珠菌在该培养基上25℃24h培养可长出假菌丝，顶端有典型的厚壁孢子，可与其它念珠菌鉴别。
[配法]
玉米粉4g，琼脂粉8g，蒸馏水1L
（pH6.0±0.2）。
将细米粉加水浸泡数分钟，扎紧瓶口，浸入60℃水浴4h，取出后用沙布过滤，除去粗渣，补足水分。
无须调整pH。
加入琼脂，煮沸溶解，有沉淀物再过滤1次，分装试管，121℃灭菌15min备用。
用玻璃片法点种后，置平皿内，保持一定湿度，置23～26℃下培养24～48h。
取出玻片培养物，用高倍镜观察真假菌丝和有无厚壁孢子。
[质量控制]
白色念珠菌（ATCC 26790）厚膜孢子阳性；新型隐球菌（ATCC 9763）厚膜孢子阴性。
注：
⑴玉米粉可用糯米粉或可溶性淀粉代替,效果相同。
⑵该培养基加入10ml/L Tween-80，制成玉米粉Tween-80琼脂，用途相同，效果更好。